בין שיטות שונות להערכת ביטוי גנים, רצף תפוקה גבוהה של RNA, או RNA-seq. הוא אטרקטיבי במיוחד, כפי שניתן לבצע ולנתח מבלי להסתמך על מידע גנומי זמין מראש. במהלך RNA-seq, RNA מבודד מדגימות עניין משמש ליצירת ספריית DNA, אשר לאחר מכן מוגברת ורצף. בסופו של דבר, RNA-seq יכול לקבוע אילו גנים באים לידי ביטוי, את רמות הביטוי שלהם ואת נוכחותם של כל תמלילים שלא היו ידועים קודם לכן.
כאן, JoVE מציג את העקרונות הבסיסיים מאחורי RNA-seq. לאחר מכן אנו דנים בצעדים הניסיוניים והאנליטיים של פרוטוקול RNA-seq כללי. לבסוף, אנו בוחנים כיצד חוקרים משתמשים כיום ב-RNA-seq, למשל, כדי להשוות ביטוי גנים בין דגימות ביולוגיות שונות, או כדי לאפיין אינטראקציות בין חלבון לרנ"א.
ריצוף RNA, או RNA-seq, היא טכניקה שיכולה לספק מידע על הרצף והכמות של כל RNA המבוטא, המכונה "שעתוק", באוכלוסיית תאים. שלא כמו שיטות אחרות ליצירת פרופיל ביטוי כגון microarrays, הכוללות בדיקות עבור רצפי RNA ידועים, RNA-seq יכול פרופיל ביטוי גנים של אורגניזמים עם גנומים לא רצפים. בנוסף, RNA-seq יכול למדוד במדויק טווח ג...
Skip to...
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved