Name: functional characterization of regulatory macrophages that inhibit graft-reactive immunity
Uploaded: 2017-06-07T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Functional Characterization of Regulatory Macrophages That Inhibit Graft-reactive Immunity at JoVE.com

Vi bekräftar de tekniska bidrag från flödescytometri, mikrokirurgi och biologiska / patologiska centra av forskningsexpertis på Mount Sinai. Detta arbete stöddes av COST Action BM1305: Åtgärder för att fokusera och accelerera celltolerogen terapi (FACTT), utvecklingsfonderna Mount Sinai Recanati / Miller Transplantation Institute, Ministerio de Ciencia e Innovacion SAF2013-48834-R och SAF2016-80031-R JO

<html> I denna studie är möss inrymda i enlighet med Förenta staternas avdelning för jordbruksriktlinjer och rekommendationerna från folkhälsovårdsguiden för vård och användning av laboratoriedjur. Alla försöksmetoder som inbegriper djuranvändning utfördes i enlighet med protokollet för institutionell djurvård och användningskommitté (IACUC) från Mount Sinai School of Medicine. 1. Media Preparation <ol><li> Förbered fullständigt RPMI 1640 medium med 10% FBS och 1% penic...

<ol>
	<li>Jose, M. D., Ikezumi, Y., van Rooijen, N., Atkins, R. C., Chadban, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+act+as+effectors+of+tissue+damage+in+acute+renal+allograft+rejection.">Macrophages act as effectors of tissue damage in acute renal allograft rejection.</a> Transplantation. 76 (7), 1015-1022 (2003).</li><li>Oberbarnscheidt, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-self+recognition+by+monocytes+initiates+allograft+rejection.">Non-self recognition by monocytes initiates allograft rejection.</a> J Clin Invest. 124 (8), 3579-3589 (2014).</li><li>Garcia, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocytic+suppressive+cells+mediate+cardiovascular+transplantation+tolerance+in+mice.">Monocytic suppressive cells mediate cardiovascular transplantation tolerance in mice.</a> J Clin Invest. 120 (7), 2486-2496 (2010).</li><li>Conde, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DC-SIGN(+)+Macrophages+Control+the+Induction+of+Transplantation+Tolerance.">DC-SIGN(+) Macrophages Control the Induction of Transplantation Tolerance.</a> Immunity. 42 (6), 1143-1158 (2015).</li><li>Ginhoux, F., Schultze, J. L., Murray, P. J., Ochando, J., Biswas, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+multidimensional+concept+of+macrophage+ontogeny,+activation+and+function.">New insights into the multidimensional concept of macrophage ontogeny, activation and function.</a> Nat Immunol. 17 (1), 34-40 (2016).</li><li>Quah, B. J., Wijesundara, D. K., Ranasinghe, C., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+fluorescent+target+arrays+for+assessment+of+T+cell+responses+in+vivo.">The use of fluorescent target arrays for assessment of T cell responses in vivo.</a> J Vis Exp. (88), e51627 (2014).</li><li>Tario, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+staining+and+proliferation+modeling+methods+for+cell+division+monitoring+using+cell+tracking+dyes.">Optimized staining and proliferation modeling methods for cell division monitoring using cell tracking dyes.</a> J Vis Exp. (70), e4287 (2012).</li><li>Poujol, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flow+cytometric+evaluation+of+lymphocyte+transformation+test+based+on+5-ethynyl-2'deoxyuridine+incorporation+as+a+clinical+alternative+to+tritiated+thymidine+uptake+measurement.">Flow cytometric evaluation of lymphocyte transformation test based on 5-ethynyl-2'deoxyuridine incorporation as a clinical alternative to tritiated thymidine uptake measurement.</a> J Immunol Methods. 415, 71-79 (2014).</li><li>Last'ovicka, J., Budinsky, V., Spisek, R., Bartunkova, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+lymphocyte+proliferation:+CFSE+kills+dividing+cells+and+modulates+expression+of+activation+markers.">Assessment of lymphocyte proliferation: CFSE kills dividing cells and modulates expression of activation markers.</a> Cell Immunol. 256 (1-2), 79-85 (2009).</li><li>Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primarily+vascularized+allografts+of+hearts+in+mice.+The+role+of+H-2D,+H-2K,+and+non-H-2+antigens+in+rejection.">Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection.</a> Transplantation. 16 (4), 343-350 (1973).</li><li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> J Vis Exp. (6), e238 (2007).</li><li>Ochando, J., Conde, P., Bronte, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte-Derived+Suppressor+Cells+in+Transplantation.">Monocyte-Derived Suppressor Cells in Transplantation.</a> Curr Transplant Rep. 2 (2), 176-183 (2015).</li><li>Gallina, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumors+induce+a+subset+of+inflammatory+monocytes+with+immunosuppressive+activity+on+CD8++T+cells.">Tumors induce a subset of inflammatory monocytes with immunosuppressive activity on CD8+ T cells.</a> J Clin Invest. 116 (10), 2777-2790 (2006).</li><li>Huang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gr-1+CD115++immature+myeloid+suppressor+cells+mediate+the+development+of+tumor-induced+T+regulatory+cells+and+T-cell+anergy+in+tumor-bearing+host.">Gr-1+CD115+ immature myeloid suppressor cells mediate the development of tumor-induced T regulatory cells and T-cell anergy in tumor-bearing host.</a> Cancer Res. 66 (2), 1123-1131 (2006).</li><li>Luan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocytic+myeloid-derived+suppressor+cells+accumulate+in+renal+transplant+patients+and+mediate+CD4(+)+Foxp3(+)+Treg+expansion.">Monocytic myeloid-derived suppressor cells accumulate in renal transplant patients and mediate CD4(+) Foxp3(+) Treg expansion.</a> Am J Transplant. 13 (12), 3123-3131 (2013).</li><li>Tario, J. D., Muirhead, K. A., Pan, D., Munson, M. E., Wallace, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+immune+cell+proliferation+and+cytotoxic+potential+using+flow+cytometry.">Tracking immune cell proliferation and cytotoxic potential using flow cytometry.</a> Methods Mol Biol. 699, 119-164 (2011).</li></ol>

Detta protokoll beskriver de metoder som vi använde för immunokarakterisering av graftinfiltrerande myeloidcellsubset i en experimentell murinmodell av hjärttransplantation, vilken också är tillämplig på andra vävnader i olika murint experimentella modeller. Lågtryckscellsortering vid 20 psi var den föredragna metoden för att isolera ett bra utbyte av rencellsundergrupper. Att upprätthålla renheten hos varje myeloid delmängd är kritisk för att fastställa avgörande resultat av den undertryckande kapacit...

Detta protokoll beskriver in vitro- tekniker för att studera funktionen av vävnadsinfiltrerande makrofager isolerade från hjärt-allotransplantat, i enlighet med deras förmåga att modulera T-cellreaktioner. Bredt beskrivet i litteraturen är fluorescerande cellspårningsfärger i kombination med flödescytometri kraftfulla verktyg för att studera den undertryckande funktionen hos specifika celltyper in vitro och in vivo. Vårt protokoll följer karboxifluoresceinsuccinimidylester (CFSE) -metoden för övervakning av lymfocytproliferation in vitro . När en CFSE-märkt cell delar upp, förvärvar dess avkomma hälften av antalet karboxifluoresceinmärkta molekyler 6 . Den motsvarande minskningen av cellfluorescens med flödescytometri kan användas för att bedöma celldelning, övervakning av kapaciteten hos undertryckande makrofager för modulering av T-cellimmunresponser. Eftersom CFSE är en fluoresceinbaserad färgämne är den kompatibel med en brOad-intervallet av andra fluorkromer, vilket gör den tillämplig på flervalsflödescytometri. Det lämpliga valet av fluorokrom för fenotypning är också viktigt för att undvika överdriven spektralöverlappning och oförmågan att känna igen antikropps-positiva celler, särskilt med synliga proteinfärger såsom CFSE 7 . Det finns många fördelar med att använda fluorescerande färgämnen över alternativa tekniker som mäter cellproliferation, såsom tymidininkorporationsanalysen, som använder radiomärkt tymidin (TdR) 8 . Denna analys utnyttjar tritierad tymidin (3H-TdR) som införlivas i nya strängar av kromosomalt DNA under mitotisk celldelning. Ett säkerhetsproblem i samband med denna analys är användningen av radioisotoper, eftersom en scintillations beta-räknare används för att mäta radioaktiviteten i DNA som återvinns från cellerna för att bestämma graden av celldelning. Metodiskt är den tritierade tymidin-rövenAy är inte tillräckligt flexibel för att passa viktiga kliniska laboratoriebegränsningar såsom lågt antal celler och fördröjd analys efter färgning. Tvärtom har CFSE-färgning visat sig förhindra cellproliferation och att störa kritiska aktiveringsmarkörer, såsom CD69, HLA-DR och CD25 9 . Därför är det viktigt att förstå fördelar och begränsningar för varje metod, särskilt i flerfärgade studier där flera färgämnen används för att spåra olika celltyper, för att få exakta och reproducerbara resultat.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="459">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">RPMI 1640 Media</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">11875119</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">10 % FBS</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">26140-079</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:147px;">1000X 2-mercaptoethanol</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">21985023</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">100X Pen/Strep</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">15140122</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">100X L-glutamine</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">25030081</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:147px;">100X Non Esential amino acids</td>
			<td style="width:111px;">Corning</td>
			<td style="width:123px;">25025039</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">1M HEPES buffer&#160;</td>
			<td style="width:111px;">Corning</td>
			<td style="width:123px;">25060CL</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">100mM Sodium Pyruvate</td>
			<td style="width:111px;">ThermoScientific</td>
			<td style="width:123px;">SH30239.01</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">Penicilin/Streptavidyn</td>
			<td style="width:111px;">ThermoScientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">Collagenese A</td>
			<td style="width:111px;">Roche</td>
			<td style="width:123px;">70381322</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:147px;">DPBS (w/o calcium&#38;magnesium)</td>
			<td style="width:111px;">Corning</td>
			<td style="width:123px;">21031CV</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">70 micron Cell strainer</td>
			<td style="width:111px;">Fisher</td>
			<td style="width:123px;">22363548</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">ACK lysis buffer</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">A10492-01</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;">DAPI</td>
			<td style="width:111px;">Sigma</td>
			<td style="width:123px;">32670-5mg-F</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="18">
			<td height="18" style="height:19px;width:147px;">CFSE-FITC</td>
			<td style="width:111px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:123px;">C34554</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:147px;">Dynabeads Mouse T cell activator CD3/CD28</td>
			<td style="width:111px;">Life Technologies</td>
			<td style="width:123px;">11452D</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">96 well&#160; U-bottom plate</td>
			<td style="width:111px;">Corning</td>
			<td style="width:123px;">353077</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">Antibodies:</td>
			<td style="width:111px;"></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">anti-Ly6C-APC</td>
			<td style="width:111px;">eBioscience</td>
			<td style="width:123px;">175932-80</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">anti-Ly6G-Pe/Cy7</td>
			<td style="width:111px;">Biolegend</td>
			<td style="width:123px;">127617</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">anti-CD11b-Percp/Cy5.5</td>
			<td style="width:111px;">eBioscience</td>
			<td style="width:123px;">45011282</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">anti-CD45-APC/Cy7</td>
			<td style="width:111px;">eBioscience</td>
			<td style="width:123px;">47045182</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">anti-CD4-APC</td>
			<td style="width:111px;">eBioscience</td>
			<td style="width:123px;">17004181</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">anti-CD8-P/ Cy7</td>
			<td style="width:111px;">eBioscience</td>
			<td style="width:123px;">25008181</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">LSRII Flow Cytometer</td>
			<td style="width:111px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:23px;width:147px;">FACSDiva Software</td>
			<td style="width:111px;">BD Bioscience</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">C57BL/6-Foxp3tm1Flv/J&#160;</td>
			<td style="width:111px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td style="width:123px;">008374</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">C57BL/6</td>
			<td style="width:111px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td style="width:123px;">000664</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:147px;">Balb/c</td>
			<td style="width:111px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td style="width:123px;">000651</td>
			<td style="width:81px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

functional characterization of regulatory macrophages that inhibit graft-reactive immunity

Makrofagackumulering i transplanterade organ har länge erkänts som ett kännetecken för avstötning av allograft 1 . Immunogena monocyter infiltrerar allograftet tidigt efter transplantationen, monterar ett transplantatreaktivt svar mot det transplanterade organet och initierar organavstötning 2 . Nya data tyder på att undertryckande makrofager underlättar framgångsrik långsiktig transplantation 3 och är nödvändiga för induktion av transplantationstolerans 4 . Detta föreslår ett flerdimensionellt koncept av makrofag ontogeni, aktivering och funktion, vilket kräver en ny färdplan för isolering och analys av makrofagfunktion 5 . På grund av makrofas plasticitet är det nödvändigt att tillhandahålla en metod för att isolera och karaktärisera makrofager, beroende på vävnadsmiljö, och att definiera sina funktioner enligt olika scenarier. Här beskriver viVara ett protokoll för immunkarakterisering av transfigurerande makrofager och metoderna som vi använde för att funktionellt utvärdera deras förmåga att hämma CD8 + T-proliferation och för att främja CD4 + Foxp3 + Treg-expansion in vitro .

De representativa resultaten visar gatingstrategin som beskrivs i ovanstående protokoll. Resultaten visar också analysen av T-cellproliferationsaktiviteten efter samkulturen med transplantatinfiltrerande makrofager. Den in vitro- undertryckande kapaciteten hos makrofagundergrupper analyserades i figur 4 . Resultaten indikerar att Ly6C lo Ly6G - makrofagerna erhållna från tolererade mottagare är undertryckande. Resultaten visar också a...

Watch this Scientific Journal Video about Functional Characterization of Regulatory Macrophages That Inhibit Graft-reactive Immunity at JoVE.com

Functional Characterization of Regulatory Macrophages That Inhibit Graft-reactive Immunity

Makrofager är plastceller i det hematopoietiska systemet som har en avgörande betydelse för skyddande immunitet och homeostas. I denna rapport beskriver vi optimerade in vitro- tekniker för att fenotypiskt och funktionellt karakterisera transplantatinfiltrerande regulatoriska makrofager som ackumuleras i det transplanterade organet under tolerogena förhållanden.

Funktionell karaktärisering av regulatoriska makrofager som inhiberar graftreaktiv immunitet

Macrophage accumulation in transplanted organs has long been recognized as a feature of allograft rejection1. Immunogenic monocytes infiltrate the ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Isolation and Characterization of Dendritic Cells and Macrophages from the Mouse Intestine

Isolering och karakterisering av dendritiska celler och makrofager från mus tarm

Within the intestine reside unique populations of innate and adaptive immune cells that are involved in promoting tolerance towards commensal flora and ...

Forward Genetics Screens Using Macrophages to Identify Toxoplasma gondii Genes Important for Resistance to IFN-&#947;-Dependent Cell Autonomous Immunity

Forward Genetics Screens Using Macrophages to Identify Toxoplasma gondii Genes Important for Resistance to IFN-ÃƒÅ½Ã‚Â³-Dependent Cell Autonomous Immunity

Framåt Genetics skärmar Använda makrofager att identifiera<em&gt; Toxoplasma gondii</em&gt; Gener Viktigt för Resistance till IFN-γ beroende cell autonoma immunitet

Toxoplasma gondii, the causative agent of toxoplasmosis, is an obligate intracellular protozoan pathogen. The parasite invades and replicates within ...

Isolation, Characterization and Functional Examination of the Gingival Immune Cell Network

Isolering, karakterisering och funktionella Undersökning av tandkötts Immune Cell Network

Immune cell networks in tissues play a vital role in mediating local immunity and maintaining tissue homeostasis, yet little is known of the resident ...

Phenotypic and Functional Analysis of Activated Regulatory T Cells Isolated from Chronic Lymphocytic Choriomeningitis Virus-infected Mice

Fenotypisk och funktionell analys av aktiverade regulatoriska T-celler isolerade från kronisk lymfatisk koriomeningitvirus-infekterade möss

Regulatory T (Treg) cells, which express Foxp3 as a transcription factor, are subsets of CD4+ T cells. Treg cells play crucial roles in immune tolerance ...

The Isolation, Differentiation, and Quantification of Human Antibody-secreting B Cells from Blood: ELISpot as a Functional Readout of Humoral Immunity

Isoleringen, differentiering och kvantifiering av human antikropp-utsöndrande B-celler från blod: ELISpot som en funktionell Avläsning av humoral immunitet

The hallmark of humoral immunity is to generate functional ASCs, which synthesize and secrete Abs specific to an antigen (Ag), such as a pathogen, and are ...

Phenotypic Characterization of Macrophages from Rat Kidney by Flow Cytometry

Fenotypisk karakterisering av makrofager från råttnjure med flödescytometri

There is increasing evidence suggesting the important role of inflammation and, subsequently, macrophages in the development and progression of renal ...

Using X-ray Crystallography, Biophysics, and Functional Assays to Determine the Mechanisms Governing T-cell Receptor Recognition of Cancer Antigens

Med användning av röntgenkristallografi, Biophysics, och Funktionella analyser för att bestämma de mekanismer som styr T-cellsreceptorigenkänning of Cancer Antigens

Human CD8+ cytotoxic T lymphocytes (CTLs) are known to play an important role in tumor control. In order to carry out this function, the cell ...

Isolation, Characterization, and Purification of Macrophages from Tissues Affected by Obesity-related Inflammation

Isolering, karakterisering och rening av makrofager från vävnader som påverkas av fetma-relaterade Inflammation

Obesity promotes a chronic inflammatory state that is largely mediated by tissue-resident macrophages as well as monocyte-derived macrophages. ...

Isolation and Characterization of Neutrophil-derived Microparticles for Functional Studies

Isolering och karakterisering av neutrofiler-derived mikropartiklar för funktionella studier

Polymorphonuclear neutrophil-derived microparticles (PMN)-MPs) are lipid bilayer, spherical microvesicles with sizes ranging from 50&#8211;1,000 nm in ...

Flow Cytometric Measurement Of ROS Production In Macrophages In Response To Fc&#947;R Cross-linking

Flow Cytometric Measurement Of ROS Production In Macrophages In Response To FcÃƒÅ½Ã‚Â³R Cross-linking

Flödescytometrisk flödesmätning av ROS produktion i makrofager som svar på FcγR Cross-linking

The oxidative or respiratory burst is used to describe the rapid consumption of oxygen and generation of reactive oxygen species (ROS) by phagocytes in ...