Name: collection of serum- and feeder-free mouse embryonic stem cell-conditioned medium for a cell-free approach
Uploaded: 2017-01-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Collection of Serum- and Feeder-free Mouse Embryonic Stem Cell-conditioned Medium for a Cell-free Approach at JoVE.com

Это исследование было поддержано Программой фундаментальных исследований (Science 2013R1A1A2060930) и Научно-исследовательский центр медицинской программы (2015R1A5A2009124) в рамках Национального исследовательского фонда Кореи (СРН), финансируемого Министерством науки, ИКТ и будущего планирования. Это исследование также поддерживается начинающей операционный грант из больницы для больных детей (HK Sung). Мы хотели бы поблагодарить Лору Barwell и Сара JS Ким за отличную помощь в редактировании рукописи и д-р Андраш Надь для обеспечения линии G4 MESC.

Примечание: Схема на serum- и фидерных свободный протокол сбора CM показан на рисунке 1. 1. Материалы (Получение MEFs, Medium, тарелки, и решения) <ol><li> Приготовьте 500 мл среды для культивирования MEFs. Дополнение модифицированную Dilbecco среду Eagle (DMEM) с добавлением 10% FBS (качество ESC), 50 ед / м?...

<ol>
	<li>Thomson, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+stem+cell+lines+derived+from+human+blastocysts.">Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts.</a> Science. 282, 1145-1147 (1998).</li><li>Lavasani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle-derived+stem/progenitor+cell+dysfunction+limits+healthspan+and+lifespan+in+a+murine+progeria+model.">Muscle-derived stem/progenitor cell dysfunction limits healthspan and lifespan in a murine progeria model.</a> Nat Commun. 3, 608 (2012).</li><li>Woo, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+and+indirect+contribution+of+human+embryonic+stem+cell-derived+hepatocyte-like+cells+to+liver+repair+in+mice.">Direct and indirect contribution of human embryonic stem cell-derived hepatocyte-like cells to liver repair in mice.</a> Gastroenterology. 142, 602-611 (2012).</li><li>Lee, A. S., Tang, C., Rao, M. S., Weissman, I. L., Wu, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumorigenicity+as+a+clinical+hurdle+for+pluripotent+stem+cell+therapies.">Tumorigenicity as a clinical hurdle for pluripotent stem cell therapies.</a> Nat Med. 19, 998-1004 (2013).</li><li>Moon, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+system+for+treating+ischemic+disease+using+human+embryonic+stem+cell-derived+endothelial+cells+without+direct+incorporation.">A system for treating ischemic disease using human embryonic stem cell-derived endothelial cells without direct incorporation.</a> Biomaterials. 32, 6445-6455 (2011).</li><li>Tongers, J., Roncalli, J. G., Losordo, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+angiogenesis+for+critical+limb+ischemia:+microvascular+therapies+coming+of+age.">Therapeutic angiogenesis for critical limb ischemia: microvascular therapies coming of age.</a> Circulation. 118, 9-16 (2008).</li><li>Lazarous, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+fibroblast+growth+factor+in+patients+with+intermittent+claudication:+results+of+a+phase+I+trial.">Basic fibroblast growth factor in patients with intermittent claudication: results of a phase I trial.</a> J Am Coll Cardiol. 36, 1239-1244 (2000).</li><li>Adams, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healing+and+hurting:+molecular+mechanisms,+functions,+and+pathologies+of+cellular+senescence.">Healing and hurting: molecular mechanisms, functions, and pathologies of cellular senescence.</a> Mol Cell. 36, 2-14 (2009).</li><li>Harrison, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapamycin+fed+late+in+life+extends+lifespan+in+genetically+heterogeneous+mice.">Rapamycin fed late in life extends lifespan in genetically heterogeneous mice.</a> Nature. 460, 392-395 (2009).</li><li>Baur, J. A., Ungvari, Z., Minor, R. K., Le Couteur, D. G., de Cabo, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+sirtuins+viable+targets+for+improving+healthspan+and+lifespan.">Are sirtuins viable targets for improving healthspan and lifespan.</a> Nat Rev Drug Discov. 11, 443-461 (2012).</li><li>Martin-Montalvo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metformin+improves+healthspan+and+lifespan+in+mice.">Metformin improves healthspan and lifespan in mice.</a> Nat Commun. 4, 2192 (2013).</li><li>Loffredo, F. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+differentiation+factor+11+is+a+circulating+factor+that+reverses+age-related+cardiac+hypertrophy.">Growth differentiation factor 11 is a circulating factor that reverses age-related cardiac hypertrophy.</a> Cell. 153, 828-839 (2013).</li><li>Jozefczuk, J., Drews, K., Adjaye, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+mouse+embryonic+fibroblast+cells+suitable+for+culturing+human+embryonic+and+induced+pluripotent+stem+cells.">Preparation of mouse embryonic fibroblast cells suitable for culturing human embryonic and induced pluripotent stem cells.</a> J Vis Exp. , (2012).</li><li>Debacq-Chainiaux, F., Erusalimsky, J. D., Campisi, J., Toussaint, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protocols+to+detect+senescence-associated+beta-galactosidase+(SA-betagal)+activity,+a+biomarker+of+senescent+cells+in+culture+and+in+vivo.">Protocols to detect senescence-associated beta-galactosidase (SA-betagal) activity, a biomarker of senescent cells in culture and in vivo.</a> Nat Protoc. 4, 1798-1806 (2009).</li><li>Bae, Y. U., Choi, J. H., Nagy, A., Sung, H. K., Kim, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antisenescence+effect+of+mouse+embryonic+stem+cell+conditioned+medium+through+a+PDGF/FGF+pathway.">Antisenescence effect of mouse embryonic stem cell conditioned medium through a PDGF/FGF pathway.</a> FASEB J. 30, 1276-1286 (2016).</li><li>Nagy, A., Rossant, J., Nagy, R., Abramow-Newerly, W., Roder, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derivation+of+completely+cell+culture-derived+mice+from+early-passage+embryonic+stem+cells.">Derivation of completely cell culture-derived mice from early-passage embryonic stem cells.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 90, 8424-8428 (1993).</li><li>Li, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Passage+number+affects+the+pluripotency+of+mouse+embryonic+stem+cells+as+judged+by+tetraploid+embryo+aggregation.">Passage number affects the pluripotency of mouse embryonic stem cells as judged by tetraploid embryo aggregation.</a> Cell Tissue Res. 327, 607-614 (2007).</li><li>Mbeunkui, F., Fodstad, O., Pannell, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretory+protein+enrichment+and+analysis:+an+optimized+approach+applied+on+cancer+cell+lines+using+2D+LC-MS/MS.">Secretory protein enrichment and analysis: an optimized approach applied on cancer cell lines using 2D LC-MS/MS.</a> J Proteome Res. 5, 899-906 (2006).</li><li>Makridakis, M., Vlahou, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretome+proteomics+for+discovery+of+cancer+biomarkers.">Secretome proteomics for discovery of cancer biomarkers.</a> J Proteomics. 73, 2291-2305 (2010).</li><li>Kim, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+replicative+senescence+by+insulin-like+growth+factor-binding+protein+3+in+human+umbilical+vein+endothelial+cells.">Regulation of replicative senescence by insulin-like growth factor-binding protein 3 in human umbilical vein endothelial cells.</a> Aging Cell. 6, 535-545 (2007).</li><li>Kim, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+cellular+senescence+by+insulin-like+growth+factor+binding+protein-5+through+a+p53-dependent+mechanism.">Induction of cellular senescence by insulin-like growth factor binding protein-5 through a p53-dependent mechanism.</a> Mol Biol Cell. 18, 4543-4552 (2007).</li><li>Eiselleova, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+study+of+mouse+and+human+feeder+cells+for+human+embryonic+stem+cells.">Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells.</a> Int J Dev Biol. 52, 353-363 (2008).</li></ol>

Для успешного сбора serum- и фидерных свободного MESC-CM, следующие предложения должны быть приняты во внимание. Наиболее важным фактором является то, используя ранние прохождение mESCs для сбора MESC-CM. Ранее было показано, что раннее прохождение MESC-CM имеет лучшие омолаживающие эффекты по сравн?...

Целью этого протокола является сбор эмбриональных стволовых клеток мыши (MESC) -conditioned среды (MESC-CM) из serum- и фидерных свободных условиях культивирования и охарактеризовать его биологические функции. В общем, эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) имеют большой потенциал для регенеративной медицины и клеточной терапии в связи с их плюрипотентности и способность к самообновлению 1-3. Тем не менее, прямая трансплантация стволовых клеток имеет ряд ограничений, например, иммунного отторжения и образования опухолей 4,5. Таким образом, подход бесклеточная может обеспечить альтернативную терапевтическую стратегию для восстановительной медицины и старения вмешательств 6,7. Старение рассматривается как сотовый аналог старения тканей и органов, характеризующееся постоянным состоянием остановки роста, измененной физиологии клеток и поведения. Старение является основным фактором риска для распространенных заболеваний, включая рак, сердечно-сосудистые заболевания, тYpe диабет 2, и нейродегенеративные 8. Одним из очевидных признаков старения является снижение регенеративного потенциала тканей, которое вызвано старением стволовых клеток и истощение 9. Многие значительные исследования показали фармакологическую молекулы, такие как рапамицин 9, ресвератрол 10 и метформина 11 и системных факторов , переносимых с кровью, а именно GDF11 12, которые имеют возможность последовательно задерживать старение и увеличить продолжительность срока службы. В настоящем исследовании, MESC-СМ был собран без сыворотки (эмбриональной телячьей сыворотки, FBS) и фидер (эмбриональных фибробластов мыши, МЭФ) слоев, чтобы исключить загрязнение факторов в сыворотке крови и секреторных факторов из MEFs. Эти условия позволили для serum- и фидерной свободной СМ, что, следовательно, позволило точно идентифицировать MESC специфических секреторных факторов. Этот предложенный протокол является высокоэффективным, относительно экономически эффективным и легкодействовать. Этот метод дает представление о характеристике МЕСК полученных из растворимых факторов, которые могут опосредовать противоопухолевый эффект старения, который может быть использован для разработки безопасной и потенциально выгодного бесклеточной терапевтического подхода к вмешательствах по причине старения заболеваний, ассоциированных и других восстановительно лечения.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="256">
	<colgroup>
		<col span="4" />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">DMEM</td>
			<td style="width:64px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:64px;">#11960-044</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:64px;">FBS</td>
			<td style="width:64px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:64px;">#30044333</td>
			<td style="width:64px;">20%, ES cell quality</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="148" rowspan="2" style="height:148px;width:64px;">Penicillin and streptomycin&#160;</td>
			<td rowspan="2" style="width:64px;">Invitrogen</td>
			<td rowspan="2" style="width:64px;">#15140</td>
			<td style="width:64px;">50units/ml penicillin and 50mg/ml strepto</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:64px;">-mycin.</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">L-glutamine&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:64px;">#25030</td>
			<td style="width:64px;">2mM</td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:64px;">Nonessential amino acids (NEAA)&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:64px;">#11140</td>
			<td style="width:64px;">100uM</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:64px;">&#946;-mercaptoethanol&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#M3148</td>
			<td style="width:64px;">100uM</td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:64px;">Leukemia inhibitory factor&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Millipore</td>
			<td style="width:64px;">#ESG1107</td>
			<td style="width:64px;">100units/ml</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">OPTI-MEM</td>
			<td style="width:64px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:64px;">#22600</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:64px;">X-gal&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#B4252</td>
			<td style="width:64px;">1mg/ml</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:64px;">Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">P6148</td>
			<td style="width:64px;">3.70%</td>
		</tr>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:64px;">Dimethylformamide (DMF)</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#D4551</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:64px;">Potassium ferricyanide&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Aldrich</td>
			<td style="width:64px;">#455946</td>
			<td style="width:64px;">5mM</td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:64px;">potassium ferrocyanide&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Aldrich</td>
			<td style="width:64px;">#455989</td>
			<td style="width:64px;">5mM</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:64px;">NaCl&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#S7653</td>
			<td style="width:64px;">150mM</td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:64px;">MgCl2&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#M2393</td>
			<td style="width:64px;">2mM</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">Mytomycin C&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#M4287</td>
			<td style="width:64px;">10ug/ml</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">Propidium iodide&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Sigma</td>
			<td style="width:64px;">#P4170</td>
			<td style="width:64px;">50ug/ml</td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">TRIzol</td>
			<td style="width:64px;">Ambion</td>
			<td style="width:64px;">#15596018</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="85">
			<td height="85" style="height:85px;width:64px;">M-MLV reverse transcript-tase</td>
			<td style="width:64px;">Promega</td>
			<td style="width:64px;">#M170B</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="127">
			<td height="127" style="height:127px;width:64px;">Power SYBR Green PCR master mix&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:64px;">#4367659</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:64px;">HDFs, NHDF-Ad-Der-Fibroblast&#160;</td>
			<td style="width:64px;">LONZA</td>
			<td style="width:64px;">#CC-2511</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:64px;">Bottle top filter,&#160;</td>
			<td style="width:64px;">Corning</td>
			<td style="width:64px;">#430513</td>
			<td style="width:64px;">0.2&#956;m</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

collection of serum- and feeder-free mouse embryonic stem cell-conditioned medium for a cell-free approach

The capacity of embryonic stem cells (ESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs) to generate various cell types has opened new avenues in the field of regenerative medicine. However, despite their benefits, the tumorigenic potential of ESCs and iPSCs has long been a barrier for clinical applications. Interestingly, it has been shown that ESCs produce several soluble factors that can promote tissue regeneration and delay cellular aging, suggesting that ESCs and iPSCs can also be utilized as a cell-free intervention method. Therefore, the method for harvesting mouse embryonic stem cell (mESC)-conditioned medium (mESC-CM) with minimal contamination of serum components (fetal bovine serum, FBS) and feeder cells (mouse embryonic fibroblasts, MEFs) has been highly demanded. Here, the present study demonstrates an optimized method for the collection of mESC-CM under serum- and feeder-free conditions and for the characterization of mESC-CM using senescence-associated multiple readouts. This protocol will provide a method to collect pure mESC-specific secretory factors without serum and feeder contamination.

Первоначально mESCs поддерживаются на MEF фидера в MESC среде с FBS и другими добавками (Фигуры 1А и 2А). CM была собрана из mESCs в Reduced Serum СМИ без фидерного слоя, FBS или других добавок (Фигуры 1В и 2В). Это состояние культуры позволяет нам собирать ...

Watch this Scientific Journal Video about Collection of Serum- and Feeder-free Mouse Embryonic Stem Cell-conditioned Medium for a Cell-free Approach at JoVE.com

Collection of Serum- and Feeder-free Mouse Embryonic Stem Cell-conditioned Medium for a Cell-free Approach

Этот протокол обеспечивает способ сбора эмбриональных стволовых клеток мыши (МЕСК) -conditioned среда (МЕСК-СМ), полученные из сыворотки (эмбриональной бычьей сыворотки, ФБС) - и фидерные (мышиные эмбриональные фибробласты, MEFs) -свободных условия для ячейки -бесплатно подход. Это может быть применимо для лечения старения и возрастного заболеваний.

Коллекция Serum- и фидерных свободной эмбриональных стволовых клеток мыши-кондиционированная среда для подхода бесклеточный

The capacity of embryonic stem cells (ESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs) to generate various cell types has opened new avenues in the field ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Serum-free Monolayer Culture

Дифференциация нейронных эмбриональных стволовых клеток мыши в бессывороточной монослоя культуры

The ability to differentiate mouse embryonic stem cells (ESC) to neural progenitors allows the study of the mechanisms controlling neural specification as ...

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Human Peripheral T Cells Using Sendai Virus in Feeder-free Conditions

Генерация индуцированные плюрипотентные стволовые клетки из человеческой периферической Т-клеток с использованием вируса Сендай в фидерной бесплатно условиях

Recently, iPSCs have attracted attention as a new source of cells for regenerative therapies. Although the initial method for generating iPSCs relied on ...

Generating CRISPR/Cas9 Mediated Monoallelic Deletions to Study Enhancer Function in Mouse Embryonic Stem Cells

Создание CRISPR / cas9 опосредованного моноаллельной Пропуски для изучения Enhancer Функция в эмбриональных стволовых клетках мышей

Enhancers control cell identity by regulating tissue-specific gene expression in a position and orientation independent manner. These enhancers are often ...

Feeder-free Derivation of Melanocytes from Human Pluripotent Stem Cells

Feeder-свободный Вывод меланоцитов из человеческих плюрипотентные стволовые клетки

Human pluripotent stem cells (hPSCs) represent a platform to study human development in vitro under both normal and disease conditions. Researchers can ...

Reprogramming Mouse Embryonic Fibroblasts with Transcription Factors to Induce a Hemogenic Program

Перепрограммирование эмбриональных фибробластов мыши с транскрипционных факторов для индуцирования кроветворения программы

This protocol details the induction of a hemogenic program in mouse embryonic fibroblasts (MEFs) via overexpression of transcription factors (TFs). We ...

Structure-function Studies in Mouse Embryonic Stem Cells Using Recombinase-mediated Cassette Exchange

Структурно-функциональные исследования в мышиных эмбриональных стволовых клеток Использование Рекомбиназа-опосредованного кассетный Обмен

Gene engineering in mouse embryos or embryonic stem cells (mESCs) allows for the study of the function of a given protein. Proteins are the workhorses of ...

Rapid, Directed Differentiation of Retinal Pigment Epithelial Cells from Human Embryonic or Induced Pluripotent Stem Cells

Быстрое, режиссер дифференциация клеток эпителия сетчатки пигмента от человеческого эмбриона или индуцированных плюрипотентных стволовых клеток

We describe a robust method to direct the differentiation of pluripotent stem cells into retinal pigment epithelial cells (RPE). The purpose of providing ...

Defined Xeno-free and Feeder-free Culture Conditions for the Generation of Human iPSC-derived Retinal Cell Models

Определенных Xeno бесплатно и фидер свободной культуры условия для моделей клеток поколения прав человека iPSC производные сетчатки

The production of specialized cells from pluripotent stem cells provides a powerful tool to develop new approaches for regenerative medicine. The use of ...

A Static Self-Directed Method for Generating Brain Organoids from Human Embryonic Stem Cells

Статический самостоятельно направленный метод генерации органов мозга из эмбриональных стволовых клеток человека

Human brain organoids differentiated from embryonic stem cells offer the unique opportunity to study complicated interactions of multiple cell types in a ...

Efficient Differentiation of Postganglionic Sympathetic Neurons using Human Pluripotent Stem Cells under Feeder-free and Chemically Defined Culture Conditions

Эффективная дифференциация постгонглионических симпатических нейронов с использованием человеческих плюрипотентных стволовых клеток в соответствии с безкормовыми и химически определенными условиями культуры

Human pluripotent stem cells (hPSCs) have become a powerful tool for disease modeling and the study of human embryonic development in vitro. We previously ...