Name: evaluation of the efficacy and toxicity of rnas targeting hiv-1 production for use in gene or drug therapy
Uploaded: 2016-09-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of the Efficacy And Toxicity of RNAs Targeting HIV-1 Production for Use in Gene or Drug Therapy at JoVE.com

यहाँ प्रस्तुत काम के स्वास्थ्य अनुसंधान (CIHR) की कनाडा के संस्थानों द्वारा समर्थित किया गया (अनुदान DCB-120266, 133377 पीपीपी और एजी को HBF-348967)।

1. कोशिकाओं और transfections <ol><li> Dulbecco संशोधित ईगल मध्यम (DMEM) में संस्कृति HEK 293T कोशिकाओं 10% भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) और 1% पेनिसिलिन / स्ट्रेप्टोमाइसिन के साथ पूरक। सेल संस्कृति के माध्यम में एक 2 x 10 5 कोशिकाओं / एमएल निल?...

<ol>
	<li>Hoxie, J. A., June, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+cell+and+gene+therapies+for+HIV.">Novel cell and gene therapies for HIV.</a> Cold Spring Harb Perspect Med. 2, a007179 (2012).</li><li>Bobbin, M. L., Burnett, J. C., Rossi, J. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Conserved+Target+Site+in+HIV-1+Gag+RNA+is+Accessible+to+Inhibition+by+Both+an+HDV+Ribozyme+and+a+Short+Hairpin+RNA.">A Conserved Target Site in HIV-1 Gag RNA is Accessible to Inhibition by Both an HDV Ribozyme and a Short Hairpin RNA.</a> Mol Ther Nucleic Acids. 3, e178 (2014).</li><li>Lain&#233;, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+cleavage+of+HIV-1+RNA+by+new+SOFA-HDV+ribozymes+and+their+potential+to+inhibit+viral+replication.">In vitro and in vivo cleavage of HIV-1 RNA by new SOFA-HDV ribozymes and their potential to inhibit viral replication.</a> RNA Biol. 8, 343-353 (2011).</li><li>Scarborough, R. J., L&#233;vesque, M. V., Perreault, J. P., Gatignol, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+Evaluation+of+Clinically+Relevant+SOFA-HDV+Ribozymes+Targeting+HIV+RNA.">Design and Evaluation of Clinically Relevant SOFA-HDV Ribozymes Targeting HIV RNA.</a> Methods Mol Biol. 1103, 31-43 (2014).</li><li>Scarborough, R. J., Adams, K. L., Daher, A., Gatignol, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+Inhibition+of+HIV-1+Production+by+Short+Hairpin+RNAs+and+Small+Interfering+RNAs+Targeting+a+Highly+Conserved+Site+in+HIV-1+Gag+RNA+Is+Optimized+by+Evaluating+Alternative+Length+Formats.">Effective Inhibition of HIV-1 Production by Short Hairpin RNAs and Small Interfering RNAs Targeting a Highly Conserved Site in HIV-1 Gag RNA Is Optimized by Evaluating Alternative Length Formats.</a> Antimicrob Agents Chemother. 59, 5297-5305 (2015).</li><li>Sarzotti-Kelsoe, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+and+validation+of+the+TZM-bl+assay+for+standardized+assessments+of+neutralizing+antibodies+against+HIV-1.">Optimization and validation of the TZM-bl assay for standardized assessments of neutralizing antibodies against HIV-1.</a> J Immunol Methods. 409, 131-146 (2014).</li><li>Campos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+lasting+control+of+viral+rebound+with+a+new+drug+ABX464+targeting+Rev+-+mediated+viral+RNA+biogenesis.">Long lasting control of viral rebound with a new drug ABX464 targeting Rev - mediated viral RNA biogenesis.</a> Retrovirology. 12, 1-15 (2015).</li><li>Zhu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CRISPR/Cas9+system+inactivates+latent+HIV-1+proviral+DNA.">The CRISPR/Cas9 system inactivates latent HIV-1 proviral DNA.</a> Retrovirology. 12, 22 (2015).</li><li>Bounou, S., Leclerc, J. E., Tremblay, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Presence+of+host+ICAM-1+in+laboratory+and+clinical+strains+of+human+immunodeficiency+virus+type+1+increases+virus+infectivity+and+CD4(+)-T-cell+depletion+in+human+lymphoid+tissue,+a+major+site+of+replication+in+vivo.">Presence of host ICAM-1 in laboratory and clinical strains of human immunodeficiency virus type 1 increases virus infectivity and CD4(+)-T-cell depletion in human lymphoid tissue, a major site of replication in vivo.</a> J Virol. 76, 1004-1014 (2002).</li><li>Shan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+PCR+assay+for+quantification+of+HIV-1+RNA.">A novel PCR assay for quantification of HIV-1 RNA.</a> J Virol. 87, 6521-6525 (2013).</li><li>Clerzius, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+PKR+activator,+PACT,+becomes+a+PKR+inhibitor+during+HIV-1+replication.">The PKR activator, PACT, becomes a PKR inhibitor during HIV-1 replication.</a> Retrovirology. 10, 96 (2013).</li><li>Bradford, M. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excessive+RNA+splicing+and+inhibition+of+HIV-1+replication+induced+by+modified+U1+small+nuclear+RNAs.">Excessive RNA splicing and inhibition of HIV-1 replication induced by modified U1 small nuclear RNAs.</a> J Virol. 84, 12790-12800 (2010).</li><li>Chang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+expression+and+HIV-1+inhibition+of+chimeric+tRNA(Lys3)-ribozymes+under+dual+U6+snRNA+and+tRNA+promoters.">Enhanced expression and HIV-1 inhibition of chimeric tRNA(Lys3)-ribozymes under dual U6 snRNA and tRNA promoters.</a> Mol Ther. 6, 481-489 (2002).</li><li>Chang, L. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-1+RRE+RNA+acts+as+an+RNA+silencing+suppressor+by+competing+with+TRBP-bound+siRNAs.">HIV-1 RRE RNA acts as an RNA silencing suppressor by competing with TRBP-bound siRNAs.</a> RNA Biol. 12, 123-135 (2015).</li><li>Castanotto, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+delivery+of+small+interfering+RNAs+reduces+RNAi+efficacy+by+selective+incorporation+into+RISC.">Combinatorial delivery of small interfering RNAs reduces RNAi efficacy by selective incorporation into RISC.</a> Nucleic Acids Res. 35, 5154-5164 (2007).</li><li>Vickers, T. A., Sabripour, M., Crooke, S. 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एचआईवी -1 उत्पादन परख वर्णित HEK293T कोशिकाओं का उपयोग कर (चित्रा 2) का प्रदर्शन किया गया था और प्रभावी ribozyme 13 के लिए स्क्रीन करने के लिए एचआईवी -1 शाही सेना, shRNA 10,29, siRNA 30, और U1i आरएनए 11,31 लक्ष्य साइ...

वर्तमान एचआईवी -1 उपचार की एक सीमा है कि वे लंबे समय से रोग प्रगति को रोकने के लिए प्रशासित किया जाना चाहिए। एचआईवी -1 प्रतिरोधी टी लिम्फोसाइट, या hematopoietic स्टेम कोशिकाओं के प्रत्यारोपण, संभावित ड्रग थेरेपी 1,2 के अभाव में एचआईवी -1 प्रतिकृति की लंबी अवधि के नियंत्रण प्रदान करने के लिए है और यह भी एक प्रभावी दृष्टिकोण एक एचआईवी -1 इलाज प्राप्त करने के लिए हो सकता है 3। एक तरह से एचआईवी -1 प्रतिकृति के लिए प्रतिरोधी कोशिकाओं को प्रस्तुत करने के लिए एक ऑटोलॉगस प्रत्यारोपण 4 के दौरान एक या एक से अधिक जीन एक संक्रमित व्यक्ति की कोशिकाओं में विरोधी एचआईवी -1 आरएनए या पेप्टाइड्स के लिए कोडिंग डालने के लिए है। कई उम्मीदवार विरोधी एचआईवी -1 जीन किसी भी एक जीन को एचआईवी -1 प्रतिरोध के विकास को रोकने के लिए दो या तीन 5 6 के संयोजन में कुछ में प्रवेश क्लिनिकल परीक्षण के साथ डिजाइन किया गया है। एंटी एचआईवी -1 आरएनए उनके कम संभावित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्रकाश में लाना करने के कारण और क्योंकि वे संयोजन जीन थेरेपी के लिए शीर्ष उम्मीदवारों के बीच में हैंबहुत ही कम जीन दृश्यों से लिखित हैं। कुछ विरोधी एचआईवी -1 आरएनए वायरल प्रविष्टि और एकीकरण को लक्षित करने के लिए डिजाइन किया गया है। हालांकि, ज्यादातर विरोधी एचआईवी -1 आरएनए वायरल जीवन चक्र में बाद के एकीकरण कदम (चित्रा 1) लक्ष्य। पोस्ट-एकीकरण अवरोधकों ऐसे ribozymes 7, 8 और shRNAs U1i RNAs 9 के रूप में एचआईवी -1 नियामक प्रोटीन गूंथना या रेव 1, और antisense आधारित RNAs को लक्षित, एचआईवी -1 शाही सेना में अलग अलग साइटों को लक्षित, प्रलोभन RNAs शामिल हैं। तरीके कि विरोधी एचआईवी -1 आरएनए की प्रभावकारिता तुलना करने के लिए इस्तेमाल किया गया है जीन उम्मीदवार RNAs के लिए कोडिंग और क्षणिक उम्मीदवार RNAs व्यक्त plasmids के साथ ट्रांसफ़ेक्ट कोशिकाओं में वायरल उत्पादन और एक एचआईवी -1 प्लाज्मिड अभिव्यक्ति को मापने के साथ transduced कोशिकाओं में वायरल प्रतिकृति की निगरानी में शामिल 10 -13। हम पहले से स्क्रीन करने के लिए एचआईवी -1 नई ribozyme लक्ष्य साइटों 13-15 के लिए शाही सेना एक एचआईवी -1 उत्पादन परख का इस्तेमाल किया है। इन विधियों के बाद से एक शाही सेना के प्रारूप अनुकूलन करने के लिए परिष्कृत किया गया हैहस्तक्षेप अणु एक shRNA के रूप में प्लास्मिड डीएनए से व्यक्त या एक सिंथेटिक siRNA 16 के रूप में दिया जाता है। परख मानव भ्रूण गुर्दे (HEK) 293T कोशिकाओं से परिपक्व वायरस के उत्पादन के उपाय, और अवरोधकों कि एचआईवी -1 प्रतिकृति चक्र में बाद के एकीकरण कदम लक्ष्य (चित्रा 1) के प्रभाव की तुलना करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। अवरोधकों कि पूर्व एकीकरण कदम लक्ष्य के लिए, इस तरह के एक TZM बीएल सेल संक्रामकता परख 17 के रूप में वैकल्पिक assays एंटीवायरल प्रभावकारिता का मूल्यांकन करने की जरूरत है। क्लिनिक में विरोधी एचआईवी -1 आरएनए के वितरण के लिए प्रमुख सुरक्षा चिंताओं मानव आरएनए या प्रोटीन, और सहज प्रतिरक्षा सेंसर की सक्रियता पर संभावित बंद लक्ष्य प्रभाव शामिल हैं। विरोधी एचआईवी -1 siRNAs की विषाक्तता का मूल्यांकन करने के लिए, हम अलग अलग सेल लाइनों 16 में एक सेल व्यवहार्यता परख का इस्तेमाल किया है। हम भी डबल असहाय शाही सेना प्रतिरक्षा सेंसर की सक्रियता को मापा, आरएनए सक्रिय प्रोटीन काइनेज आर (PKR) और रिसेप्टर 3 (TLR3) की तरह टोल, साथ ही पूर्वइंटरफेरॉन की अभिव्यक्ति जीन, ADAR1 P150 को प्रेरित किया। ये assays पुष्टि करने के लिए कि विरोधी एचआईवी -1 आरएनए की प्रभावकारिता सेल व्यवहार्यता या प्रतिरक्षा सेंसर सक्रियण पर अप्रत्यक्ष प्रभाव के कारण नहीं है इस्तेमाल किया जा सकता है। उन्होंने यह भी आगे विकास से संभावित विषाक्तता के साथ उम्मीदवार RNAs को छोड़कर में उपयोगी होते हैं। निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, प्रक्रियाओं नई चिकित्सकीय RNAs की पहचान करने और अनुकूलन मौजूदा वालों के प्रारूप में वर्णित किया जाता है। तरीकों एचआईवी -1 प्रतिकृति की स्क्रीनिंग आरएनए आधारित पोस्ट-एकीकरण अवरोधकों के लिए उपयोगी होते हैं और इस तरह के वायरल शाही सेना 18 या CRISPR की रेव मध्यस्थता निर्यात को निशाना छोटे अणुओं के रूप में अन्य के बाद एकीकरण निरोधक, स्क्रीन के लिए अनुकूलित किया जा सकता है / डिजाइन किए कैस सिस्टम एकीकृत लक्षित करने एचआईवी -1 डीएनए 19।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM HyClone</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>SH30243.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS HyClone</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>SH30396.03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin Gibco</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates, 96 well, 24 well, 6 well.</td>
			<td>Corning</td>
			<td>353075, 353047, 353043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro tubes Axygen</td>
			<td>Corning</td>
			<td>311-08-051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low molecular weight Poly I:C</td>
			<td>InvivoGen</td>
			<td>3182-29-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DharmaFECT-1</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>T-2001-01</td>
			<td>transfection reagent for synthetic RNAs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TransIT-LT1</td>
			<td>Mirus</td>
			<td>MIR 2300</td>
			<td>transfection reagent for RNA expression plasmids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nonidet P40 (NP-40)</td>
			<td>USB</td>
			<td>19628</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>[32P]dTTP</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>BLU505H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly(A) RNA template&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10108626001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>oligo(dT)12-18 DNA primer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>18418-012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DEAE filtermat paper&#160;</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>1450-522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate scintillation counter</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>1450-024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M-2128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS HyClone</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>SH30028.02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate spectrophotometer</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>1706930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lysis buffer tablets</td>
			<td>Roche</td>
			<td>4693159001, 4906837001</td>
			<td>protease and phosphatase inhibitors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5415R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bradford reagent</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>500-0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gel running chamber</td>
			<td>Hoefer</td>
			<td>SE600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-dry transfer cell</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>1703940</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein ladder EZ-Run</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>BP3603-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrocellulose membrane</td>
			<td>Bio-rad</td>
			<td>162-0094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9647-1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibody stripping solution</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>2504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ECL - Pierce</td>
			<td>Thermo Fisher&#160;</td>
			<td>PI32106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ADAR1 antibody</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>from Dr. B.L. Bass</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phospho-T446-PKR antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab32036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phospho-S396-IRF3 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>4947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PKR antibody</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>from Dr. A. Hovanessian</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IRF3 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>11904</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase-labeled goat anti-rabbit</td>
			<td>KPL</td>
			<td>474-1506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase-labeled goat anti-mouse</td>
			<td>KPL</td>
			<td>474-1806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponceau S&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>6226-79-5</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of the efficacy and toxicity of rnas targeting hiv-1 production for use in gene or drug therapy

Small RNA therapies targeting post-integration steps in the HIV-1 replication cycle are among the top candidates for gene therapy and have the potential to be used as drug therapies for HIV-1 infection. Post-integration inhibitors include ribozymes, short hairpin (sh) RNAs, small interfering (si) RNAs, U1 interference (U1i) RNAs and RNA aptamers. Many of these have been identified using transient co-transfection assays with an HIV-1 expression plasmid and some have advanced to clinical trials. In addition to measures of efficacy, small RNAs have been evaluated for their potential to affect the expression of human RNAs, alter cell growth and/or differentiation, and elicit innate immune responses. In the protocols described here, a set of transient transfection assays designed to evaluate the efficacy and toxicity of RNA molecules targeting post-integration steps in the HIV-1 replication cycle are described. We have used these assays to identify new ribozymes and optimize the format of shRNAs and siRNAs targeting HIV-1 RNA. The methods provide a quick set of assays that are useful for screening new anti-HIV-1 RNAs and could be adapted to screen other post-integration inhibitors of HIV-1 replication.

प्रक्रियाओं का एक सामान्य योजनाबद्ध तीन टेस्ट RNAs और एक नियंत्रण चित्रा 2 बी में प्रदान की शाही सेना के लिए एक उदाहरण अभिकर्मक योजना के साथ चित्रा 2 में दिखाया गया है। वायरल उत्प?...

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Evaluation of the Efficacy And Toxicity of RNAs Targeting HIV-1 Production for Use in Gene or Drug Therapy

Methods to evaluate the efficacy and toxicity of RNA molecules targeting post-integration steps of the HIV-1 replication cycle are described. These methods are useful for screening new molecules and optimizing the format of existing ones.

जीन या ड्रग थेरेपी में उपयोग के लिए लक्ष्य निर्धारण एचआईवी -1 उत्पादन प्रभावकारिता और आरएनए की विषाक्तता का मूल्यांकन

Small RNA therapies targeting post-integration steps in the HIV-1 replication cycle are among the top candidates for gene therapy and have the potential ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Genotypic Inference of HIV-1 Tropism Using Population-based Sequencing of V3

V3 के एचआईवी -1 tropism के genotypic निष्कर्ष का प्रयोग जनसंख्या आधारित अनुक्रमण

Background: Prior to receiving a drug from CCR5-antagonist class in HIV therapy, a patient must undergo an HIV tropism test to confirm that his or her ...

Preparation and Use of HIV-1 Infected Primary CD4+ T-Cells as Target Cells in Natural Killer Cell Cytotoxic Assays

तैयारी और प्रयोग करें एचआईवी 1 संक्रमित प्राथमिक + प्राकृतिक खूनी सेल साइटोटोक्सिक Assays में लक्ष्य कोशिकाओं के रूप में सीडी 4 टी कोशिकाओं

 Natural killer (NK) cells are a vital component of the innate immune response to virus-infected cells. It is important to understand the ability of NK ...

Generation of Multivirus-specific T Cells to Prevent/treat Viral Infections after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplant

Multivirus विशेष टी कोशिकाओं की पीढ़ी को रोकें / allogeneic hematopoietic स्टेम सेल प्रत्यारोपण के बाद वायरल संक्रमण का इलाज

Viral infections cause morbidity and mortality in allogeneic hematopoietic stem cell transplant (HSCT) recipients. We and others have successfully ...

Amplifying and Quantifying HIV-1 RNA in HIV Infected Individuals with Viral Loads Below the Limit of Detection by Standard Clinical Assays

Amplifying और मानक नैदानिक ​​Assays द्वारा जांच की सीमा से नीचे वायरल लोड के साथ एचआईवी संक्रमित व्यक्तियों में एचआईवी -1 शाही सेना बढ़ाता

Amplifying viral genes and quantifying HIV-1 RNA in HIV-1 infected individuals with viral loads below the limit of detection by standard assays (below ...

In vitro Uncoating of HIV-1 Cores

In vitro Uncoating of HIV-1 Cores

एचआईवी-1 कोर की इन विट्रो Uncoating में

The genome of the retroviruses is encased in a capsid surrounded by a lipid envelope. For lentiviruses, such as HIV-1, the conical capsid shell is ...

Imaging of HIV-1 Envelope-induced Virological Synapse and Signaling on Synthetic Lipid Bilayers

के इमेजिंग एचआईवी -1 लिफाफा प्रेरित virological Synapse और सिंथेटिक लिपिड bilayers पर संकेतन

Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infection occurs most efficiently via cell to cell transmission2,10,11. This cell to cell transfer between ...

Conformational Evaluation of HIV-1 Trimeric Envelope Glycoproteins Using a Cell-based ELISA Assay

एक सेल आधारित एलिसा परख का उपयोग एचआईवी -1 trimeric लिफाफा glycoproteins के गठनात्मक मूल्यांकन

HIV-1 envelope glycoproteins (Env) mediate viral entry into target cells and are essential to the infectious cycle. Understanding how those glycoproteins ...

High-throughput Quantitative Real-time RT-PCR Assay for Determining Expression Profiles of Types I and III Interferon Subtypes

उच्च throughput मात्रात्मक वास्तविक समय आरटी पीसीआर परख प्रकार मैं और तृतीय इंटरफेरॉन उपप्रकार की अभिव्यक्ति प्रोफाइल निर्धारण के लिए

Described in this report is a qRT-PCR assay for the analysis of seventeen human IFN subtypes in a 384-well plate format that incorporates highly specific ...

Isolation of Exosomes from the Plasma of HIV-1 Positive Individuals

एचआईवी -1 सकारात्मक व्यक्तियों के प्लाज्मा से Exosomes का अलगाव

Exosomes are small vesicles ranging in size from 30 nm to 100 nm that are released both constitutively and upon stimulation from a variety of cell types. ...

Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes

Measurement of In Vitro Integration Activity of HIV-1 Preintegration Complexes

का नाप<em&gt; इन विट्रो</em&gt; एचआईवी -1 Preintegration परिसर की एकता गतिविधि

HIV-1 envelope proteins engage cognate receptors on the target cell surface, which leads to viral-cell membrane fusion followed by the release of the ...