Name: simultaneous detection of c-fos activation from mesolimbic and mesocortical dopamine reward sites following naive sugar and fat ingestion in rats
Uploaded: 2016-08-24T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Simultaneous Detection of c-Fos Activation from Mesolimbic and Mesocortical Dopamine Reward Sites Following Naive Sugar and Fat Ingestion in Rats at JoVE.com

Благодаря Diana Икаса-Culaki, Cristal Sampson и Theologia Karagiorgis за их напряженную работу над этим проектом.

Эти экспериментальные протоколы были одобрены по уходу и использованию комитета Institutional Animal заверив, что все предметы и процедуры в соответствии с национальными институтами Руководство здравоохранения по уходу и использованию лабораторных животных. 1. Субъекты <ol><li> Покупка и / и...

Цель исследования состояла в том, чтобы определить, является ли источник (ВТА) и переднего мозга цели проекции (NAC, AMY, MPFC) ДА вознаграждение связанных нейронов одновременно активируется после нового приема жира и сахара у крыс с помощью клеточного с-ФОС технику , Настоящее исследование п...

Мозг допамин (DA) , участвует в центральных реакции на прием аппетитных сахаров через предложенный гедоническая 1,2, усилий , связанных с 3 и привычки на основе 4,5 механизмы действия. Первичный DA путь замешан в этих эффектов берет свое начало в районе вентральной тегментальной (VTA), а также проекты в прилежащем ядре (NAC) ядра и оболочки, базолатеральный и центрально-кортико-медиальное миндалины (ЭМИ), и прелимбальной и infralimbic медиальной префронтальной коры (MPFC) (см отзывы 6,7). ВТА участвует в потреблении сахарозы 8,9, и DA - релиз наблюдается следующее потребление сахара в NAC 10-15, AMY 16,17 и MPFC 18-20. Жир также стимулирует потребление DA NAC выпуск 21, а другой DA-богатая проекционная зона на дорсальную стриатума (хвостатое-скорлупа) был также связан с DA-опосредованной подачи 22,23. Kelley 24-27 предположил , что эти многочисленные проектаионные зоны этого DA-опосредованной системы формируется интегрированный и интерактивный распределенной сети мозга через обширные и интимных соединений 28-34. В дополнение к способности антагонистов рецепторов DA D1 и D2 , чтобы уменьшить потребление сахаров и жиров 35-37 38-40, сигнализации DA также участвует в опосредовании способности сахаров и жиров для производства вкусовых предпочтений обусловленные (CFP) 41- 46. Микроинъекции антагониста DA D1 рецепторов в NAC, Светы или MPFC 47-49 исключить приобретение CFP , вызванную внутрижелудочного глюкозы. В то время как микроинъекции антагонистов рецепторов либо DA D1 или D2 в в MPFC исключает приобретение фруктозы-CFP 50, приобретение и экспрессия фруктозы-CFP дифференцированно блокируются антагонистами дофамина в NAC и AMY 51,52. C-FOS метод 53,54 был применен для исследования нейронных activatioп, индуцированный приемом и вкусной нейронной активации. Термин &quot;C-FOS активации&quot; будет использоваться по всей рукописи, и операционно определяется повышенной транскрипцией с-Fos во время нейрональной деполяризации. Сахароза потребление увеличилось FOS-подобной иммунореактивности (FLI) в центральном ядре AMY, ВТА, а также оболочка, но не ядро, из NAC 55-57. В то время как потребление сахарозы в имитацией кормления крыс значительно увеличилось FLI в AMY и NAC, но не ВТА 58, внутрижелудочной сахароза или глюкоза настои значительно увеличилось FLI в NAC и центральных и базолатеральной ядер AMY 59,60. Повторное добавление сахарозы к запланированной чау доступа увеличилось FLI в MPFC, а также оболочки NAC и сердечник 61. Сахарозы концентрация понижающей передачи парадигма показала , что наибольший рост FLI произошло в базолатеральной AMY и NAC, но не ВТА 62. После кондиционирования, исчезновение сахара, связанных с естественной Реваго поведения увеличилась FLI в базолатеральной AMY и NAC 63. Кроме того, спаривания сахара наличие на тон привел в тон последующего повышения уровней FLI в базолатеральной AMY 64. Высокое потребление жиров также увеличилось FLI в NAC и MPFC сайтов 65-67. Большинство из ранее приведенных исследований исследовали сахара и жира эффекты на С-FOS активации в отдельных сайтах , которые не предоставляют информацию об идентификации вознаграждения , связанных с распределенными сетями мозга 24-27. Кроме того, многие из этих исследований также не разграничить относительный вклад подобластей НКС (ядра и оболочки), Ами (базолатеральной и центрально-кортико-медиальной) и MPFC (прелимбальной и infralimbic), которые потенциально могут быть рассмотрены преимущество, отличной пространственной разрешением одноклеточного в с-Fos 68 отображения. Наша лаборатория 69 недавно использовали с-ФОС активации и одновременно измеренные изменения в пути VTA DA и его прозоны проекция (NAC, AMY и MPFC) после нового приема жиров и сахаров у крыс. Настоящее исследование описывает процедурные и методологические шаги одновременно анализировать ли острое воздействие шести различных растворов (кукурузное масло, глюкоза, фруктоза, сахарин, вода и контроль эмульсии жира) будет дифференцированно активировать FLI в подзонах НКС AMY, MPFC, а также спинной стриатуме. Это одновременное обнаружение различий позволило подтверждение значительных эффектов на FLI в каждом месте и определения того , являются ли изменения в одном конкретном месте коррелируют с изменениями в соответствующих сайтов, обеспечивая тем самым поддержку распределенной сети мозга 24-27. Эти процедуры проверяли, действительно ли ВТА, прелимбальной и infralimbic MPFC, ядром и оболочкой НКС и базолатеральной и центральной кортико-медиальной AMY), а также спинной стриатуме дисплей скоординированы бы и одновременное срабатывание FLI после перорального, безусловный прием глюкозы (8%), фруктоза (8%), кукурузное масло (3,5%) и сахарина (0,2%) растворы.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="613">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:273px;">Equipment</td>
			<td style="width:195px;"></td>
			<td style="width:127px;"></td>
			<td style="width:19px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sprague-Dawley rats</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>CD-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Wire Mesh Cages</td>
			<td>Lab Products, Seaford, DE</td>
			<td>30-Cage rack</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat Chow</td>
			<td>PMI Nutrition International</td>
			<td>5001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Taut Metal Spring</td>
			<td>Lab Products, Seaford, DE</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat Weighing Scale</td>
			<td>Fisher Scientific Company</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Nalgene Centrifuge Tubes</td>
			<td>Lab Products, Seaford, DE</td>
			<td>10-0501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber Stopper</td>
			<td>Lab Products, Seaford, DE</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Metal Sippers</td>
			<td>Lab Products, Seaford, DE</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Saccharin</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>82385-42-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Kool-Aid, Cherry</td>
			<td>Kool-Aid</td>
			<td>Commerical</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Kool-Aid, Grape</td>
			<td>Kool-Aid</td>
			<td>Commercial</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fructose</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>F0127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glucose</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Corn Oil</td>
			<td>Mazzola</td>
			<td>Commerical</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xanthan Gum</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>11138-66-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sliding Microtome</td>
			<td>Microm International</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Neurolucida Camera</td>
			<td>MBF Bioscience</td>
			<td colspan="2">Software application</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gelatin-coated Slides</td>
			<td>Fisher Scientific Company</td>
			<td>12-550-343</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cover glass</td>
			<td>Fisher Scientific Company</td>
			<td>12-545-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Golden Nylon Brushes</td>
			<td>Loew-Cornell&#160;</td>
			<td>2037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Natural Hair Sable&#160;</td>
			<td>Loew-Cornell&#160;</td>
			<td>2022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">24 Well Plates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>3527</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">6 Well Plates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1L Pyrex bottles</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>1395-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tissue insert (tissue strainer)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>7200214</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eagle pipettes&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>E10 for 1-10ul&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Eagle pipettes&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>E100 for 20-100ul</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Eagle pipettes&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>E200 for 50-200ul</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Eagle pipettes&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td colspan="2">E1000 for 100-1000ul</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Eagle pipettes&#160;</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td colspan="2">E5000 for 1000-5000ul&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Universal Tips .1-10ul</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500192</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Universal Tips 5-200ul</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500194</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Universal Tips 500-5000ul</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>500198</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Blade Vibroslice 100</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>BLADE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DPX Mounting Medium&#160;</td>
			<td>Electron Microscopy&#160;</td>
			<td>13510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15mL centrifuge tubes</td>
			<td>Biologix Research Co.</td>
			<td>10-0501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Slide Boxes</td>
			<td>Biologix Research Co.</td>
			<td>41-6100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Orbital Shaker&#160;</td>
			<td>Madell Corporation&#160;&#160;</td>
			<td>ZD-9556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">weigh boats&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>02-202-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;">5mL disposable pipettes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-711-5AM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;">Stereo Investigator Software</td>
			<td>Micro Bright Field</td>
			<td colspan="2">Software application</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paraformaldehyde Granular</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NaCl</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S271-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Phophate Monobasic</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S468-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Phosphate Diphasic</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP332-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hydrogen Peroxide&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>H324-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">SafeClear II&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23-044-192</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Methanol&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A412-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Normal Goat Serum</td>
			<td>Vector</td>
			<td>S-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Biotinylated Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td>Vector</td>
			<td>BA-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ABC Kit Peroxidase Standard</td>
			<td>Vector</td>
			<td>PK-4000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-cFos (Ab-5) Rabbit</td>
			<td>EMD chem/Cal Biochem</td>
			<td>PC38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X 100</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>X-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3,3&#39; diaminobenzidine tetra hydrochloride&#160;</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>D5905</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium Hydroxide</td>
			<td>SigmaAldrich</td>
			<td>5881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Primary TH anti body</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>AB152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Euthosol</td>
			<td>Virbac AH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simultaneous detection of c-fos activation from mesolimbic and mesocortical dopamine reward sites following naive sugar and fat ingestion in rats

Это исследование использует сотовую с-ФОС активации для оценки влияния нового употребления жира и сахара на мозг допамина (DA) путей у крыс. Воздухозаборники сахаров и жиров опосредованы их врожденными аттракционами, а также узнали предпочтения. Мозг допамин, особенно мезо-лимбической и мезо-кортикальной проекции из вентральной области покрышки (VTA), участвует в обоих этих необразованных и рефлексами. Концепция распределенных сетей мозга, в котором несколько сайтов, и передатчик / пептидные системы взаимодействуют между собой, было предложено, чтобы посредничать вкусную потребление пищи, но есть ограниченные доказательства эмпирически демонстрируют такие действия. Таким образом, потребление сахара вызывает DA релиз и увеличивает с-ФОС-подобной иммунореактивности (FLI) из отдельных проекционных зон VTA DA включая прилежащем ядре (NAC), миндалины (Amy) и медиальной префронтальной коры головного мозга (MPFC), а также спинной полосатого тела. Кроме того, центральное управление селективных антагонистов рецепторов DA в эти сайтS дифференцированно уменьшить приобретение и экспрессию условных вкусовых предпочтений, вызываемых сахаров или жиров. Один из подходов, с помощью которого можно определить, взаимодействовал ли эти сайты в качестве распределенной сети мозга в ответ на сахар или потребление жиров будет одновременному оценить ли VTA и ее основные зоны проекции mesotelencephalic DA (прелимбальной и infralimbic MPFC, ядро ​​и оболочка NAC, базолатеральная и центрально-кортико-медиальное ЭМИ), а также спинной стриатуме будет отображать скоординированы и одновременное срабатывание FLI после перорального, некондиционной потребление кукурузного масла (3,5%), глюкозы (8%), фруктозу (8%) и сахарина (0,2 %) решений. Такой подход является успешным первым шагом в определении возможности использования сотовой связи с-ФОС активацию одновременно на соответствующих участках мозга для изучения вознаграждения, связанных с обучения в проглатывания аппетитную пищу у грызунов.

Все показательные результаты , описанные ниже, были опубликованы ранее 69, и повторно представлены здесь , чтобы поддержать &quot;доказательство концепции&quot; в указании эффективности методики. Решение Потребления Зна?...

Watch this Scientific Journal Video about Simultaneous Detection of c-Fos Activation from Mesolimbic and Mesocortical Dopamine Reward Sites Following Naive Sugar and Fat Ingestion in Rats at JoVE.com

Simultaneous Detection of c-Fos Activation from Mesolimbic and Mesocortical Dopamine Reward Sites Following Naive Sugar and Fat Ingestion in Rats

Цель данного исследования заключается в определении вознаграждения, связанных распределенных сетей мозга путем очерчивания надежного иммуногистохимического технику с помощью мобильного с-ФОС активации для измерения одновременных изменений в дофаминовых путей и терминальных участков после нового приема жира и сахара у крыс.

Одновременное обнаружение с-Fos активации от мезолимбическом и мезокортикальных Награда сайты Допамин После Наивное сахара и жира При приеме внутрь в Rats

This study uses cellular c-fos activation to assess effects of novel ingestion of fat and sugar on brain dopamine (DA) pathways in rats. Intakes of sugars ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Хроматин Иммунопреципитация из ткани спинного Ganglia Корневая следующие аксональное повреждение

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

A General Method for Evaluating Incubation of Sucrose Craving in Rats

Общий метод оценки Инкубация Сахароза Тяга у крыс

For someone on a food-restricted diet, food craving in response to food-paired cues may serve as a key behavioral transition point between abstinence and ...

Progressive-ratio Responding for Palatable High-fat and High-sugar Food in Mice

Прогрессивная отношением Отвечая на приемлемой высоким содержанием жиров и высоким содержанием сахара питания в мыши

Foods that are rich in fat and sugar significantly contribute to over-eating and escalating rates of obesity. The consumption of palatable foods can ...

Single Cell Measurement of Dopamine Release with Simultaneous Voltage-clamp and Amperometry

Одноместный измерительной ячейки из высвобождение дофамина с одновременным напряжения зажим и амперометрии

After its release into the synaptic cleft, dopamine exerts its biological properties via its pre- and post-synaptic targets1. The dopamine signal is ...

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

Всеобъемлющее Профилирование Допамин регулирование в черной субстанции и вентральной области покрышки

Dopamine is a vigorously studied neurotransmitter in the CNS. Indeed, its involvement in locomotor activity and reward-related behaviour has fostered five ...

Environmental Modulations of the Number of Midbrain Dopamine Neurons in Adult Mice

Экологические модуляций Количество мозга допамина нейронов у взрослых мышей

Long-lasting changes in the brain or &#8216;brain plasticity&#8217; underlie adaptive behavior and brain repair following disease or injury. Furthermore, ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Одновременный<em&gt; Экс естественных условиях</em&gt; Функциональное тестирование двух сетчатки по<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Система электроретинограммы

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

Одновременная запись электроретинография и визуальных Вызванные Потенциалы в анестезированных крыс

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

Оценка дофаминергической гомеостаза у мышей с использованием высокопроизводительных жидкостной хроматографии анализа и поглощение синаптосомальных допамина

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...