Name: induction of acute skeletal muscle regeneration by cardiotoxin injection
Uploaded: 2017-01-01T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Acute Skeletal Muscle Regeneration by Cardiotoxin Injection at JoVE.com

We thank the Animal House and the Integrated Microscopy Facilities of IGB-CNR. This work has benefited from research funding from the European Community's Seventh Framework Programme in the project ENDOSTEM (Activation of vasculature associated stem cells and muscle stem cells for the repair and maintenance of muscle tissue, grant agreement number 241440), the Italian Ministry of Education-University-Research (MIUR-PRIN2 010-2011) to G.M. and S.B. and PON Cluster IRMI to G.M., and the CARIPLO foundation to G.M. and S.B.

وأجريت جميع التجارب بما يتفق تماما مع المبادئ التوجيهية المؤسسية للبحوث الحيوانية والموافقة عليها من قبل وزارة الصحة العامة وصحة الحيوان والتغذية وسلامة الأغذية من الوزارة الإيطالية للصحة وفقا للقانون التجارب على الحيوانات. قد تختلف إجراءات الخلع عنق الرحم من مؤسسة لأخرى بن?...

<ol>
	<li>Morgan, J. E., Partridge, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+satellite+cells.">Muscle satellite cells.</a> Int J Biochem Cell Biol. 35 (8), 1151-1156 (2003).</li><li>Roca, I., Requena, J., Edel, M. J., Alvarez-Palomo, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myogenic+Precursors+from+iPS+Cells+for+Skeletal+Muscle+Cell+Replacement+Therapy.">Myogenic Precursors from iPS Cells for Skeletal Muscle Cell Replacement Therapy.</a> J Clin Med. 4 (2), 243-259 (2015).</li><li>Cheung, T. H., Rando, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+stem+cell+quiescence.">Molecular regulation of stem cell quiescence.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 14 (6), 329-340 (2013).</li><li>Dumont, N. A., Wang, Y. X., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+and+extrinsic+mechanisms+regulating+satellite+cell+function.">Intrinsic and extrinsic mechanisms regulating satellite cell function.</a> Development. 142 (9), 1572-1581 (2015).</li><li>Hawke, T. J., Garry, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myogenic+satellite+cells:+physiology+to+molecular+biology.">Myogenic satellite cells: physiology to molecular biology.</a> J Appl Physiol. 91 (1985), 534-551 (1985).</li><li>Saclier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differentially+activated+macrophages+orchestrate+myogenic+precursor+cell+fate+during+human+skeletal+muscle+regeneration.">Differentially activated macrophages orchestrate myogenic precursor cell fate during human skeletal muscle regeneration.</a> Stem Cells. 31 (2), 384-396 (2013).</li><li>Pillon, N. J., Bilan, P. J., Fink, L. N., Klip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-talk+between+skeletal+muscle+and+immune+cells:+muscle-derived+mediators+and+metabolic+implications.">Cross-talk between skeletal muscle and immune cells: muscle-derived mediators and metabolic implications.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 304 (5), E453-E465 (2013).</li><li>Bentzinger, C. F., Wang, Y. X., Dumont, N. A., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+dynamics+in+the+muscle+satellite+cell+niche.">Cellular dynamics in the muscle satellite cell niche.</a> EMBO Rep. 14 (12), 1062-1072 (2013).</li><li>Costamagna, D., Costelli, P., Sampaolesi, M., Penna, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Inflammation+in+Muscle+Homeostasis+and+Myogenesis.">Role of Inflammation in Muscle Homeostasis and Myogenesis.</a> Mediators Inflamm. 2015, (2015).</li><li>Charge, S. B., Rudnicki, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+regulation+of+muscle+regeneration.">Cellular and molecular regulation of muscle regeneration.</a> Physiol Rev. 84 (1), 209-238 (2004).</li><li>Arnold, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+monocytes+recruited+after+skeletal+muscle+injury+switch+into+antiinflammatory+macrophages+to+support+myogenesis.">Inflammatory monocytes recruited after skeletal muscle injury switch into antiinflammatory macrophages to support myogenesis.</a> J Exp Med. 204 (5), 1057-1069 (2007).</li><li>Chang, C. C., Chuang, S. T., Lee, C. Y., Wei, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+cardiotoxin+and+phospholipase+A+in+the+blockade+of+nerve+conduction+and+depolarization+of+skeletal+muscle+induced+by+cobra+venom.">Role of cardiotoxin and phospholipase A in the blockade of nerve conduction and depolarization of skeletal muscle induced by cobra venom.</a> Br J Pharmacol. 44 (4), 752-764 (1972).</li><li>Meng, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+triage+and+freezing+for+models+of+skeletal+muscle+disease.">Tissue triage and freezing for models of skeletal muscle disease.</a> J Vis Exp. (89), (2014).</li><li>Mann, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aberrant+repair+and+fibrosis+development+in+skeletal+muscle.">Aberrant repair and fibrosis development in skeletal muscle.</a> Skelet Muscle. 1 (1), (2011).</li><li>Pessina, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+and+optimized+strategies+for+inducing+fibrosis+in+vivo:+focus+on+Duchenne+Muscular+Dystrophy.">Novel and optimized strategies for inducing fibrosis in vivo: focus on Duchenne Muscular Dystrophy.</a> Skelet Muscle. 4 (1), 7 (2014).</li></ol>

هنا، نحن تصف بروتوكول للحث على إصابة حادة في العضلات والهيكل العظمي (أي الحقن العضلي من CTX). يستخدم على نطاق واسع على أنها أداة قوية لدراسة ديناميات تجديد الهيكل العظمي والعضلات في الجسم الحي. حقن CTX الحث على تحلل الألياف العضلية، والذي كان سببه الاستقطاب من ?...

تتشكل الكبار الثدييات العضلات والهيكل العظمي من قبل مجموعات من fascicules من خلايا العضلات متعددة النوى (myofibers) التي تخصصت للانكماش. كل ليف عضلي هو مخلى ممدود، وتحيط بها غمد الليف العضلي (غشاء PLASMATIC) والتي تحتوي على اللييفات العضلية، والتي تتكون من البروتينات مقلص نظمت بشكل منتظم ومتكرر (الأكتين والميوسين خيوط). في حياة الكبار وفي ظروف الراحة والعضلات والهيكل العظمي لها دوران منخفض جدا من myonuclei من 1؛ في الواقع، وmyonuclei، والتي تقع في محيط ليف عضلي، تحت غمد الليف العضلي، وألقي القبض عليه في مرحلة G0 من دورة الخلية وغير قادر على التكاثر 1،2. عضلات الهيكل العظمي لديها القدرة على التجدد غريبة التالية الضرر، ليصل إلى التوازن بعد عدة أحداث إعادة تشكيل الأنسجة التي ترتبط ارتباطا وثيقا بعضها البعض. بعد الإصابة الحادة أو الصدمة، وبفعل انحطاط، تليها عمليات تجديدالتي تشارك فيها أعداد مختلفة من الخلايا، بما في ذلك عدد السكان المقيمين في خلايا العضلات والخلايا الأقمار الصناعية (المنبوذة). في الواقع، في غياب أي محفزات البيئية، والخلايا الأقمار الصناعية في حالة هادئة وتقع في محراب المتخصصة بين غمد الليف العضلي و3،4 الصفيحة القاعدية. بعد الإصابة أو المرض، المنبوذة تصبح تفعيلها، وتتكاثر، الهجرة إلى المناطق المتضررة، وأخيرا تمييز، مما أدى إلى تشكيل حديثا myofibers 5. المنبوذة تنشيط تؤسس عبر الحديث مع السكان خلية مختلفة، وذلك أساسا الخلايا الالتهابية، والتي يتم تعيينهم في الموقع من الصدمة 6-8. هذا عبر الحديث يسمح للخلايا لمتابعة نموذج التنظيم التي الإشارات الجزيئية بالسيارة التعديلات الهيكلية، مما يؤدي في النهاية إلى توازن 9. إلى جانب المنبوذة، الخلايا الالتهابية والخلالي، عمليات عائية، وأحداث إعادة تعصيب-ويشارك فيه ايضا، يتصرف بطريقة منسقة لإصلاح هذه درجة عالية من التنظيم والصورةهيكل pecialized. هناك اهتمام كبير في دراسة الجوانب المختلفة لتجديد الهيكل العظمي والعضلات، وليس فقط لفهم علم وظائف الأعضاء من العضلات، ولكن أيضا لتحسين الاستراتيجيات العلاجية التي تتطلب معرفة أعمق للعملية برمتها. عدة طرق التجريبية متوفرة لدراسة الهوية وظيفة من مختلف السكان الخلية، ومسارات الإشارات، والآليات الجزيئية التي تشارك حاليا. نماذج الماوس من الإصابة الحادة تمثل أداة قوية لتحقيق العديد من جوانب هذه العملية. مختلفة تستخدم عادة تقنيات للحث على تلف العضلات الحاد تسمح للباحثين لمتابعة عملية تجديد في الجسم الحي، من المراحل المبكرة جدا من نهاية العملية. يصف هذا البروتوكول على بعد خطوات من طريق الحقن العضلي من cardiotoxin المستمدة سم ثعبان (CTX)، والتي يدفع تحلل العضل ويطلق عملية تجديد، وصولا إلى تحليل عينات الأنسجة. بعد الحقن CTX، ميلم يمكن التضحية في نقاط زمنية مختلفة اعتمادا على متطلبات التجريبية، والعضلات والهيكل العظمي يمكن تشريح ومعالجتها لمزيد من التحليل. وأخيرا، نحن تصف البروتوكول تلطيخ أقسام الأنسجة لأداء الملاحظات الشكلية والتحليلات الكمية الأساسية. يسمح هذا البروتوكول لدراسة الحاد تجديد الهيكل العظمي والعضلات في الجسم الحي بطريقة استنساخه للغاية (10).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="957">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Cardiotoxin from&#160;Naja mossambica mossambica</td>
			<td style="width:199px;">SIGMA ALDRICH</td>
			<td style="width:119px;">C9759</td>
			<td style="width:191px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Syringe For Insulin BD Micro-Fine+ Needle 30 G X 8 mm - Da 0,3 ml</td>
			<td style="width:199px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">324826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Tragacanth Gum</td>
			<td style="width:199px;">MP BIOMEDICALS,LLC</td>
			<td style="width:119px;">104792</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2-Methylbutane (Isopentane)</td>
			<td>SIGMA ALDRICH</td>
			<td style="width:119px;">78-78-4.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">OCT Killik Solution For Inclusion Cryostat</td>
			<td>Bio-optica</td>
			<td>&#160;05-9801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Feather Microtome Blade S35</td>
			<td style="width:199px;">Bio-optica</td>
			<td style="width:119px;">&#160;01-S35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Glass Slide Superfrost Plus</td>
			<td style="width:199px;">Menzel-Gl&#228;ser</td>
			<td style="width:119px;">09-OPLUS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Dumon #5 Mirror Finish Forceps&#160;</td>
			<td style="width:199px;">2BIOLOGICAL INSTRUMENTS</td>
			<td style="width:119px;">11251-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Scissors Straight Sharp/Sharp</td>
			<td style="width:199px;">2BIOLOGICAL INSTRUMENTS</td>
			<td style="width:119px;">15024-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Scissors Noyes Straight</td>
			<td style="width:199px;">2BIOLOGICAL INSTRUMENTS</td>
			<td style="width:119px;">15012-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Fine Iris Scissors Straight Sharp/Sharp 10,5 Cm</td>
			<td style="width:199px;">2BIOLOGICAL INSTRUMENTS</td>
			<td style="width:119px;">14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Eukitt</td>
			<td style="width:199px;">Bio-optica</td>
			<td style="width:119px;">09-00100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Slide Coverslip</td>
			<td style="width:199px;">BIOSIGMA</td>
			<td style="width:119px;">VBS651</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Xylene</td>
			<td style="width:199px;">SIGMA ALDRICH</td>
			<td style="width:119px;">214736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethanol 100%</td>
			<td>sigma-Aldrich</td>
			<td>02860-2.5L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Hematoxyline</td>
			<td style="width:199px;">J.T. BAKER</td>
			<td style="width:119px;">3873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Eosin</td>
			<td style="width:199px;">SIGMA ALDRICH</td>
			<td style="width:119px;">HT110116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:449px;">Cryostat</td>
			<td style="width:199px;">LEICA</td>
			<td style="width:119px;">CM3050 S</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of acute skeletal muscle regeneration by cardiotoxin injection

الهيكل العظمي تجديد العضلات هي عملية الفسيولوجية التي تحدث في العضلات والهيكل العظمي الكبار في الاستجابة لإصابة أو مرض. حاد الإصابة الناجمة عن تجديد العضلات والهيكل العظمي هو يستخدم على نطاق واسع وقوي نظام نموذجي لدراسة الأحداث تشارك في تجديد العضلات وكذلك الآليات ومختلف اللاعبين. في الواقع، معرفة مفصلة من هذه العملية ضرورية لفهم أفضل للظروف المرضية التي تؤدي إلى ضمور العضلات والهيكل العظمي، وأنها تساعد في تحديد استراتيجيات علاجية جديدة هادفة. يصف هذا العمل بروتوكول مفصلة وقابلة للتكرار للحث الحاد تجديد الهيكل العظمي والعضلات في الفئران عن طريق الحقن العضلي واحد من cardiotoxin (CTX). CTX ينتمي إلى عائلة من السموم سم الأفعى ويسبب تحلل العضل من myofibers، الذي يؤدي في نهاية المطاف إلى أحداث تجديد. يتم تقييم ديناميات تجديد الهيكل العظمي والعضلات عن طريق التحليل النسيجي للأقسام العضلات. البروتوكول أيضايوضح الإجراءات التجريبية للتشريح، وتجميد، وقطع العضلات قصبة الساق الأمامية، فضلا عن الروتيني الهيماتوكسيلين ويوزين تلطيخ التي يتم استخدامها على نطاق واسع للتحليل الصرفي والمورفولوجية لاحق.

H &amp; E تلطيخ يسمح لتقييم التشكل لعملية تجديد في نقطة زمنية محددة خلال تجديد الهيكل العظمي والعضلات. ويبين الشكل 3 تحليل الوقت بالطبع أجريت على عضلات TA الجرحى من الفئران نوع البرية. وقد تم عزل العضلات في 3 و 7 و 15، و 30 أيام بعد الحقن CTX، كما schematize...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Acute Skeletal Muscle Regeneration by Cardiotoxin Injection at JoVE.com

Induction of Acute Skeletal Muscle Regeneration by Cardiotoxin Injection

توضح هذه المخطوطة بروتوكول مفصلة للحث الحاد تجديد الهيكل العظمي والعضلات في الفئران البالغة والتلاعب اللاحقة للعضلات، مثل التشريح، وتجميد، قطع، وتلطيخ الروتيني، وليف عضلي تحليل منطقة مستعرضة.

تحريض الحاد الهيكل العظمي تجديد العضلات التي Cardiotoxin حقن

Skeletal muscle regeneration is a physiological process that occurs in adult skeletal muscles in response to injury or disease. Acute injury-induced ...

The overall goal of this procedure is to obtain a mouse model of skeletal muscle acute injury to study the regeneration process in vivo, from the very early stages to the end of the process. Mouse models of muscle acute injury is a powerful tool to investigate many aspects of the regeneration process. The main advantage of this technique is the high reproducibility of all the steps involved.To begin this procedure, apply a few drops of 70%ethanol onto the the hind limb of an anesthetized mouse. To visualize the exact location of the tibialis anterior muscle, remove the hair at the anterior part of the lower leg with a scalpel. To inject the cardiotoxin solution, draw 100 microliters of it into the syringe.Hold the syringe upright and remove the air bubbles. Then, insert the needle in the center of TA from the tendon towards the knee, following the position of the tibia bone as guidance. Perform the injection without going too deep, and avoid going beyond the muscle itself.Wait two to three seconds before pulling out the needle to prevent leakage of cardiotoxin from the muscle. Apply a few drops of 70%ethanol onto the hind limb of the euthanized animal. Cut the skin at the level of the proximal tendon, then insert one of the blades of the scissors under the skin and cut the skin in the direction of the knee.Pull up the skin to expose the muscle entirely. Carefully remove all the skin and the hair from the area of interest. After that, eliminate the fascia by slowly pinching or cutting the extreme periphery of the muscle.Once broken, gently remove the fascia with the help of the thin-tipped tweezers, avoiding damaging the underlying muscle. Visualize the distal tibialis anterior tendon above the foot, then separate the distal tibialis anterior tendon from the extensor digitorum tendon by passing the tweezers'tip below the tendon. Gently slide the tweezers below the tibialis anterior to separate it from the underlying muscle.Hold the tweezers under the muscle to keep it slightly raised. Cut the tibialis anterior tendon and gently pull it upwards until only the area below the knee is attached. Subsequently, cut the TA below the knee, following the edge of the muscle with the scissors.Place a small amount of tragacanth gum on a slice of cork. Insert the distal tendon of the TA into the tragacanth gum, and leave about 3/4ths of the muscle outside, making sure to have the muscle in a perpendicular position with respect to the cork. After that, fill an aluminum can with isopentane.Suspend the can of isopentane in a dewar containing liquid nitrogen. When isopentane reaches the proper temperature, white solid particles form at the bottom of the can. Rapidly dip the cork with the muscle into isopentane, keeping the muscle position downwards.While the specimen floats, only the reverse side of the cork should be visible in the liquid. Leave the sample in isopentane for one minute. After that, immerse the muscle in liquid nitrogen for at least two minutes.Then, wrap the specimens individually in labeled aluminum foil and immediately place them in dry ice. During the procedure, it is extremely important to maintain the correct temperature and to prevent the specimen from thawing. In this procedure, place the specimen stub, the blade, and the specimen in the cryostat chamber, allowing them to equilibrate for at least 30 minutes.Next, place a small amount of freezing compound on the specimen stub, and immerse the cork with the specimen in the OCT compound before the freezing compound solidifies. Place the blade in the blade holder. Place the specimen in its proper holder.Cut the sections at a thickness of 10 micrometers. Then, place the sections on a polarized slide. After sectioning, store the slides at 80 degrees Celsius.In a chemical hood, completely air dry the frozen slides with sections for 10 to 15 minutes at room temperature. Then, lodge the slides in a staining tray. Stain the sections for one minute with hematoxylin.After that, lay the staining trough under a fairly weak tap water jet for 10 minutes to wash out the hematoxylin. Following that, counterstain the sections with eosin solution for one minute, then rinse them with water to eliminate excessive eosin solution. Subsequently, dehydrate the samples in a graded ethanol series at 50%followed by 70%Afterward, rapidly immerse the samples in 95%ethanol, followed by two changes in 100%ethanol.Clear the samples in two changes of xylene, each for at least five minutes. To mount the slides, apply a few drops of the xylene-based mounting medium on each slide, and cover it with a cover slip. Keep the slides in the fume hood for a few hours, or overnight.Shown here is the experimental scheme of the acute skeletal muscle injury. Here are the representative pictures of hematoxylin-and eosin-stained sections of cardiotoxin-treated muscles at the indicated days after injury. A couple of necrotic fibers, which is enclosed by the black continuous line, are likely invaded by the inflammatory cells.The dashed line marks an area of the infiltrating mononucleated cells. A single immature myofiber with centrally located nucleus is indicated by the black circle. Here are the large regenerated eosinophilic myofibers, with the centrally located nuclei that are marked by the black circles.This graph shows the average of the centrally-nucleated myofiber size values in TA muscle sections. And this graph shows the myofiber cross-sectional area distribution at 6, 15, and 30 days after cardiotoxin injection. Following this procedure, skeletal muscle sections can be used to perform different histological and immunofluorescence protocols to identify specific features of the muscle tissue.After watching this video, you should have a good understanding of how to investigate different aspects of skeletal muscle regeneration process that follow acute injury.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Kidney Regeneration in Adult Zebrafish by Gentamicin Induced Injury

التجديد الكلى في اسماك الزرد الكبار قبل جنتاميسين المستحثة الإصابات

The kidney is essential for fluid homeostasis, blood pressure regulation and filtration of waste from the body. The fundamental unit of kidney function is ...

Isolation and Quantitative Immunocytochemical Characterization of Primary Myogenic Cells and Fibroblasts from Human Skeletal Muscle

العزلة والكمية Immunocytochemical توصيف الخلايا عضلي الابتدائية والخلايا الليفية من العضلات الهيكلية البشرية

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

تحليل الزرد اليرقات الهيكل العظمي النزاهة العضلات مع ايفانز الأزرق صبغ

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Chondrogenic Differentiation Induction of Adipose-derived Stem Cells by Centrifugal Gravity

مكون للغضروف التمايز تحريض الخلايا الجذعية الدهنية المشتقة من الجاذبية الطرد المركزي

Impaired cartilage cannot heal naturally. Currently, the most advanced therapy for defects in cartilage is the transplantation of chondrocytes ...

Shifting Zebrafish Lethal Skeletal Mutant Penetrance by Progeny Testing

تحويل الزرد الفتاكة Penetrance متحولة الهيكل العظمى بذرية اختبار

Zebrafish mutant phenotypes are often incompletely penetrant, only manifesting in some mutants. Interesting phenotypes that inconsistently appear can be ...

Evaluation of Injury-induced Senescence and In Vivo Reprogramming in the Skeletal Muscle

Evaluation of Injury-induced Senescence and In Vivo Reprogramming in the Skeletal Muscle

تقييم الضرر الناجم عن الشيخوخة و في فيفو إعادة برمجة في العضلات الهيكلية

Cellular senescence is a stress response that is characterized by a stable cellular growth arrest, which is important for many physiological and ...

Application of Chronic Stimulation to Study Contractile Activity-induced Rat Skeletal Muscle Phenotypic Adaptations

تطبيق التحفيز المزمن لدراسة التعديلات المظهرية الهيكل العظمى والعضلات الهوس الفئران التي يسببها النشاط

Skeletal muscle is a highly adaptable tissue, as its biochemical and physiological properties are greatly altered in response to chronic exercise. To ...

Identification of Skeletal Muscle Satellite Cells by Immunofluorescence with Pax7 and Laminin Antibodies

تحديد خلايا الهيكل العظمى والعضلات الأقمار الصناعية قبل الفلورة مع Pax7 والأجسام المضادة لامينين

Immunofluorescence is an effective method that helps to identify different cell types on tissue sections. In order to study the desired cell population, ...

X-ray Diffraction of Intact Murine Skeletal Muscle as a Tool for Studying the Structural Basis of Muscle Disease

الأشعة السينية الانعراج من العضلات الهيكلية Murine سليمة كأداة لدراسة الأساس الهيكلي لأمراض العضلات

Transgenic mouse models have been important tools for studying the relationship of genotype to phenotype for human diseases including those of skeletal ...