Name: acute and chronic models of hyperglycemia in zebrafish: a method to assess the impact of hyperglycemia on neurogenesis and the biodistribution of radiolabeled molecules
Uploaded: 2017-06-26T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled

Wir danken den Direction des Usages du Numérique (DUN) von der Universität La Réunion für die Bearbeitung des Videos (insbesondere Jean-François Février, Eric Esnault und Sylvain Ducasse), Lynda-Rose Mottagan für die Voiceover, Mary Osborne-Pellegrin zum Korrekturlesen Die Voice-over und die CYROI-Plattform. Diese Arbeit wurde unterstützt durch Stipendien der La Réunion University (Bonus Qualité Recherche, Dispositifs incitatifs), Conseil Régional de La Réunion, Europäische Union (CPER / FEDER) und Philancia Association. ACD ist ein Empfänger eines Stipendiums Zuschuss aus der Ministère de l&#39;Education Nationale, de l&#39;Enseignement Supérieur et de la Recherche, La Réunion Universität (Contrat Doctoral).

Erwachsene Wildtyp Zebrafisch ( Danio rerio ) wurden unter Standard-Photoperiode (14/10 h hell / dunkel) und Temperatur (28 ° C) Bedingungen gehalten. Alle Versuche wurden im Einklang mit den französischen und europäischen Gemeinschaftsrichtlinien für die Verwendung von Tieren in der Forschung (86/609 / EWG und 2010/63 / EU) durchgeführt und wurden vom örtlichen Ethikausschuss für Tierversuche genehmigt. 1. Etablierung eines Modells der akuten Hyperglykämie in Zebrafisch <...

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	<li>Ho, N., Sommers, M. S., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+diabetes+on+hippocampal+neurogenesis:+links+to+cognition+and+depression.">Effects of diabetes on hippocampal neurogenesis: links to cognition and depression.</a> Neurosci Biobehav Rev. 37 (8), 1346-1362 (2013).</li><li>Cukierman, T., Gerstein, H. C., Williamson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+decline+and+dementia+in+diabetes--systematic+overview+of+prospective+observational+studies.">Cognitive decline and dementia in diabetes--systematic overview of prospective observational studies.</a> Diabetologia. 48 (12), 2460-2469 (2005).</li><li>Gaudieri, P. A., Chen, R., Greer, T. F., Holmes, C. 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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperglycemia+as+an+independent+predictor+of+worse+outcome+in+non-diabetic+patients+presenting+with+acute+ischemic+stroke.">Hyperglycemia as an independent predictor of worse outcome in non-diabetic patients presenting with acute ischemic stroke.</a> Neurocrit Care. 10 (2), 181-186 (2009).</li><li>Kagansky, N., Levy, S., Knobler, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+hyperglycemia+in+acute+stroke.">The role of hyperglycemia in acute stroke.</a> Arch Neurol. 58 (8), 1209-1212 (2001).</li><li>Gilmore, R. M., Stead, L. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+impaired+glucose+metabolism+in+a+zebrafish+hyperglycemia+model.">Persistent impaired glucose metabolism in a zebrafish hyperglycemia model.</a> Comp Biochem Physiol B Biochem Mol Biol. 171, 58-65 (2014).</li><li>Capiotti, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperglycemia+induces+memory+impairment+linked+to+increased+acetylcholinesterase+activity+in+zebrafish+(Danio+rerio).">Hyperglycemia induces memory impairment linked to increased acetylcholinesterase activity in zebrafish (Danio rerio).</a> Behav Brain Res. 274, 319-325 (2014).</li><li>Schmidt, R., Beil, T., Str&#228;hle, U., Rastegar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stab+wound+injury+of+the+zebrafish+adult+telencephalon:+a+method+to+investigate+vertebrate+brain+neurogenesis+and+regeneration.">Stab wound injury of the zebrafish adult telencephalon: a method to investigate vertebrate brain neurogenesis and regeneration.</a> J Vis Exp. (90), e51753 (2014).</li><li>Diotel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+estradiol+in+adult+neurogenesis+and+brain+repair+in+zebrafish.">Effects of estradiol in adult neurogenesis and brain repair in zebrafish.</a> Horm Behav. 63 (2), 193-207 (2013).</li><li>Rodriguez Viales, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+helix-loop-helix+protein+id1+controls+stem+cell+proliferation+during+regenerative+neurogenesis+in+the+adult+zebrafish+telencephalon.">The helix-loop-helix protein id1 controls stem cell proliferation during regenerative neurogenesis in the adult zebrafish telencephalon.</a> Stem Cells. 33 (3), 892-903 (2015).</li><li>Kaslin, J., Ganz, J., Brand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proliferation,+neurogenesis+and+regeneration+in+the+non-mammalian+vertebrate+brain.">Proliferation, neurogenesis and regeneration in the non-mammalian vertebrate brain.</a> Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 363 (1489), 101-122 (2008).</li><li>Kroehne, V., Freudenreich, D., Hans, S., Kaslin, J., Brand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+of+the+adult+zebrafish+brain+from+neurogenic+radial+glia-type+progenitors.">Regeneration of the adult zebrafish brain from neurogenic radial glia-type progenitors.</a> Development. 138 (22), 4831-4841 (2011).</li><li>Alunni, A., Bally-Cuif, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+view+of+regenerative+neurogenesis+in+vertebrates.">A comparative view of regenerative neurogenesis in vertebrates.</a> Development. 143 (5), 741-753 (2016).</li><li>M&#228;rz, M., Schmidt, R., Rastegar, S., Str&#228;hle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+response+following+stab+injury+in+the+adult+zebrafish+telencephalon.">Regenerative response following stab injury in the adult zebrafish telencephalon.</a> Dev Dyn. 240 (9), 2221-2231 (2011).</li><li>Wullimann, M., Rupp, B., Reichert, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neuroanatomy of the zebrafish brain: A topological atlas. , 1-144 (1996).</li><li>Pellegrini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+aromatase-positive+radial+glial+cells+as+progenitor+cells+in+the+ventricular+layer+of+the+forebrain+in+zebrafish.">Identification of aromatase-positive radial glial cells as progenitor cells in the ventricular layer of the forebrain in zebrafish.</a> J Comp Neurol. 501 (1), 150-167 (2007).</li><li>Zupanc, G. K., Hinsch, K., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proliferation,+migration,+neuronal+differentiation,+and+long-term+survival+of+new+cells+in+the+adult+zebrafish+brain.">Proliferation, migration, neuronal differentiation, and long-term survival of new cells in the adult zebrafish brain.</a> J Comp Neurol. 488 (3), 290-319 (2005).</li><li>Sarras, M. P., Intine, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+Zebrafish+as+a+Disease+Model+Provides+a+Unique+Window+For+Understanding+the+Molecular+Basis+of+Diabetic+Metabolic+Memory.">Use of Zebrafish as a Disease Model Provides a Unique Window For Understanding the Molecular Basis of Diabetic Metabolic Memory.</a> iConcept Press. , 2611-2619 (2013).</li><li>Connaughton, V. P., Baker, C., Fonde, L., Gerardi, E., Slack, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternate+Immersion+in+an+External+Glucose+Solution+Differentially+Affects+Blood+Sugar+Values+in+Older+Versus+Younger+Zebrafish+Adults.">Alternate Immersion in an External Glucose Solution Differentially Affects Blood Sugar Values in Older Versus Younger Zebrafish Adults.</a> Zebrafish. , (2016).</li><li>Prasad, S., Sajja, R. K., Naik, P., Cucullo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+Mellitus+and+Blood-Brain+Barrier+Dysfunction:+An+Overview.">Diabetes Mellitus and Blood-Brain Barrier Dysfunction: An Overview.</a> J Pharmacovigil. 2 (2), 125 (2014).</li></ol>

Diese Arbeit beschreibt verschiedene Methoden, um akute und chronische Modelle der Hyperglykämie in Zebrafisch zu etablieren. Die Hauptvorteile dieser Verfahren sind: (1) sie erlauben eine Verringerung der Anzahl der Säugetiere, die für die Forschung verwendet werden, (2) sie sind einfach einzurichten und schnell zu implementieren, und (3) sie sind wirtschaftlich. Daher erlauben solche Modelle die Untersuchung der Auswirkungen von Hyperglykämie auf eine große Anzahl von Tieren, um ihre Auswirkungen auf verschiedene...

Hyperglykämie ist definiert als übermäßige Blutzuckerwerte. Obwohl es eine Situation von akutem Stress widerspiegeln könnte, ist Hyperglykämie auch eine Bedingung, die oft zu einer Diagnose von Diabetes, einer chronischen Erkrankung der Insulinsekretion und / oder Resistenz führt. Im Jahr 2016 hat die Zahl der Erwachsenen, die mit Diabetes leben, 422 Millionen weltweit erreicht, und jedes Jahr sterben 1,5 Millionen Menschen an dieser Krankheit und sind damit ein wichtiges Gesundheitsproblem 1 . In der Tat führt unkontrollierter Diabetes zu mehreren physiologischen Störungen, die das Herz-Kreislauf-System, die Nieren und die peripheren und zentralen Nervensysteme beeinflussen. Interessanterweise kann akute und chronische Hyperglykämie die Kognition verändern und zu Demenz und Depression beitragen 2 , 3 , 4 , 5 , 6 . Darüber hinaus ist die Aufnahme von Patienten mitMit Hyperglykämie wurde mit schlechteren funktionellen, neurologischen und überlebenden Ergebnissen nach ischämischem Schlaganfall 7 , 8 , 9 , 10 , 11 assoziiert. Es wurde auch gezeigt, dass Hyperglykämie / Diabetes die erwachsene Neurogenese beeinflussen, ein Prozess, der zur Entstehung neuer Neuronen führt, indem sie die neuronale Stammzellaktivität und die neuronale Differenzierung, Migration und Überleben beeinflussen 2 , 12 . Im Gegensatz zu Säugetieren zeigen Telefische wie Zebrafisch eine intensive neurogene Aktivität im ganzen Gehirn und zeigen eine herausragende Fähigkeit zur Hirnreparatur im Erwachsenenalter 13 , 14 , 15 , 16 . Bemerkenswert ist, dass solche Kapazitäten aufgrund der Beharrlichkeit von neu möglich sindRale Stamm- / Vorläuferzellen, einschließlich radialer Glia und Neuroblasten 17 , 18 , 19 . Darüber hinaus hat sich der Zebrafisch vor kurzem als Modell für das Studium von Stoffwechselstörungen, einschließlich Fettleibigkeit und Hyperglykämie / Diabetes 20 , 21 , 22 . Obwohl der Zebrafisch ein gut erkanntes Modell der Hyperglykämie und Neurogenese ist, haben wenige Studien die Auswirkungen von Hyperglykämie auf die Hirnhomöostase und die kognitive Funktion 12 , 23 untersucht . Um die Auswirkungen von Hyperglykämie auf die konstitutive und verletzungsinduzierte Hirnzellproliferation zu bestimmen, wurde durch die intraperitoneale Injektion von D-Glucose ein Modell der akuten Hyperglykämie erzeugt. Darüber hinaus wurde ein Modell der chronischen Hyperglykämie durch das Eintauchen von Fisch in Wasser ergänzt w reproduziertMit D-Glukose 12 . Zebrafisch zeigt viele Vorteile in der Forschung. Sie sind billig, leicht zu heben und transparent während der ersten Stadien der Entwicklung, und ihr Genom wurde sequenziert. Im Rahmen dieser Arbeit zeigen sie auch mehrere zusätzliche Vorteile: (1) sie teilen ähnliche physiologische Prozesse mit Menschen und sind damit ein kritisches Instrument für die biomedizinische Forschung; (2) sie erlauben die schnelle Untersuchung der Auswirkungen von Hyperglykämie auf die Hirnhomöostase und Neurogenese, da ihre weit verbreitete und starke neurogene Aktivität; Und (3) sie sind ein alternatives Modell, das die Verringerung der Anzahl der Säugetiere, die in der Forschung verwendet werden, ermöglicht. Schließlich kann Zebrafisch als Modell für die Prüfung der Biodistribution von radioaktiv markierten Molekülen und potentiellen therapeutischen Mitteln unter Verwendung von PET / CT verwendet werden. Das übergeordnete Ziel des folgenden Verfahrens ist es, visuell zu dokumentieren, wie man Modelle der akuten und chronischen Hyperglykämie in Zebrafisch aufbaut, mit zebRafish, um die Gehirnremodellierung in hyperglykämischen Zuständen zu beurteilen und radioaktiv markierte Moleküle (hier [ 18 F] -FDG) unter Verwendung von PET / CT zu überwachen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="738">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:328px;">1mL Luer-Lok Syringe</td>
			<td style="width:151px;">BD, USA</td>
			<td style="width:93px;">309628</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">4&#39;,6&#39;-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td style="width:93px;">D8417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">7 mL bijou container plain lab</td>
			<td style="width:151px;">Dutscher, France</td>
			<td style="width:93px;">080171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>67021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Digital camera</td>
			<td>Life Sciences, Japan</td>
			<td>Hamamatsu ORCA-ER</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Disposable base molds&#160;</td>
			<td>Simport, Canada</td>
			<td>M475-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Donkey anti-rabbit Alexa fluor 488</td>
			<td>Life Technologies, USA</td>
			<td>A21206</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Embedding center</td>
			<td>Thermo Scientific, USA</td>
			<td>Shandon Histocentre 3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Fluorescence microscope</td>
			<td>Nikon, Japan</td>
			<td>Eclipse 80i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fluorodeoxyglucose (18F-FDG)</td>
			<td>Cyclotron, France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Glucometer test strip</td>
			<td>LifeScan, France</td>
			<td>One-Touch 143 Ultra</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Goat anti-mouse Alexa fluor 594</td>
			<td>Life Technologies, USA</td>
			<td>A11005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">In-Vivo Imaging System</td>
			<td>TriFoil Imaging, Canada</td>
			<td>Triumph Trimodality&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Microtome</td>
			<td>Thermo Scientific, USA</td>
			<td>Microm HM 355 S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Monoclonal mouse anti-PCNA</td>
			<td>DAKO, USA</td>
			<td>clone PC10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>P6148-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Polyclonal rabbit anti-GFAP</td>
			<td>DAKO, USA</td>
			<td>Z033429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Slide drying bench</td>
			<td>Electrothermal, USA</td>
			<td>MH6616</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Sodium citrate trisodium salt dehydrate&#160;</td>
			<td>Prolabo, France</td>
			<td>27833.294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Sterile needle</td>
			<td>BD Microlance 3</td>
			<td>30 G 1/2 ; 0.3 mm x 13 mm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Student Dumont #5 Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91150-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Student surgical scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91400-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Superfros Plus Gold Slides</td>
			<td>Thermo Scientific, USA</td>
			<td>FT4981GLPLUS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Surgical microscope</td>
			<td>Leica, France</td>
			<td>M320-F12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Tissue embedding cassettes</td>
			<td>Simport, Canada</td>
			<td>M490-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Tissue embedding medium</td>
			<td>LeicaBiosystems, USA</td>
			<td>39602004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Toluene</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>244511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:328px;">Tricaine MS-222</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>A5040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Triton X100</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>X100-500 mL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Vectashield medium&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories, USA</td>
			<td>H-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Xylene</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>534056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Fish Strain</td>
			<td>AB</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Saline phosphate buffer (10X PBS) pH 7.4 (for 1 liter)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For preparing 10X PBS, add the following&#160; salts and complete to 1 liter with distilled water</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Potassium chloride (MM : 74.55 g/mol): 2.00 g</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>746436</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Potassium phosphate monobasic (MM: 136,09 g/mol): 2.40g</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>795488</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Sodium chloride (MM : 58.44 g/mol): 80.00 g&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Sodium phosphate dibasic (MM: 141,96 g): 14,40 g</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>795410</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

acute and chronic models of hyperglycemia in zebrafish: a method to assess the impact of hyperglycemia on neurogenesis and the biodistribution of radiolabeled molecules

Hyperglykämie ist ein wichtiges gesundheitliches Problem, das zu Herz-Kreislauf-und zerebralen Dysfunktion führt. Zum Beispiel ist es mit erhöhten neurologischen Problemen nach Schlaganfall assoziiert und zeigt, dass neurogene Prozesse beeinträchtigt werden. Interessanterweise hat sich der adulte Zebrafisch vor kurzem als ein relevantes und nützliches Modell entwickelt, um Hyperglykämie / Diabetes nachzuahmen und die konstitutive und regenerative Neurogenese zu untersuchen. Diese Arbeit stellt Methoden zur Verfügung, um Zebrafisch-Modelle der Hyperglykämie zu entwickeln, um die Auswirkungen von Hyperglykämie auf die Gehirnzellproliferation unter homöostatischen und Hirnreparaturbedingungen zu untersuchen. Eine akute Hyperglykämie wird unter Verwendung der intraperitonealen Injektion von D-Glucose (2,5 g / kg Körpergewicht) in erwachsenen Zebrafisch etabliert. Chronische Hyperglykämie wird durch Eintauchen von adultem Zebrafisch in D-Glucose (111 mM), das Wasser für 14 Tage enthält, induziert. Blut-Glukose-Messungen sind für diese verschiedenen Ansätze beschrieben. Methoden zur Untersuchung der Auswirkungen von Hyperglykämie auf konstitutiv aNd regenerative Neurogenese, durch die Beschreibung der mechanischen Verletzung des Telencephalon, Sezierung des Gehirns, Paraffin Einbettung und Schnitt mit einem Mikrotom, und die Durchführung von Immunhistochemie Verfahren, werden nachgewiesen. Schließlich wird auch die Methode zur Verwendung von Zebrafisch als relevantem Modell zur Untersuchung der Biodistribution von radioaktiv markierten Molekülen (hier [ 18 F] -FDG) unter Verwendung von PET / CT beschrieben.

Unter Verwendung der in diesem Artikel beschriebenen Verfahren wurde die intraperitoneale Injektion von D-Glucose (2,5 g / kg Körpergewicht) auf adultem Zebrafisch durchgeführt und führte zu einer signifikanten Erhöhung der Blutzuckerwerte von 1,5 h nach der Injektion ( 1A ). 24 h nach der Injektion waren die Blutzuckerwerte zwischen D-Glucose und PBS-injizierten Fischen ähnlich. Für die chronische Behandlung wurde Zebrafisch in D-Glucose-Wasser (111 m...

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Acute and Chronic Models of Hyperglycemia in Zebrafish: A Method to Assess the Impact of Hyperglycemia on Neurogenesis and the Biodistribution of Radiolabeled Molecules

Diese Arbeit beschreibt Methoden, um akute und chronische Hyperglykämie Modelle in Zebrafisch zu etablieren. Ziel ist es, die Auswirkungen von Hyperglykämie auf physiologische Prozesse, wie zB konstitutive und verletzungsinduzierte Neurogenese, zu untersuchen. Die Arbeit hebt auch die Verwendung von Zebrafisch hervor, um radiomarkierten Molekülen (hier [ 18 F] -FDG) unter Verwendung von PET / CT zu folgen.

Akute und chronische Modelle der Hyperglykämie in Zebrafisch: Eine Methode zur Beurteilung der Auswirkungen von Hyperglykämie auf die Neurogenese und die Biodistribution von radioaktiv markierten Molekülen

Hyperglycemia is a major health issue that leads to cardiovascular and cerebral dysfunction. For instance, it is associated with increased neurological ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse von Zebrafisch-Larven Skelettmuskel Integrität mit Evans Blue Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Forschung

Entwicklungsbiologie

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Mit Touch-evozierte Reaktion und Locomotion Assays zur Beurteilung der Muskelleistung und Funktion in Zebrabärbling

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae

Methoden, um die Lymphdrüsen und Blutzellen zu prüfen, die in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larvae

Many parallels exist between the Drosophila and mammalian hematopoietic systems, even though Drosophila lack the lymphoid lineage that characterize ...

Building Finite Element Models to Investigate Zebrafish Jaw Biomechanics

Der Aufbau Finite-Elemente-Modelle zu Zebrabärbling Jaw Biomechanik Untersuchen

Skeletal morphogenesis occurs through tightly regulated cell behaviors during development; many cell types alter their behavior in response to mechanical ...

Histological Analyses of Acute Alcoholic Liver Injury in Zebrafish

Histologische Analysen der akuten alkoholischen Leberverletzung in Zebrafisch

Alcoholic Liver Disease (ALD) refers to damage to the liver due to acute or chronic alcohol abuse. It is among the leading causes of alcohol-related ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Live Imaging der Maus Sekundärer Gaumen Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissektion, Immunofluorescent Färbung der Pilz Körper und Photorezeptor Neuronen im Gehirn Erwachsener Taufliege melanogaster

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Adult Zebrafish Injury Models to Study the Effects of Prednisolone in Regenerating Bone Tissue

Erwachsenen Zebrafisch Verletzungen Modelle zur Untersuchung der Auswirkungen von Prednisolon bei der Regeneration von Knochengewebe

Zebrafish are able to regenerate various organs, including appendages (fins) after amputation. This involves the regeneration of bone, which regrows ...

HUVEC Tube-formation Assay to Evaluate the Impact of Natural Products on Angiogenesis

HUVEC Tube-Formation Assay zur Bewertung der Auswirkungen natürlicher Produkte auf die Angiogenese

Angiogenesis is a phenomenon that includes different processes, such as endothelial cell proliferation, differentiation, and migration, that lead to the ...

Electroporation Method for In Vivo Delivery of Plasmid DNA in the Adult Zebrafish Telencephalon

Elektroporationsmethode zur In-Vivo-Lieferung von Plasmid-DNA im erwachsenen Zebrafisch Telencephalon

Electroporation is a transfection method in which an electrical field is applied to cells to create temporary pores in a cell membrane and increase its ...