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•
08:35 min
January 7th, 2019
DOI :
10.3791/55345-v
Chapters
0:04
Title
0:38
Pan-leukocyte Preparation and Immune Synapse Induction and Staining
2:45
Flow Cytometric Image Acquisition
3:39
Data Analysis
5:54
Results: Representative CD3 and F-actin Immune Synapse Enrichment Analysis
7:22
Conclusion
Transcript
这种方法可以帮助回答人类免疫学领域的关键问题,例如白细胞之间在分子和细胞水平上如何进行交流。该技术的主要优点是,未净化的人类T细胞可以在相对较短的时间内分析外体。演示这个程序将是海宁基希格斯纳,一个技术人员从我们的实验室。
首先将一毫升新鲜绘制的人类外周血液与 30 毫升的 ACK 解结缓冲液混合在 50 毫升锥形管中。在室温下8分钟后,用PBS填充管内进行离心洗涤,并在培养培养的两毫升中重新灌装颗粒,在37摄氏度下孵育60分钟。在孵育结束时,将五倍10的金黄色葡萄球菌肠毒素B
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Summary
在这里, 我们描述了一个完整的工作流程, 用于定性和定量分析免疫突触之间的原代人类 t 细胞和抗原呈现细胞。该方法基于成像流式细胞仪, 允许在相对较短的时间内采集和评估数千张细胞图像。
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