Name: a murine model of group b streptococcus vaginal colonization
Uploaded: 2016-11-16T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization at JoVE.com

We would like to thank the vivarium manager and staff at San Diego State University for support with animal husbandry. During this work, K.A.P. was supported by an ARCS scholarship and a fellowship from the Inamori Foundation. K.S.D. is supported by an R01 grant, NS051247, from the National Institutes of Health.

Все для животных работа была одобрена Управлением Лабораторный уходу за животными в Сан-Диего государственного университета и проводится в соответствии с принятыми стандартами ветеринарные. Самок мышей, возраст 8 - 16 недель, были использованы для разработки этого метода. 1. Подгото?...

В целях дальнейшего улучшения положения понимания GBS взаимодействия с хоста и других микробов в контексте хоста, требуется модель животного. Эта работа описывает технические аспекты создания GBS вагинальный колонизации у мышей. Этот протокол достигает&gt; 90% колонизацию мышей без примен...

Streptococcus agalactiae, стрептококки группы В (GBS), представляет собой инкапсулированный, грамположительные бактерии , которая часто выделяемыми из кишечника и мочеполового тракта здоровых взрослых. В 1970 - е годы, GBS появился в качестве ведущего агента инфекционного неонатальной смертности, с более чем 7000 случаев заболевания у новорожденных в год 1. Раннее начало болезни GBS (ОВБ) происходит в первые часы или дни жизни, возникает как пневмония или дыхательной недостаточности, и часто развивается в сепсисом, в то время как с поздним началом заболевания (LOD) наступает через несколько месяцев и подарки с бактериемией, которые часто переходит к менингиту 2. По состоянию на 2002, Центры по контролю и профилактике заболеваний рекомендует всеобщий скрининг для GBS вагинальной колонизации в конце беременности и в родах антибиотикопрофилактики (IAP) для GBS-положительных матерей 1. Несмотря на снижение заболеваемости раннего начала до приблизительно 1000 случаев в Соединенных Штатах ежегодно из-за IAP,GBS остается ведущей причиной раннего начала неонатального сепсиса, и появление с поздним началом остается неизменным 1. Будь внутриутробно, во время родов или даже в поздним началом случаях, неонатальный воздействие GBS требует выживания, поперечный с помощью ряда сред-хозяев и барьеров, иммунной уклонения, а также, в случае менингита, пересечения высоко регулируемой гематоэнцефалического гематоэнцефалический барьер 2. Вверх по течению этих сильнодействующих взаимодействий внутри новорожденному является начальным колонизация влагалища матери-кишечного тракта. Материнское GBS вагинальных колонизация колеблется от 8-18% в развитых и развивающихся странах, с предполагаемой средней ставке 12,7% 3,4. GBS колонизация вагинального тракта во время беременности может быть постоянным, прерывистым, или временный характер среди отдельных женщин 5. Интересно, что материнский возраст&gt; 36 лет связана с постоянной колонизации 6. Многочисленные биологические и социально-экономические факторы риска для GBS вагинальной колонизациибыли идентифицированы. Биологические факторы включают желудочно - колонизацию GBS и отсутствие лактобактерий в кишечнике. Тем не менее, этническая принадлежность, ожирение, гигиена, и сексуальная активность также были связаны с GBS вагинального перевозки 7. Хотя пресловутая за причинение неонатальных инфекций, GBS также вызывает множество материнских инфекций как послеродовых и после родов. ГБС каретка увеличивается в женщин с вагинитом 8 и, в некоторых случаях, может быть даже сущности болезни 9. Кроме того, GBS вознесение репродуктивного тракта во время беременности может привести к интраамниальной инфекции или хориоамнионита 10. Кроме того, в до 3,5% беременностей, GBS распространяет в мочевой пузырь , чтобы вызвать инфекцию мочевых путей или бессимптомной бактериурии 11. GBS бактериурии во время беременности связано с повышенным риском интранатального лихорадки, хориоамнионита, преждевременных родов и prematurе разрыв плодных оболочек 12. Взятые вместе, присутствие GBS в вагинального тракта связана с инфекциями нескольких тканей хозяина, а также возможность устранить GBS из этой ниши крайне важно как для здоровья матерей и новорожденных. До недавнего времени большая часть работы следственным GBS взаимодействия с шеечно -кишечного тракта было ограничено в пробирке клеточных моделей 13-15. Эти эксперименты в пробирке показали бактериальные факторы , которые являются важными для присоединения, в том числе поверхностных белков , таких а и серин пили богатые повторы 17,18, а также двухкомпонентные системы регулирования 15,19 и глобальная реакция транскрипционной вагинального эпителия GBS 19. Вместе с тем, чтобы в полной мере выяснить хост-микробных взаимодействий внутри влагалищного тракта, надежная модель животного необходимо. Ранние работы показали , что ГБС может быть извлечена из вагинального тракта засеянных мышей и крыс 20,21 &lt;SUP&gt; 22 в обоих беременных и небеременных условиях. В 2005 году краткосрочные GBS вагинальные колонизация была смоделирована на мышах , чтобы изучить эффективность фага литического фермента для лечения вагинального GBS в течение 24 ч 23. Несколько лет спустя, долгосрочный GBS вагинальные колонизация мышиная модель была разработана с целью изучения хозяина и бактериальные факторы, определяющие GBS настойчивость. Эта модель выявила многочисленные факторы , способствующие GBS колонизации, в том числе поверхностных придатков 17,18 и GBS двухкомпонентных систем 19,24. Эта модель способствовала выявлению механизмов 19,25 ответа хозяина и был использован для тестирования несколько терапевтических стратегий, в том числе иммуномодулирующих пептидов 26 и пробиотиков 27. Этот протокол дает необходимые указания привить GBS в мыши вагинального тракта и впоследствии отслеживать колонизацию и собирать образцы для дальнейших анализов.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="592">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Sesame oil&#160;</td>
			<td style="width:91px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S3547-250ML</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:46px;width:216px;">&#946;-Estradiol&#160;</td>
			<td style="width:91px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">E8875-1G</td>
			<td>CAUTION: Wear appropriate PPE. &#946;-estradiol can be absorbed through the skin and mucosal surfaces.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">200 &#956;L gel loading pipette tips&#160;</td>
			<td style="width:91px;">USA Scientific</td>
			<td style="width:119px;">1252-0610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Urethro-genital, sterile, calcium alginate swabs</td>
			<td style="width:91px;">Puritan</td>
			<td style="width:119px;">25-801 A 50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">CHROMagar StrepB</td>
			<td style="width:91px;">DRG International</td>
			<td style="width:119px;">SB282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Todd Hewitt Broth</td>
			<td style="width:91px;">Hardy Diagnostics</td>
			<td style="width:119px;">7161C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">18 G, 1.5 inch needles</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">26 G, 0.5 inch needles</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10 mL syringes</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1 mL syringes</td>
			<td style="width:91px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">0.45 &#956;m PVDF syringe filters</td>
			<td style="width:91px;">Whatman</td>
			<td style="width:119px;">6900-2504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Dulbecco&#39;s Phosphate-Buffered Salt Solution 1X</td>
			<td style="width:91px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of group b streptococcus vaginal colonization

Streptococcus agalactiae (стрептококки группы В, ГБС), представляет собой грамположительные, бессимптомно колонизатор человеческого желудочно - кишечного тракта и вагинального тракта 10 - 30% взрослого населения. В ослабленным иммунитетом лиц, в том числе новорожденных, беременных женщин и пожилых людей, GBS может переключиться на инвазивный возбудителем сепсис, артрит, пневмония и менингит. Поскольку GBS является ведущим бактериальный возбудитель новорожденных, профилактика тока состоит из позднего скрининга гестации для GBS вагинальной колонизации и последующего перипартальной лечения антибиотиками GBS-инфицированных матерей. Тяжелые GBS вагинальные бремя является фактором риска как заболевания у новорожденных и колонизации. К сожалению, мало известно о хозяине и бактериальных факторов, которые способствуют или разрешают GBS вагинальные колонизации. Этот протокол описывает способ для установления стойких GBS вагинальный колонизацию с использованием одного бета-эстрадиол предварительную обработку и отбор суточных проб для определения бактериальной лоаd. Кроме того, он подробно методы администрирования дополнительных методов лечения или реагентов, представляющих интерес и для сбора промывание влагалища жидкости и тканей половых путей. Эта модель мыши будет способствовать пониманию GBS-хозяина взаимодействия в среде влагалища, что приведет к потенциальным терапевтических мишеней для контроля материнской колонизации во влагалище во время беременности и для профилактики передачи ВИЧ уязвимого новорожденного. Он также будет представлять интерес для улучшения нашего понимания общих взаимодействий бактериально-хозяевах в женском влагалище.

При разработке этой модели, многочисленные наблюдения были сделаны в отношении факторов, которые влияют на продолжительность GBS вагинальной колонизации. Для того, чтобы определить, каким образом эстрального этап при инокуляции воздействий GBS бактериальной персистен...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization at JoVE.com

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

Целью этого протокола является подражать человеческой группы B стрептококк (СГБ) вагинальный колонизацию в мышиной модели. Этот метод может быть использован для исследования иммунного ответа и бактериальные факторы, способствующие GBS вагинального настойчивость, а также для тестирования терапевтических стратегий.

Мышиной модели группы B<em&gt; Streptococcus</em&gt; Вагинальный Колонизация

Streptococcus agalactiae (group B Streptococcus, GBS), is a Gram-positive, asymptomatic colonizer of the human gastrointestinal tract and vaginal tract of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

Murine Model of CD40-activation of B cells

Мышиной модели CD40-активации В-клеток

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Induction and Assessment of Class Switch Recombination in Purified Murine B Cells

Индукция и оценка класса Рекомбинация коммутатор в Очищенная мышиные клетки B

Humoral immunity is the branch of the immune system maintained by B cells and mediated through the secretion of antibodies. Upon B cell activation, the ...

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

Live Cell Imaging of Bacillus subtilis and Streptococcus pneumoniae using Automated Time-lapse Microscopy

Живая изображений Ячейка Сенная Bacillus И Пневмококк С использованием средства аварийного Покадровый микроскопии

During the last few years scientists became increasingly aware that average data obtained from microbial population based experiments are not ...

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

Protocols for Vaginal Inoculation and Sample Collection in the Experimental Mouse Model of Candida vaginitis

Протоколы для Вагинальные Прививка и сбора проб в экспериментальной модели мышей Candida Вагинит

Vulvovaginal candidiasis (VVC), caused by Candida species, is a fungal infection of the lower female genital tract that affects approximately 75% of ...

Quantification of Fungal Colonization, Sporogenesis, and Production of Mycotoxins Using Kernel Bioassays

Количественная грибковой колонизации, спорогенеза, и производство микотоксинов Использование ядра Биопробы

The rotting of grains by seed-infecting fungi poses one of the greatest economic challenges to cereal production worldwide, not to mention serious risks ...

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Characterization of Inflammatory Responses During Intranasal Colonization with Streptococcus pneumoniae

Характеристика воспалительных реакций во время интраназальной колонизации стрептококковой пневмонией

Nasopharyngeal colonization by Streptococcus pneumoniae is a prerequisite to invasion to the lungs or bloodstream1. This organism is capable of colonizing ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Неинвазивного Модель Neuropathogenic<em&gt; Кишечная палочка</em&gt; Инфекция в новорожденной крысы

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Non-invasive Imaging of the Innate Immune Response in a Zebrafish Larval Model of Streptococcus iniae Infection

Неинвазивная Визуализация врожденного иммунного ответа в данио рерио личинок модели<em&gt; Streptococcus iniae</em&gt; Инфекция

The aquatic pathogen, Streptococcus iniae, is responsible for over 100 million dollars in annual losses for the aquaculture industry and is capable of ...

Intracranial Subarachnoidal Route of Infection for Investigating Roles of Streptococcus suis Biofilms in Meningitis in a Mouse Infection Model

Intracranial Subarachnoidal Route of Infection for Investigating Roles of Streptococcus suis Biofilms in Meningitis in a Mouse Infection Model

Внутричерепная Subarachnoidal маршрут инфекции для расследования роли Streptococcus suis биоплёнки в менингита в мышиной модели инфекции

Streptococcus suis is not only a major bacterial pathogen of pigs worldwide but also an emerging zoonotic agent. In humans and pigs, meningitis is a major ...

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Quantifying Vibrio cholerae Colonization and Diarrhea in the Adult Zebrafish Model

Холерный вибрион колонизации и диарея в модели для взрослых рыбок данио

Vibrio cholerae is best known as the infectious agent that causes the human disease cholera. Outside the human host, V. cholerae primarily exists in the ...