Name: a device for performing cell migration/wound healing in a 96-well plate
Uploaded: 2017-03-07T15:00:00
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लेखक इस wounder के प्रोटोटाइप बनाने में श्री टैम पो Leung, श्री वाँग ची परिजनों और विज्ञान संकाय कार्यशाला के तकनीकी स्टाफ, हांगकांग बैपटिस्ट विश्वविद्यालय, अपने तकनीकी कौशल के लिए और सलाह का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं।

1. wounder के कुछ हिस्सों को परिचय (चित्रा 1) <ol><li> समान दूरी पर लोग घायल हो गए पिन फिक्सिंग से पिन धारक तैयार करें। विंदुक युक्तियाँ पकड़ो और समायोज्य लोग घायल हो गए पिन ऊपर और नीचे ले जाकर टिप ऊंचाई समायोजित कर?...

<ol>
	<li>Friedl, P., Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour-cell+invasion+and+migration:+diversity+and+escape+mechanisms.">Tumour-cell invasion and migration: diversity and escape mechanisms.</a> Nat Rev Cancer. 3 (5), 362-374 (2003).</li><li>Friedl, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prespecification+and+plasticity:+shifting+mechanisms+of+cell+migration.">Prespecification and plasticity: shifting mechanisms of cell migration.</a> Curr Opin Cell Biol. 16 (1), 14-23 (2004).</li><li>Lampugnani, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+into+a+wounded+area+in+vitro.">Cell migration into a wounded area in vitro.</a> Methods Mol Biol. 96, 177-182 (1999).</li><li>Sholley, M. M., Gimbrone, M. A., Cotran, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+migration+and+replication+in+endothelial+regeneration:+a+study+using+irradiated+endothelial+cultures.">Cellular migration and replication in endothelial regeneration: a study using irradiated endothelial cultures.</a> Lab Invest. 36 (1), 18-25 (1977).</li><li>Gotlieb, A. I., Spector, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migration+into+an+in+vitro+experimental+wound:+a+comparison+of+porcine+aortic+endothelial+and+smooth+muscle+cells+and+the+effect+of+culture+irradiation.">Migration into an in vitro experimental wound: a comparison of porcine aortic endothelial and smooth muscle cells and the effect of culture irradiation.</a> Am J Pathol. 103 (2), 271-282 (1981).</li><li>Chen, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+migration+chip+for+chemotaxis-based+microfluidic+selection+of+heterogeneous+cell+populations.">Single-cell migration chip for chemotaxis-based microfluidic selection of heterogeneous cell populations.</a> Sci Rep. 18 (5), 9980 (2015).</li><li>Yarrow, J. C., Periman, Z. E., Westwood, N. J., Mitchison, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+cell+migration+assay+using+scratch+wound+healing,+a+comparsion+of+image-based+readout+methods.">A high-throughput cell migration assay using scratch wound healing, a comparsion of image-based readout methods.</a> BMC Biotechnol. 4, 21 (2004).</li><li>Lauder, H., Frost, E. E., Hiley, C. R., Fan, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+repair+process+involved+in+the+repair+of+a+cell+monolayer+using+an+in+vitro+model+of+mechanical+injury.">Quantification of the repair process involved in the repair of a cell monolayer using an in vitro model of mechanical injury.</a> Angiogenesis. 2 (1), 67-80 (1998).</li><li>Yue, P. Y. K., Leung, E. P. Y., Mak, N. K., Wong, R. N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+quantifying+cell+migration/+wound+healing+in+96-well+plates.">A simplified method for quantifying cell migration/ wound healing in 96-well plates.</a> J. Biomol Screen. 15 (4), 427-433 (2010).</li><li>Yue, P. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elucidation+of+the+mechanisms+underlying+the+angiogenic+effects+of+ginsenoside+Rg(1)+in+vivo+and+in+vitro.">Elucidation of the mechanisms underlying the angiogenic effects of ginsenoside Rg(1) in vivo and in vitro.</a> Angiogenesis. 8 (3), 205-216 (2005).</li><li>Kwok, H. H., Chan, L. S., Poon, P. Y., Yue, P. Y., Wong, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ginsenoside-Rg1+induces+angiogenesis+by+the+inverse+regulation+of+MET+tyrosine+kinase+receptor+expression+through+miR-23a.">Ginsenoside-Rg1 induces angiogenesis by the inverse regulation of MET tyrosine kinase receptor expression through miR-23a.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 287 (3), 276-283 (2015).</li></ol>

हमारे सेल wounder पारंपरिक सेल प्रवास assays की समस्याओं को सुलझाने में कई अनूठी विशेषताएं है। 8 चैनल यांत्रिक सेल wounder एक लंबी उम्र कि autoclaving द्वारा निष्फल किया जा सकता है के साथ उच्च ग्रेड स्टेनलेस स्टील (स्टील 304) ?...

सेल प्रवास ऐसी embryogenesis, न्यूरोजेनेसिस, angiogenesis, घाव भरने, श्लैष्मिक मरम्मत, सामान्य विकास और रोग की स्थिति 1 के तहत उपकला-mesenchymal-संक्रमण के रूप में सेलुलर प्रक्रियाओं में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। यह एक जटिल प्रक्रिया है जो संकेत अणु बातचीत, सेल ध्रुवीकरण, cytoskeletal पुनर्गठन, मैट्रिक्स remodeling, झिल्ली फलाव और गतिशील सेल सेल आसंजन मॉडुलन 2 सहित कई अंतर और अंतर सेलुलर घटनाओं के समन्वय शामिल है। सेल प्रवास का अध्ययन करके, डिस्कवरी और रसायन या biomolecules सेल आंदोलन और इससे संबंधित जैव रासायनिक रास्ते के लिए अग्रणी के सत्यापन निर्धारित किया जा सकता है। यह मौलिक प्रक्रिया ऐसी बीमारी के इलाज और दवा को निशाना बनाने के रूप में विभिन्न अनुप्रयोगों के लिए एक प्रॉक्सी के रूप में लाभदायक इस्तेमाल किया जा सकता है। लोग घायल हो गए परख सेल प्रवास assays के 3 में से एक है। इधर, एककोशिकाओं के अलग-अलग नमूना आंशिक रूप से यांत्रिक तरीकों से हटा दिया जाएगा एक ऐसा क्षेत्र है जहां denuded कोशिकाओं क्षेत्र को कवर की ओर पलायन होगा उत्पादन करने के लिए। एक विशेष समय बिंदु पर वसूली का प्रतिशत नजर रखी जाएगी। जब नमूनों की बड़ी संख्या को संभालने, इस तरह की प्रयोगात्मक लागत और नमूने के भीतर पार संदूषण के रूप में मुद्दों समस्याग्रस्त किया जा सकता है। हालांकि कई वाणिज्यिक उपकरण और assays सेल प्रवास 4, 5, 6 का अध्ययन करने के लिए उपलब्ध हैं, उनमें से कई के लिए आवश्यक महंगा और अत्याधुनिक उपकरणों और सुधार अब भी जरूरत है। इन कारणों के लिए, एक 8 चैनल यांत्रिक सेल wounder (चित्रा 1) विकसित की है। हमारे 8 चैनल यांत्रिक सेल wounder उपर्युक्त समस्याओं को सुलझाने में कई अनूठी विशेषताएं शामिल किया गया है। यह लचीलापन सेल प्रवास / 96 अच्छी तरह से संस्कृति की थाली प्रारूप में assays लोग घायल हो गए प्रदर्शन करने के लिए प्रदान करता है। समायोज्य गुजरातiding बार डिजाइन सुनिश्चित करता है कि खरोंच क्षेत्र में अच्छी तरह से प्रत्येक के केंद्रीय स्थिति में है। इसके अलावा, मार्गदर्शक बारों की ऊंचाई समायोजित किया जा सकता है ताकि wounder संस्कृति प्लेटों के विभिन्न ब्रांडों के लिए लागू है। अंत में, समायोज्य लोग घायल हो गए पिन डिजाइन एक भी संस्कृति की थाली सतह एक साथ और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य लोग घायल हो गए 7, 8 को प्राप्त करने के साथ पिपेट सुझावों के संपर्क में सक्षम बनाता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-well cell culture plate</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>167008</td>
			<td>Other brands of 96-well cell culture plate can also be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P10 pipette tips</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>301-03-051</td>
			<td>Short P10 pipette tip is more easy to create a clear wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wounder</td>
			<td>R&#38;P Technology Limited</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium 199</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2520-1L</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>26140079</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt from porcine intestinal mucosa</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3393</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin from bovine skin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G9391</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a device for performing cell migration/wound healing in a 96-well plate

सेल प्रवास / लोग घायल हो गए परख सेल प्रवास और इस तरह के angiogenesis और ट्यूमर मेटास्टेसिस के रूप में अन्य जैविक प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए आमतौर पर इस्तेमाल किया विधि है। इस परख में, कोशिकाओं को एक मिला हुआ monolayer फार्म के लिए बड़े हो रहे हैं और एक यांत्रिक घाव एक डिवाइस के साथ scratching द्वारा बनाई गई है। तब denuded क्षेत्र की ओर कोशिकाओं के प्रवास दर इमेजिंग द्वारा नजर रखी जा सकती है। हमारे 8 चैनल यांत्रिक wounder सेल प्रवास परख के साथ जुड़ी समस्याओं के सबसे निपटने के लिए बनाया गया है। सबसे पहले, हमारे wounder आसानी से autoclaving द्वारा या आम कीटाणुनाशक के साथ निष्फल किया जा सकता है। दूसरे, व्यक्तिगत समायोज्य पिन भी सेल संस्कृति की थाली इतना है कि तेज और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य घाव बनाया जा सकता है के साथ संपर्क की अनुमति। तीसरा, wounder के दोनों किनारों पर मार्गदर्शक सलाखों अच्छी तरह से प्रत्येक में लगातार लोग घायल हो गए स्थिति जाता है। घायल आगे wounder की बेहतर हैंडलिंग प्रदान कर सकते हैं के रूप में अच्छी तरह से पार contaminat कम से कम करने के लिए डिस्पोजेबल प्लास्टिक पिपेट सुझावों का उपयोगआयन। अंत में, अपने सेल wounder मानक 96 अच्छी तरह से संस्कृति प्लेट का उपयोग सेल प्रवास परख प्रदर्शन के लिए एक उपयोगकर्ता के अनुकूल और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य डिवाइस के साथ शोधकर्ताओं प्रदान कर सकते हैं।

यह 8 चैनल यांत्रिक wounder आदेश सेल प्रवास परख प्रदर्शन करने के लिए एक सेल monolayer खरोंच करने के लिए निर्माण किया है। यह एक उपयोगकर्ता के अनुकूल डिवाइस है कि विशेष प्रशिक्षण के बिना एक मिनट से भी कम स...

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A Device for Performing Cell Migration/Wound Healing in a 96-Well Plate

यहाँ, हम एक 96 अच्छी तरह से सेल संस्कृति की थाली पर एक अर्द्ध उच्च throughput सेल प्रवास परख प्रदर्शन करने के लिए एक प्रोटोकॉल उपस्थित थे। इस प्रोटोकॉल एक सेल monolayer पर लगातार खरोंच घावों को बनाने के लिए एक तेज, सरल और किफायती तरीका है।

एक 96 अच्छी तरह से थाली में सेल प्रवास / घाव भरने प्रदर्शन के लिए एक डिवाइस

The cell migration/wounding assay is a commonly used method to study cell migration and other biological processes, such as angiogenesis and tumor ...

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