Name: development of an economical dna delivery system by "acufection" and its application to skin research
Uploaded: 2017-04-19T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Development of an Economical DNA Delivery System by "Acufection" and its Application to Skin Research at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af bevilling fra Ministeriet for Videnskab og Teknologi (MEST 103-2633-B-002-002, 104-2320-B-002-048). Vi takker Drs. Betty Wu-Hsieh og Chien-Kuo Lee på NTU, Leigh Zerboni på Stanford University og Dr. Peter Hoffmann ved University of Hawaii for at læse manuskriptet, Yun Chien på NTU for teknisk assistance, og Dr. Wen-Chi Wei på landbrug bioteknologi Research center ved Academia Sinica for teknisk rådgivning.

Hunmus ved 8 - 12 uger gamle, blev anvendt til denne undersøgelse. C57 / BL6 vildtype (WT) og IL-15 deficient (IL15 - / -) mus blev fremskaffet fra National Laboratory Animal Center (NLAC), Taiwan og Taconic Farm, hhv. IL-15-deficiente (IL15 - / -) og IL-15-dominant (IL15 +/- og IL15 + / +) viste en 1: 3-forhold i anden generation fra kors IL15 +/- heterozygoter. Genotype IL15 - / - mus blev bekræftet ved PCR-analyse. Musene blev opretholdt i SPF (SPF) f...

<ol>
	<li>Effendy, I., Loffler, H., Maibach, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+cytokines+in+murine+cutaneous+irritant+responses.">Epidermal cytokines in murine cutaneous irritant responses.</a> Journal of applied toxicology : JAT. 20, 335-341 (2000).</li><li>Nestle, F. O., Di Meglio, P., Qin, J. Z., Nickoloff, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+immune+sentinels+in+health+and+disease.">Skin immune sentinels in health and disease.</a> Nature reviews. 9, 679-691 (2009).</li><li>Liu, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+application+of+HIV+DNA+vaccine+with+cytokine-expression+plasmids+induces+strong+antigen-specific+immune+responses.">Topical application of HIV DNA vaccine with cytokine-expression plasmids induces strong antigen-specific immune responses.</a> Vaccine. 20, 42-48 (2001).</li><li>Lu, B., Federoff, H. J., Wang, Y., Goldsmith, L. A., Scott, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+application+of+viral+vectors+for+epidermal+gene+transfer.">Topical application of viral vectors for epidermal gene transfer.</a> J Invest Dermatol. 108, 803-808 (1997).</li><li>Partidos, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivering+vaccines+into+the+skin+without+needles+and+syringes.">Delivering vaccines into the skin without needles and syringes.</a> Expert Rev Vaccines. 2, 753-761 (2003).</li><li>Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+with+DNA+through+the+skin.">Immunization with DNA through the skin.</a> Methods. 31, 232-242 (2003).</li><li>Yang, N. S., Burkholder, J., Roberts, B., Martinell, B., McCabe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+and+in+vitro+gene+transfer+to+mammalian+somatic+cells+by+particle+bombardment.">In vivo and in vitro gene transfer to mammalian somatic cells by particle bombardment.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 87, 9568-9572 (1990).</li><li>Tang, D. C., DeVit, M., Johnston, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+immunization+is+a+simple+method+for+eliciting+an+immune+response.">Genetic immunization is a simple method for eliciting an immune response.</a> Nature. 356, 152-154 (1992).</li><li>Haynes, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Particle-mediated+DNA+vaccine+delivery+to+the+skin.">Particle-mediated DNA vaccine delivery to the skin.</a> Expert Opin Biol Ther. 4, 889-900 (2004).</li><li>Tuomela, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+and+general+safety+of+a+naked+DNA+plasmid,+GTU-MultiHIV,+in+a+rat,+using+a+quantitative+PCR+method.">Biodistribution and general safety of a naked DNA plasmid, GTU-MultiHIV, in a rat, using a quantitative PCR method.</a> Vaccine. 23, 890-896 (2005).</li><li>Eriksson, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+gene+transfer+to+skin+and+wound+by+microseeding.">In vivo gene transfer to skin and wound by microseeding.</a> J Surg Res. 78, 85-91 (1998).</li><li>Lee, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternatively+spliced+IL-15+isoform+modulates+abrasion-induced+keratinocyte+activation.">An alternatively spliced IL-15 isoform modulates abrasion-induced keratinocyte activation.</a> J Invest Dermatol. 135, 1329-1337 (2015).</li><li>Rudy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imiquimod+(Aldara):+modifying+the+immune+response.">Imiquimod (Aldara): modifying the immune response.</a> Dermatol Nurs. 14, 268-270 (2002).</li><li>van der Fits, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imiquimod-induced+psoriasis-like+skin+inflammation+in+mice+is+mediated+via+the+IL-23/IL-17+axis.">Imiquimod-induced psoriasis-like skin inflammation in mice is mediated via the IL-23/IL-17 axis.</a> J Immunol. 182, 5836-5845 (2009).</li><li>Sumida, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interplay+between+CXCR2+and+BLT1+facilitates+neutrophil+infiltration+and+resultant+keratinocyte+activation+in+a+murine+model+of+imiquimod-induced+psoriasis.">Interplay between CXCR2 and BLT1 facilitates neutrophil infiltration and resultant keratinocyte activation in a murine model of imiquimod-induced psoriasis.</a> J Immunol. 192, 4361-4369 (2014).</li><li>Bamford, R. N., DeFilippis, A. P., Azimi, N., Kurys, G., Waldmann, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+5'+untranslated+region,+signal+peptide,+and+the+coding+sequence+of+the+carboxyl+terminus+of+IL-15+participate+in+its+multifaceted+translational+control.">The 5' untranslated region, signal peptide, and the coding sequence of the carboxyl terminus of IL-15 participate in its multifaceted translational control.</a> J Immunol. 160, 4418-4426 (1998).</li><li>Horton, R. M., Hunt, H. D., Ho, S. N., Pullen, J. K., Pease, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+hybrid+genes+without+the+use+of+restriction+enzymes:+gene+splicing+by+overlap+extension.">Engineering hybrid genes without the use of restriction enzymes: gene splicing by overlap extension.</a> Gene. 77, 61-68 (1989).</li><li>Tan, X., Lefrancois, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+IL-15+isoforms+generated+by+alternative+splicing+are+expressed+in+the+intestinal+epithelium.">Novel IL-15 isoforms generated by alternative splicing are expressed in the intestinal epithelium.</a> Genes Immun. 7, 407-416 (2006).</li><li>Basner-Tschakarjan, E., Mirmohammadsadegh, A., Baer, A., Hengge, U. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake+and+trafficking+of+DNA+in+keratinocytes:+evidence+for+DNA-binding+proteins.">Uptake and trafficking of DNA in keratinocytes: evidence for DNA-binding proteins.</a> Gene Ther. 11, 765-774 (2004).</li><li>Fan, H., Lin, Q., Morrissey, G. R., Khavari, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+via+hair+follicles+by+topical+application+of+naked+DNA+to+normal+skin.">Immunization via hair follicles by topical application of naked DNA to normal skin.</a> Nat Biotechnol. 17, 870-872 (1999).</li><li>Kennedy-Crispin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+keratinocytes'+response+to+injury+upregulates+CCL20+and+other+genes+linking+innate+and+adaptive+immunity.">Human keratinocytes' response to injury upregulates CCL20 and other genes linking innate and adaptive immunity.</a> J Invest Dermatol. 132, 105-113 (2012).</li></ol>

Det mest kritiske trin for at sikre ekspressionen af ​​acufected plasmid-DNA er til jævnt oscillere og løsne hornlag af huden. Samtidig med at skubbe nåle forsigtigt uden at skære huden skal kraften være hårdt nok til at nedtrykke overfladen. For at lette absorption af DNA i 10 pi opløsning på en 1 cm x 1 cm overfladeareal, bør nåle oscillere op-og-ned til omkring 100 gange på 30 s. Kan man bestemme den kraft, der skal punktere huden og ved at notere det antal gange, der er nødvendige til opnåelse af be...

Huden er den første linje af vært forsvar. Keratinocytter (KCS) er den vigtigste celletype i huden på mennesker og mus. Som respons på miljømæssige stimuli (f.eks sollys, ilt, kemikalier og patogene invasion), er KCS aktiveres og producere en bred vifte af proinflammatoriske cytokiner og kemokiner, såsom IL-8, IL-6, IL-1α, IL-1β, TNF α og GM-CSF 1. Sammen udløse rekruttering af immunceller til huden. Forværret kutan inflammation er ofte forbundet med en række humane sygdomme, herunder akut ektopisk kontaktdermatitis og kronisk T-cellemedieret inflammation (f.eks allergisk kontakteksem og psoriasis) 2. Modulering proinflammatoriske reaktioner i huden ved at hæmme KC aktivering er en plausibel tilgang til behandling af kutan inflammation. Denne protokol beskriver en ny tilgang til transient at udtrykke et cytokingen i epidermis for at studere immune response en følge af en sådan behandling i huden. Epidermis komponerer den mest overfladiske lag af huden. Det tjener som en fysisk barriere holde eksterne stoffer såsom nukleinsyrer og patogener i at komme ind i de dybere lag af huden. Adskillige nålefri teknikker er blevet fastsat for epidermal DNA-transfer 3, 4. DNA i opløsning eller forbundet med kationiske liposomer eller adenovirusvektorer er direkte påført på epidermis modificeret med teknikker såsom fjernelse af stratum corneum eller behandling med depilating reagens. Fjernelse af forhornet epitel letter DNA krydser epidermal barriere og interaktion med keratinocytter og Langerhans-celler til at inducere immune 5 responser. Mens en stor overflade er til rådighed for DNA-overførsel og denne fremgangsmåde ikke involverer nåle, der er ulemper, herunder kravetfor de store mængder DNA (10 - 100 ug), barske behandling på huden ved stripning, og de inkonsistente resultater i inducere immunrespons i de immuniserede dyr uden DNA levering booster 6. Mikropartikel-medieret intracellulær levering af nøgent DNA til huden har vist sig at være yderst effektiv og reproducerbar til induktion immunrespons 7, 8. En håndholdt genkanon er blevet brugt til at bombardere huden målstedet med plasmid DNA-coatede guldpartikler 2 um diameter i størrelse ved hjælp af tryksat helium luftstrøm 9. Plasmid-DNA&#39;et formentlig optages af KCsand dendritiske celler (DC&#39;er) i huden og proteinet er lokalt udtrykt eller transporteres til drænende lymfeknuder af DC&#39;er 10. Selvom det gen pistol systemet er enkel og kræver begrænset teknisk erfaring, prisen for at udarbejde og levere &quot;DNA bullad &quot;(dvs. guldpulvere, helium gas) og for genkanonen selv har begrænset sin generelle anvendelse. Derudover kravet om en helium gasleveringssystem begrænser nem genkanon transport, når man udfører eksperimenter ved forskellige steder. mikropodning har vist sig at opnå en højere effektivitet af genoverførsel end enkelt injektion og partikelbombardement 11. mikropodning bruger en tatovering pistol at afgive DNA til huden uden brug af partikel perler 11. Oscillerende mikronålene på huden ved hjælp af denne fremgangsmåde sandsynligvis direkte skrabe cellemembranen og dermed overføre DNA til flere celler samtidig. Men smerter forbundet med det store antal injektioner med nåle mm diameter 0,254 er en ulempe. Her giver vi en alternativ tilgang til DNA levering in vivo. Den &quot;acufection&quot; </strong&gt; protokol vi beskrevet her tilvejebringer en økonomisk og effektiv måde at levere plasmid-DNA i musehud. Kort fortalt blev ti akupunktur nåle (0,2 mm i diameter x 13 mm i længden) bundet i et bundt med klæbende tape. Et volumen på 10 pi PBS med 10 ug plasmid-DNA indeholdende transgenet af interesse blev placeret på den barberede, hårfjerningscremen-behandlede flanke hud. Ved anvendelse af akupunkturnål bundtet at oscillere overfladen (1 cm x 1 cm) af huden, blev keratiner på hornlaget løsnes og plasmid-DNA&#39;et påføres overfladen blev absorberet ind i epidermis. Hud skader blev overvåget og fundet at være minimal. Ekspression af det transficerede gen i acufected hud blev bekræftet ved både kvantitativ realtids-PCR (QRT-PCR) og ELISA. Immun modulatoriske virkninger af acufection leveret IL-15ΔE7 på kutan inflammation blev påvist under anvendelse af IMQ-behandlede musemodel 12. Mens acufection viser sig at være en nem og mindre demande fremgangsmåde til DNA-afgivelse in vivo, den optimale mængde af DNA til forskellige gener og de tidspunkter at punktere huden skal være omhyggeligt optimerede for at opnå reproducerbare resultater.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Accu Handy Needle</td>
			<td>Accu</td>
			<td>36Gx0.5</td>
			<td>Medical device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NairTM Lotion</td>
			<td>Church &#38; Dwight</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Use to remove hair</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Xyline substitute</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>6764506</td>
			<td>Deparaffinization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avertin (2,2,2-Tribromethanol)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T4,840-2</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-methyl-2-butanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>152463</td>
			<td>Solvent for the dissolution of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DifcoTM LB broth, Miller</td>
			<td>BD</td>
			<td>244620</td>
			<td>Propagation and maintenance of E. coli for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAGEN&#9415; Plasmid Midi Kit</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>12143</td>
			<td>Purification of plasmid DNA from E. coli</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-15/IL-15R Complex ELISA Ready-SET-Go kit</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>88-7215</td>
			<td>Measure IL-15 protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse Ly6G</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>127601</td>
			<td>Antibody used for immunohistochemical stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-mouse Ki-67</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>14-5698-80</td>
			<td>Antibody used for immunohistochemical stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Simple Stain Mouse MAXPO (Rat)</td>
			<td>Nichirei Biosciences</td>
			<td>414341F</td>
			<td>Reagent to block background signal in mouse-on-mouse stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Peroxidase (HRP) Substrate Kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td>Peroxidse substrate for immunohistochemical stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra V block</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>TA-060-UB</td>
			<td>Reduce nonspecific background staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl green</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8884</td>
			<td>Nuclear staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vecta MountTM</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>M-5000</td>
			<td>Permanently preserving histochemical stains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail tablets</td>
			<td>Roche</td>
			<td>04-693-116-001</td>
			<td>Inhibit protease activity in cell lysate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldara cream</td>
			<td>3M Parmaceuticals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5% imiquimod cream</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bessman Tissue Pulverizer</td>
			<td>Spectrum Labs</td>
			<td>189475</td>
			<td>Use to pulverize skin tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABI7900HT cycler</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>N/A</td>
			<td>quantitative real-time PCR assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camcorder</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>HDC-SD60</td>
			<td>Image documentation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axio Scope.A1</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Bright-field microscopy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ScanScope&#9415; XT</td>
			<td>Aperio</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Whole-field image scanner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph&#9415; Research Imaging</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Quantitative analysis of skin thickness and immune-reactive cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of an economical dna delivery system by "acufection" and its application to skin research

Dysregulering af immunrespons i huden er forbundet med en række menneskelige hudlidelser. Direkte overførsel af immunrelaterede gener i hudvævet er et fascinerende tilgang til at undersøge immunmodulation af kutane inflammation i musemodeller for humane sygdomme. Her præsenterer vi en omkostningseffektiv protokol, leveret nøgent DNA i musehud og fører til transgen ekspression. Fremgangsmåden er opfundet &quot;acufection&quot;, der betegner acu punktering-medieret DNA-trans fektion. At udføre acufection blev musehud først infunderes med DNA i phosphatbufret saltvand (PBS) og derefter prikkes let med et bundt af akupunktur nåle for at lette absorptionen af ​​DNA og transfektion ind i celler. Plasmid-DNA&#39;et formentlig optages af keratinocyt og dendritiske celler (DC&#39;er) i huden og udtrykt til protein. Mekanisk prick med nåle per se bevirkede ikke skader huden eller fremkalde keratinocyt aktivering. udtrykketaf de transficerede gener blev detekteret i huden på både transkriptionelle og translationelle niveauer efter acufection i 2 dage og opretholdt op til 7 dage. Det primære mål for udviklingen af ​​denne acufection metode var at undersøge et hidtil udefineret isoform af IL-15. Anvendelse af denne fremgangsmåde, et alternativt splejset IL-15-isoformen med delvist fjernede exon 7 (IL-15ΔE7) blev udtrykt i huden og behandles efterfølgende med et Toll-lignende receptor 7 (TLR7) agonist, imiquimod (IMQ), at inducere inflammation. Acufection leveret IL-15ΔE7 i huden undertrykt keratinocytproliferation, epidermal tykkelse og neutrofilrekruttering i IMQ-induceret kutan inflammation. Med stigende interesse i at identificere de regulatoriske mekanismer for kutan inflammation, protokollen beskrevet her tilvejebringer en omkostningseffektiv og alsidigt alternativ til genkanonen system eller mikropodning til DNA levering in vivo. Det kan potentielt give opdagelse af funktionen af ​​et hidtil ukendtgen i huden eller til undersøgelse ny behandling for hudsygdomme.

Mens nogle rødme var tydelig inden for den første time efter prikning med akupunktur nåle, huden blokerede på dag 2 og blev observeret nogen negativ hudreaktion op til dag 7 efter prikning (figur 2A). Nål stikkende induceret meget lavt niveau af epidermal orthokeratosis og minimal dermal infiltration af H &amp; E-analyse sammenlignet med ubehandlet hud (figur 2B). Den epidermale tykkelse (figur 2C)</str...

Watch this Scientific Journal Video about Development of an Economical DNA Delivery System by "Acufection" and its Application to Skin Research at JoVE.com

Development of an Economical DNA Delivery System by "Acufection" and its Application to Skin Research

Denne protokol er en omkostningseffektivt alternativ til ekspression nøgent plasmid-DNA i musehud. Det overordnede mål med protokollen er at levere immunrelaterede gener i hudvæv at afgrænse den funktionelle rolle af et specifikt gen i kutan inflammation.

Udvikling af en økonomisk DNA Delivery System med &quot;Acufection&quot; og dens Anvendelse på Skin Research

Dysregulation of immune response in skin is associated with numerous human skin disorders. Direct transfer of immune-related genes into skin tissue is a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Development of a Negative Selectable Marker for Entamoeba histolytica

Development of a Negative Selectable Marker for Entamoeba histolytica

Entamoeba histolytica is the causative agent of amebiasis and infects up to 10% of the world's population. The molecular techniques that have enabled the ...

Development of Cell-type specific anti-HIV gp120 aptamers for siRNA delivery

The global epidemic of infection by HIV has created an urgent need for new classes of antiretroviral agents. The potent ability of small interfering ...

Application of a Mouse Ligated Peyer&#x2019;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Application of a Mouse Ligated PeyerÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Anvendelse af en mus Ligated Peyer er Patch Intestinal Loop Assay at evaluere Bakteriel Optagelse ved M celler

The inside of our gut is inhabited with enormous number of commensal bacteria. The mucosal surface of the gastrointestinal tract is continuously exposed ...

Purification and Visualization of Lipopolysaccharide from Gram-negative Bacteria by Hot Aqueous-phenol Extraction

Oprensning og visualisering af lipopolysaccharid fra Gram-negative bakterier ved varm vandig-phenolekstraktion

Lipopolysaccharide (LPS)  is a major component of Gram-negative bacterial outer membranes. It is a tripartite molecule consisting of  lipid A, which is ...

Establishment of an In vitro System to Study Intracellular Behavior of Candida glabrata in Human THP-1 Macrophages

Establishment of an In vitro System to Study Intracellular Behavior of Candida glabrata in Human THP-1 Macrophages

A cell culture model system, if a close mimic of host environmental conditions, can serve as an inexpensive, reproducible and easily manipulatable ...

Application of Fluorescent Nanoparticles to Study Remodeling of the Endo-lysosomal System by Intracellular Bacteria

Anvendelse af Fluorescent Nanopartikler til Studieinformationen ombygning af Endo-lysosomale System af intracellulære bakterier

Fluorescent nanoparticles (NPs) with desirable chemical, optical and mechanical properties are promising tools to label intracellular organelles. Here, we ...

Development of an in vitro model system for studying the interaction of Equus caballus IgE with its high-affinity receptor Fc&#949;RI

Development of an in vitro model system for studying the interaction of Equus caballus IgE with its high-affinity receptor FcÃƒÅ½Ã‚ÂµRI

Udvikling af en<em&gt; In vitro</em&gt; Modelsystem til at studere interaktionen af<em&gt; Equus</em&gt;<em&gt; Caballus</em&gt; IgE med sin højaffinitetsreceptoren FceRI

The interaction of IgE with its high-affinity Fc receptor (Fc&#949;RI) followed by an antigenic challenge is the principal pathway in IgE mediated ...

The Mesenteric Lymph Duct Cannulated Rat Model: Application to the Assessment of Intestinal Lymphatic Drug Transport

Den mesenterielymfeknuderne Duct kanyle Rat Model: Ansøgning om vurdering af intestinal lymfatisk Drug Transport

The intestinal lymphatic system plays key roles in fluid transport, lipid absorption and immune function. Lymph flows directly from the small intestine ...

Cultivation of Heligmosomoides Polygyrus: An Immunomodulatory Nematode Parasite and its Secreted Products

Cultivation of Heligmosomoides Polygyrus: An Immunomodulatory Nematode Parasite and its Secreted Products

Dyrkning af<em&gt; Heligmosomoides Polygyrus:</em&gt; Et immunmodulatorisk Nematode Parasite og dens udskilte produkter

Heligmosomoides polygyrus (formerly known as Nematospiroides dubius, and also referred to by some as H. bakeri) is a gastrointestinal helminth that ...

Development of an Antigen-driven Colitis Model to Study Presentation of Antigens by Antigen Presenting Cells to T Cells

Udvikling af et antigen-drevet Colitis Model at studere Præsentation af antigener ved antigen-præsenterende celler for T-celler

Inflammatory bowel disease (IBD) is a chronic inflammation which affects the gastrointestinal tract (GIT). One of the best ways to study the immunological ...