Name: a mouse model of fatigue induced by peripheral irradiation
Uploaded: 2017-03-17T14:00:00
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Os autores gostariam de agradecer Michele Allen do National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI) dos Institutos Nacionais de Saúde (NIH) para generosamente compartilhando sua experiência em métodos fenotípicos murino e por sua assistência técnica em curso, bem como para Timothy Hunt, da NHLBI por nos ajudar a desenvolver o dispositivo de blindagem. Este estudo é apoiado pela Divisão de Investigação Intramural do Instituto Nacional de Pesquisa em Enfermagem do NIH, e parte do julgamento de validação é apoiado por uma bolsa da Fundação Oncology Nursing Society.

Declaração de Ética: Este estudo foi aprovado pelo National Institutes of Health (NIH) Animal Care e do Comitê Use. Todos os investigadores que participam no manejo dos animais e medição dos resultados do estudo foram devidamente treinados pelo Gabinete NIH da Animal Care e Use e do National Heart, Lung, and Blood Institute Murino fenotipagem Core. Todos os aspectos de testes em animais, habitação e condições ambientais utilizados neste estudo estavam em conformidade com o Guia para o Cuidado e Uso de Animais ...

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Nós descrevemos um protocolo usando irradiação periférica direcionada para induzir uma redução de VWRA em camundongos sem confundir morbidade ou mortalidade. Importante, um dispositivo de blindagem simples permite a irradiação neste protocolo para alvejar uma região desejada de forma consistente, imitando os tratamentos de radiação recebidas por pacientes com câncer pélvico. Em contraste com modelos de CRF existentes que envolvem o cérebro ou irradiação total do corpo 8,</sup...

A fadiga relacionada ao câncer (CRF) é uma condição angustiante e caro que muitas vezes afeta os pacientes que receberam tratamentos de câncer 1. A fadiga é proporcional à actividade nem recente nem aliviada pelo repouso, e que está associada com uma grande variedade de distúrbios relacionados com o humor, a motivação, a atenção, a cognição e 2. As causas biológicas de CRF são desconhecidas, embora tenha sido demonstrado em muitos casos que se correlacionam com níveis de inflamação e citocinas, também, em alguns casos com níveis de hemoglobina e a função de vários sistemas hormonais (ver Saligan et al. 3 para uma revisão de biológico estudos de CRF). estudos controlados utilizando modelos animais são necessários para entender o comportamento e biologia associada com esta condição complexa. Enquanto 4 ou 5 relacionadas com quimioterapia relacionado com o tumor, 6 gorduraIgue foi estudada em modelos de roedores, a etiologia de CRF pode ser específica do tratamento. Para investigar CRF relacionado com a terapia de radiação, o nosso grupo desenvolveu recentemente um modelo do rato da fadiga induzida por irradiação 7. Em contraste com modelos de CRF existentes que envolvem o cérebro ou irradiação total do corpo 8, 9, este modelo explora como uma mudança no comportamento centralmente-driven, como fadiga, pode ser desencadeada por um procedimento de irradiação perifericamente-alvo. O procedimento aqui descrito é concebido para modelar a terapia de radiação administrada a doentes com cancro pélvica, usando protecção de chumbo para atingir a parte inferior região abdominal / pélvica com irradiação. No entanto, pela modificação da protecção de chumbo ou a sua colocação em relação aos animais experimentais, este procedimento pode ser adaptado para modelar a irradiação de outras partes do corpo. Voluntária atividade de execução roda (VWRA) é usado para medir a fadiga behavio-likeR; porque é um comportamento voluntário e normal 10, deve permitir o uso concomitante de outros testes comportamentais e biológicos. Nós descobrimos que a irradiação periférica é suficiente para reduzir VWRA em ratos sem causar morbidade ostensiva 7. Experiências futuras com este modelo pode ajudar a revelar os efeitos de irradiação periférica sobre a sinalização imune biológica e outros, bem como as alterações a jusante no sistema nervoso central que podem produzir défices associadas com o CRF.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1098">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:255px;">C57BL/6 Mice</td>
			<td style="width:135px;">Charles River</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">Strain code 027 (http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-a-model/c57bl-6n-mouse)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Ketamine HCl</td>
			<td style="width:135px;">Putney</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">100 mg/ml stock solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Xylazine HCl</td>
			<td style="width:135px;">Lloyd Laboratories</td>
			<td></td>
			<td style="width:591px;">100 mg/ml stock solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Rodent Tattoo System</td>
			<td style="width:135px;">AIMS</td>
			<td style="width:119px;">ATS-3</td>
			<td>http://animalid.com/lab-animal-identification-systems/ats-3-general-rodent-tattoo-system</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Lead Shielding Apparatus</td>
			<td style="width:135px;">(custom made)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">One-inch thick lead shielding arranged as two boxes with a one-inch thick gap between them for targeted irradiation</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Plexiglass shielding container</td>
			<td style="width:135px;">(custom made)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:591px;">Plexiglass container filled with styrofoam. Styrofoam cutouts hold the lead shielding in place.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">GammaCell 40 Exactor</td>
			<td style="width:135px;">Best Theratronics</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>http://www.theratronics.ca/product_gamma40.html</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">RAD Disk Ultra</td>
			<td style="width:135px;">Best Theratronics</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>http://www.theratronics.ca/product_rad.html</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;">Mouse Single Activity Wheel Chamber</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#80820</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=980</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Activity Wheel Counter for Computer Monitoring</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86061</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1052</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Modular Cable for Wheel Counters</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86051-7</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1046</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">USB Computer Interface for Activity Wheel Counters</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86056A</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1047</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:255px;">Activity Wheel Monitor Software</td>
			<td style="width:135px;">Lafayette Instrument Company</td>
			<td style="width:119px;">#86065</td>
			<td>http://www.lafayetteneuroscience.com/product_detail.asp?itemid=1053</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model of fatigue induced by peripheral irradiation

A fadiga relacionada ao câncer (CRF) é uma condição angustiante e caro que muitas vezes afeta os pacientes que receberam tratamentos de câncer, incluindo a terapia de radiação. Aqui nós descrevemos um método que utiliza a irradiação periférica direcionada para induzir comportamento à fadiga, como em ratos. Com proteção adequada, a irradiação tem como alvo a região abdominal inferior / pélvica do rato, poupando o cérebro, em um esforço para modelar o tratamento de radiação recebida pelos indivíduos com câncer pélvico. Nós entregamos uma dose de irradiação que é suficiente para induzir comportamento à fadiga, como em ratos, medido pela atividade de execução roda voluntária (VWRA), sem causar morbidade óbvio. Desde roda de corrida é um comportamento normal, voluntária em ratos, a sua utilização deve ter pouco efeito de confusão em outros testes comportamentais ou medidas biológicas. Por isso, roda de corrida pode ser usado como uma medida do resultado viável na compreensão dos correlatos comportamentais e biológicos de fadiga. CRF é uma condição complexa com co frequentemorbidades, e provavelmente tem causas relacionadas tanto ao câncer e seus vários tratamentos. Os métodos descritos neste documento são úteis para investigar mudanças induzidas pela radiação que contribuem para o desenvolvimento de CRF e, mais genericamente, para explorar as redes biológicas que podem explicar o desenvolvimento e persistência de um comportamento perifericamente-acionada, mas centralmente dirigido como fadiga .

Três lotes de ratos foram realizadas por meio do protocolo descrito acima. Houve um total de 16 sham e 20 irradiadas (2400 cGy, 3 x 800 / dia cGy) ratinhos. Depois de três dias consecutivos de irradiação, o grupo irradiado apresentaram redução significativamente VWRA comparação com sham (medidas repetidas mistos ANOVA: efeito principal do tratamento de irradiação, F 1,13 = 19,233, p &lt;0,001). O efeito foi significativo para os primeiros sete dias após a irradiaç?...

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A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Nós descrevemos um método que utiliza a irradiação periférica direcionada para induzir comportamento à fadiga, como em ratos. A dose de irradiação não letal selecionado leva a uma redução de uma semana em atividade de execução roda voluntária.

Um mouse modelo de fadiga induzida por irradiação periférica

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

The overall goal of this procedure is to measure fatigue-like behavior induced by peripheral irradiation. This method can help answer key questions about fatigue and, in particular, fatigue related to irradiation. For example, it can be used to explore the different roles of the immune system and the central nervous system in fatigue after irradiation.The main advantage of this technique is that it specifically uses peripheral irradiation to affect essentially driven fatigue behavior. Begin by randomizing the mice into either sham irradiated control or irradiated groups. Then, identify five-week-old, male mice by tail tattoo, and assign each mouse to an individual, standard ventilated mouse cage.Allow mice to acclimate to their cages for at least three more days, handling each mouse gently for a period of three minutes per day. Next, introduce the mice to individual, voluntary wheel-running activity, or VWRA, cages, each equipped with a running wheel connected to an electronic counter for continuous recording. Initiate recording of VWRA through the computer software interface.Set recording intervals to one hour and the duration to at least five days. Finally, after five days, stop VWRA recording through the software interface, and return the mice to their standard cages without running wheels. After anesthetizing the mouse, confirm that the anesthesia was effective with a toe pinch.Use ointment on the eyes to prevent dryness. Next, transfer the anesthetized mouse into a lead shielding device. Arrange the mouse in the shielding so that only the lower abdominal and pelvic region is exposed.Then, use medical tape to secure the base of the mouse's tail in position within the shielding to ensure that the position does not change during irradiation. If the mouse is in the irradiation group, deliver 800 centigray at a dose rate of about 110 centigray per minute. If the mouse is in the sham irradiation control group, leave the mouse in the inactive irradiator for the equivalent time.After irradiation is complete, remove the mouse from the irradiator and shielding and return it to its original standard cage. Monitor the mouse continuously until it has regained sufficient consciousness to maintain sternal recumbency. After three successive days of irradiation, transfer the mice into their individual VWRA cages.Finally, to capture radiation-induced fatigue, record VWRA for 15 days. The effect was significant for the first seven days after radiation, with the lowest mean VWRA distance occurring on the third day after radiation. Here, the distribution of the change in VWRA from before to after irradiation is shown.While the majority of mice tested showed fatigue-like symptoms, there was a small number of mice that showed little change or even an increase in VWRA. While attempting this procedure, it's important to make sure the mice are completely anesthetized during irradiation since any movements may affect the irradiation targeting and dosage. After watching this video, you should have a good understanding of how to use peripherally targeted irradiation to induce fatigue-like behavior in mice.

Research

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