Name: fluorescent dye labeling of erythrocytes and leukocytes for studying the flow dynamics in mouse retinal circulation
Uploaded: 2017-07-03T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fluorescent Dye Labeling of Erythrocytes and Leukocytes for Studying the Flow Dynamics in Mouse Retinal Circulation at JoVE.com

Het onderzoeksproject werd gefinancierd uit New Investigator grant van de National Medical Research Council (NMRC), Singapore. Het team wil graag de onderzoeksopleiding ontvangen die aan Dr Agrawal bij het Institute of Ophthalmology (IoO), University College London (UCL) is verstrekt aan de National Medical Research Council (NMRC) overzeese onderzoeksopleiding van november 2012 tot oktober 2014 onder mentorschap van prof. David Shima. Dr. Agrawal verwierf het concept en de vaardigheden om de cellen te labelen en live imaging te produceren in het lab van Dr. Shima. Het team zal bijgevolg het toezicht en de begeleiding tijdens de training van prof. David Shima, Pro.f Kenith Meissner, Dr. Peter Lundh en Dr. Daiju Iwata erkennen.

De dierprotocollen die in deze studie werden gebruikt, werden goedgekeurd door het Institutionele Diervoeder- en Gebruikskomitee van SingHealth, Singapore en zijn in overeenstemming met de richtlijnen van de Vereniging voor Onderzoek in Visie en Oogheelkunde (ARVO) Verklaring voor het gebruik van dieren in oogheelkunde en visie Onderzoek. 1. Etikettering van erytrocyten en leukocyten met fluorescerende kleurstoffen <ol><li> Bereiding van reagentia <ol><li> Bereid ICG (1,5 mg / ml) door 3 mg IC...

Het bestuderen van de hemodynamica in de retinale en choroidale circulatie is essentieel voor het begrijpen van de pathofysiologie van veel oogziekten. De bloedstroomdynamiek in de retinale circulatie kan worden bestudeerd door Fourier-domeine optische coherentie-tomografie (FD-OCT), laserspotflowgrafie (LSFG) en retinale oximetrie. Hoewel deze methoden verschillende benaderingen gebruiken om de totale bloedstroom in de retinale circulatie 40 , 41 , <...

Het bestuderen van de stromingsdynamiek van de bloedcellen in de retinale en choroidale circulatie is essentieel voor het begrijpen van de pathogenese van potentieel visiebedreigende oogziekten en andere oculaire inflammatoire aandoeningen. De conventionele angiografietechnieken, die de binding van fluorescerende kleurstoffen aan plasma-eiwitten omvatten, verschaffen echter geen informatie over de dynamiek van de erythrocyten of leukocyten 1 . De erytrocytische retinale stromingsdynamiek is belangrijk voor het bestuderen van metabolisch efficiënte circulatie in het retina, en de leukocytestroomdynamiek, om de celmigratie, herkenning, adhesie en vernietiging in verschillende ontstekingsomstandigheden te begrijpen 2 . Er zijn verschillende fluorescerende moleculen gebruikt bij de identificatie en karakterisering van verschillende celtypen 3 . De hemodynamica van de bloedcellen kan worden gemeten door ze te kleuren met de juiste fluorenCent kleurstoffen en het toepassen van de juiste beeldvormingstechnieken 4 . De aanwezigheid van ontstekingsreacties bij intraoculaire ziekten zoals leeftijdgerelateerde macular degeneratie (AMD) en diabetische retinopathie (DR) behelst de accumulatie van lymfocyten in het zieke gebied 5 , 6 . Het bijhouden van de immuuncellen in de weefsels kan helpen bij het begrijpen van de complexe gebeurtenissen die betrokken zijn bij het mechanisme van ziektepatogenese. Radioactieve isotopen zoals 51 Cr en 125 I werden in vroege studies gebruikt als cellracers. Deze kleurstoffen zijn giftig en beïnvloeden de levensvatbaarheid van de cellen. Hoewel de radioactieve markers 3 H en 14 C minder giftig zijn voor de cellen, is het moeilijk om hun signalen in het systeem 7 , 8 te detecteren door hun lagere emissie-energieën. Er werden een aantal fluorochroom-kleurstoffen ingevoerd om de mogelijke problemen die verband houden met w te overwinnenMet radioactieve markers en tracklymfocytemigratie in vitro met behulp van fluorescerende microscopie en flowcytometrie 9 , 10 . Hoechst 33342 en thiazoloranje zijn DNA-bindende fluorescerende kleurstoffen, die worden gebruikt om lymfocyten in vivo te volgen. Hoechst 33342 bindt aan AT-rijke gebieden in het DNA, is membraan doorlaatbaar, houdt fluorescentiesignalen gedurende 2 - 4 dagen en is bestand tegen slokkend 9 , 10 . De nadelen van Hoechst 33342 en thiazoloranje zijn de remming van lymfocyt proliferatie 11 en de korte halveringstijd respectievelijk 9 . Calcein-AM, fluoresceendiacetaat (FDA), 2 &#39;, 7&#39;-bis- (2-carboxyethyl) -5- (en-6) -carboxyfluoresceïne, acetoxymethylester (BCECF-AM), 5- (en-6) Carboxyfluoresceendiacetaat (CFDA) en 5- (en-6) -carboxyfluoresceendiacetaatacetoxymethylester (CFDA-AM)Zijn de cytoplasmatische fluorescerende kleurstoffen gebruikt voor lymfocytemigratie studies. FDA, CFDA en CFDA-AM hebben echter lagere retentie in de cellen 9 . BCECF-AM vermindert de proliferatieve respons en beïnvloedt de chemotaxis en superoxideproductie 9 , 12 . Calcein-AM is een fluorescerende kleurstof en bruikbaar voor korte termijn in vivo lymfocytemigratie studies. Het emitert sterke fluorescerende signalen, verstoort de meeste cellulaire functies niet en houdt fluorescente signalen gedurende maximaal 3 dagen 12 , 13 . Fluoresceïne-isothiocyanaat (FITC) en carboxyfluoresceendiacetaatsuccinimidylester (CFDA-SE) zijn covalente koppeling fluorescerende kleurstoffen die worden gebruikt voor lymfocytemigratie studies. FITC vertoont geen effect op de cellevendigheid en heeft een sterkere affiniteit met B-lymfocyten dan T-lymfocyten 14 , 15 </sup&gt;. De CFDA-SE gelabelde lymfocyten kunnen meer dan 8 weken en tot 8 celafdelingen 9 , 16 in vivo worden gevolgd. C18 DiI (1,1&#39;-dioctadecyl-3,3,3 &#39;, 3&#39;-tetramethylindocarbocyanineperchloraat), DiO (3,3&#39;-dioctadecyloxacarbocyanineperchloraat), Paul Karl Horan (PKH) 2, PKH3 en PKH26 zijn membraan- Het inbrengen van fluorescerende lipofiele carbocyanine kleurstoffen die gebruikt worden om leukocyten en erythrocyten te labelen. C18 Dil en DiO tonen hogere signalen wanneer ze in het celmembraan worden opgenomen en zijn relatief niet giftig 12 , 17 . PKH2-, PKH3- en PKH26-gemerkte cellen tonen een goede retentie van de fluorescerende signalen met minder toxiciteit 18 , 19 , 20 , 21 , 22 . Echter, PKH2 regelt de CD62L expressie en vermindert de ly<html> Mphocyt levensvatbaarheid 23 . De meeste bovengenoemde studies zijn uitgevoerd voor het bijhouden van de lymfocytemigratie en proliferatie in de lymfatica en het bestuderen van de geëtiketteerde erythrocyten in de niet-oculaire circulatie. Er zijn zeer weinig studies die de etiketteringstechnieken toepassen om de bloedcellen in de oculaire circulatie te bestuderen. Toepassing van scan-laser-oftalmoprofie (SLO) heeft een groot voordeel bij het bestuderen van de gelabelde cellen in de retinale en choroidale circulatie in vivo door fundus angiography 24 . Er zijn verschillende fluorescerende kleurstoffen, zoals ICG, acridine oranje, FITC, natriumfluoresceïne en CFDA die gebruikt worden om de leukocyten in de retinale circulatie door SLO 25 , 26 , 27 , 28 , 29 , 30 ,Class = &quot;xref&quot;&gt; 31 , 32 , 33 , 34 . De fototoxiciteit en carcinogeniciteit van acridine oranje 26 , 27 , de interferentie van FITC met de cellulaire activiteit en de eis van een intravascular contrastmiddel voor de oplossing van de retinale en choroidale bloedvaten beperkt hun toepassing in in vivo dierproeven 29 . Natriumfluoresceïne en ICG zijn niet-toxisch, goedgekeurd door de Food and Drug Administration, en veilig voor het testen op mensen 32 , 35 . De meeste dynamische studies zijn gerelateerd aan de etikettering van de leukocyten of erythrocyten en zijn visualisatie in de retinale en choroidale bloedvaten 36 , 37 , 38 , 39 </sup&gt;. Hier beschrijven we een gestandaardiseerd protocol van ICG-etikettering van de erythrocyten, natriumfluoresceïne-etikettering van de leukocyten, en het bijhouden van de gevisualiseerde gelabelde cellen in de retinale circulatie van de muis met behulp van SLO.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="751">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">Cardiogreen polymethine dye (Indocyanine green)</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">12633-50MG</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">Fluorescein 100 mg/mL</td>
			<td style="width:179px;">Novartis</td>
			<td style="width:119px;">U1705A/H-1330292</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">10X Phosphate-buffered saline (PBS) Ultra Pure Grade</td>
			<td style="width:179px;">1st BASE</td>
			<td style="width:119px;">BUF-2040-10X1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:287px;">Bovine serum albumin</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A7906-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">Microtainer tubes with K2E (K2EDTA) - EDTA concentration - 1.8 mg/mL of blood</td>
			<td style="width:179px;">BD, USA</td>
			<td style="width:119px;">REF 365974</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:287px;">Histopaque 1077 solution</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">10771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:287px;">Centrifuge 5810 R</td>
			<td style="width:179px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">05-413-401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:287px;">Microcentrifuge tubes 2mL</td>
			<td style="width:179px;">Axygen</td>
			<td style="width:119px;">MCT-200-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:287px;">Vortex mixer</td>
			<td style="width:179px;">Insta BioAnalytik pte. ltd</td>
			<td style="width:119px;">FINE VORTEX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:287px;">Shaker incubator</td>
			<td style="width:179px;">Lab Tech</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">Ceva Ketamine injection (Ketamine hydrochloride 100mg/mL)</td>
			<td style="width:179px;">Ceva</td>
			<td style="width:119px;">KETALAB03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">ILIUM XYLAZIL-20 (Xylazine hydrochloride 20mg/Ml)</td>
			<td style="width:179px;">Troy Laboratories PTY. Limited</td>
			<td style="width:119px;">LI0605</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">1% Mydriacyl 15 mL (Tropicamide 1%)</td>
			<td style="width:179px;">Alcon&#160;Laboratories, Inc. USA</td>
			<td style="width:119px;">NDC&#160;0998-0355-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">2.5% Mydfrin 5 mL (Phenylephrine hydrochloride 2.5%)</td>
			<td style="width:179px;">Alcon&#160;Laboratories, Inc. USA</td>
			<td style="width:119px;">NDC&#160;0998-0342-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Terumo syringe with needle 1cc/mL Tuberculin</td>
			<td style="width:179px;">Terumo (Philippenes) Corporation, Philippines</td>
			<td style="width:119px;">SS-01T2613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:287px;">Vidisic Gel 10G</td>
			<td style="width:179px;">Dr. Gerhard Mann, Chem.-Pharm, Fabrik Gmbh, Berlin, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:287px;">Alcohol swabs</td>
			<td style="width:179px;">Assure medical disposables</td>
			<td style="width:119px;">7M-004-L-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:287px;">Confocal laser scanning angiography system (Heidelberg Retina Angiograph 2)</td>
			<td style="width:179px;">Heidelberg Engineering, GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:287px;">Hiedelberg Spectralis Viewing Module software, v4.0</td>
			<td style="width:179px;">Heidelberg Engineering, GmbH, Heidelberg, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Fluorescent microscope</td>
			<td style="width:179px;">ZEISS</td>
			<td style="width:119px;">Model: axio imager z1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fluorescent dye labeling of erythrocytes and leukocytes for studying the flow dynamics in mouse retinal circulation

De retinale en choroidale bloedstroomdynamiek kan inzicht verschaffen in de pathofysiologie en vervolg van diverse oogziekten, zoals glaucoom, diabetische retinopathie, leeftijdgerelateerde macular degeneratie (AMD) en andere oculaire inflammatoire aandoeningen. Het kan ook helpen om de therapeutische reacties in het oog te volgen. De juiste etikettering van de bloedcellen, in combinatie met live-celbeelden van de gelabelde cellen, maakt het mogelijk om de stromingsdynamiek in de retinale en choroidale circulatie te onderzoeken. Hier beschrijven we de gestandaardiseerde protocollen van respectievelijk 1,5% indocyaninegroen (ICG) en 1% natriumfluoresceïne-etikettering van muizen erythrocyten en leukocyten. Scanning laser-oftalmocopie (SLO) werd toegepast om de gelabelde cellen te visualiseren in de retinale circulatie van C57BL / 6J muizen (wildtype). Beide methoden demonstreerden onderscheiden fluorescent gelabelde cellen in de retinale circulatie van de muis. Deze etiketteringsmethoden kunnen bredere toepassingen hebben in verschillende oogziektenmodellen.

Erythrocyten gemarkeerd met 1,5% ICG werden gevisualiseerd in de retinale circulatie van C57BL / 6J muizen (wild type). Beide 1% en 5% hematocriet van 1,5% ICG gelabelde erythrocyten waren onderscheiden in de retinale circulatie. De afzonderlijke gemerkte cellen werden echter duidelijker met 1% hematocriet van 1,5% ICG gelabelde erythrocyten ( Figuur 1 ). In 5% hematocrit, door het grote aantal gelabelde cellen in de retinale vaten, was het niet mogelijk om ...

Watch this Scientific Journal Video about Fluorescent Dye Labeling of Erythrocytes and Leukocytes for Studying the Flow Dynamics in Mouse Retinal Circulation at JoVE.com

Fluorescent Dye Labeling of Erythrocytes and Leukocytes for Studying the Flow Dynamics in Mouse Retinal Circulation

Live-imaging van de gelabelde bloedcellen in de oculaire circulatie kan informatie verschaffen over ontsteking en ischemie bij diabetische retinopathie en leeftijdgerelateerde macular degeneratie. Een protocol om bloedcellen te labelen en de gemarkeerde cellen in de retinale circulatie af te beelden is beschreven.

Fluorescent Dye Etikettering van Erythrocyten en Leukocyten voor het bestuderen van de Flow Dynamics in de retinale circulatie van de muis

The retinal and choroidal blood flow dynamics may provide insight into the pathophysiology and sequelae of various ocular diseases, such as glaucoma, ...

The overall goal of this procedure is to visualize retinal circulation of blood cells in the mouse using a scanning laser ophthalmoscope. This method can help answer key questions about retinal diseases such as what is the retinal floor dynamics of WBCs and RBCs and how can their flow dynamics contribute to disease pathogenesis. The main advantages of this technique is that it can refelct on different disease phenotypes and it is also very easy to perform.This procedure will be demonstrated by our team members, Praveen, Bo Bo, and Neha. To isolate the mouse blood cells layer freshly collected whole blood on top of a 1:1 polysucrose and sodium diatrizoatem solution in a two milliliter tube. Then centrifuge the tube for 30 minutes.Next aspirate and discard the plasma supernatant. Then carefully collect the buffy coat layer composed of leukocytes and the underlying layer of erythrocytes in separate tubes. Next wash the erythrocytes with 1XPBS to remove any contaminants and resuspend them in one volume of PBS.Then transfer half milliliter aliquots of the suspension into microcentrifuge tubes. Spin down the aliquots, discard the supernatant and add about 200 microliters of 40%1XPBS to the pelleted erythrocytes. Mix them well.And incubate them at room temperature for five minutes. After five minutes, add 100 microliters of ICG to each suspension. Mix the tubes using inversions and then incubate them at room temperature for five minutes.Next add 300 microliters of 1XPBS and incubate for an hour with gentle agitation at 37 degree Celsius. Then centrifuge the suspensions, keep the pelleted cells and resuspend them in one milliliter of 1XPBS. Keep washing the cells with 1XPBS until the supernatant is clear.After decanting the supernatant add back one volume of 1%BSA and PBS to achieve 50%hematocrit of ICG labeled erythrocytes. Next process the buffy coat collection. First wash the cells once with 10 milliliters of 1XPBS to remove any contaminants.Centrifuge the samples again and then resuspend the pellet in 900 microliters of 1XPBS. Next add 100 microliters of 10%sodium fluorescein and incubate the cells at room temperature for two minutes. Finally wash the labeled lymphocytes three times with 10 milliliters of 1XPBS.Centrifuge and resuspend them in 100 microliters of 1XPBS. To prepare the ICG labeled erythrocytes for injection first dilute an aliquot for injection down to a 5%or 1%hematocrit. Anesthetize the mouse and dilate its pupils.Then apply ophthalmic ointment to both eyes. And place a contact lens over one of the eyes. Now image the mouse using a confocal SLO camera with a positive 25 diopter lens to compensate for the eye's refraction.Fresh perfectly direct the cornea to the optical head of the SLO machine. Next switch on the imaging module and to maneuver it until the optic nerve is at the center of the imaging screen. Then at a 30 degree angle take the infrared fundus images.Next take an infrared fundus video. Turn on the 790 nanometer ICG filter set the camera mode to high speed addition keep the view angle at 15 to 30 degrees. Then set the ICG intensity to 85 for all readings.On the control panel, click on the acquire button to take a baseline video at 8.8 to 15 frames per second for one minute. Next load 100 microliters of ICG labeled erythrocytes into an insulin syringe with a 30 gauge needle and inject the cells into the tail vein or inject them retroorbitally. Immediately after the injection, take a new infrared fundus image and a new ICG filter video.After acquiring the videos export them in TIFF format for image analysis. Process the images using the freely available imaging software package, MHJ. After opening the file, set the frame interval of the image video for velocity measurements.Then open the MtrackJ plugin. From the menu, select tracking and toggle the option for moving to next timeframe index after adding a point. Now locate a cell of interest and track through each frame.From the menu, click add to add a new track and then click on the chosen cell. Then continue clicking on the current position of the cell as images advance from frame to frame. Once tracked change the display option for the trajectory from the displaying choices and choose to display only the track points at the current time.Continue clicking until the trajectory of the cell is displayed and then save the track. Now proceed with tracking the next cell starting with the add command and proceeding as with the first cell. After tracking all the cells of interest open the display of all the track measurements using the measure option.Then save the output for further analysis. Erythrocytes labeled with 1.5%ICG were visualized in the retinal circulation of C57 black 6J mice using 1%or 5%hematocrit, cells were distinguishable but in the 1%hematocrit the labeled cells were more easily visualized. With either injected concentration some erythrostasis was observable in the parapapillary region and it was more visible with the 5%hematocrit.Leukocytes were labeled with 1%sodium fluorescein and visualized as green labeled cells using fluorescence microscopy. Some clumping was observed. Once mastered, this technique can be done in six hours if performed properly.While attempting this procedure, it is important to dilate the eyes to acquire quality retinal images and videos.

Research

JoVE Journal

Medicine

Doppler Optical Coherence Tomography of Retinal Circulation

Doppler Optical Coherence Tomography van het netvlies Circulation

Noncontact retinal blood flow measurements are performed with a Fourier domain optical coherence tomography (OCT) system using a circumpapillary double ...

High-throughput Flow Cytometry Cell-based Assay to Detect Antibodies to N-Methyl-D-aspartate Receptor or Dopamine-2 Receptor in Human Serum

High-throughput flowcytometrie-Cell gebaseerde test voor opsporing van antilichamen tegen N-methyl-D-aspartaat receptor of dopamine-2 receptor in het menselijk serum

Over the recent years, antibodies against surface and conformational proteins involved in neurotransmission have been detected in autoimmune CNS diseases ...

Intravital Video Microscopy Measurements of Retinal Blood Flow in Mice

Intravitale Video Microscopie Metingen van retinale bloedstroom in Muizen

Alterations in retinal blood flow can contribute to, or be a consequence of, ocular disease and visual dysfunction. Therefore, quantitation of altered ...

In Vivo Dynamics of Retinal Microglial Activation During Neurodegeneration: Confocal Ophthalmoscopic Imaging and Cell Morphometry in Mouse Glaucoma

In Vivo Dynamics of Retinal Microglial Activation During Neurodegeneration: Confocal Ophthalmoscopic Imaging and Cell Morphometry in Mouse Glaucoma

In Vivo Dynamiek van retinale Microgliale Activering Tijdens Neurodegeneratie: Confocal oftalmoscopisch Imaging en Cell Morphometry in Mouse Glaucoom

Microglia, which are CNS-resident neuroimmune cells, transform their morphology and size in response to CNS damage, switching to an activated state with ...

Preparation Steps for Measurement of Reactivity in Mouse Retinal Arterioles Ex Vivo

Preparation Steps for Measurement of Reactivity in Mouse Retinal Arterioles Ex Vivo

Voorbereiding stappen voor meting van reactiviteit in muis retinale arteriolen Ex Vivo

Vascular insufficiency and alterations in normal retinal perfusion are among the major factors for the pathogenesis of various sight-threatening ocular ...

Studying Diabetes Through the Eyes of a Fish: Microdissection, Visualization, and Analysis of the Adult tg(fli:EGFP) Zebrafish Retinal Vasculature

Studying Diabetes Through the Eyes of a Fish: Microdissection, Visualization, and Analysis of the Adult tgfli:EGFP Zebrafish Retinal Vasculature

Bestuderen van Diabetes door de ogen van een vis: Microdissection, visualisatie en analyse van de volwassen tg(fli:EGFP) Zebrafish Retinal therapieën

Diabetic retinopathy is the leading cause of blindness among middle-aged adults. The rising prevalence of diabetes worldwide will make the prevention of ...

Intrathecal Application of a Fluorescent Dye for the Identification of Cerebrospinal Fluid Leaks in Cochlear Malformation

Intrathecale toepassing van een fluorescerende kleurstof voor de identificatie van cerebrospinale vloeistoflekken in cochleaire misvorming

In cases of cerebrospinal fluid (CSF) leaks, reliable detection of their origins is needed to seal the leak sufficiently and prevent complications, such ...

Retinal Pigment Epithelium Transplantation in a Non-human Primate Model for Degenerative Retinal Diseases

Retinale pigmentepitheeltransplantatie in een niet-humaan primaatmodel voor degeneratieve retinale ziekten

Retinal pigment epithelial (RPE) transplantation holds great promise for the treatment of inherited and acquired retinal degenerative diseases. These ...

Retinal Explant of the Adult Mouse Retina as an Ex Vivo Model for Studying Retinal Neurovascular Diseases

Retinal Explant of the Adult Mouse Retina as an Ex Vivo Model for Studying Retinal Neurovascular Diseases

Retinale explant van het netvlies van de volwassen muis als een ex vivo model voor het bestuderen van retinale neurovasculaire ziekten

One of the challenges in retina research is studying the cross-talk between different retinal cells such as retinal neurons, glial cells, and vascular ...

A Heterotopic Mouse Model for Studying Laryngeal Transplantation

Een heterotopisch muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie

Laryngeal heterotopic transplantation, although a technically challenging procedure, offers more scientific analysis and cost benefits compared to other ...