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Principles of Precipitation

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Precipitation of Milk Proteins

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通过沉淀混合物的分离

资料来源: 实验室的博士安娜 · 加西亚-Sáez 中 — — 蒂宾根大学

大多数样品感兴趣的是许多不同的组件的混合物。样品制备,在分析的过程中,一个关键步骤删除可能会影响分析的干扰。因此,开发分离技术是重要的努力,不只是在学术界,但也在工业。

分离混合物的一种方法是使用他们的溶解性能。在这简短的文件,我们将处理水溶液。感兴趣的一种化合物的溶解度取决于 (1) 离子强度的溶液,(2) 的 ph 值和温度 (3)。通过操纵与这三个因素,这种化合物是不溶性条件可以用于从剩下的采样删除这种化合物的兴趣。1

1.沉淀的 CaCO3

  1. 准备 1 M CaCl25 毫升。
  2. 准备 5 毫升 1 M Na2CO3
  3. 在小离心管 (1.5 毫升),添加的 CaCl2 750 µ L 和 Na2CO3750 µ L。
  4. 等待 2 分钟反应发生。该解决方案应该转阴。
  5. 离心机的混合物在拥有 10 万 × g 5 分钟。
  6. 倒上清液。
  7. 添加颗粒 1 毫升的冷水。
  8. 通过在 10 旋涡混合器混合悬小球...

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溶解平衡被从事许多的净化过程。 钙可以从使用碳酸钠的水。CaCO3的溶度积 (Ksp) 是 4.8 × 10-9。混合的 CaCl2 1 米和 1 米的 Na2CO3产生 CaCO3沉淀。沉淀分离其余的解决方案采用离心法。

酪蛋白 (牛奶中的关键蛋白) 等电点 ph 值为 4.6,在此 ph 值形成不溶性的凝乳。凝乳分离后从其余的解决方案 (也叫乳清) 使用过...

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沉淀反应被适用于许多样品制备过程。如前所述,它们可以用于删除盐或特定离子根据其溶解性的平衡。它们也可以用于删除混合物中的蛋白质和其他生物分子。

再结晶经常被雇用,进一步净化固体。此过程将删除被困内固体杂质。除其他外,可以用重结晶来净化盐和有机分子。

离心和过滤技术,适用于大多数样品制备要求从溶剂分离不溶组分。过滤通...

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  1. Kotz, J., Treichel, P., Townsend, J. Chemistry and Chemical Reactivity. 8th ed. Brooks/Cole, Belmont, CA (2012).
  2. Arakawa, T., Timasheff, S.N.  Mechanism of Protein Salting In and Salting Out by Divalent Cation Salts: Balance between Hydration and Salt Binding. Biochemistry. 23, 5912-5923 (1984).

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