Name: methods for acute and subacute murine hindlimb ischemia
Uploaded: 2016-06-21T15:00:00
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This study was supported by NIH grants R21HL118661, R56HL124444, and R01HL124444 to CDK, and by NIH grants R00HL103797 and R01HL125695 to JMM.

Todos los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con el protocolo aprobado por el Comité de Cuidado y Uso de Animales institucional de Duke. Los ratones machos se utilizaron en este estudio, aunque se puede utilizar cualquier sexo, como se indica con el fin científico del estudio. 1. Depilación <ol><li> Antes de la inducción de la anestesia, establecer un área de preparación de pre-quirúrgico que consiste en una resistencia de calentamiento cubierto fijado en 37 ° C y u...

<ol>
	<li>Criqui, M. H., Aboyans, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+peripheral+artery+disease.">Epidemiology of peripheral artery disease.</a> Circ. Res. 116, 1509-1526 (2015).</li><li>Thukkani, A. K., Kinlay, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+intervention+for+peripheral+artery+disease.">Endovascular intervention for peripheral artery disease.</a> Circ. Res. 116, 1599-1613 (2015).</li><li>Vartanian, S. M., Conte, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+intervention+for+peripheral+arterial+disease.">Surgical intervention for peripheral arterial disease.</a> Circ. Res. 116, 1614-1628 (2015).</li><li>Bonaca, M. P., Creager, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+treatment+and+current+management+of+peripheral+artery+disease.">Pharmacological treatment and current management of peripheral artery disease.</a> Circ. Res. 116, 1579-1598 (2015).</li><li>Conte, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+rationale+of+the+PREVENT+III+clinical+trial:+edifoligide+for+the+prevention+of+infrainguinal+vein+graft+failure.">Design and rationale of the PREVENT III clinical trial: edifoligide for the prevention of infrainguinal vein graft failure.</a> Vasc Endovascular Surg. 39, 15-23 (2005).</li><li>Pomposelli, F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+decade+of+experience+with+dorsalis+pedis+artery+bypass:+analysis+of+outcome+in+more+than+1000+cases.">A decade of experience with dorsalis pedis artery bypass: analysis of outcome in more than 1000 cases.</a> J. Vasc. Surg. 37, 307-315 (2003).</li><li>Willigendael, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smoking+and+the+patency+of+lower+extremity+bypass+grafts:+a+meta-analysis.">Smoking and the patency of lower extremity bypass grafts: a meta-analysis.</a> J. Vasc. Surg. 42, 67-74 (2005).</li><li>Schillinger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+angioplasty+versus+implantation+of+nitinol+stents+in+the+superficial+femoral+artery.">Balloon angioplasty versus implantation of nitinol stents in the superficial femoral artery.</a> N. Engl. J. Med. 354, 1879-1888 (2006).</li><li>Marmagkiolis, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=12-month+primary+patency+rates+of+contemporary+endovascular+device+therapy+for+femoro-popliteal+occlusive+disease+in+6,024+patients:+beyond+balloon+angioplasty.">12-month primary patency rates of contemporary endovascular device therapy for femoro-popliteal occlusive disease in 6,024 patients: beyond balloon angioplasty.</a> Catheter. Cardiovasc. Interv. 84, 555-564 (2014).</li><li>Rosenfield, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trial+of+a+Paclitaxel-Coated+Balloon+for+Femoropopliteal+Artery+Disease.">Trial of a Paclitaxel-Coated Balloon for Femoropopliteal Artery Disease.</a> N. Engl. J. Med. 373, 145-153 (2015).</li><li>Tepe, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-coated+balloon+versus+standard+percutaneous+transluminal+angioplasty+for+the+treatment+of+superficial+femoral+and+popliteal+peripheral+artery+disease:+12-month+results+from+the+IN.PACT+SFA+randomized+trial.">Drug-coated balloon versus standard percutaneous transluminal angioplasty for the treatment of superficial femoral and popliteal peripheral artery disease: 12-month results from the IN.PACT SFA randomized trial.</a> Circulation. 131, 495-502 (2015).</li><li>Couffinhal, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+angiogenesis.">Mouse model of angiogenesis.</a> Am. J. Pathol. 152, 1667-1679 (1998).</li><li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M. D., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+hindlimb+ischemia.">Murine model of hindlimb ischemia.</a> J Vis Exp. , (2009).</li><li>McClung, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle-specific+genetic+determinants+contribute+to+the+differential+strain-dependent+effects+of+hindlimb+ischemia+in+mice.">Skeletal muscle-specific genetic determinants contribute to the differential strain-dependent effects of hindlimb ischemia in mice.</a> Am. J. Pathol. 180, 2156-2169 (2012).</li><li>Dokun, A. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+trait+locus+(LSq-1)+on+mouse+chromosome+7+is+linked+to+the+absence+of+tissue+loss+after+surgical+hindlimb+ischemia.">A quantitative trait locus (LSq-1) on mouse chromosome 7 is linked to the absence of tissue loss after surgical hindlimb ischemia.</a> Circulation. 117, 1207-1215 (2008).</li><li>Rivard, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+impairment+of+angiogenesis.">Age-dependent impairment of angiogenesis.</a> Circulation. 99, 111-120 (1999).</li><li>Hazarika, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+angiogenesis+after+hindlimb+ischemia+in+type+2+diabetes+mellitus:+differential+regulation+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+1+and+soluble+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+1.">Impaired angiogenesis after hindlimb ischemia in type 2 diabetes mellitus: differential regulation of vascular endothelial growth factor receptor 1 and soluble vascular endothelial growth factor receptor 1.</a> Circ. Res. 101, 948-956 (2007).</li><li>Couffinhal, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+collateral+vessel+development+associated+with+reduced+expression+of+vascular+endothelial+growth+factor+in+ApoE-/-+mice.">Impaired collateral vessel development associated with reduced expression of vascular endothelial growth factor in ApoE-/- mice.</a> Circulation. 99, 3188-3198 (1999).</li><li>Tang, G. L., Chang, D. S., Sarkar, R., Wang, R., Messina, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+gradual+or+acute+arterial+occlusion+on+skeletal+muscle+blood+flow,+arteriogenesis,+and+inflammation+in+rat+hindlimb+ischemia.">The effect of gradual or acute arterial occlusion on skeletal muscle blood flow, arteriogenesis, and inflammation in rat hindlimb ischemia.</a> J. Vasc. Surg. 41, 312-320 (2005).</li><li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanism+regulating+blood+flow+recovery+in+acute+versus+gradual+femoral+artery+occlusion+are+distinct+in+the+mouse.">Cellular and molecular mechanism regulating blood flow recovery in acute versus gradual femoral artery occlusion are distinct in the mouse.</a> J. Vasc. Surg. 48, 1546-1558 (2008).</li><li>Litvak, J., Siderides, L. E., Vineberg, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+experimental+production+of+coronary+artery+insufficiency+and+occlusion.">The experimental production of coronary artery insufficiency and occlusion.</a> Am. Heart J. 53, 505-518 (1957).</li><li>Bredee, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+ameroid+constrictor.+Preliminary+communication.">An improved ameroid constrictor. Preliminary communication.</a> J. Surg. Res. 9, 107-112 (1969).</li><li>McClung, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subacute+limb+ischemia+induces+skeletal+muscle+injury+in+genetically+susceptible+mice+independent+of+vascular+density.">Subacute limb ischemia induces skeletal muscle injury in genetically susceptible mice independent of vascular density.</a> J. Vasc. Surg. , (2015).</li><li>Hellingman, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+surgical+procedures+for+hind+limb+ischaemia+mouse+models+result+in+differences+in+collateral+formation.">Variations in surgical procedures for hind limb ischaemia mouse models result in differences in collateral formation.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 40, 796-803 (2010).</li><li>Kochi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+arterial+anatomy+of+the+murine+hindlimb:+functional+role+in+the+design+and+understanding+of+ischemia+models.">Characterization of the arterial anatomy of the murine hindlimb: functional role in the design and understanding of ischemia models.</a> PloS one. 8, e84047 (2013).</li></ol>

Quizás el paso más difícil en este procedimiento es la separación de la arteria femoral de la vena femoral. El diámetro más grande y paredes más delgadas de la vena femoral en comparación con los de la arteria aumentan su susceptibilidad a la perforación y al desgarro durante la manipulación quirúrgica. La probabilidad de que la interrupción de la vena puede reducirse manteniendo húmeda la herida usando un hisopo estéril humedecido con PBS. También es importante asegurarse de que todos los fórceps se afi...

La enfermedad arterial periférica (PAD) es una de las principales causas de morbilidad y mortalidad cardiovascular en los países desarrollados 1. PAD resultados de la obstrucción aterosclerótica de las arterias periféricas que conduce a la isquemia de las extremidades con dolor de esfuerzo o de reposo resultante y, ocasionalmente, las úlceras y gangrena que requieren amputación de miembros que no cicatrizan. Las terapias dirigidas PAD se dirigen principalmente hacia endovascular 2 o 3 revascularización quirúrgica, ya que en esencia no existen terapias médicas eficaces 4. Por desgracia, la revascularización es a menudo un beneficio limitado, ya que los injertos de derivación tienen altas tasas de fracaso (hasta un 50% en 5 años) 5 que son peores en algunas poblaciones (por ejemplo, fumadores, mujeres, injertos de vena safena) no 6,7. enfoques endovasculares, tales como angioplastia y colocación de stent, también se ven comprometidos por las altas tasas de reestenosis (en exceso de 50% dentro de 1 año), particularmente in femoropoplíteo enfermedad 8, aunque el uso de globos y stents liberadores de fármacos ha mejorado los resultados un tanto 9-11. Con el fin de desarrollar nuevos tratamientos para la PAD es esencial para desarrollar modelos animales que reproduzcan de forma fiable la enfermedad humana. Hasta la fecha, el modelo más común de la EAP es el modelo de extremidad posterior isquemia (HLI), que se realiza con mayor frecuencia en los ratones 12,13. En su manifestación más común, el modelo implica la ligadura quirúrgica de la arteria femoral proximal y distal y sus intermedios ramas laterales seguido por escisión de la embarcación, dando como resultado la oclusión del flujo sanguíneo y la inducción de la isquemia de las extremidades aguda. HLI se ha utilizado principalmente para estudiar las respuestas angiogénicas y arteriogénicos en el tejido muscular del miembro periférica y los efectos de varias terapias (por ejemplo, las drogas, la entrega de genes, células madre) en estas respuestas. Más recientemente, nuestro grupo ha utilizado este modelo para examinar el papel de las células del músculo esquelético in la respuesta a la isquemia de las extremidades y de los efectos de las diferencias genéticas en los resultados 14. El modelo de HLI ha facilitado nuestra actual comprensión de que las respuestas vasculares y musculares a la isquemia dependen de la genética (es decir, la cepa consanguínea) 15, de 16 años, y la presencia o ausencia de otras enfermedades o condiciones relacionadas con la aterosclerosis, como la diabetes mellitus 17 y hipercolesterolemia 18. Sin embargo, una debilidad importante del modelo tradicional HLI es que es un modelo de isquemia de las extremidades aguda 12,13, mientras que PAD humana provoca isquemia crónica como resultado del desarrollo gradual de las lesiones ateroscleróticas oclusivos en las arterias periféricas. En un intento de eludir esta debilidad, Tang y sus colegas desarrollaron inicialmente un modelo de rata de la oclusión de la arteria femoral gradual usando constrictores AMEROID 19, y el mismo Grupo que más tarde developed un modelo similar del ratón 20. Constrictor ameroide se describieron inicialmente en la década de 1950 en un modelo canino de isquemia miocárdica crónica 21,22. Estos dispositivos tienen un manguito de metal exterior que encierra una capa interior de un material higroscópico, por lo general caseína, y cuando se coloca alrededor de una arteria que inducen la oclusión del vaso gradual a medida que absorben la humedad de los tejidos circundantes. En su modificación del modelo, Yang et al. Coloca constrictores tanto en los extremos proximal y distal de la arteria femoral en sitios análogos a los sitios de la ligadura quirúrgica, y se ligó las ramas laterales de la arteria femoral, como en el modelo tradicional. En comparación con HLI aguda, aneroide la isquemia inducida por constrictor resultó en una menor expresión de genes inflamatorios y de estrés de cizalla-dependiente, la recuperación del flujo sanguíneo inferior 4 - 5 semanas después de la cirugía, y menos necrosis muscular 20. Basándose en estas observaciones, se consideró que la oclusión arterial gradual podría proporcionar un modelo de PAD más relevante para la enfermedad humana. En particular, en el informe original, efectos de la isquemia inducida por constrictor aneroide se examinaron sólo en ratones C57BL / 6 19, que son relativamente resistentes a la necrosis muscular inducida por isquemia 15. Recientemente hemos modificado el modelo de isquemia progresiva más allá y exploramos sus efectos en el más susceptible a la isquemia BALB / c cepa de ratón 23. En la primera manifestación de la modelo, colocamos constrictoras en ambos extremos proximal y distal de la arteria femoral, pero nos fuimos todos los ramas laterales intactas. En una segunda modificación, más suave, colocamos un solo constrictor sólo en la arteria femoral proximal y otra vez fuimos todos los secundarios manojos de la arteria intacta. En ambas modificaciones de este modelo, se encontró que los ratones BALB / c, pero no C57BL / 6 ratones, mostró necrosis muscular significativa a pesar de tener el flujo de sangre y densidad similares vascular. Al igual que en nuestro estudio anterior 14, estos resultados demuestran que el músculo del miembrolesión no está únicamente influenciado por el flujo de sangre, pero depende en parte en el fondo genético. Por otra parte, se encontró que el flujo sanguíneo hacia las extremidades cayó a su punto más bajo dentro de los 3 días, por lo que el modelo parece ser más una de &#39;subaguda&#39; en lugar de isquemia de las extremidades gradual. Con base en estos estudios previos, parece claro que un solo método para inducir isquemia del miembro posterior puede no ser adecuado en todos los casos. Debido a una variedad de condiciones (por ejemplo, las diferencias genéticas y la presencia o ausencia de condiciones comórbidas) influyen tanto en el vascular y las respuestas específicas del músculo esquelético, los investigadores puede verse en la necesidad de modificar la cronicidad y / o la severidad de la isquemia de las extremidades posteriores al mejor satisfacer sus propósitos. Por otra parte, las descripciones anteriores del modelo por lo general carecían de referencias anatómicas adecuadas para facilitar fiable reproducibilidad inter-investigador de la técnica. En este trabajo, los métodos para inducir isquemia de las extremidades posteriores, ya sea aguda o subaguda en el ratónse describen y se proporcionan puntos de referencia anatómicos precisos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="698">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11251-35</td>
			<td style="width:167px;">Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont Style 5 Mini Forceps</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11200-14</td>
			<td>Inox</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Extra Fine Bonn Scissors</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">7-0 Silk Suture</td>
			<td style="width:176px;">Sharpoint</td>
			<td style="width:139px;">DA-2527N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">5-0 Coated Vicryl Suture</td>
			<td style="width:176px;">Ethicon</td>
			<td style="width:139px;">J463G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Graefe Forceps</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11053-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vannas Spring Scissors</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:216px;">Artifical Tears Ointment</td>
			<td style="width:176px;">Rugby Laboratories</td>
			<td>0536-6550-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Surgical Tape</td>
			<td style="width:176px;">3M</td>
			<td style="width:139px;">1530-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fine Cotton Swabs</td>
			<td style="width:176px;">Contec</td>
			<td style="width:139px;">SC-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Temperature Controller</td>
			<td style="width:176px;">Physitemp</td>
			<td style="width:139px;">TCAT-2DF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Ameroid Constrictors</td>
			<td style="width:176px;">Research Instruments SW</td>
			<td style="width:139px;">MMC-0.25 x 1.00-SS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hot Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Deltaphase Isothermal Pad</td>
			<td style="width:176px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:139px;">39DP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Needle Driver</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Phosphate Buffered Saline&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Gibco</td>
			<td style="width:139px;">10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Moor LDPI</td>
			<td style="width:176px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:139px;">moorLDI2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">moorLDI Measurement software</td>
			<td style="width:176px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:139px;">v. 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hair Removal Cream</td>
			<td style="width:176px;">Nair</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for acute and subacute murine hindlimb ischemia

La enfermedad arterial periférica (PAD) es una causa importante de morbilidad y mortalidad cardiovascular en los países desarrollados, y modelos animales que se reproducen de forma fiable la enfermedad humana son necesarias para desarrollar nuevas terapias para esta enfermedad. El modelo de extremidad posterior del ratón isquemia ha sido ampliamente utilizado para este propósito, pero la práctica estándar de la inducción de isquemia del miembro aguda por la ligadura de la arteria femoral puede dar lugar a necrosis tisular sustancial, comprometer la capacidad de investigadores para estudiar las respuestas vasculares y el tejido muscular esquelético a isquemia . Un enfoque alternativo a la ligadura de la arteria femoral es la inducción de la oclusión de la arteria femoral gradual mediante el uso de constrictor ameroide. Cuando se coloca alrededor de la arteria femoral en la misma o diferentes ubicaciones como los sitios de ligación de la arteria femoral, estos dispositivos ocluyen la arteria por encima de 1 - 3 días, lo que resulta en más gradual, isquemia subaguda. Esto da como resultado la necrosis del tejido del músculo esquelético menos sustancial, which puede imitar más de cerca las respuestas observadas en la AP humano. Debido a las influencias genéticas fondo resultados tanto en los modelos de isquemia aguda y subaguda, la consideración de la cepa de ratón en estudio es importante en la elección del mejor modelo. Este artículo describe el procedimiento adecuado y la colocación anatómica de ligaduras o constrictoras AMEROID en la arteria femoral de ratón para inducir isquemia subaguda o aguda de las extremidades posteriores en el ratón.

La correcta identificación de los vasos de las extremidades posteriores del ratón es fundamental para asegurar la reproducibilidad de las técnicas para inducir tanto la isquemia subaguda y aguda de las extremidades posteriores, tal como se describe aquí. Además de la variación inherente en estudios con animales, otros factores pueden introducir variabilidad en láser de perfusión Doppler (LDPI), incluyendo el tipo de anestesia, la posición del animal (vs. supina boca aba...

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Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

Surgical induction of hindlimb ischemia in the mouse is useful to examine angiogenesis, however this is compromised in certain inbred mouse strains that display marked ischemia-induced tissue necrosis. Methods are described to induce subacute limb ischemia using ameroid constrictors to circumvent this problem through the induction of gradual arterial occlusion.

Los métodos para aguda y subaguda murino de isquemia del miembro posterior

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably ...

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Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

La isquemia-reperfusión modelo de lesión renal aguda y post lesión fibrosis en ratones

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Lesiones tejido isquémico en la Cámara de los pliegues cutáneos dorsal del ratón: Un modelo de la piel de la aleta para Investigar la isquemia aguda persistente

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Modelo murino de isquemia-reperfusión intestinal Lesiones

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

La traqueostomía abierta ácido gástrico aspiración modelo murino de lesión pulmonar aguda Resultados en máxima no letal aguda lesión pulmonar

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Combined Intravital Microscopy and Contrast-enhanced Ultrasonography of the Mouse Hindlimb to Study Insulin-induced Vasodilation and Muscle Perfusion

Combina la microscopia Intravital y ecografía de contraste de la trasera de ratón para estudiar la perfusión muscular y vasodilatación inducida por la insulina

It has been demonstrated that insulin's vascular actions contribute to regulation of insulin sensitivity. Insulin's effects on muscle perfusion regulate ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Modelo preclínico de isquemia de extremidades traseras en conejos diabéticos

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Evaluación de la angiogénesis terapéutica en un modelo murino de isquemia de las extremidades posteriores

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...