Name: effects of allogeneic platelet-rich plasma (prp) on the healing process of sectioned achilles tendons of rats: a methodological description
Uploaded: 2018-03-19T12:30:00
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Diese Studie wurde unterstützt durch Standard de Liège und Lejeune - Lechien gewährt der Leon Frédéricq Mittel.

Pflege und Umgang mit den Tieren durchgeführt wurden, gemäß dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren zubereitet von der National Academy of Sciences und vom National Institute of Health (USA) veröffentlicht. Europäische und nationale Gesetzgebung wurden sorgfältig befolgt.
(1) tierische Vorbereitung
<ol><li>Verwenden Sie 132 2 - Monate alte männliche Sprague-Dawley Ratten mit einem Gewicht von 320-450 g (120 Ratten für Experimente) und 12 Ratten für die Blutabnah...

<ol>
	<li>Kaux, J., Degrave, N., Crielaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+rich+plasma+traitement+des+tendinopathies+chroniques?+Revue+de+la+litt&#233;rature.+Platelet+rich+plasma+treatment+of+chronic+tendinopathies?+Review+of+literature.">Platelet rich plasma traitement des tendinopathies chroniques? Revue de la litt&#233;rature. Platelet rich plasma treatment of chronic tendinopathies? Review of literature.</a> J. Traumatol. du Sport. 24, 99-102 (2007).</li><li>Anitua, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+preparations+rich+in+growth+factors+promote+proliferation+and+induce+VEGF+and+HGF+production+by+human+tendon+cells+in+culture.">Autologous preparations rich in growth factors promote proliferation and induce VEGF and HGF production by human tendon cells in culture.</a> J. Orthop. Res. 23, 281-286 (2005).</li><li>Bosch, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+platelet-rich+plasma+on+the+quality+of+repair+of+mechanically+induced+core+lesions+in+equine+superficial+digital+flexor+tendons:+A+placebo-controlled+experimental+study.">Effects of platelet-rich plasma on the quality of repair of mechanically induced core lesions in equine superficial digital flexor tendons: A placebo-controlled experimental study.</a> J. Orthop. Res. 28, 211-217 (2010).</li><li>Kaux, J. F., Drion, P., Croisier, J. L., Crielaard, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tendinopathies+and+platelet-rich+plasma+(PRP):+From+pre-clinical+experiments+to+therapeutic+use.">Tendinopathies and platelet-rich plasma (PRP): From pre-clinical experiments to therapeutic use.</a> J. Stem Cells Regen. Med. 11, P7-P17 (2015).</li><li>Maffulli, N., Wong, J., Almekinders, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Types+and+epidemiology+of+tendinopathy.">Types and epidemiology of tendinopathy.</a> Clin. Sports Med. 22, 675-692 (2003).</li><li>Molloy, T., Wang, Y., Murrell, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+growth+factors+in+tendon+and+ligament+healing.">The roles of growth factors in tendon and ligament healing.</a> Sports Med. 33, 381-394 (2003).</li><li>Lyras, D. 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Sports Med. 38, 2477-2486 (2010).</li><li>Kajikawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-rich+plasma+enhances+the+initial+mobilization+of+circulation-derived+cells+for+tendon+healing.">Platelet-rich plasma enhances the initial mobilization of circulation-derived cells for tendon healing.</a> J. Cell. Physiol. 215, 837-845 (2008).</li><li>Pasternak, B., Aspenberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metalloproteinases+and+their+inhibitors-diagnostic+and+therapeutic+opportunities+in+orthopedics.">Metalloproteinases and their inhibitors-diagnostic and therapeutic opportunities in orthopedics.</a> Acta Orthop. 80, 693-703 (2009).</li><li>Dell, R. B., Holleran, S., Ramakrishnan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+size+determination.">Sample size determination.</a> ILAR J. 43, 207-213 (2002).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Lab. Anim. 48, 178-192 (2014).</li><li>Kaux, J. -. 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F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Endothelial+Growth+Factor-111+(VEGF-111)+and+tendon+healing:+preliminary+results+in+a+rat+model+of+tendon+injury.">Vascular Endothelial Growth Factor-111 (VEGF-111) and tendon healing: preliminary results in a rat model of tendon injury.</a> Muscles. Ligaments Tendons J. 4, 24-28 (2014).</li><li>Docheva, D., Hunziker, E. B., F&#228;ssler, R., Brandau, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tenomodulin+is+necessary+for+tenocyte+proliferation+and+tendon+maturation.">Tenomodulin is necessary for tenocyte proliferation and tendon maturation.</a> Mol. Cell. Biol. 25, 699-705 (2005).</li><li>Lambert, C. A., Colige, A. C., Munaut, C., Lapi&#232;re, C. M., Nusgens, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+pathways+in+the+over-expression+of+matrix+metalloproteinases+in+human+fibroblasts+by+relaxation+of+mechanical+tension.">Distinct pathways in the over-expression of matrix metalloproteinases in human fibroblasts by relaxation of mechanical tension.</a> Matrix Biol. 20, 397-408 (2001).</li><li>Nurden, A. T., Nurden, P., Sanchez, M., Andia, I., Anitua, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelets+and+wound+healing.">Platelets and wound healing.</a> Front. Biosci. 13, 3532-3548 (2008).</li><li>Woodall, J., Tucci, M., Mishra, A., Benghuzzi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+effects+of+platelet+rich+plasma:+a+study+on+HL-60+macrophage-like+cells.">Cellular effects of platelet rich plasma: a study on HL-60 macrophage-like cells.</a> Biomed. Sci. Instrum. 43, 266-271 (2007).</li><li>Taylor, D. W., Petrera, M., Hendry, M., Theodoropoulos, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+of+the+use+of+platelet-rich+plasma+in+sports+medicine+as+a+new+treatment+for+tendon+and+ligament+injuries.">A systematic review of the use of platelet-rich plasma in sports medicine as a new treatment for tendon and ligament injuries.</a> Clin. J. Sport Med. 21, 344-352 (2011).</li><li>Mazzocca, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+positive+effects+of+different+platelet-rich+plasma+methods+on+human+muscle,+bone,+and+tendon+cells.">The positive effects of different platelet-rich plasma methods on human muscle, bone, and tendon cells.</a> Am. J. Sports Med. 40, 1742-1749 (2012).</li><li>McCarrel, T. M., Minas, T., Fortier, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+leukocyte+concentration+in+platelet-rich+plasma+for+the+treatment+of+tendinopathy.">Optimization of leukocyte concentration in platelet-rich plasma for the treatment of tendinopathy.</a> J. Bone Joint Surg. Am. 94 (1-8), e143 (2012).</li><li>Boswell, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increasing+platelet+concentrations+in+leukocyte-reduced+platelet-rich+plasma+decrease+collagen+gene+synthesis+in+tendons.">Increasing platelet concentrations in leukocyte-reduced platelet-rich plasma decrease collagen gene synthesis in tendons.</a> Am. J. Sports Med. 42, 42-49 (2014).</li><li>Virchenko, O., Aspenberg, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+can+one+platelet+injection+after+tendon+injury+lead+to+a+stronger+tendon+after+4+weeks?:+Interplay+between+early+regeneration+and+mechanical+stimulation.">How can one platelet injection after tendon injury lead to a stronger tendon after 4 weeks?: Interplay between early regeneration and mechanical stimulation.</a> Acta Orthop. 77, 806-812 (2006).</li></ol>

Thrombozyten sind wichtig für die frühen entzündlichen Phase der Heilungsprozess Sehne. Wenn diese Plättchen verbindlich Gewebe oder Faktoren, die Gerinnung induzieren ausgesetzt sind, werden sie Wachstumsfaktoren freigesetzt, die in α-Granulat gefüllt sind. Durch diese Interaktion extrazelluläre Matrix Makromoleküle sind dazu und mesenchymale Zellen vermehren. Thrombozyten haben auch eine chemotaktische Aktivität auf Vorläuferzellen in der Durchblutung, Verbesserung der Angiogenese und anregende zellulare Unte...

Koagulation, entzündliche Prozesse und die Immunität Modulation Rollen der Thrombozyten sind bekannt1. Vor kurzem wurde nachgewiesen, dass sie auch stärkenden Eigenschaften2,3. In der Tat verschiedene Zytokine und Wachstum Faktoren (VEGF, PDGF, TGF-B, IGF-I und HGF) während Degranulation von Blutplättchen freigesetzt werden. Diese Wachstumsfaktoren fördern Angiogenese, Gewebe Umbau und Wunde heilen (Knochen, Haut, Muskel, Sehne)2. Autologem Blut Zentrifugieren produziert Thrombozyten rich Plasma (PRP) enthält hohe Thrombozyten-Konzentrationen abhängig von der Isolierung-Methode (zwischen 3 und 10 Mal Blut Grundlinie Konzentrationen). In der Tat können nicht verschiedenen PRP Präparationstechniken eine identische Endprodukt zur Verfügung stellen. Bis jetzt gab es keine internationale Einigkeit zu diesem Thema. Insgesamt konnte PRP eine attraktive Therapieoption für die Behandlung von chronischen Muskel-Skelett-Erkrankungen, wie Sehnenerkrankung, Plantarfasziitis, Arthrose und Pseudarthrose4sein. Es wurde zum ersten Mal in orale Chirurgie und Implantologie4 verwendet, zur Verbesserung und Beschleunigung der Knochenheilung nach dem Platzieren eines Zahnimplantats. In dieser Studie beschreiben wir eine reproduzierbare Methode, die den Erwerb von PRP für Tierversuche4ermöglicht.
Da Verletzungen von Sehnen häufig bei Sportlern und körperliche Arbeiter beobachtet werden, den Heilungsprozess und reduziert die Zeit zur Erholung zu verstärken sind von großem Interesse5. Neue Behandlungsmethoden, die oft entwickeln beinhalten die Verwendung von Wachstumsfaktoren und die Verwaltung der PRP ist eine einfache und minimal-invasive Möglichkeit, eine Mischung aus endogene Wachstumsfaktoren4liefern.
Mehrere in-vitro- oder Tier-Studien haben gezeigt, dass die Gabe von Plasma, enthält ein hohes Maß an Thrombozyten, durch biologische Mediatoren lösen Sehnen- und Bänderverletzungen Reparatur anregen kann, durch die Freigabe biologische Mediatoren6 ,7,8,9. Darüber hinaus haben andere Studien gezeigt, dass PRP Typ I und III Kollagen-Synthese in Sehne Zellen9,10,11, stimulieren kann. Es wurde auch vermutet, dass PRP kann die Aktivierung der Matrix-Metalloproteinasen (MMPs) zu verringern und verringern somit den Abbau der Matrix. Zellen, die den Entzündungsprozess beteiligt sind können MMP-9, produzieren, die in Gewebe Umbau (physiologische und pathologische) durch Entzündung12induziert eine Rolle spielt.
Basierend auf diesen Informationen, vermutet wir, dass eine einzige PRP-Injektion in den geschnittenen Achillessehnen von Ratten die Recovery-Prozess und die mechanische Festigkeit des reparierten Gewebes verbessert werden könnte. Dies wird durch die Messung der biomechanischen Eigenschaften der Heilung sehnen während des Wiederherstellungsprozesses und durch histologische und molekularbiologische Analysen zur Bewertung von Kollagen Umbau in das neu gebildete Gewebe getestet. Ziel der Studie war zu beobachten, wenn die Heilung der geschnittenen Achillessehnen eine einmalige Injektion von allogenen PRP beeinflussen könnten.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xyl-M)</td>
			<td>VMD</td>
			<td>none</td>
			<td>anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamin (J&#233;tamine 1000 CEVA)</td>
			<td>CEVA Sant&#233; Animale</td>
			<td>none</td>
			<td>anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphin (Veterg&#233;sic Multidosis)</td>
			<td>ALSTOE</td>
			<td>none</td>
			<td>Painkiller</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iso-Betadine</td>
			<td>MEDA-Pharma</td>
			<td>none</td>
			<td>Desinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>resorbable yarn Vicryl 6/0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nembutal</td>
			<td>CEVA Sant&#233; Animale</td>
			<td>none</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td>Preserves structure of the tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol 100%</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20,922,364</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 95%</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20,823,362</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>VWR</td>
			<td>28973.363</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin</td>
			<td>VWR</td>
			<td>LEIC3950.1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>1.15938.0025</td>
			<td>Colorant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>1.15935.0100</td>
			<td>Colorant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eukitt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>3989</td>
			<td>Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

effects of allogeneic platelet-rich plasma (prp) on the healing process of sectioned achilles tendons of rats: a methodological description

Dieser Artikel beschreibt die experimentellen Verfahren zu beobachten, wenn PRP positiv Sehne Heilung beeinflussen kann. Es gibt 4 wichtigsten Schritten zu folgen: induzieren eine Läsion in der Achillessehne; Vorbereiten von PRP und injizieren es (oder die Kochsalzlösung); Entfernen Sie die Sehne; und biomechanischen, molekulare und histologischen Auswertungen. Bei jedem Schritt werden alle Verfahren und Methoden detailliert beschrieben, so dass sie leicht reproduziert werden können.
Achillessehnen wurden chirurgisch geschnitten (Entfernung von einen 5 mm langen Abschnitt). Danach wurde PRP oder Kochsalzlösung injiziert, um zu untersuchen ob PRP einen positiven Effekt hat auf die Heilung der Sehne. Drei Gruppen von 40 Tieren (insgesamt 120 Ratten in dieser Studie verwendet wurden) wurden in 2 Gruppen unterteilt: PRP-Injektion-Gruppe und eine Kochsalzlösung Injektion Gruppe steuern. Ratten wurden geopfert, bei zunehmender Zeitpunkten (Gruppe A: 5 Tage; Gruppe B: 15 Tage; Gruppe C: 30 Tage) und Sehnen entfernt wurden. 90 sehnen unterzog sich biomechanische Tests vor der Ausführung transkriptomischen Analyse und 30 verbleibenden Spannglieder wurden histologische Analyse vorgelegt.

Die Ergebnisse werden als Mittelwert ± Standardabweichung des Mittelwerts ausgedrückt und mit Varianzanalyse (ANOVA) verglichen. Ein zwei-Wege-ANOVA und post-Hoc test de Scheffé, das ist ein parametrischer Test, verwendet wurden.
Die Zugfestigkeit (UTS) erforderlich, um einen Bruch der nicht verletzten Achillessehnen von Ratten provozieren betrug 42,0 ± 5,7 N (n = 10). Die Zugfestigkeit deutlich erhöht (p < 0,0001)...

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Effects of Allogeneic Platelet-Rich Plasma PRP on the Healing Process of Sectioned Achilles Tendons of Rats: A Methodological Description

Dieses Protokoll beschreibt Verfahren zur Bewertung der Heilung sehnen in Ratten, die mit allogenen Platelet rich Plasma (PRP) oder Kochsalzlösung injiziert wurde, nach dem entfernen Teil der Achillessehne. Der Fortschritt der Heilung der Sehne zu mehreren Zeitpunkten mit verschiedenen Arten von Analysen ausgewertet.

Auswirkungen der allogenen Platelet-Rich Plasma (PRP) auf den Heilungsprozess des geschnittenen Achillessehnen von Ratten: eine methodische Beschreibung

This article describes the experimental procedures used to observe if PRP can positively affect tendon healing. There are 4 main steps to follow: induce a ...

The overall goal of this procedure is to observe the effects of a single injection of Platelet-Rich Plasma, or PRP, on the resistance and healing process of surgically-sectioned rat Achilles tendons at various time points. This method can help answer quick questions on musculoskeletal field about tendon lesions. The main advantage of this technique is that the surgical, biomechanical, and PRP progression procedures are well-standardized.The implications of these techniques extend toward the use of PRP in humans, because these types of lesion and the tendon healing process are similar between rats and human. Though this method can provide insight into PRP preparation for musculoskeletal injuries, this injection technique can also be applied to other systems, such as heart or skin disease. Visual demonstration of the method is very important, because surgical and biomechanical steps require consistent reproducibility in order to obtain optimal results.Begin by weighing and ear-tagging the rat. After confirming the appropriate level of sedation by toe pinch, apply water drops onto the animal's corneas and remove the hair from the left hind limb. Disinfect the exposed skin with a one-to-10 dilution of iso-Betadine solution and place the animal on a 20-degree Celsius heating pad under a dissecting microscope in the lateral decubitus position, with the left hind limb in the superior position.Grasp the left hind limb paw with forceps and make a 20 to 25 millimeter lateral skin incision around the Achilles tendon. Using fine scissors, dissect the fascia to expose the Achilles tendon complex and remove the plantaris tendon. Cut the Achilles tendon transversely, five millimeters proximal to its calcaneal insertion, and remove a five-millimeter long portion.Then use resorbable yarn and continue with sutures to close the fascia and the skin, and place the rat under a heat source with monitoring until full recovery. While the recipient animals are recovering, collect 20 milliliters of whole blood from one donor rat heart per experimental animal into individual tubes containing 3.2%buffered sodium citrate. To obtain the platelet-rich plasma, centrifuge the blood and use a plastic transfer pipette to carefully harvest the upper PRP-containing phase into a second plastic tube.Determine the volume of collected PRP and measure the platelet count on a hematology analyzer. Centrifuge the PRP again and carefully transfer the supernatant into a new plastic tube. The remaining volume in the PRP tube should be around 2/3 of the volume required to achieve 2.5 times 10 to the sixth platelets per microliter.Next, gently re-suspend the platelet pellet with pipetting. Measure the platelet count of this concentrated platelet-rich plasma, adding back the appropriate volume of autologous platelet-poor plasma to reach the target concentration as necessary. Activate the platelets with 50 microliters of calcium chloride per milliliter of PRP for about one hour at room temperature.Then load the platelets into a one-milliliter syringe equipped with a 21-gauge needle and inject 50 microliters of the platelets directly into the suture site of each animal. At the appropriate experimental endpoint, shave the left hind limb of the anesthetized experimental animal, and position the rat under a dissecting microscope as just demonstrated. Holding the paw with fingers, make a 10-millimeter incision in the surgical site to expose the triceps suralis.To remove the Achilles tendon, cut the calcaneal bone transversally, five to 10 millimeters distal to its attachment and dissect a piece of the triceps suralis large enough to fit into the cryo-jaw. Use forceps to place the sample immediately into the upper jaw of the cryo-jaw and close the instrument. Place the cryo-jaw vertically into a universal testing machine, and fix the calcaneal bone between the lower clamps.To calculate the cross-sectional area, place cameras perpendicular to each other. Add liquid nitrogen into both of the upper jaw basins to freeze the muscle to an order of magnitude stiffer than the tendon, so that it does not deform during the tensile test. When the freezing zone reaches the metal clamp border, set the displacement rate of the machine at a constant speed of one millimeter per second until rupture, and begin the tensile test, using a computer to record the ultimate tensile strength in Newtons.To account for differences in the cross-sectional areas of the healing tendons, normalize the ultimate tensile strength to a unit area that represents the mechanical stress experienced by the tissue. Then when the tendon ruptures, snap freeze the ruptured tendon samples in liquid nitrogen and store them at negative 80 degrees Celsius until RNA extraction and RTPCR analysis. In this representative experiment, a greater force was required to induce tendon rupture in the PRP-injected group than in the control saline-treated group at every time point tested, suggesting a more robust healing process or better mechanical properties within the PRP-treated animals.Although the PRP group demonstrated a higher intra-group scatter than did the saline group, the cross-sectional area of the tendons was determined to be larger in the PRP-injected group at days 15 and 30 after lesion induction. Further, Masson's trichrome staining revealed a higher presence fibrillar collagen, a key component in tendon morphology and strength, in PRP-treated animals on days five and 15, with a similar intensity of staining observed in both groups by day 30 after injection. After watching this video, you should have a good understanding of how to induce a rat standard lesions, and to sample the tendon to evaluate their healing process after a PRP injection.

Research

JoVE Journal

Medicine

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Forschung

Medizin

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Using 2-Photon Microscopy to Quantify the Effects of Chronic Unilateral Ureteral Obstruction on Glomerular Processes

Mit der 2-Photonen-Mikroskopie die Auswirkungen einer chronischen einseitigen Harnleiterobstruktion auf glomeruläre Prozesse quantifizieren

Applying novel microscopy methods to suitable animal disease models to explore the dynamic physiology of the kidney remains a challenge. Rats with surface ...

Platelet-Rich Plasma Lysate for Treatment of Eye Surface Diseases

Plättchenreiches Plasmalysat zur Behandlung von Erkrankungen der Augenoberfläche

Various ocular surface diseases are treated with blood-derived eye drops. Their use has been introduced in clinical practice because of their metabolite ...

Ultraschalluntersuchung der Morphologie der Achillessehne

Measurement of Healthy and Injured Triceps Surae Morphology

Autor im Rampenlicht: Erforschung der Komplexität von Achillessehnenverletzungen – Forschung und zukünftige Richtungen

Messung der gesunden und verletzten Morphologie des Trizeps surae

Achilles tendon injuries occur throughout the lifespan and can negatively affect quality of life and overall health. Achilles tendinopathy is generally ...