Name: a device for performing cell migration/wound healing in a 96-well plate
Uploaded: 2017-03-07T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Device for Performing Cell Migration/Wound Healing in a 96-Well Plate at JoVE.com

Yazarlar bu wounder prototipini yapımında Sayın Tam Po Leung, Bay Wong Chi Kin ve teknik becerileri Fen Fakültesi Atölyesi teknik personel, Hong Kong Baptist Üniversitesi ve danışmanlık teşekkür etmek istiyorum.

Wounder parçaları 1. Giriş (Şekil 1) <ol><li> eşit mesafelerde yaralama işaretçilerine sabitleyerek pim tutucu hazırlayın. pipet uçları tutun ve yukarı ve aşağı ayarlanabilir yaralama işaretçilerine hareket ettirerek ucu yüksekliğini ayarlayın. </li><li> 96-kuyu kültür plakaları farklı markalarda ayarlanabilir rehberlik-bar Fit ve yaralama alanı sabit bir pozisyonda olduğundan emin olun. </li><li> altıgen vidayı sıkarak ayarlanabilir yaralama pimini sabitleyin. iki ucunda altıgen başlı ...

<ol>
	<li>Friedl, P., Wolf, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumour-cell+invasion+and+migration:+diversity+and+escape+mechanisms.">Tumour-cell invasion and migration: diversity and escape mechanisms.</a> Nat Rev Cancer. 3 (5), 362-374 (2003).</li><li>Friedl, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prespecification+and+plasticity:+shifting+mechanisms+of+cell+migration.">Prespecification and plasticity: shifting mechanisms of cell migration.</a> Curr Opin Cell Biol. 16 (1), 14-23 (2004).</li><li>Lampugnani, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+migration+into+a+wounded+area+in+vitro.">Cell migration into a wounded area in vitro.</a> Methods Mol Biol. 96, 177-182 (1999).</li><li>Sholley, M. M., Gimbrone, M. A., Cotran, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+migration+and+replication+in+endothelial+regeneration:+a+study+using+irradiated+endothelial+cultures.">Cellular migration and replication in endothelial regeneration: a study using irradiated endothelial cultures.</a> Lab Invest. 36 (1), 18-25 (1977).</li><li>Gotlieb, A. I., Spector, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Migration+into+an+in+vitro+experimental+wound:+a+comparison+of+porcine+aortic+endothelial+and+smooth+muscle+cells+and+the+effect+of+culture+irradiation.">Migration into an in vitro experimental wound: a comparison of porcine aortic endothelial and smooth muscle cells and the effect of culture irradiation.</a> Am J Pathol. 103 (2), 271-282 (1981).</li><li>Chen, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+migration+chip+for+chemotaxis-based+microfluidic+selection+of+heterogeneous+cell+populations.">Single-cell migration chip for chemotaxis-based microfluidic selection of heterogeneous cell populations.</a> Sci Rep. 18 (5), 9980 (2015).</li><li>Yarrow, J. C., Periman, Z. E., Westwood, N. J., Mitchison, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+cell+migration+assay+using+scratch+wound+healing,+a+comparsion+of+image-based+readout+methods.">A high-throughput cell migration assay using scratch wound healing, a comparsion of image-based readout methods.</a> BMC Biotechnol. 4, 21 (2004).</li><li>Lauder, H., Frost, E. E., Hiley, C. R., Fan, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+the+repair+process+involved+in+the+repair+of+a+cell+monolayer+using+an+in+vitro+model+of+mechanical+injury.">Quantification of the repair process involved in the repair of a cell monolayer using an in vitro model of mechanical injury.</a> Angiogenesis. 2 (1), 67-80 (1998).</li><li>Yue, P. Y. K., Leung, E. P. Y., Mak, N. K., Wong, R. N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+quantifying+cell+migration/+wound+healing+in+96-well+plates.">A simplified method for quantifying cell migration/ wound healing in 96-well plates.</a> J. Biomol Screen. 15 (4), 427-433 (2010).</li><li>Yue, P. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elucidation+of+the+mechanisms+underlying+the+angiogenic+effects+of+ginsenoside+Rg(1)+in+vivo+and+in+vitro.">Elucidation of the mechanisms underlying the angiogenic effects of ginsenoside Rg(1) in vivo and in vitro.</a> Angiogenesis. 8 (3), 205-216 (2005).</li><li>Kwok, H. H., Chan, L. S., Poon, P. Y., Yue, P. Y., Wong, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ginsenoside-Rg1+induces+angiogenesis+by+the+inverse+regulation+of+MET+tyrosine+kinase+receptor+expression+through+miR-23a.">Ginsenoside-Rg1 induces angiogenesis by the inverse regulation of MET tyrosine kinase receptor expression through miR-23a.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 287 (3), 276-283 (2015).</li></ol>

Bizim hücre wounder geleneksel hücre göçü deneyleri sorunlarını çözmede birçok benzersiz özelliklere sahiptir. 8-kanallı mekanik hücre wounder otoklav ile sterilize edilebilir, uzun ömürlü, yüksek dereceli paslanmaz çelik (çelik 304) yapılmıştır. piyasada bulunan 96 oyuklu kültür plakaları neredeyse tüm ticari markalar için ayarlanabilir kılavuz çubuğunun bu mekanik hücre wounder kullanılabilir. Ayarlanabilir kılavuz çubuğunun tasarımı da kazıma alanı her bir merkezinde olmasını...

Hücre göçü gibi embriyojenez, nöron, anjiyogenez, yara iyileşmesi, mukozal tamiri, normal gelişim ve hastalık durumuna 1 altında epitelyal-mezenkimal-geçişler gibi hücresel süreçleri de önemli bir rol oynar. Bu sinyal molekül etkileşimleri, hücre kutuplaşma, hücre iskeleti yeniden, matris yeniden membran çıkıntı ve dinamik hücre-hücre yapışması modülasyonu 2 olmak üzere çok sayıda içi ve hücresel olayların koordinasyonunu içeren karmaşık bir süreçtir. hücre göçü inceleyerek, hücre hareketi ve bununla ilgili biyokimyasal yollar yol açan kimyasal madde veya biyomoleküllerin keşif ve doğrulama tespit edilebilir. Bu temel süreç böyle hastalık tedavisi ve ilaç hedefleme gibi çeşitli uygulamalar için bir vekil olarak yararlı bir şekilde kullanılabilir. Yaralama deney hücre göçü deneyleri 3 biridir. Burada, birhücrelerin tek tek örnek, kısmen hücre alanı kapsayacak şekilde göç bir soyulmuş alanı üretmek için mekanik araçlar ile kaldırılır. Belirli bir zaman noktasında geri kazanım yüzdesi izlenecektir. Örneklerin çok sayıda tutarken, bu tür örneklerin içinde deneysel maliyet ve çapraz kontaminasyon gibi konular sorunlu olabilir. Pek çok ticari araçlar ve deneyler, hücre göçü 4, 5, 6, çalışmak için uygun olmakla birlikte, bunların çok pahalı ve karmaşık ekipmanlar gerekmektedir ve geliştirmeler de ihtiyaç vardır. Bu nedenlerden dolayı, 8-kanallı mekanik hücre wounder (Şekil 1) olarak geliştirilmiştir. Bizim 8-kanal mekanik hücre wounder yukarıda belirtilen sorunların çözümünde birçok benzersiz özelliklere yer vermiş. Bu 96 gözlü kültür plakası formatında tahlilleri yaralama / hücre göçü gerçekleştirmek için esneklik sağlar. ayarlanabilir guiding bar tasarımı karalama alanı de her merkezi konumda olmasını sağlar. wounder kültür plakalarının çeşitli markalar için geçerlidir, böylece aynı zamanda, yönlendirme çubuklarının yüksekliğinin ayarlanabilir. Son olarak, ayarlanabilir yaralama pimi tasarımı aynı anda ve tekrarlanabilir yaralama 7, 8 ulaşmak için kültür plaka yüzeyi ile pipet uçları eşit teması sağlar.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-well cell culture plate</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>167008</td>
			<td>Other brands of 96-well cell culture plate can also be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P10 pipette tips</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>301-03-051</td>
			<td>Short P10 pipette tip is more easy to create a clear wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wounder</td>
			<td>R&#38;P Technology Limited</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium 199</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M2520-1L</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>26140079</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium salt from porcine intestinal mucosa</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3393</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelatin from bovine skin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G9391</td>
			<td>For cell culture of human umbilical vein endothelial cells. 
			Use appropirate culture medium and condition for other type of cells.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a device for performing cell migration/wound healing in a 96-well plate

Hücre göçü / tahlil yaralama hücre göçü ve anjiyogenez ve tümör metastazı gibi diğer biyolojik süreçleri incelemek için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir. Bu tahlilde, hücreler konfluent tek tabaka oluşturmak için büyütülür ve mekanik bir yara bir cihaz ile çizilerek oluşturulur. Sonra soyulmuş alanına doğru hücrelerinin göç hızı görüntüleme ile izlenebilir. Bizim 8 kanallı mekanik wounder hücre göçü deneyi ile ilişkili sorunların çoğunu çözmek için tasarlanmıştır. Birincisi, bizim wounder kolayca otoklav ile veya ortak dezenfektanlar ile sterilize edilebilir. İkinci olarak, tek tek ayarlanabilen pimleri daha keskin ve tekrarlanabilir yaralar oluşturulabilir, böylece hücre kültür plakası ile temas etmesi. Üçüncü olarak, wounder her iki tarafında kılavuz çubukları her bir tutarlı yaralama pozisyonunu garantiler. ayrıca wounder daha iyi yol tutuşu sağlayabilir yanı sıra çapraz contaminat en aza indirmek için yaralama için tek kullanımlık plastik pipet uçlarının kullanılmasıiyon. Sonuç olarak, hücre wounder standart 96 oyuklu bir kültür plakası kullanarak hücre göçü deneyi gerçekleştirmek için bir kullanıcı dostu ve yeniden üretilebilir bir cihazla araştırmacılar sağlayabilir.

Bu 8-kanal mekanik wounder hücre göçü deneyi gerçekleştirmek için hücre tek tabaka kazımak için imal edilir. Bu özel eğitim olmadan bir dakikadan az 96 oyuklu plakalarda hücre tırmalamak analizleri yapabilir kullanıcı dostu bir cihazdır. Bu wounder yaklaşık 600 um&#39;lik bir düzgün genişlikte ve keskin kenarlı hücre tekli katmanları üzerinde yara alanı neden olabilir (Şekil 5 ve 6). Yaraların genişliği pipet uçları marka...

Watch this Scientific Journal Video about A Device for Performing Cell Migration/Wound Healing in a 96-Well Plate at JoVE.com

A Device for Performing Cell Migration/Wound Healing in a 96-Well Plate

Burada, bir 96-yuvalı hücre kültürü plakasının bir yarı-yüksek verimli hücre göçü deneyi gerçekleştirmek için bir protokol mevcut. Bu protokol, bir hücre tek tabaka üzerinde tutarlı çizik yaraları oluşturmak için hızlı, basit ve ekonomik bir yöntemdir.

96 oyuklu bir plaka içerisinde hücre gücü / yara iyileşme gerçekleştirmek için bir cihaz

The cell migration/wounding assay is a commonly used method to study cell migration and other biological processes, such as angiogenesis and tumor ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Understanding Early Organogenesis Using a Simplified In Situ Hybridization Protocol in Xenopus

Understanding Early Organogenesis Using a Simplified In Situ Hybridization Protocol in Xenopus

Anlamak Basitleştirilmiş kullanma Erken Organogenez<em&gt; In Situ</emIçinde&gt; Hibridizasyon Protokolü<em&gt; Ksenopus</em

Organogenesis is the study of how organs are specified and then acquire their specific shape and functions during development.  The Xenopuslaevis embryo ...

Automated Quantification of Hematopoietic Cell &#8211; Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Automated Quantification of Hematopoietic Cell ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â‚¬Å“ Stromal Cell Interactions in Histological Images of Undecalcified Bone

Hematopoetik Hücre Otomatik Ölçümü - undekalsifiye Kemik histolojik Görüntüler stromal hücre etkileşimleri

Confocal microscopy is the method of choice for the analysis of localization of multiple cell types within complex tissues such as the bone marrow. ...

Scalable 96-well Plate Based iPSC Culture and Production Using a Robotic Liquid Handling System

Bir Robotik Sıvı İşleme Sisteminin Kullanılması Ölçeklenebilir 96-iyi iPSC Kültür Bazlı Plaka ve Üretim

Continued advancement in pluripotent stem cell culture is closing the gap between bench and bedside for using these cells in regenerative medicine, drug ...

Establishment of a Clinically Relevant Ex Vivo Mock Cataract Surgery Model for Investigating Epithelial Wound Repair in a Native Microenvironment

Establishment of a Clinically Relevant Ex Vivo Mock Cataract Surgery Model for Investigating Epithelial Wound Repair in a Native Microenvironment

Bir Klinik İlgili kurulması<em&gt; Ex Vivo</emYerli mikroçevresinin Epitelyal Yara Tamir incelenmesi için&gt; Mock Katarakt Cerrahisi Modeli

The major impediment to understanding how an epithelial tissue executes wound repair is the limited availability of models in which it is possible to ...

Microinjection for Transgenesis and Genome Editing in Threespine Sticklebacks

Threespine Sticklebacks içinde Transgenesis ve Genom Kurgu Mikroenjeksiyon

The threespine stickleback fish has emerged as a powerful system to study the genetic basis of a wide variety of morphological, physiological, and ...

Adenoviral Gene Therapy for Diabetic Keratopathy: Effects on Wound Healing and Stem Cell Marker Expression in Human Organ-cultured Corneas and Limbal Epithelial Cells

Diyabetik Keratopatide için adenoviral Gen Tedavisi: İnsan Organ-kültürlü kornealar ve Limbal Epitel Hücreleri Yara İyileşmesi Üzerine Etkileri ve Hücre Marker İfade Kök

The goal of this protocol is to describe molecular alterations in human diabetic corneas and demonstrate how they can be alleviated by adenoviral gene ...

Rapid Isolation of BMPR-IB+ Adipose-Derived Stromal Cells for Use in a Calvarial Defect Healing Model

BMPR-IB + hızlı İzolasyon Kalvaryum Hata Şifa Modeli Kullanılan Stromal Hücreleri yağ kaynaklı

Invasive cancers, major injuries, and infection can cause bone defects that are too large to be reconstructed with preexisting bone from the patient's own ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Vasküler Endotelyal Kök Hücrelerin Damar Oluşumunu Görselleştirmek İçin Yeni Bir Göğüs Göğsü Transplantasyon Tekniği

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Generation of Scaffold-free, Three-dimensional Insulin Expressing Pancreatoids from Mouse Pancreatic Progenitors In Vitro

Generation of Scaffold-free, Three-dimensional Insulin Expressing Pancreatoids from Mouse Pancreatic Progenitors In Vitro

İskele-free, üç boyutlu insülin ifade Pancreatoids fare pankreas ataları Vitro gelen nesil

The pancreas is a complex organ composed of many different cell types that work together to regulate blood glucose homeostasis and digestion. These cell ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Düğüm ve Notochordal plaka Gastrulating fare embriyo Tarama elektron mikroskobu ve bütün Dağı ayirt kullanarak görselleştirme

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...