Name: a method to test the efficacy of handwashing for the removal of emerging infectious pathogens
Uploaded: 2017-06-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Method to Test the Efficacy of Handwashing for the Removal of Emerging Infectious Pathogens at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי הסוכנות האמריקאית לפיתוח בינלאומי, משרד סיוע חוץ מאסון (AID-OFDA-A-15-00026). מרלין וולף נתמך על ידי הקרן הלאומית למדע (מענק 0966093).

הצהרת האתיקה: המחקר המתואר כאן (על Phi6 ו- E. coli כמחליפים עבור אבולה) אושר על ידי המועצה המוסדית לבדיקה במרכז הרפואי טאפטס וקמפוס למדעי הבריאות באוניברסיטת טאפטס (# 12018); אוניברסיטת הרווארד פנתה לסקירה במועצת הסקירה המוסדית של טאפטס. <p class="jove_content" style=";text-align:right;direction...

<ol>
	<li>Kampf, G., Kramer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiologic+Background+of+Hand+Hygiene+and+Evaluation+of+the+Most+Important+Agents+for+Scrubs+and+Rubs.">Epidemiologic Background of Hand Hygiene and Evaluation of the Most Important Agents for Scrubs and Rubs.</a> Clin Microbiol Rev. 17 (4), 863-893 (2004).</li><li>Miller, T., Patrick, D., Ormrod, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand+decontamination:+influence+of+common+variables+on+hand-washing+efficiency.">Hand decontamination: influence of common variables on hand-washing efficiency.</a> Healthc Infect. 16 (1), 18 (2013).</li><li>Jensen, D. A., Danyluk, M. D., Harris, L. J., Schaffner, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+the+effect+of+hand+wash+duration,+soap+use,+ground+beef+debris,+and+drying+methods+on+the+removal+of+Enterobacter+aerogenes+on+hands.">Quantifying the effect of hand wash duration, soap use, ground beef debris, and drying methods on the removal of Enterobacter aerogenes on hands.</a> J Food Prot. 78 (4), 685-690 (2015).</li><li>Girou, E., Loyeau, S., Legrand, P., Oppein, F., Brun-Buisson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+handrubbing+with+alcohol+based+solution+versus+standard+handwashing+with+antiseptic+soap:+randomised+clinical+trial.">Efficacy of handrubbing with alcohol based solution versus standard handwashing with antiseptic soap: randomised clinical trial.</a> BMJ. 325 (7360), 362 (2002).</li><li>Kac, G., Podglajen, I., Gueneret, M., Vaupr&#233;, S., Bissery, A., Meyer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiological+evaluation+of+two+hand+hygiene+procedures+achieved+by+healthcare+workers+during+routine+patient+care:+a+randomized+study.">Microbiological evaluation of two hand hygiene procedures achieved by healthcare workers during routine patient care: a randomized study.</a> J Hosp Infect. 60 (1), 32-39 (2005).</li><li>Lages, S. L. S., Ramakrishnan, M. A., Goyal, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vivo+efficacy+of+hand+sanitisers+against+feline+calicivirus:+a+surrogate+for+norovirus.">In-vivo efficacy of hand sanitisers against feline calicivirus: a surrogate for norovirus.</a> J Hosp Infect. 68 (2), 159-163 (2008).</li><li>Holton, R. H., Huber, M. A., Terezhalmy, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+efficacy+of+soap+and+water+hand+washing+versus+an+alcohol-based+hand+cleanser.">Antimicrobial efficacy of soap and water hand washing versus an alcohol-based hand cleanser.</a> Tex Dent J. 126 (12), 1175-1180 (2009).</li><li>Salmon, S., Truong, A. T., Nguyen, V. H., Pittet, D., McLaws, M. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+care+workers'+hand+contamination+levels+and+antibacterial+efficacy+of+different+hand+hygiene+methods+used+in+a+Vietnamese+hospital.">Health care workers' hand contamination levels and antibacterial efficacy of different hand hygiene methods used in a Vietnamese hospital.</a> Am J Infect Control. 42 (2), 178-181 (2014).</li><li>Steinmann, J., Nehrkorn, R., Meyer, A., Becker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+in-vivo+protocols+for+testing+virucidal+efficacy+of+handwashing+and+hand+disinfection.">Two in-vivo protocols for testing virucidal efficacy of handwashing and hand disinfection.</a> Int J Hyg Environ Health. 196 (5), 425-436 (1995).</li><li>Weber, D. J., Sickbert-Bennett, E., Gergen, M. F., Rutala, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+selected+hand+hygiene+agents+used+to+remove+Bacillus+atrophaeus+(a+surrogate+of+Bacillus+anthracis)+from+contaminated+hands.">Efficacy of selected hand hygiene agents used to remove Bacillus atrophaeus (a surrogate of Bacillus anthracis) from contaminated hands.</a> JAMA. 289 (10), 1274-1277 (2003).</li><li>Grayson, M. L., Melvani, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+Soap+and+Water+and+Alcohol-Based+Hand-Rub+Preparations+against+Live+H1N1+Influenza+Virus+on+the+Hands+of+Human+Volunteers.">Efficacy of Soap and Water and Alcohol-Based Hand-Rub Preparations against Live H1N1 Influenza Virus on the Hands of Human Volunteers.</a> Clin Infect Dis. 48 (3), 285-291 (2009).</li><li>Oughton, M. T., Loo, V. G., Dendukuri, N., Fenn, S., Libman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hand+hygiene+with+soap+and+water+is+superior+to+alcohol+rub+and+antiseptic+wipes+for+removal+of+Clostridium+difficile.">Hand hygiene with soap and water is superior to alcohol rub and antiseptic wipes for removal of Clostridium difficile.</a> Infect Control Hosp Epidemiol. 30 (10), 939-944 (2009).</li><li>Liu, P., Yuen, Y., Hsiao, H. -. M., Jaykus, L. -. A., Moe, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effectiveness+of+liquid+soap+and+hand+sanitizer+against+Norwalk+virus+on+contaminated+hands.">Effectiveness of liquid soap and hand sanitizer against Norwalk virus on contaminated hands.</a> Appl Environ Micro. 76 (2), 394-399 (2010).</li><li>Savolainen-Kopra, C., Korpela, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+treatment+with+ethanol+hand+rub+is+ineffective+against+human+rhinovirus--hand+washing+with+soap+and+water+removes+the+virus+efficiently.">Single treatment with ethanol hand rub is ineffective against human rhinovirus--hand washing with soap and water removes the virus efficiently.</a> J Med Virol. 84 (3), 543-547 (2012).</li><li>Tuladhar, E., Hazeleger, W. C., Koopmans, M., Zwietering, M. H., Duizer, E., Beumer, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+viral+contamination+from+finger+pads:+handwashing+is+more+effective+than+alcohol-based+hand+disinfectants.">Reducing viral contamination from finger pads: handwashing is more effective than alcohol-based hand disinfectants.</a> J Hosp Infect. 90 (3), 226-234 (2015).</li><li>Steinmann, J., Paulmann, D., Becker, B., Bischoff, B., Steinmann, E., Steinmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+virucidal+activity+of+alcohol-based+hand+sanitizers+versus+antimicrobial+hand+soaps+in+vitro+and+in+vivo.">Comparison of virucidal activity of alcohol-based hand sanitizers versus antimicrobial hand soaps in vitro and in vivo.</a> J Hosp Infect. 82 (4), 277-280 (2012).</li><li>de Aceituno, A. F., Bartz, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ability+of+Hand+Hygiene+Interventions+Using+Alcohol-Based+Hand+Sanitizers+and+Soap+To+Reduce+Microbial+Load+on+Farmworker+Hands+Soiled+during+Harvest.">Ability of Hand Hygiene Interventions Using Alcohol-Based Hand Sanitizers and Soap To Reduce Microbial Load on Farmworker Hands Soiled during Harvest.</a> J Food Protect. 78 (11), 2024-2032 (2015).</li><li>Boyce, J. M., Pittet, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guideline+for+Hand+Hygiene+in+Health-Care+Settings+Recommendations+of+the+Healthcare+Infection+Control+Practices+Advisory+Committee+and+the+HICPAC/SHEA/APIC/IDSA+Hand+Hygiene+Task+Force.">Guideline for Hand Hygiene in Health-Care Settings Recommendations of the Healthcare Infection Control Practices Advisory Committee and the HICPAC/SHEA/APIC/IDSA Hand Hygiene Task Force.</a> Infect Control Hosp Epidemiol. 23 (12 Suppl), S3-S40 (2002).</li><li>. UNDP Medical Waste Experts Assessment and Recommendations Regarding Management of Ebola-Contaminated Waste Available from: <a target="_blank" href="https://noharm-global.org/sites/default/files/documents-files/3127/Report%20to%20WHO%20WASH%20and%20Geneva%20on%20Ebola%20final.pdf">https://noharm-global.org/sites/default/files/documents-files/3127/Report%20to%20WHO%20WASH%20and%20Geneva%20on%20Ebola%20final.pdf</a> (2015)</li><li>Hopman, J., Kubilay, Z., Allen, T., Edrees, H., Pittet, D., Allegranzi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+chlorine+solutions+used+for+hand+hygiene+and+gloves+disinfection+in+Ebola+settings:+a+systematic+review.">Efficacy of chlorine solutions used for hand hygiene and gloves disinfection in Ebola settings: a systematic review.</a> Antimicrob Resist Infect Control. 4 (1), 1 (2015).</li><li>Lowbury, E. J. L., Lilly, H. A., Bull, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disinfection+of+hands:+removal+of+transient+organisms.">Disinfection of hands: removal of transient organisms.</a> BMJ. 2 (5403), 230-233 (1964).</li><li>Edmonds, S. L., Zapka, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effectiveness+of+Hand+Hygiene+for+Removal+of+Clostridium+difficile+Spores+from+Hands.">Effectiveness of Hand Hygiene for Removal of Clostridium difficile Spores from Hands.</a> Infect Control Hosp Epidemiol. 34 (3), 302-305 (2013).</li><li>Rotter, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=150+years+of+hand+disinfection-Semmelweis'+heritage.">150 years of hand disinfection-Semmelweis' heritage.</a> Hyg Med. (22), 332-339 (1997).</li><li>Hitomi, S., Baba, S., Yano, H., Morisawa, Y., Kimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+effects+of+electrolytic+products+of+sodium+chloride--comparative+evaluation+with+sodium+hypochlorite+solution+and+efficacy+in+handwashing.">Antimicrobial effects of electrolytic products of sodium chloride--comparative evaluation with sodium hypochlorite solution and efficacy in handwashing.</a> Kansensh&#333;gaku Zasshi. 72 (11), 1176-1181 (1998).</li><li>. Standard E1174-13. Standard Test Method for Evaluation of the Effectiveness of Health Care Personnel Handwash Formulations Available from: <a target="_blank" href="https://www.astm.org/">https://www.astm.org/</a> (2013)</li><li>Casanova, L. M., Weaver, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+eluents+for+the+recovery+of+an+enveloped+virus+from+hands+by+whole-hand+sampling.">Evaluation of eluents for the recovery of an enveloped virus from hands by whole-hand sampling.</a> J Appl Microbiol. 118 (5), 1210-1216 (2015).</li><li>Sinclair, R. G., Rose, J. B., Hashsham, S. A., Gerba, C. P., Haas, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+for+Selection+of+Surrogates+Used+To+Study+the+Fate+and+Control+of+Pathogens+in+the+Environment.">Criteria for Selection of Surrogates Used To Study the Fate and Control of Pathogens in the Environment.</a> Appl Environ Microbiol. 78 (6), 1969-1977 (2012).</li><li>Held, E., Skoet, R., Johansen, J. D., Agner, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hand+eczema+severity+index+(HECSI):+A+scoring+system+for+clinical+assessment+of+hand+eczema.+A+study+of+inter-+and+intraobserver+reliability.">The hand eczema severity index (HECSI): A scoring system for clinical assessment of hand eczema. A study of inter- and intraobserver reliability.</a> Br J Dermatol. 152 (2), 302-307 (2005).</li><li>. Method 1604: Total Coliforms and Escherichia coli in Water by Membrane Filtration Using a Simultaneous Detection Technique (MI Medium) Available from: <a target="_blank" href="https://www.epa.gov/sites/production/files/2015-08/documents/method_1604_2002.pdf">https://www.epa.gov/sites/production/files/2015-08/documents/method_1604_2002.pdf</a> (2002)</li><li>Adams, M. H., Anderson, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bacteriophages. , (1959).</li><li>Kao, L. S., Green, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+Variance:+Is+There+a+Difference+in+Means+and+What+Does+It+Mean?.">Analysis of Variance: Is There a Difference in Means and What Does It Mean?.</a> The Journal of surgical research. 144 (1), 158-170 (2008).</li><li>Schutz, R. W., Gessaroli, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Analysis+of+Repeated+Measures+Designs+Involving+Multiple+Dependent+Variables.">The Analysis of Repeated Measures Designs Involving Multiple Dependent Variables.</a> Research Quarterly for Exercise and Sport. 58 (2), 132-149 (1987).</li><li>Woolwine, J. D., Gerberding, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+testing+method+on+apparent+activities+of+antiviral+disinfectants+and+antiseptics.">Effect of testing method on apparent activities of antiviral disinfectants and antiseptics.</a> Antimicrob Agents Chemother. 39 (4), 921-923 (1995).</li></ol>

The method described here provides an approach for testing handwashing efficacy in a controlled laboratory setting. This method highlights the use of human volunteers and surrogate, non-infectious organisms. Using the method, it was possible to demonstrate differences in: 1) the efficacy of handwashing methods and 2) organism persistence in rinse water. The purpose of presenting this protocol is to provide a general framework that can be adapted to test a wide range of surrogate organisms and handwashing methods relevant...

שטיפת ידיים מומלצת באופן נרחב על מנת למנוע את התפשטות המחלה, במיוחד אלה המועברים על ידי הצוואר הפה או אוראלי, כולל מחלות שלשולים ונשימה. באופן מפתיע, יש עדויות רבות על יעילותן של שיטות שטיפת הידיים, כגון שטיפת ידיים במים וסבון (HWWS) ועם אלכוהול על בסיס אלכוהול (ABHS), על הסרת אורגניזמים מן הידיים. מחקר ראשוני מצא כי הפעולה המכנית של שטיפת ידיים, בניגוד לשיטת שטיפת הידיים, עשויה להסביר את רוב הסרת האורגניזם 2 , 3 . בנוסף, יש ראיות השוואתי קטן על אשר שיטת שטיפת ידיים היא היעילה ביותר. בסקירה ספרותית לא רשמית, 14 מחקרים אשר השוו את יעילות הסבון ותמצית היד על הסרת אורגניזמים זוהו. מתוך מחקרים אלה, חמישה מצאו ABHS להיות יעיל יותר 4 , </Sup&gt; 5 , 6 , 7 , 8 , 7 מצאו כי HWWS יעילים יותר 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , ושניים לא מצאו הבדל משמעותי בין השיטות 16 , 17 . ממצאים אלה אינם עקביים ואינם מתייחסים לסיכון המתמשך למחלות עקב התמשכות האורגניזמים במי השטיפה לאחר שטיפת ידיים. בסך הכל, הראיות על היעילות היחסית של שיטות שטיפת ידיים להסרת פתוגנים הגורמים למחלות זיהומיות מוגבלות. עדות מוגבלת זו הובילה לחוסר ודאות לגבי השיטות המתאימות ביותר להגדרות התפרצות המחלה. לדוגמה, במהלך התפרצות מחלת הנגיף (EVD) במערב אפריקה בשנים 2013 עד 2016, מספר מגיבים בינלאומיים גדולים סיפקו המלצות סותרות לפתרונות כלור HWWS, ABHS או 0.05%. Mddecins Sans Frontières (MSF) ממליצה על שימוש בפתרון של 0.05% כלור לשטיפת ידיים, בעוד ארגון הבריאות העולמי (WHO) ממליץ על HWWS או ABHS (אם הידיים אינן מלוכלכות). ארגון הבריאות העולמי מרחיק לכת על מנת לקבוע כי אין להשתמש בכלור אלא אם כן אין אפשרויות אחרות, כי הוא פחות יעיל מאשר שיטות אחרות עקב הביקוש כלור המופעל על ידי העור 18 , 19 , 20 , 21 , 22 . בנוסף, הפתרונות כלור מופקים בדרך כלל מארבעה תרכובות כלור שונות, כולל hypochlorite הבדיקה גבוהה (HTH), מקומי שנוצר וייצוב hypochlorite נתרן (NaOCl), ואת sodDichloroisocyanurate ium (NaDCC). סקירה שיטתית שהוזמנה על ידי ארגון הבריאות העולמי בתגובה לפריצת ה- EVD במערב אפריקה מצאה לאחרונה רק ארבעה מחקרים שחקרו את היעילות היחסית של שטיפת ידיים עם כלור 23 . מחקרים אלה גם הניבו תוצאות סותרות, ואף אחד מהמחקרים הללו לא השתמש בריכוז הכלור המומלץ של 0.05% לשטיפת ידיים או למיקרואורגניזמים שנבדקו בדומה לנגיף האבולה 10 , 24 , 25 , 26 , 27 . לפיכך, ההמלצות לא נמצאו מבוססות על ראיות, ולא ברור אילו המלצות היו יעילות ביותר. יש צורך במחקר נוסף כדי להשוות בין גישות שטיפת ידיים למניעת התפשטות של פתוגנים זיהומיים, שכן התערבויות שטיפת כלים הן כלי חשוב למניעת העברת מחלות מגיפה. אלה חוהמלצות שוטפות חייבות להתבסס על ראיות. לפיכך, פותחה שיטה 2 , 28 , 29 לבדיקת יעילות שטיפת ידיים ושטיפת מים, המבוצעת באמצעות תחליפים או פתוגנים לא זיהומיים. תוצאות לדוגמה, באמצעות Phi6 כמו תחליף עבור וירוס אבולה ושימוש Escherichia coli כאורגניזם מחוון משותף, מוצגים כאן. בפרוטוקול זה, יעילות שטיפת ידיים ושטיפת מיצוי המים מוצגים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Soap bar</td>
			<td>Dove</td>
			<td colspan="2">White Beauty Bar soap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol-based hand sanitizer</td>
			<td>Purell</td>
			<td colspan="2">Advanced Instant Hand Sanitizer with 70% Ethyl Alcohol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HTH Powder</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>300340010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaDCC Powder</td>
			<td>Medentech</td>
			<td>Klorsept granules</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOCl Solution</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>419550010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrochlorinator</td>
			<td>AquaChlor</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodometric titrator</td>
			<td>Hach</td>
			<td>1690001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>NC0117242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptone</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP1421-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Mucin</td>
			<td>EMD Milipore</td>
			<td>49-964-3500MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m Filter</td>
			<td>EMD Milipore</td>
			<td>GVWP04700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP358-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin pH probe</td>
			<td>Hanna Instruments</td>
			<td>H199181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large Whirlpak Sample Bag</td>
			<td>Nasco</td>
			<td>B01447WA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Whirlpak Sample Bag</td>
			<td>Nasco</td>
			<td>B01323WA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Funnel bottle</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>3120850001</td>
			<td>You may drill an appropriately sized hole in the lid of a bottle to form a funnel that will dispense water at the appropriate flow rate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>615090010</td>
			<td>Mix with water to produce 70% ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray bottle</td>
			<td>Qorpak</td>
			<td>PLC06934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E. coli</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>25922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP1426-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Agar</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP1425-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile loop</td>
			<td>Globe Scientific</td>
			<td>22-170-204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phi6</td>
			<td>HER</td>
			<td>102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nutrient broth</td>
			<td>BD Difco</td>
			<td>BD 247110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GeneQuant 100 Spectrophotometer</td>
			<td>General Electric</td>
			<td>28-9182-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium thiosulfate</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>S445-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Membrane filter (47mm, 0.45 &#181;m)</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>HAWP04700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>m-ColiBlue24 broth media</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>M00PMCB24</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish with pad (47mm)</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>09-720-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Manifold</td>
			<td>Thermo Scientific/Nalgene</td>
			<td>09-752-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Filter funnels</td>
			<td>Thermo Scientific/Nalgene</td>
			<td>09-747</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudomonas syringae</td>
			<td>HER</td>
			<td>1102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>10010031</td>
			<td>Solution may also be mixed from source compounds according to any basic recipe</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a method to test the efficacy of handwashing for the removal of emerging infectious pathogens

שטיפת ידיים מומלץ באופן נרחב כדי למנוע שידור מחלות מדבקות. עם זאת, קיימות עדויות רבות על יעילותן של שיטות שטיפת ידיים באופן כללי. בנוסף, קיימות עדויות קטנות להשוואת שיטות שטיפת ידיים כדי לקבוע אילו יעילים ביותר על הסרת פתוגנים זיהומיות. המחקר נדרש כדי לספק ראיות עבור גישות שונות לשטיפת ידיים, כי ניתן להשתמש במהלך התפרצויות מחלות זיהומיות. כאן, שיטה מעבדה כדי להעריך את היעילות של שיטות שטיפת ידיים על הסרת מיקרואורגניזמים מן הידיים ואת ההתמדה שלהם במי השטיפה מתואר. ידיים של מתנדבים הם הראשון spiked עם אורגניזם הבדיקה ולאחר מכן שטף עם כל שיטת שטיפת ידיים של עניין. בדרך כלל, מיקרואורגניזמים פונדקאים משמשים להגנה על בני אדם מפני מחלות. מספר האורגניזמים שנותרו על ידי מתנדבים לאחר הכביסה נבדק באמצעות שיטת &quot;מיץ כפפות&quot; שונה: הידיים ממוקמות כפפות עם eluEnt ו הם scrubbed להשעות את מיקרואורגניזמים ולהפוך אותם זמינים לניתוח על ידי סינון קרום (חיידקים) או assay פלאק (וירוסים / bacteriophages). לשטוף מים המיוצר מן שטיפת הידיים נאסף ישירות לניתוח. יעילות שטיפת ידיים היא לכמת על ידי השוואת ערך הפחתת יומן בין דגימות נלקח לאחר שטיפת ידיים לדגימות ללא שטיפת ידיים. לשטוף מים התמדה הוא לכמת על ידי השוואת דגימות מים לשטוף משיטות שונות שטיפת ידיים לדגימות שנאספו לאחר שטיפת ידיים עם מים פשוטים. בעוד ששיטה זו מוגבלת על ידי הצורך להשתמש באורגניזמים חלופיים כדי לשמור על שלומם של מתנדבים אנושיים, היא לוכדת היבטים של שטיפת ידיים שקשה לשכפל במחקר במבחנה וממלא פערים במחקר על יעילות שטיפת ידיים והתמדה של אורגניזמים זיהומיות בשטיפה מַיִם.

הנה, פרוטוקול ( איור 1 ) הושלמה עם 18 מתנדבים, אשר נבדקו כל אחד באמצעות E. קולי ו Phi6. נמצאו הבדלים משמעותיים בין תוצאות שטיפת ידיים עם E. coli הן עם וללא עומס קרקע ו ​​Phi6 עם עומס הקרקע ( איור 2 איור 3 ). ...

Watch this Scientific Journal Video about A Method to Test the Efficacy of Handwashing for the Removal of Emerging Infectious Pathogens at JoVE.com

A Method to Test the Efficacy of Handwashing for the Removal of Emerging Infectious Pathogens

שטיפת ידיים מומלץ באופן נרחב כדי למנוע שידור מחלות מדבקות. עם זאת, יש ראיות מועטות בהן שיטות שטיפת ידיים יעילות ביותר בהסרת פתוגנים למחלות זיהומיות. פיתחנו שיטה כדי להעריך את היעילות של שיטות שטיפת ידיים בהסרת מיקרואורגניזמים.

שיטה לבדיקת יעילות שטיפת הידיים להסרת הפתוגנים המזהמים

Handwashing is widely recommended to prevent infectious disease transmission. However, little comparable evidence exists on the efficacy of handwashing ...

The overall goal of this experiment is to test the comparative efficacy of handwashing options on hands that have been experimentally inoculated with an organism of interest. This method can provide information on key questions to help prevent of infectious diseases. By allowing researchers to investigate the efficacy of handwashing for particular organisms of interest.The main advantage of this technique is that it is flexible and can be adapted to allow for investigation of many different organisms. We first had the idea for this method when we realized chlorine solutions were being used for handwashing in Ebola contexts and there was no evidence for the efficacy of this at the time. After recruiting eligible subjects and preparing handwashing solutions according to the text protocol, prepare bacteria by streaking a non-pathogenic strand of E.Coli onto LB agar plates and incubate the cultures at 37 degrees celsius for 24 hours to obtain single colonies.One day before the start of the experiment, use a sterile lube to grab a single colony from the plate and inoculate 10 milliliters of LB broth. Incubate the cultures at 37 degree celsius, with shaking, overnight. On the morning of the experiment, add one milliliter of the overnight culture to 20 milliliters of fresh LB broth.Incubate the cultures for approximately two and half hours to achieve a salt density greater than 10 to the eighth CFU per milliliter. Then, use a spectrophotometer to estimate the concentration of the culture. Immediately prior to testing, prepare an inoculum composed of 68%bacteria or viral suspension and 32%sodium chloride or soil load.Swirl or gently vortex to mix. After preparing the volunteers according to the text protocol, test the pH of each volunteer's skin by placing a flat tip skin pH probe in the webbed space between the pointer and the middle fingers. Ensure that the electrode is flat against the skin and record the pH reading.Next, have the volunteer cup both hands together. Then, carefully pipette 750 microliters of the inoculate into each palm to spike the hands. When spiking volunteers'hands, it is important none of the inoculum is spilled.Remind volunteers this is important and give them the opportunity to practice with water before beginning the procedure. Have the volunteers gently rub their hands together until all surfaces of the hand are coded with the inoculate, while subjecting the hands to as little friction as possible. Instruct the volunteers to hold their hands still and away from their body for an additional 30 seconds to allow the inoculate to dry.Then wash the hands using one of the methods described in the text protocol. For hand washing with soap, use 10 milliliters of Ultrapure water to wet the hands. Have the volunteers lather their hands with soap and then rub their hands together for an additional 20 seconds.Rinse the volunteer's hands by pouring 500 milliliters of Ultrapure water at room temperature through a funnel at a flow rate of 1.5 liters per minute into a large sample collection bag and process the sample within two hours. For all chlorine solutions, pour 200 milliliters of chlorine solution over the volunteer's hands through a funnel at a flow rate of 1.5 liters per minute and have the volunteers rub their hands thoroughly. As another hand washing method, have the volunteers use hand sanitizer to wash their hands.It's important all surfaces of the hand are gently rubbed, instruct participants to focus on each part, palms, fingernails, in between fingers as they rub and then ensure the entire hand has been rinsed. For control A, after inoculation, do not perform a handwashing step. For control B, use only Ultrapure water at room temperature to perform handwashing through a funnel with a known flow rate.After handwashing, immediately place each volunteer's hand selected for testing, into a sample bag containing 75 milliliters of Leeuwin up to the wrist. Hold the top of the bag tightly around the wrist. Have the volunteers gently rub their hand in the solution for 30 seconds, taking care to reach in between the fingers and underneath the fingernails.Gently massage the hand from outside the bag for 30 seconds to ensure that the entire hand is thoroughly rinsed in the Leeuwin, all the way up to the wrist. Seal the bag and process it according to the appropriate essay. Before repeating the process with each handwashing method, have the volunteers use soap in warm water to thoroughly wash their hands in the sink.Finally, use 70%ethanol to spray the volunteer's hands until they are coated on both sides, and allow them to dry. To analyze the samples, set up a flame and a filtration manifold with sterile filtration funnels and a vacuum connection. Sterilize forceps by dipping them in ethanol and flaming them.Use the forceps to place a 0.45 micron filter onto the filtration manifold with the grid facing up. Then use a small amount of sterile PBS to wet the filter. Place the funnel on the base and pipette or pour the sample directly onto the filter.Engage the vacuum until the entire sample has passed through the membrane. Then, use sterile PBS to rinse the sides of the funnel and engage the vacuum again. Next, remove the funnel, flame sterilize the forceps and lift the filter from the base.Then place the filter gently on the medium in a petri dish with the grid facing up, ensuring that the filter lies flush against the surface. Invert the plates and incubate at 37 degrees celsius for 24 hours. Following the incubation, count the E.Coli colonies and record the data.Carry out data analysis according to the text protocol. The protocol described in this video was completed with 18 volunteers tested with E.Coli and Phi6, for E.Coli without soil load, handwashing with HTH, NaDCC and stabilized NaOCl, all resulted in significantly greater log reductions than handwashing with water only. With soil load, HTH resulted in a significantly greater log reduction of E.Coli than water only handwashing with soap and ABHS.There was no significant difference between methods for Phi6 without soil load. However, for Phi6 with soil load, water alone resulted in a greater log reduction than ABHS or stabilized NaOCl, and handwashing with soap in a greater log reduction than ABHS, stabilized NaOCl and generated NaOCl. HTH also had a greater log reduction than ABHS and stabilized NaOCl and NaDCC resulted in a greater log reduction than stabilized NaOCl and ABHS.As demonstrated in these graphs, chlorine resulted in a significantly greater log reduction of E.Coli persisting in the rinse water than handwashing with soap. Finally, the same pattern was found in Phi6 without soil load with all chlorine solutions resulting in a significantly greater reduction of Phi6 in rinse water than handwashing with soap. There were no significant decreases in rinse water with Phi6 and soil load.While attempting this procedure, it's important to remember efficacy results for each condition are calculated by comparing the results for the two controls. This means it is very important to perform the steps consistently for each handwashing option.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

96 microtiter ובכן פלייט מבוססי שיטה ליצירת ניטור ובדיקה של רגישות נגד פטריות קנדידה אלביקנס Biofilms

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

Isolation of Brain and Spinal Cord Mononuclear Cells Using Percoll Gradients

בידוד של המוח ותאי חוט השדרה mononuclear שימוש Percoll Gradients

Isolation of immune cells that infiltrate the central nervous system (CNS) during infection, trauma, autoimmunity or neurodegeneration, is often required ...

Using a Pan-Viral Microarray Assay (Virochip) to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

Using a Pan-Viral Microarray Assay Virochip to Screen Clinical Samples for Viral Pathogens

באמצעות assay הפאן ויראלי microarray (Virochip) אל מסך דוגמאות קליניות עבור פתוגנים ויראליים

The diagnosis of viral causes of many infectious diseases is difficult due to the inherent sequence diversity of viruses as well as the ongoing emergence ...

'Bioluminescent' Reporter Phage for the Detection of Category A Bacterial Pathogens

&quot;Bioluminescent&quot; כתב phage לצורך זיהוי של קטגוריה פתוגנים חיידקיים

Yersinia pestis and Bacillus anthracis are Category A bacterial pathogens that are the causative agents of the plague and anthrax, respectively 1. ...

Diagnosing Pulmonary Tuberculosis with the Xpert MTB/RIF Test

אבחון שחפת ריאתית עם מבחן אקספרט MTB / RIF

Tuberculosis (TB) due to Mycobacterium tuberculosis (MTB) remains a major public health issue: the infection affects up to one third of the world ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

שימוש בינוני כיח מלאכותית לבדיקת יעילות אנטיביוטי נגד<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; בתנאי רלוונטיים יותר ריאות סיסטיק פיברוזיס

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

Using Click Chemistry to Measure the Effect of Viral Infection on Host-Cell RNA Synthesis

שימוש בכימיה לחץ כדי למדוד את ההשפעה של זיהום ויראלי בסינתזת RNA Host-Cell

Many RNA viruses have evolved the ability to inhibit host cell transcription as a means to circumvent cellular defenses. For the study of these viruses, ...

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

בניתוח חוץ גופייה של תיווך Myd88 הסלולרי תגובה החיסונית לוירוס הנילוס המערבי זיהום הזנים Mutant

An attenuated West Nile virus (WNV), a nonstructural (NS) 4B-P38G mutant, induced higher innate cytokine and T cell responses than the wild-type WNV in ...

A Rapid Strategy for the Isolation of New Faustoviruses from Environmental Samples Using Vermamoeba vermiformis

A Rapid Strategy for the Isolation of New Faustoviruses from Environmental Samples Using Vermamoeba vermiformis

אסטרטגית ראפיד עבור הבידוד של ניו Faustoviruses ממדגמים סביבת שימוש<em&gt; Vermiformis Vermamoeba</em

The isolation of giant viruses is of great interest in this new era of virology, especially since these giant viruses are related to protists. Giant ...

A Simple Flow Cytometric Method to Measure Glucose Uptake and Glucose Transporter Expression for Monocyte Subpopulations in Whole Blood

Cytometric זרימה פשוט שיטה למדוד ספיגת הגלוקוז ואת ביטוי נשא גלוקוז עבור מונוציטים subpopulations ב דם מלא

Monocytes are innate immune cells that can be activated by pathogens and inflammation associated with certain chronic inflammatory diseases. Activation of ...