Name: large-scale reconstructions and independent, unbiased clustering based on morphological metrics to classify neurons in selective populations
Uploaded: 2017-02-15T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Large-scale Reconstructions and Independent, Unbiased Clustering Based on Morphological Metrics to Classify Neurons in Selective Populations at JoVE.com

Vi vil gerne takke Drs. Ed Callaway og Marty Usrey for at tillade os at bruge væv udarbejdet som et led i en forudgående undersøgelse og Libby Fairless og Shiyuan Liu om hjælp med neuronale rekonstruktioner. Dette arbejde blev finansieret af NIH (NEI: EY018683) og Whitehall Foundation.

Bemærk: Den undersøgt i dette studie væv blev fremstillet som en del af en separat undersøgelse 5. Derfor er alle af de eksperimentelle fremgangsmåder, der involverer anvendelse af dyr er blevet beskrevet i detaljer i afsnittet Eksperimentelle metoder af Briggs et al. (2016). Alle procedurer, der involverer dyr udført som en del af den forudgående undersøgelse blev godkendt af Institutional Animal Care og Brug udvalg. Trinene til injektion af virus i dLGN og histologisk behandlin...

<ol>
	<li>Cajal, S. R. y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Histologie du systeme nerveaux de l'homme et des vertebres. , (1911).</li><li>Seung, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+functional+connectomics.">Toward functional connectomics.</a> Nature. 471, 170-172 (2011).</li><li>Callaway, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transneuronal+circuit+tracing+with+neurotropic+viruses.">Transneuronal circuit tracing with neurotropic viruses.</a> Current Opinion in Neurobiology. 18, 1-7 (2009).</li><li>Wickersham, I. R., Finke, S., Conzelmann, K. K., Callaway, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+neuronal+tracing+with+a+deletion-mutant+rabies+virus.">Retrograde neuronal tracing with a deletion-mutant rabies virus.</a> Nature Methods. 4, 47-49 (2007).</li><li>Briggs, F., Kiley, C. W., Callaway, E. M., Usrey, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+substrates+for+parallel+streams+of+corticogeniculate+feedback+originating+in+both+V1+and+V2+of+the+macaque+monkey.">Morphological substrates for parallel streams of corticogeniculate feedback originating in both V1 and V2 of the macaque monkey.</a> Neuron. 90, 388-399 (2016).</li><li>Cauli, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classification+of+fusiform+neocortical+interneurons+based+on+unsupervised+clustering.">Classification of fusiform neocortical interneurons based on unsupervised clustering.</a> PNAS. 97, 6144-6149 (2000).</li><li>Bragg, E. M., Fairless, E. A., Liu, S., Briggs, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+visual+sector+thalamic+reticular+neurons+in+the+macaque+monkey+sugests+retinotopically-specialized,+parallel+stream-mixed+input+to+the+lateral+geniculate+nucleus.">Morphology of visual sector thalamic reticular neurons in the macaque monkey sugests retinotopically-specialized, parallel stream-mixed input to the lateral geniculate nucleus.</a> J. Comparative Neurology. 525 (5), 1273-1290 (2017).</li><li>Osakada, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rabies+virus+varients+for+monitoring+and+manipulating+activity+and+gene+expression+in+defined+neural+circuits.">New rabies virus varients for monitoring and manipulating activity and gene expression in defined neural circuits.</a> Neuron. 71, 617-631 (2011).</li><li>Callaway, E. M., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+circuit+tracing+with+glycoprotein-deleted+rabies+viruses.">Monosynaptic circuit tracing with glycoprotein-deleted rabies viruses.</a> Journal of Neuroscience. 35, 8979-8985 (2015).</li><li>Nhan, H. L., Callaway, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+superior+colliculus-+and+middle+temporal+area-projecting+neurons+in+primate+primary+visual+cortex.">Morphology of superior colliculus- and middle temporal area-projecting neurons in primate primary visual cortex.</a> J. Comparative Neurology. 520, 52-80 (2012).</li><li>Pinault, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+thalamic+reticular+nucleus:+structure,+function+and+concept.">The thalamic reticular nucleus: structure, function and concept.</a> Brain Research Reviews. 46, 1-31 (2004).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+Animal+Perfusion+Fixation+for+Rodents.">Whole Animal Perfusion Fixation for Rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. 65, e3564 (2012).</li><li>Wong-Riley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+the+visual+system+of+monocularly+sutured+or+enucleated+cats+demonstrable+with+cytochrome+oxidase+histochemistry.">Changes in the visual system of monocularly sutured or enucleated cats demonstrable with cytochrome oxidase histochemistry.</a> Brain Research. 171, 11-28 (1979).</li><li>Gerfen, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+neuroanatomical+methods.">Basic neuroanatomical methods.</a> Current Protocols in Neuroscience. Chapter 1, Unit 1.1 (2003).</li><li>Thorndike, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Who+belongs+in+the+family?.">Who belongs in the family?.</a> Psychometrika. 18, 267-276 (1953).</li><li>Talebi, V., Baker, C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Categorically+distinct+types+of+receptive+fields+in+early+visual+cortex.">Categorically distinct types of receptive fields in early visual cortex.</a> Journal of Neurophysiology. 115, 2556-2576 (2016).</li><li>Helmstaedter, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Connectomic+reconstruction+of+the+inner+plexiform+layer+in+the+mouse+retina.">Connectomic reconstruction of the inner plexiform layer in the mouse retina.</a> Nature. 500, 168-174 (2013).</li></ol>

Neuroanatomiske undersøgelser har været en af ​​grundpillerne i neurovidenskab og nylige interesse i connectomics og mellem struktur og funktion har fornyet begejstring for detaljeret morfologisk karakterisering af selektive neuronale populationer. Traditionelt har neuroanatomiske undersøgelser påberåbt kvalitative klassifikationer af neuroner i morfologisk forskellige klasser af neuroner, der er defineret af ekspert neuroanatomists. Med fremskridt i teknikker til rekonstruktion neuroner og udvinding morfologis...

Neuroanatomi er en af grundpillerne i neurovidenskab 1 og nylige interesse i &quot;connectomics&quot; har fornyet begejstring for at forstå den morfologiske diversitet neuronale populationer og forbindelserne mellem specifikke neuroner 2. Metoder til mærkning og genopbygning neuroner har forbedret med de seneste nyskabelser, herunder genetiske og virus-medieret kredsløb sporing nærmer 3, 4, muliggør mere omfattende morfologiske undersøgelser af neuronale populationer 5. Ud over forbedringer i mærkning individuelle neuroner, har kvantitative data analyseteknikker også frem, at gøre det muligt for uafhængige og upartiske klassifikation af neuroner i adskilte subpopulationer baseret på morfologiske data 5, 6. Disse upartiske teknikker er en forbedring på mere traditional kvalitative klassificering metoder, der har været standard på området i over et århundrede. Målet med denne undersøgelse er at skitsere, trin-for-trin, kombinationen af ​​virus-medieret mærkning af neuroner inden for et selektivt befolkning, store rekonstruktioner af en omfattende stikprøve af disse neuroner, og kvantitativ dataanalyse baseret på uafhængige klyngedannelse med statistisk vurdering. Ved at kombinere disse metoder, vi skitsere en ny tilgang til indsamling og analyse af neuroanatomiske data for at lette omfattende prøvetagning og uvildig klassifikation af morfologisk unikke neuronale typer inden for et selektivt neuronal population. Som et eksempel på disse metoder beskriver vi vores analyse af en stor population af neuroner inden for en enkelt sektor af thalamiske retikulære kerne (TRN) af makakabe. Disse data er fra en tidligere undersøgelse 7. Metoder til selektivt mærkning TRN neuroner rager til dorsale Lateral geniculate kerne af thalamus (dLGN) ved hjælp af kirurgisk injektion af modificeret rabiesvirus koder EGFP 4, 8 (se tabel for specifikke materialer / udstyr, række 2) er skitseret. Denne modificerede rabiesvirus mangler genet, der koder et væsentligt kappeprotein, eliminere trans-synaptisk bevægelse af virusset. Når virus ind Axon terminaler på injektionsstedet, det virker som en traditionel retrograd tracer med vigtig fordel ved at køre EGFP udtryk gennem hele dendritiske arborization af inficerede neuroner 5, 9, 10. Følgelig kan denne G-deleteret rabiesvirus anvendes til selektivt at inficere og mærke enhver neuronal population efter injektion og retrograd transport. For at udføre en omfattende analyse af en specifik neuronal population, er det vigtigt at prøve fraen bred fordeling af neuroner i befolkningen. Da virus-medieret teknik mærkning frembringer fuldstændig intracellulære, &quot;Golgi-lignende&quot; fylder af mange neuroner med axoner på virus injektionsstedet, er det muligt at rekonstruere et meget stort udsnit af neuroner inden for det fulde omfang af en hjerne struktur. Desuden, fordi den modificerede rabiesvirus er så effektiv til at inficere og mærkning stort antal neuroner, er det muligt at rekonstruere hundredvis af neuroner per dyr. Procedurer for prøveudtagning 160 neuroner i hele den visuelle del af TRN 11 for at generere en omfattende prøve af dLGN-udragende TRN neuroner er skitseret. Processen med at rekonstruere individuelle neuroner ved anvendelse af en neuron rekonstruktion, der indbefatter et mikroskop, kamera og genopbygning software er beskrevet. Der beskrives også metoder til at bestemme positioner af enkelte neuroner inden en hjerne struktur (i dette tilfælde i TRN) og til at kontrollere virus injektion siddee omfang og placering i en struktur (i dette tilfælde inden for dLGN) ved hjælp af volumetriske kontur rekonstruktioner. Skridt til at eksportere morfologiske data og udføre uafhængig klynge analyser baseret på morfologiske målinger målt for hvert neuron er skitseret. Der er begrænsninger for klyngedannelse metoder, og der er også en række forskellige klyngedannelse algoritmer til rådighed. Følgelig er disse muligheder, og fordelene ved nogle af de mere almindeligt anvendte algoritmer beskrevet. Klyngeanalysen giver ikke statistiske verifikation af det unikke i klynger. Derfor er yderligere trin skitseret at verificere optimal clustering samt relationerne mellem morfologiske data inden for og på tværs af klynger. Statistiske metoder til evaluering klynger for TRN datasættet at bekræfte, at TRN neuroner er grupperet i tre unikke klynger baseret på 10 uafhængige morfologiske målinger er beskrevet. Således ved at skitsere skridt til selektivt mærkning, Rekonstruktion og analysere morfologiske data fra en specifik neuronal population, beskriver vi fremgangsmåder til kvantificering morfologiske forskelle blandt neuroner i en population. Tidligere fund af forskellige neuronale typer inden den visuelle del af makak abe TRN bekræftes med separate statistiske evalueringsmetoder. Sammen håber vi disse teknikker vil være bredt anvendelig til neuroanatomiske datasæt og hjælpe med at etablere kvantitativ klassificering af mangfoldigheden af ​​neuronale populationer gennem hjernen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="818">
	<tbody>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:233px;">SAD&#916;G-EGFP</td>
			<td style="width:171px;">E.M. Callaway Laboratory, Salk Institute</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;">Prepared by Dr. F. Osakada. G-deleted rabies virus available through the Salk Institute Viral Core</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:233px;">Recording electrode: platinum/iridium or tungsten</td>
			<td style="width:171px;">FHC</td>
			<td style="width:133px;">UEPSGGSE1N2M</td>
			<td style="width:281px;">Visit website (www.fh-co.com) for alternative order specifications</td>
		</tr>
		<tr height="33">
			<td height="33" style="height:33px;width:233px;">Nanoject II</td>
			<td style="width:171px;">Drummod Scientific</td>
			<td style="width:133px;">3-000-204, 110V</td>
			<td style="width:281px;">Alternatives: picospritzer, Hamilton syringe</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:233px;">Freezing microtome</td>
			<td style="width:171px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;"></td>
		</tr>
		<tr height="100">
			<td height="100" style="height:100px;width:233px;">DAB</td>
			<td style="width:171px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:133px;">D5905-50TAB</td>
			<td style="width:281px;">3,3&#39;-Diaminobenzidine tetrahydrochloride, tablet, 10 mg substrate per tablet. Caution: carcinogen - must be bleached before discarding</td>
		</tr>
		<tr height="36">
			<td height="36" style="height:36px;width:233px;">Cytochrome C</td>
			<td style="width:171px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:133px;">C2037-100MG</td>
			<td style="width:281px;"></td>
		</tr>
		<tr height="37">
			<td height="37" style="height:37px;width:233px;">Catalase</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldich</td>
			<td style="width:133px;">C9322-5G</td>
			<td style="width:281px;"></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:233px;">Rabbit anti-GFP</td>
			<td style="width:171px;">Life Technologies/Thermo Fisher</td>
			<td style="width:133px;">#A-11122&#160;</td>
			<td style="width:281px;">Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:233px;">Biotinylated goat anti-rabbit</td>
			<td style="width:171px;">Vector Laboratories</td>
			<td style="width:133px;">#BA-1000</td>
			<td style="width:281px;">Secondary antibody</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:233px;">Neurolucida System&#160;</td>
			<td style="width:171px;">MicroBrightField</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;">Software for neuron tracing and analysis. http://www.mbfbioscience.com/neurolucida</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:233px;">Neurolucida Explorer</td>
			<td style="width:171px;">MicroBrightField</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;">Data export software</td>
		</tr>
		<tr height="80">
			<td height="80" style="height:80px;width:233px;">Microfire Camera&#160;</td>
			<td style="width:171px;">Optronics</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;">2-Megapixel true color microscope camera. http://www.simicroscopes.com/pdfs/microfire.pdf</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:233px;">Nikon E800 Microscope</td>
			<td style="width:171px;">Nikon Instruments Inc.</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;">Biological research microscope. http://www.microscopyu.com/museum/eclipseE800.html</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:233px;">Matlab</td>
			<td style="width:171px;">The MathWorks Inc.&#160;</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td style="width:281px;">Matrix-based computational mathematics software. http://www.mathworks.com</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:233px;">Microsoft Office Excel</td>
			<td style="width:171px;">Microsoft</td>
			<td style="width:133px;"></td>
			<td>Spreadsheet program</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

large-scale reconstructions and independent, unbiased clustering based on morphological metrics to classify neurons in selective populations

Denne protokol skitserer store rekonstruktioner af neuroner kombineret med anvendelsen af ​​uafhængige og upartiske clustering analyser at skabe en omfattende undersøgelse af de morfologiske karakteristika observeret blandt en selektiv neuronal population. Kombination af disse teknikker udgør en ny tilgang til indsamling og analyse af neuroanatomiske data. Tilsammen udgør disse teknikker gør det muligt i stor skala, og derfor mere omfattende, sampling af selektive neuronale populationer og etablere upartiske kvantitative metoder til at beskrive morfologisk unikke neuronale klasser inden for en population. Protokollen beskriver anvendelsen af ​​modificeret rabiesvirus til selektivt at mærke neuroner. G-slettet rabies virus fungerer som et tilbageskridt sporstof følgende stereotaktisk injektion i et mål hjernens struktur af interesse og tjener som et middel til levering og ekspressionen af ​​EGFP i neuroner. Et stort antal neuroner er smittet ved hjælp af denneteknik og udtrykke GFP gennem hele deres dendritter, der producerer &quot;Golgi-lignende&quot; komplette fills enkelte neuroner. Derfor virus-medierede retrograd sporing metode forbedrer traditionelle farvestofbaserede retrograd tracing teknikker ved at producere komplette intracellulære fills. Individuelle godt isolerede neuroner spænder alle regioner af hjernen område under undersøgelsen er udvalgt til genopbygning for at opnå et repræsentativt udvalg af neuroner. Protokollen skitserer procedurer til at rekonstruere celle organer og fuldføre dendritiske arborization mønstre af mærkede neuroner spænder flere vævssnit. Morfologiske data, herunder positioner af hver neuron i hjernen struktur, ekstraheres til yderligere analyse. Standard programmering funktioner blev udnyttet til at udføre uafhængig klynge analyser og klynge evalueringer baseret på morfologiske målinger. For at verificere anvendeligheden af ​​disse analyser, statistisk evaluering af en klyngeanalyse PerfoRMED på 160 neuroner rekonstrueret i thalamiske retikulære kerne af thalamus (TRN) af makak abe blev lavet. Både den oprindelige klynge analyse og de statistiske evalueringer her viser, at TRN neuroner er adskilt i tre subpopulationer, hver med unikke morfologiske karakteristika.

Vi har tidligere vist, at store rekonstruktioner af neuroner inden for et selektivt befolkning er muligt efter injektion af modificeret rabiesvirus i dLGN 5. For nylig blev det samme væv udnyttes til at rekonstruere 160 neuroner i den visuelle del af TRN (Bragg et al, i revision;. Figur 2A-B) efter de detaljerede metodologiske ovenfor beskrevne trin. I TRN undersøgelsen blev tre unikke klynger af TRN neuroner identificeret på baggrund af u...

Watch this Scientific Journal Video about Large-scale Reconstructions and Independent, Unbiased Clustering Based on Morphological Metrics to Classify Neurons in Selective Populations at JoVE.com

Large-scale Reconstructions and Independent, Unbiased Clustering Based on Morphological Metrics to Classify Neurons in Selective Populations

Denne protokol beskriver store rekonstruktioner af selektive neuronale populationer, mærket efter retrograd infektion med en modificeret rabiesvirus udtrykker fluorescerende markører, og uafhængig, uvildig klynge analyser, muliggøre omfattende karakterisering af morfologiske målinger blandt forskellige neuronale underklasser.

Storstilet rekonstruktioner og Independent, Uvildige Clustering Baseret på Morfologiske Metrics at klassificere Neuroner i Selektive populationer

This protocol outlines large-scale reconstructions of neurons combined with the use of independent and unbiased clustering analyses to create a ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Fluorescence Recovery After Photobleaching (FRAP) of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

Fluorescence Recovery After Photobleaching FRAP of Fluorescence Tagged Proteins in Dendritic Spines of Cultured Hippocampal Neurons

FRAP has been used to quantify the mobility of GFP-tagged proteins. Using a strong excitation laser, the fluorescence of a GFP-tagged protein is bleached ...

Physiological, Morphological and Neurochemical Characterization of Neurons Modulated by Movement

The role of individual neurons and their function in neuronal circuits is fundamental to understanding the neuronal mechanisms of sensory and motor ...

Vibrodissociation of Neurons from Rodent Brain Slices to Study Synaptic Transmission and Image Presynaptic Terminals

Mechanical dissociation of neurons from the central nervous system has the advantage that presynaptic boutons remain attached to the isolated neuron of ...

Recording Large-scale Neuronal Ensembles with Silicon Probes in the Anesthetized Rat

Large scale electrophysiological recordings from neuronal ensembles offer the opportunity to investigate how the brain orchestrates the wide variety of ...

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Selective Viral Transduction of Adult-born Olfactory Neurons for Chronic in vivo Optogenetic Stimulation

Selektiv Viral transduktion af Voksen-fødte olfaktoriske neuroner for Kronisk In vivo Optogenetic Stimulation

Local interneurons are continuously regenerated in the olfactory bulb of adult rodents1-3. In this process, called adult neurogenesis, neural stem cells ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

Storstilet Registrering af neuroner ved Flytbare Silicon Probes at opføre sig Gnavere

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In vivo to-foton billedbehandling af oplevelsesbaseret afhængige molekylære ændringer i kortikal neuroner

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

Simultaneous Electrophysiological Recording and Calcium Imaging of Suprachiasmatic Nucleus Neurons

Simultaneous electrophysiological and fluorescent imaging recording methods were used to study the role of changes of membrane potential or current in ...

Functional and Morphological Assessment of Diaphragm Innervation by Phrenic Motor Neurons

Funktionel og Morfologisk vurdering af Membran innervation af phrenic Motor neuroner

This protocol specifically focuses on tools for assessing phrenic motor neuron (PhMN) innervation of the diaphragm at both the electrophysiological and ...