Name: development of an economical dna delivery system by "acufection" and its application to skin research
Uploaded: 2017-04-19T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Development of an Economical DNA Delivery System by "Acufection" and its Application to Skin Research at JoVE.com

Detta arbete stöddes av anslag från ministeriet för vetenskap och teknologi (MOST 103-2633-B-002 till 002; 104 till 2320-B-002 till 048). Vi tackar Dr.. Betty Wu-Hsieh och Chien-Kuo Lee på NTU, Leigh Zerboni vid Stanford University och Dr. Peter Hoffmann vid University of Hawaii för att läsa manuskriptet, Yun Chien på NTU för tekniskt stöd, och Dr. Wen-Chi Wei på jordbruk bioteknik Research Center vid Academia Sinica för teknisk rådgivning.

Honmöss på 8 - 12 veckor gamla användes för denna studie. C57 / BL6 vildtyp (WT) och IL-15 deficient (IL-15 - / -) möss köptes från National Laboratory Animal Center (NLAC), Taiwan och Taconic Farm, respektive. IL-15-deficient (IL-15 - / -) och IL-15-dominanta (IL-15 +/- och IL15 + / +) visade en 1: 3-förhållande i den andra generationen från korset av IL-15 +/- heterozygoter. Genotypen av IL15 - / - möss bekräftades genom PCR-analys. Möss hö...

<ol>
	<li>Effendy, I., Loffler, H., Maibach, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+cytokines+in+murine+cutaneous+irritant+responses.">Epidermal cytokines in murine cutaneous irritant responses.</a> Journal of applied toxicology : JAT. 20, 335-341 (2000).</li><li>Nestle, F. O., Di Meglio, P., Qin, J. Z., Nickoloff, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+immune+sentinels+in+health+and+disease.">Skin immune sentinels in health and disease.</a> Nature reviews. 9, 679-691 (2009).</li><li>Liu, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+application+of+HIV+DNA+vaccine+with+cytokine-expression+plasmids+induces+strong+antigen-specific+immune+responses.">Topical application of HIV DNA vaccine with cytokine-expression plasmids induces strong antigen-specific immune responses.</a> Vaccine. 20, 42-48 (2001).</li><li>Lu, B., Federoff, H. J., Wang, Y., Goldsmith, L. A., Scott, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+application+of+viral+vectors+for+epidermal+gene+transfer.">Topical application of viral vectors for epidermal gene transfer.</a> J Invest Dermatol. 108, 803-808 (1997).</li><li>Partidos, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivering+vaccines+into+the+skin+without+needles+and+syringes.">Delivering vaccines into the skin without needles and syringes.</a> Expert Rev Vaccines. 2, 753-761 (2003).</li><li>Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+with+DNA+through+the+skin.">Immunization with DNA through the skin.</a> Methods. 31, 232-242 (2003).</li><li>Yang, N. S., Burkholder, J., Roberts, B., Martinell, B., McCabe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+and+in+vitro+gene+transfer+to+mammalian+somatic+cells+by+particle+bombardment.">In vivo and in vitro gene transfer to mammalian somatic cells by particle bombardment.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 87, 9568-9572 (1990).</li><li>Tang, D. C., DeVit, M., Johnston, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+immunization+is+a+simple+method+for+eliciting+an+immune+response.">Genetic immunization is a simple method for eliciting an immune response.</a> Nature. 356, 152-154 (1992).</li><li>Haynes, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Particle-mediated+DNA+vaccine+delivery+to+the+skin.">Particle-mediated DNA vaccine delivery to the skin.</a> Expert Opin Biol Ther. 4, 889-900 (2004).</li><li>Tuomela, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+and+general+safety+of+a+naked+DNA+plasmid,+GTU-MultiHIV,+in+a+rat,+using+a+quantitative+PCR+method.">Biodistribution and general safety of a naked DNA plasmid, GTU-MultiHIV, in a rat, using a quantitative PCR method.</a> Vaccine. 23, 890-896 (2005).</li><li>Eriksson, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+gene+transfer+to+skin+and+wound+by+microseeding.">In vivo gene transfer to skin and wound by microseeding.</a> J Surg Res. 78, 85-91 (1998).</li><li>Lee, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternatively+spliced+IL-15+isoform+modulates+abrasion-induced+keratinocyte+activation.">An alternatively spliced IL-15 isoform modulates abrasion-induced keratinocyte activation.</a> J Invest Dermatol. 135, 1329-1337 (2015).</li><li>Rudy, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imiquimod+(Aldara):+modifying+the+immune+response.">Imiquimod (Aldara): modifying the immune response.</a> Dermatol Nurs. 14, 268-270 (2002).</li><li>van der Fits, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imiquimod-induced+psoriasis-like+skin+inflammation+in+mice+is+mediated+via+the+IL-23/IL-17+axis.">Imiquimod-induced psoriasis-like skin inflammation in mice is mediated via the IL-23/IL-17 axis.</a> J Immunol. 182, 5836-5845 (2009).</li><li>Sumida, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interplay+between+CXCR2+and+BLT1+facilitates+neutrophil+infiltration+and+resultant+keratinocyte+activation+in+a+murine+model+of+imiquimod-induced+psoriasis.">Interplay between CXCR2 and BLT1 facilitates neutrophil infiltration and resultant keratinocyte activation in a murine model of imiquimod-induced psoriasis.</a> J Immunol. 192, 4361-4369 (2014).</li><li>Bamford, R. N., DeFilippis, A. P., Azimi, N., Kurys, G., Waldmann, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+5'+untranslated+region,+signal+peptide,+and+the+coding+sequence+of+the+carboxyl+terminus+of+IL-15+participate+in+its+multifaceted+translational+control.">The 5' untranslated region, signal peptide, and the coding sequence of the carboxyl terminus of IL-15 participate in its multifaceted translational control.</a> J Immunol. 160, 4418-4426 (1998).</li><li>Horton, R. M., Hunt, H. D., Ho, S. N., Pullen, J. K., Pease, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+hybrid+genes+without+the+use+of+restriction+enzymes:+gene+splicing+by+overlap+extension.">Engineering hybrid genes without the use of restriction enzymes: gene splicing by overlap extension.</a> Gene. 77, 61-68 (1989).</li><li>Tan, X., Lefrancois, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+IL-15+isoforms+generated+by+alternative+splicing+are+expressed+in+the+intestinal+epithelium.">Novel IL-15 isoforms generated by alternative splicing are expressed in the intestinal epithelium.</a> Genes Immun. 7, 407-416 (2006).</li><li>Basner-Tschakarjan, E., Mirmohammadsadegh, A., Baer, A., Hengge, U. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uptake+and+trafficking+of+DNA+in+keratinocytes:+evidence+for+DNA-binding+proteins.">Uptake and trafficking of DNA in keratinocytes: evidence for DNA-binding proteins.</a> Gene Ther. 11, 765-774 (2004).</li><li>Fan, H., Lin, Q., Morrissey, G. R., Khavari, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunization+via+hair+follicles+by+topical+application+of+naked+DNA+to+normal+skin.">Immunization via hair follicles by topical application of naked DNA to normal skin.</a> Nat Biotechnol. 17, 870-872 (1999).</li><li>Kennedy-Crispin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+keratinocytes'+response+to+injury+upregulates+CCL20+and+other+genes+linking+innate+and+adaptive+immunity.">Human keratinocytes' response to injury upregulates CCL20 and other genes linking innate and adaptive immunity.</a> J Invest Dermatol. 132, 105-113 (2012).</li></ol>

Det mest kritiska steget för att säkerställa uttryck av den acufected plasmid-DNA är att jämnt oscillera och lossa hornlagret i huden. Samtidigt som du trycker nålarna försiktigt utan att skära huden, bör kraften vara tillräckligt hårt för att trycka ytan. För att underlätta absorption av DNA i 10 mikroliter lösning på en 1 cm x 1 cm ytarea, bör nålarna oscillera upp-och-ner i ca 100 gånger i 30 s. Man kan bestämma den kraft som behöver sticka huden och genom att notera hur många gånger som behöv...

Huden är den första raden av värdförsvar. Keratinocyter (KCS) är den huvudsakliga celltypen i huden hos människor och möss. Som svar på miljöstimuli (t.ex. solljus, syre, kemikalier och patogena invasion), är KCS aktiveras och producerar ett brett spektrum av proinflammatoriska cytokiner och kemokiner såsom IL-8, IL-6, IL-1α, IL-1β, TNF-a α och GM-CSF en. Tillsammans utlösa rekrytering av immunceller till huden. Förvärras kutan inflammation är ofta förknippat med många humana sjukdomar innefattande akut ektopisk kontaktdermatit och kroniska T-cellmedierad inflammation (t.ex. allergisk kontaktdermatit och psoriasis) 2. Modulera proinflammatoriska svar i huden genom att hämma KC-aktivering är ett rimligt tillvägagångssätt för att behandla kutan inflammation. Detta protokoll beskriver en ny metod för övergående uttrycka en cytokin gen i överhuden för att studera immun resPonse en följd av en sådan behandling i huden. Epidermis komponerar det mest ytliga lagret av huden. Det fungerar som en fysisk barriär hålla externa substanser såsom nukleinsyror och patogener från att komma in de djupare hudlagren. Flera nålfria tekniker har fastställts för epidermal DNA-överföring 3, 4. DNA i lösning eller associerad med katjoniska liposomer eller adenovirusvektorer har direkt appliceras på epidermis modifierade med tekniker såsom avlägsnande av stratum corneum eller behandlingen med depilating reagens. Avlägsnande av den förhornade epitelet underlättar DNA korsar den epidermala barriären och interaktion med keratinocyter och Langerhans-celler för att inducera immunsvar 5. Medan en stor yta är tillgänglig för DNA överföring och detta tillvägagångssätt inte innebär nålar, det finns nackdelar inklusive kravetför de stora kvantiteter av DNA (10-100 ng), hård behandling på huden genom strippning, och motsägande resultat i att inducera immunsvar i de immuniserade djuren utan DNA leverans booster 6. Mikropartikel-medierad intracellulär tillförsel av naket DNA till huden har visat sig vara mycket effektiv och reproducerbar för att inducera immunsvar 7, 8. En handhållen genkanon har använts för att bombardera målstället huden med plasmid DNA-belagda guldpartiklar 2 um diameter i storlek med hjälp av trycksatt helium luftflödes 9. Plasmid-DNA antagligen tas upp av KCsand dendritiska celler (DC) i huden och proteinet lokalt uttryckta eller transporteras till dränerande lymfkörtlar från DCs 10. Även om genkanon systemet är enkelt och kräver begränsad teknisk erfarenhet, kostnaden för att förbereda och leverera &quot;DNA-bullåt &quot;(dvs guldpulver, heliumgaser) och för genkanonen själv har begränsat dess allmänna tillämpning. Dessutom kravet på en heliumgas avgivningssystem begränsar enkel genpistol transport när experimenten utförs på olika platser. Microseeding har visats för att uppnå en högre effektivitet av genöverföring än enda injektion och partikelbombardemang 11. Microseeding använder en tatuering pistol för att leverera DNA till huden utan användning av partikelpärlor 11. Oscillerande mikronålarna på huden med användning av detta tillvägagångssätt är sannolikt att direkt skrapa cellmembranet och sålunda överföra DNA till flera celler samtidigt. emellertid är smärta i samband med det stora antalet injektioner med 0,254 nålar mm diameter en nackdel. Här ger vi ett alternativ till DNA-leverans in vivo. Den &quot;acufection&quot; </strong&gt; protokoll vi beskrivs här tillhandahåller ett ekonomiskt och effektivt sätt att leverera plasmid-DNA i mushud. I korthet, tio akupunkturnålar (0,2 mm i diameter x 13 mm längd) bunden i en bundle av tejp. En volym av 10 | il PBS med 10 ^ g av plasmid-DNA innehållande transgenen av intresse placerades på den rakade, hårborttagningskräm behandlad flank hud. Med hjälp av akupunkturnål knippet att oscillera ytan (1 cm x 1 cm) i huden, de keratiner på hornlagret lossade och plasmid-DNA anbringas på ytan absorberades in i epidermis. Hudskador övervakades och befanns vara minimal. Expression av den transfekterade genen i acufected huden bekräftades genom både kvantitativ realtids-PCR (QRT-PCR) och ELISA. Immunmodulerande effekter av acufection levererade IL-15ΔE7 vid kutan inflammation demonstrerades med användning av IMQ behandlade musmodell 12. Medan acufection visar sig vara ett enkelt och mindre demaENDE metod för DNA-leverans in vivo, den optimala mängden av DNA för olika gener och tiderna att sticka huden måste vara noggrant optimerade för att erhålla reproducerbara resultat.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Accu Handy Needle</td>
			<td>Accu</td>
			<td>36Gx0.5</td>
			<td>Medical device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NairTM Lotion</td>
			<td>Church &#38; Dwight</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Use to remove hair</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Xyline substitute</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>6764506</td>
			<td>Deparaffinization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Avertin (2,2,2-Tribromethanol)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T4,840-2</td>
			<td>Anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-methyl-2-butanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>152463</td>
			<td>Solvent for the dissolution of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DifcoTM LB broth, Miller</td>
			<td>BD</td>
			<td>244620</td>
			<td>Propagation and maintenance of E. coli for molecular biology</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAGEN&#9415; Plasmid Midi Kit</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>12143</td>
			<td>Purification of plasmid DNA from E. coli</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse IL-15/IL-15R Complex ELISA Ready-SET-Go kit</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>88-7215</td>
			<td>Measure IL-15 protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse Ly6G</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>127601</td>
			<td>Antibody used for immunohistochemical stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-mouse Ki-67</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>14-5698-80</td>
			<td>Antibody used for immunohistochemical stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Simple Stain Mouse MAXPO (Rat)</td>
			<td>Nichirei Biosciences</td>
			<td>414341F</td>
			<td>Reagent to block background signal in mouse-on-mouse stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Peroxidase (HRP) Substrate Kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td>Peroxidse substrate for immunohistochemical stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra V block</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>TA-060-UB</td>
			<td>Reduce nonspecific background staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl green</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M8884</td>
			<td>Nuclear staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vecta MountTM</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>M-5000</td>
			<td>Permanently preserving histochemical stains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail tablets</td>
			<td>Roche</td>
			<td>04-693-116-001</td>
			<td>Inhibit protease activity in cell lysate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aldara cream</td>
			<td>3M Parmaceuticals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>5% imiquimod cream</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bessman Tissue Pulverizer</td>
			<td>Spectrum Labs</td>
			<td>189475</td>
			<td>Use to pulverize skin tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABI7900HT cycler</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>N/A</td>
			<td>quantitative real-time PCR assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camcorder</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>HDC-SD60</td>
			<td>Image documentation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axio Scope.A1</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Bright-field microscopy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ScanScope&#9415; XT</td>
			<td>Aperio</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Whole-field image scanner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph&#9415; Research Imaging</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Quantitative analysis of skin thickness and immune-reactive cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of an economical dna delivery system by "acufection" and its application to skin research

Dysreglering av immunsvar i huden är förknippad med många mänskliga hudsjukdomar. Direkt överföring av immunrelaterade gener i hudvävnad är en fascinerande metod för att undersöka immunmodulering av kutan inflammation vid musmodeller av mänskliga sjukdomar. Här presenterar vi en kostnadseffektiv protokoll som levereras naket DNA i mus huden och leder till transgen uttryck. Metoden är myntade &quot;acufection&quot;, som betecknar acu punkteringsmedierad DNA-trans-fection. Att utföra acufection ades mushud först infunderas med DNA i fosfatbuffrad saltlösning (PBS) och sedan prickas lätt med en bunt av akupunkturnålar för att underlätta absorptionen av DNA och transfektion in i celler. Plasmid-DNA antagligen tas upp av keratinocyter och dendritiska celler (DC) i huden och uttrycks in i protein. Mekanisk prick med nålar i sig inte orsaka hudskador eller framkalla keratinocytdifferentieringen aktivering. Uttrycketav de transfekterade generna detekterades i huden vid både transkriptionella och translationella nivåer efter acufection under 2 dagar och underhållas upp till 7 dagar. Det primära målet för utvecklingen av denna acufection metod var att undersöka en tidigare odefinierad isoform av IL-15. Användning av denna metod, en alternativt splitsad IL-15-isoformen med delvis borttagen exon 7 (IL-15ΔE7) uttrycktes i huden och behandlas därefter med en Toll-liknande receptor 7 (TLR7) agonist, imiquimod (IMQ), för att inducera inflammation. Acufection levererade IL-15ΔE7 i huden tryckte keratinocytproliferation, epidermal tjocklek och neutrofil rekrytering i IMQ-inducerad kutan inflammation. Med ökande intresse i att identifiera de regulatoriska mekanismerna för kutan inflammation, beskrivna protokollet här ger en kostnadseffektiv och mångsidig alternativ till genkanonen systemet eller microseeding för DNA-leverans in vivo. Det kan eventuellt tillåta upptäckten av funktionen av en nygenen i huden eller för att utreda ny behandling för kutana sjukdomar.

Medan vissa rodnad var tydlig inom den första timmen efter prickning med akupunkturnålar, huden rensas på dag 2 och ingen negativ hudreaktion upp till dag 7 observerades efter prickning (Figur 2A). Nål prickning inducerade mycket låg nivå av epidermal orthokeratosis och minimal dermal infiltration av H &amp; E-analys jämfört med obehandlad hud (Figur 2B). Den epidermal tjocklek (figur 2C) oc...

Watch this Scientific Journal Video about Development of an Economical DNA Delivery System by "Acufection" and its Application to Skin Research at JoVE.com

Development of an Economical DNA Delivery System by "Acufection" and its Application to Skin Research

Detta protokoll är ett kostnadseffektivt alternativ för att uttrycka naket plasmid-DNA i mushud. Det övergripande målet med protokollet är att leverera immunrelaterade gener i hudvävnad för att avgränsa den funktionella rollen för en specifik gen i kutan inflammation.

Utveckling av en ekonomisk DNA Delivery System av &quot;Acufection&quot; och dess tillämpning på Skin Research

Dysregulation of immune response in skin is associated with numerous human skin disorders. Direct transfer of immune-related genes into skin tissue is a ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Development of a Negative Selectable Marker for Entamoeba histolytica

Development of a Negative Selectable Marker for Entamoeba histolytica

Utveckling av en negativ markör för Entamoeba histolytica</em

Entamoeba histolytica is the causative agent of amebiasis and infects up to 10% of the world's population. The molecular techniques that have enabled the ...

Development of Cell-type specific anti-HIV gp120 aptamers for siRNA delivery

Utveckling av celltyp specifika anti-HIV gp120 aptamers för siRNA leverans

The global epidemic of infection by HIV has created an urgent need for new classes of antiretroviral agents. The potent ability of small interfering ...

Application of a Mouse Ligated Peyer&#x2019;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Application of a Mouse Ligated PeyerÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Tillämpning av en mus knyts ihop Peyer s Patch Intestinal Loop-analys för att utvärdera Bakteriell Upptag av M celler

The inside of our gut is inhabited with enormous number of commensal bacteria. The mucosal surface of the gastrointestinal tract is continuously exposed ...

Purification and Visualization of Lipopolysaccharide from Gram-negative Bacteria by Hot Aqueous-phenol Extraction

Rening och visualisering av lipopolysackarid från Gram-negativa bakterier genom varm vattenhaltig fenol Extraktion

Lipopolysaccharide (LPS)  is a major component of Gram-negative bacterial outer membranes. It is a tripartite molecule consisting of  lipid A, which is ...

Establishment of an In vitro System to Study Intracellular Behavior of Candida glabrata in Human THP-1 Macrophages

Establishment of an In vitro System to Study Intracellular Behavior of Candida glabrata in Human THP-1 Macrophages

Inrättande av en<em&gt; In vitro</em&gt; System för att studera intracellulära Beteende<em&gt; Candida glabrata</em&gt; I Human THP-1 makrofager

A cell culture model system, if a close mimic of host environmental conditions, can serve as an inexpensive, reproducible and easily manipulatable ...

Application of Fluorescent Nanoparticles to Study Remodeling of the Endo-lysosomal System by Intracellular Bacteria

Tillämpning av fluorescerande nanopartiklar för att studera Ombyggnad av Endo-lysosomala System från intracellulära bakterier

Fluorescent nanoparticles (NPs) with desirable chemical, optical and mechanical properties are promising tools to label intracellular organelles. Here, we ...

Development of an in vitro model system for studying the interaction of Equus caballus IgE with its high-affinity receptor Fc&#949;RI

Development of an in vitro model system for studying the interaction of Equus caballus IgE with its high-affinity receptor FcÃƒÅ½Ã‚ÂµRI

Utveckling av ett<em&gt; In vitro</em&gt; Modellsystem för att studera interaktionen mellan<em&gt; Equus</em&gt;<em&gt; Caballus</em&gt; IgE med sin högaffinitetsreceptor FcsRI

The interaction of IgE with its high-affinity Fc receptor (Fc&#949;RI) followed by an antigenic challenge is the principal pathway in IgE mediated ...

The Mesenteric Lymph Duct Cannulated Rat Model: Application to the Assessment of Intestinal Lymphatic Drug Transport

Den kröslymfknutor Duct kanylerad Rat Model: Ansökan om bedömning av Intestinal Lymfatisk Drug Transport

The intestinal lymphatic system plays key roles in fluid transport, lipid absorption and immune function. Lymph flows directly from the small intestine ...

Cultivation of Heligmosomoides Polygyrus: An Immunomodulatory Nematode Parasite and its Secreted Products

Cultivation of Heligmosomoides Polygyrus: An Immunomodulatory Nematode Parasite and its Secreted Products

Odling av<em&gt; Heligmosomoides Polygyrus:</em&gt; En immunoreglerande Nematode Parasite och dess utsöndrade produkter

Heligmosomoides polygyrus (formerly known as Nematospiroides dubius, and also referred to by some as H. bakeri) is a gastrointestinal helminth that ...

Development of an Antigen-driven Colitis Model to Study Presentation of Antigens by Antigen Presenting Cells to T Cells

Utveckling av ett antigen-driven kolit modell för att studera Presentation av antigener genom antigenpresenterande celler till T-celler

Inflammatory bowel disease (IBD) is a chronic inflammation which affects the gastrointestinal tract (GIT). One of the best ways to study the immunological ...