Name: reproducible arterial denudation injury by infrarenal abdominal aortic clamping in a murine model
Uploaded: 2016-11-24T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet med tilskudd fra Eli og Edythe Bred Center of Regenerative Medicine og stamcelleforskning ved UCLA Training Program for å ASS og AIM, Philip J. Whitcome Fellowship til AIM, og National Institutes of Health (HL130290) til MLIA.

MERK: Denne protokollen er godkjent av forsøksdyrutvalget ved Universitetet i California Los Angeles. 1. Preoperativ forberedelse og anestesi <ol><li> Sørg for å observere steril teknikk gjennom hele prosedyren. </li><li> Steriliser alle kirurgiske forsyninger ved hjelp av en damp autoklav. </li><li> Slå på oppvarmede gnager kirurgisk plattformen før bedøvelse induksjon, slik at den kan oppvarmes til passende temperatur (37 ° C) og anbring under stereomikroskop for visualisering under kirurgiske prosed...

<ol>
	<li>Farooq, V., Gogas, B. D., Serruys, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Restenosis:+delineating+the+numerous+causes+of+drug-eluting+stent+restenosis.">Restenosis: delineating the numerous causes of drug-eluting stent restenosis.</a> Circ Cardiovasc Interv. 4, 195-205 (2011).</li><li>Tada, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+of+stent+thrombosis+among+bare-metal+stents,+first-generation+drug-eluting+stents,+and+second-generation+drug-eluting+stents:+results+from+a+registry+of+18,334+patients.">Risk of stent thrombosis among bare-metal stents, first-generation drug-eluting stents, and second-generation drug-eluting stents: results from a registry of 18,334 patients.</a> JACC Cardiovasc Interv. 6, 1267-1274 (2013).</li><li>Otsuka, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+importance+of+the+endothelium+in+atherothrombosis+and+coronary+stenting.">The importance of the endothelium in atherothrombosis and coronary stenting.</a> Nat Rev Cardiol. 9, 439-453 (2012).</li><li>Kipshidze, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+endothelium+in+modulating+neointimal+formation:+vasculoprotective+approaches+to+attenuate+restenosis+after+percutaneous+coronary+interventions.">Role of the endothelium in modulating neointimal formation: vasculoprotective approaches to attenuate restenosis after percutaneous coronary interventions.</a> J Am Coll Cardiol. 44, 733-739 (2004).</li><li>Finn, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathological+correlates+of+late+drug-eluting+stent+thrombosis:+strut+coverage+as+a+marker+of+endothelialization.">Pathological correlates of late drug-eluting stent thrombosis: strut coverage as a marker of endothelialization.</a> Circulation. 115, 2435-2441 (2007).</li><li>Joner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+drug-eluting+stents+in+humans:+delayed+healing+and+late+thrombotic+risk.">Pathology of drug-eluting stents in humans: delayed healing and late thrombotic risk.</a> J Am Coll Cardiol. 48, 193-202 (2006).</li><li>Joner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+cell+recovery+between+comparator+polymer-based+drug-eluting+stents.">Endothelial cell recovery between comparator polymer-based drug-eluting stents.</a> J Am Coll Cardiol. 52, 333-342 (2008).</li><li>McDonald, A. I., Iruela-Arispe, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healing+arterial+ulcers:+Endothelial+lining+regeneration+upon+vascular+denudation+injury.">Healing arterial ulcers: Endothelial lining regeneration upon vascular denudation injury.</a> Vascul Pharmacol. 72, 9-15 (2015).</li><li>Fingerle, J., Tina Au, Y. P., Clowes, A. W., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+Lesion+Formation+in+Rat+Carotid+Arteries+after+Endothelial+Denudation+in+Absence+of+Medial+Injury.">Intimal Lesion Formation in Rat Carotid Arteries after Endothelial Denudation in Absence of Medial Injury.</a> Arteriosclerosis. 10, 1082-1087 (1990).</li><li>Granada, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+response+to+zotarolimus-coated+balloons+in+injured+superficial+femoral+arteries+of+the+familial+hypercholesterolemic+Swine.">Vascular response to zotarolimus-coated balloons in injured superficial femoral arteries of the familial hypercholesterolemic Swine.</a> Circ Cardiovasc Interv. 4, 447-455 (2011).</li><li>Tulis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+carotid+artery+balloon+injury+model.">Rat carotid artery balloon injury model.</a> Methods Mol Med. 139, 1-30 (2007).</li><li>Bavry, A. A., Bhatt, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Appropriate+use+of+drug-eluting+stents:+balancing+the+reduction+in+restenosis+with+the+concern+of+late+thrombosis.">Appropriate use of drug-eluting stents: balancing the reduction in restenosis with the concern of late thrombosis.</a> Lancet (London, England). 371, 2134-2143 (2008).</li><li>Gucu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+temporary+vascular+occluder+poloxamer+407+Gel+on+the+endothelium.">Effects of temporary vascular occluder poloxamer 407 Gel on the endothelium.</a> J Cardiothorac Surg. 8, (2013).</li><li>Holt, A. W., Tulis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Rat+and+Mouse+Carotid+Artery+Surgery:+Injury+&amp;+Remodeling+Studies.">Experimental Rat and Mouse Carotid Artery Surgery: Injury &amp; Remodeling Studies.</a> ISRN Minim Invasive Surg. 2013, (2013).</li><li>Nam, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297, 1535-1543 (2009).</li><li>Lindner, V., Fingler, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Model+of+Arterial+Injury.">Mouse Model of Arterial Injury.</a> Circ Res. 73, 792-796 (1993).</li><li>Kumar, A., Lindner, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+with+neointima+formation+in+the+mouse+carotid+artery+after+cessation+of+blood+flow.">Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 17, 2238-2244 (1997).</li><li>Hehrlein, C., Weinschenk, I., Metz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long+period+of+balloon+inflation+and+the+implantation+of+stents+potentiate+smooth+muscle+cell+death.+Possible+role+of+chronic+vascular+injury+in+restenosis.">Long period of balloon inflation and the implantation of stents potentiate smooth muscle cell death. Possible role of chronic vascular injury in restenosis.</a> Int J Cardiovasc Intervent. 2, 21-26 (1999).</li></ol>

Arteriell denudasjon skade på grunn av perkutane intervensjoner, for eksempel ballong angioplastikk og vaskulær stenting, resultere i tidlig og sen vaskulær trombose og restenose og bidrar til tilbakevendende iskemi 3,12. Interessant nok har kirurgisk vaskulær klem også vært innblandet som en årsak til arteriell denudasjon, utvide omfanget av problemet til pasienter som gjennomgår alle vaskulære prosedyre, enten perkutan eller åpen 13. Mens svekket re-endotelialisering er en forholdsvis a...

Trombose og restenose er alvorlige tidlige og sene komplikasjoner hos pasienter som gjennomgår perkutane vaskulære intervensjoner, for eksempel endovaskulær ballong angioplastikk og stenting 1,2. Flere strategier er ansatt for å håndtere disse komplikasjonene, særlig dobbel platehemmende behandling og medikamentavgivende stenter. Imidlertid har liten fokus vært plassert på den underliggende årsaken til trombose og restenose, nemlig tapet av endotelial celledekning (denudasjon). Denudasjon skade er en uunngåelig konsekvens av intervensjonsprosedyrer som følge av mekanisk skade på karveggen. Denne mekaniske traumer kan føre til skade og fjernelse av den beskyttende endotel-lag og eksponering av basalmembran og vaskulær glatt muskulatur til sirkulerende blod tre. Tapet av endoteliale celler i disse områdene danner et pro-trombotiske og pro-inflammatorisk miljø som ikke bare fremmer blodplateadhesjon og etterfølgende trombose, men enLSO stimulerer migrering og proliferasjon av vaskulære glatte muskelceller som resulterer i neointimal fortykning og restenose 4. Disse komplikasjoner, og tilhørende terapier, føre til betydelig sykelighet, særlig tilbakevendende iskemisk sykdom og blødninger som påvirker menneskers helse. Re-endotelialisering av avdekt skade fra sårkantene er av avgjørende betydning for å forebygge trombose og restenose 5. Obduksjonsresultatene og dyremodeller har effektivt demonstrert reduserte priser på trombose med dekning av stent struts 6,7. Medikamentstent, utviklet for å redusere forekomsten av restenose ved å hemme glatt muskel spredning og neointimal hyperplasi, resultere i betydelige svekkelser i arteriell re-endotelialisering og økende forekomst av sen trombose tre. Dessverre er å forstå mekanismene for re-endotelialisering har vært en langsom prosess, i stor grad begrenset av mangelen på apsiktsdyremodeller 8. Flere dyremodeller for å forstå rollene til endotelceller og vaskulære glatte muskelceller følgende arteriell skade har blitt opprettet 7,9,10. Rottehalspulsåren ballong skade modellen er best preget og har vært ansatt for å studere effekter av denudasjon skade på brutto, cellulært og molekylært nivå 11. Likevel mangler en svært reproduserbar murine modell av arteriell denudasjon skade med gode overlevelsesrate og mye nødvendig å dra nytte av flere transgene linjer tilgjengelig for å bedre belyse vaskulær regenerasjon i flere innstillinger. Dette manuskriptet presenterer en murine modell av arteriell denudasjon skade som er reproduserbar og enkel å utføre. Tilnærmingen har vist minimal sykelighet og dødelighet i flere transgene linjer. På grunn av den brede antall genetisk modifiserte mus linjer, kan denne modellen benyttes for åbelyse de molekylære mekanismene bak re-endotelialisering etter denudasjon skade.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="762">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:289px;">Zeiss Discovery.V12 Stereomicroscope</td>
			<td style="width:187px;">Zeiss</td>
			<td colspan="2" style="width:285px;">495037-9904-000</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">Rodent Heated Surgical Platform</td>
			<td style="width:187px;">Protech International</td>
			<td style="width:119px;">RES4000</td>
			<td>Heated platform for body temperature maintenance with nosecone for anesthestic maintenance and on which surgical procedure is performed</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">Isoflurane</td>
			<td style="width:187px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">50033</td>
			<td>4% Induction; 2.5% Maintenance</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:289px;">Isoflurane Vaporizer</td>
			<td style="width:187px;">Summit Medical Equipment</td>
			<td style="width:119px;">470062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Stryker T/Pump Warm Water Recirculator</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>TP-700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:289px;">Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment</td>
			<td style="width:187px;">Akorn Animal Health</td>
			<td style="width:119px;">17478-162-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Carprieve (Carprofen)</td>
			<td>Norbrook Laboratories</td>
			<td colspan="2">NDC 55529-131-01</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Oster&#8482; A5 Professional Animal Clipper</td>
			<td>M.Schneider &#38; Sons Inc.</td>
			<td>78005010</td>
			<td>Use with animal clipper size 40</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">Adjustable Wire Retractor</td>
			<td style="width:187px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">17004-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Schwartz Micro Serrefines - Sharp Bend</td>
			<td>Fine&#160;Science Tools</td>
			<td>18052-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Surgical Instruments</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td></td>
			<td>sharp dissecting forceps, blunt forceps, fine scissors, spring scissors, hemostat</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">0.5% Marcaine</td>
			<td style="width:187px;">Hospira</td>
			<td style="width:119px;">0409-1610-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">5-0 Suture, Vicryl</td>
			<td style="width:187px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">NC0189890</td>
			<td>tapered needle</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">Vetbond</td>
			<td style="width:187px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">NC0304169</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:289px;">Falcon&#174; 35 mm Not TC-Treated Easy-Grip Style Bacteriological Petri Dish</td>
			<td style="width:187px;">Corning</td>
			<td align="right">351008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">Sylgard 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td style="width:187px;">Dow Corning</td>
			<td style="width:119px;">3097358-1004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:289px;">Dissecting pins</td>
			<td style="width:187px;">Fisher Scientific</td>
			<td>NC9681411</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reproducible arterial denudation injury by infrarenal abdominal aortic clamping in a murine model

Perkutane vaskulære intervensjoner jevnt resultere i arteriell denudasjon skader som senere fører til trombose og restenose. Disse komplikasjonene kan tilskrives svekkelser i re-endotelialisering innenfor sårkantene. Likevel, de cellulære og molekylære mekanismer for re-endotelialisering gjenstår å bli definert. Mens flere dyremodeller for å studere re-endotelialisering etter arteriell denudasjon er tilgjengelige, vil få utført i mus på grunn av operasjonsbegrensninger. Dette svekker muligheten til å utnytte transgene mus linjer og undersøke bidraget av spesifikke gener i ferd med å re-endotelialisering. Her presenterer vi en steg-for-steg-protokollen for å skape en svært reproduserbar murine modell av arteriell denudasjon skade i infrarenale bukaorta bruker ekstern vaskulær klem. Immunocytokjemisk farging av skadde Aorta for fibrinogen og β-catenin demonstrere eksponering av et pro-trombotisk overflaten end grensen av intakt endotel, respektivt. Metoden som presenteres her har fordeler av hastighet, utmerket total overlevelsesrate, og relativ teknisk letthet, og skaper et unikt praktisk verktøy for å pålegge arteriell denudasjon skade i transgene musemodeller. Ved hjelp av denne metoden, kan etterforskerne belyse mekanismene for re-endotelialisering under normale eller patologiske tilstander.

Åttifem mus har gjennomgått overlevelsen kirurgiske teknikken som er beskrevet i denne rapporten for infrarenale abdominale aorta klem. Den totale overlevelsen var 85,9%. Operative komplikasjoner inkludert intestinal blødning og store kar perforering, noe som resulterer i 5,9% og 3,5% dødelighet henholdsvis (tabell 1). Etter utvinning fra anestesi, mus gå normalt og viser ingen tegn på iskemisk skade på dårligere lemmer. Ingen vekttap eller manglende appetitt ble...

Watch this Scientific Journal Video about Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model at JoVE.com

Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model

Forstå cellulære og molekylære mekanismer for re-endotelialisering følgende arteriell denudasjon skade er av avgjørende betydning for å forebygge trombose og restenose av arterier. Her beskriver vi en protokoll for reproduserbar arteriell denudasjon skade av infrarenale bukaorta. Prosedyren ble utviklet for å undersøke de underliggende mekanismene som regulerer endothelial regenerering ved hjelp av musemodeller.

Reproduserbar Arteriell denudasjon Injury av infrarenale Abdominal aortic Klem i en murine modell

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

En ny murine modell av Endovascular aortaaneurisme Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproduserbar Paraplegi av Thoracic Aorta Okklusjon i en Muse Model of Spinal Cord iskemi-reperfusjon

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Arterial Restenosis: Technical Aspects of Femoral Wire Injury

En Muse Modell av arteriell restenose: tekniske aspekter ved Femoral Wire Injury

Cardiovascular disease caused by atherosclerosis is the leading cause of death in the developed world. Narrowing of the vessel lumen, due to ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Åpne trakeostomi magesyre aspire Murine modell av akutt lungeskade Resultater i Maximal Akutt-dødelige lungeskade

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Etableringen av en gnager modell av abdominalt aortaaneurisme blokkerer Adventitial Vasa Vasorum perfusjon

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Reproducible Motor Deficit Following Aortic Occlusion in a Rat Model Of Spinal Cord Ischemia

Reproducerbart motordefekt etter aortaoklusjon i rottemodell av ryggradssjikt

Spinal cord ischemia is a fatal complication following thoracoabdominal aortic aneurysm surgery. Researchers can investigate the strategies for preventing ...

Intravital Microscopy of Monocyte Homing and Tumor-Related Angiogenesis in a Murine Model of Peripheral Arterial Disease

Intravital mikroskopi Monocyte Homing og svulst-relaterte angiogenese i en Murine modell av perifere Arterial sykdom

The therapeutic goal for peripheral arterial disease and ischemic heart disease is to increase blood flow to ischemic areas caused by hemodynamic ...

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Murine cervical aorta transplantasjon modell ved hjelp av en modifisert ikke-Sutur cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Svin modell av Kranieankrene abdominal aorta-blødning

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

En murin modell av iskemisk retinal skade indusert av forbigående bilaterale felles halspulsåren okklusjon

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...