Name: a novel mammary fat pad transplantation technique to visualize the vessel generation of vascular endothelial stem cells
Uploaded: 2017-08-03T13:00:00
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この研究は、中国国立科学財団（31530045および31371500、YAZ、31401245からQCY）、中国科学技術省（2014CB964800）、中国科学アカデミー（XDB19000000からYAZ）、および中国細胞生物学会（QCYへの早期キャリアフェローシップ）。

実験手順は、承認されたプロトコールSIBCB-NAF-15-002-S335-003の下で、上海生化学および細胞生物学研究所の中国科学アカデミーのアニマルケアおよび使用委員会によって承認された。 1.マウス乳腺からのVESCの単離<ol><li> 乳腺の収穫および組織消化。 <ol><li>組織ドナーとして、8週齢のアクチン-GFP成熟処女レポーターマウスを使用し、体重範囲は20〜25gで?...

<ol>
	<li>Thomas, E. D., Lochte, H. L., Lu, W. C., Ferrebee, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+infusion+of+bone+marrow+in+patients+receiving+radiation+and+chemotherapy.">Intravenous infusion of bone marrow in patients receiving radiation and chemotherapy.</a> N Engl J Med. 257 (11), 491-496 (1957).</li><li>Chao, M. P., Seita, J., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+normal+hematopoietic+and+leukemia+stem+cell+hierarchy.">Establishment of a normal hematopoietic and leukemia stem cell hierarchy.</a> Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 73, 439-449 (2008).</li><li>Bompais, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+endothelial+cells+derived+from+circulating+progenitors+display+specific+functional+properties+compared+with+mature+vessel+wall+endothelial+cells.">Human endothelial cells derived from circulating progenitors display specific functional properties compared with mature vessel wall endothelial cells.</a> Blood. 103 (7), 2577-2584 (2004).</li><li>Fang, S., Wei, J., Pentinmikko, N., Leinonen, H., Salven, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+functional+blood+vessels+from+a+single+c-kit++adult+vascular+endothelial+stem+cell.">Generation of functional blood vessels from a single c-kit+ adult vascular endothelial stem cell.</a> PLoS Biol. 10 (10), e1001407 (2012).</li><li>Naito, H., Kidoya, H., Sakimoto, S., Wakabayashi, T., Takakura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+a+resident+vascular+stem/progenitor+cell+population+in+preexisting+blood+vessels.">Identification and characterization of a resident vascular stem/progenitor cell population in preexisting blood vessels.</a> EMBO J. 31 (4), 842-855 (2012).</li><li>Yoder, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redefining+endothelial+progenitor+cells+via+clonal+analysis+and+hematopoietic+stem/progenitor+cell+principals.">Redefining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals.</a> Blood. 109 (5), 1801-1809 (2007).</li><li>Snippert, H. J., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+adult+stem+cells.">Tracking adult stem cells.</a> Embo Rep. 12 (2), 113-122 (2011).</li><li>Yu, Q. C., Song, W., Wang, D., Zeng, Y. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+blood+vascular+endothelial+stem+cells+by+the+expression+of+protein+C+receptor.">Identification of blood vascular endothelial stem cells by the expression of protein C receptor.</a> Cell Res. 26 (10), 1079-1098 (2016).</li><li>Rios, A. C., Fu, N. Y., Lindeman, G. J., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+identification+of+bipotent+stem+cells+in+the+mammary+gland.">In situ identification of bipotent stem cells in the mammary gland.</a> Nature. 506, 322-327 (2014).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+stem+cells+in+small+intestine+and+colon+by+marker+gene+Lgr5.">Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5.</a> Nature. 449, 1003-1007 (2007).</li><li>Wang, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multipotent+mammary+stemcells+by+protein+C+receptor+expression.">Identification of multipotent mammary stemcells by protein C receptor expression.</a> Nature. 517, 81-U201 (2015).</li><li>Stahl, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mouse+Retina+as+an+Angiogenesis+Model.">The Mouse Retina as an Angiogenesis Model.</a> Invest Ophth Vis Sci. 51 (6), 2813-2826 (2010).</li><li>Mammoto, T., Mammoto, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+Fibrin+Gel+on+Mouse+Lung+to+Study+Lung-specific+Angiogenesis.">Implantation of Fibrin Gel on Mouse Lung to Study Lung-specific Angiogenesis.</a> J. Vis. Exp. (94), e52012 (2014).</li><li>Snippert, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+crypt+homeostasis+results+from+neutral+competition+between+symmetrically+dividing+Lgr5+stem+cells.">Intestinal crypt homeostasis results from neutral competition between symmetrically dividing Lgr5 stem cells.</a> Cell. 143 (1), 134-144 (2010).</li><li>Soriano, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generalized+lacZ+expression+with+the+ROSA26+Cre+reporter+strain.">Generalized lacZ expression with the ROSA26 Cre reporter strain.</a> Nat Genet. 21 (1), 70-71 (1999).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lgr5(+ve)+stem+cells+drive+self-renewal+in+the+stomach+and+build+long-lived+gastric+units+in+vitro.">Lgr5(+ve) stem cells drive self-renewal in the stomach and build long-lived gastric units in vitro.</a> Cell Stem Cell. 6 (1), 25-36 (2010).</li><li>Solar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+exocrine+duct+cells+give+rise+to+insulin-producing+beta+cells+during+embryogenesis+but+not+after+birth.">Pancreatic exocrine duct cells give rise to insulin-producing beta cells during embryogenesis but not after birth.</a> Dev Cell. 17 (6), 849-860 (2009).</li></ol>

血管新生アッセイは、血管動態を研究するための良好な実験的アプローチである。出生後に発症するマウス網膜血管系は、血管新生を研究する魅力的なモデルであることが証明されている12 。それが比較的接近可能であるにもかかわらず、網膜血管床内の実際の操作はむしろ困難である。これまでのところ、最もよく記述されているインビボ移植は、基底膜マ?...

発生およびホメオスタシスの間、血管の成長およびリモデリングは、臓器の成長および修復に従って忠実に起こる。血管新生は、既存の血管か​​らの新しい血管の発生を説明し、これらの動的な血管変化を媒介する主要な力とみなされる。各血管は内皮細胞（EC）の層で内張りされており、血管構造の基礎と思われる。長い間、恒常性の間にECプールが補充されるメカニズムは依然として不明であり、血管代謝回転が成熟EC増殖の結果であるか、または血管幹/前駆細胞活性の寄与であるかについて議論がなされた。直接の生理学的証拠の欠如のために、血管内皮幹細胞（VESC）の存在および細胞の同一性もまた議論の余地があった。 幹細胞の行動を確認するために使用される最も一般的なアプローチの1つは、移植計画推定上の幹細胞のレシピエントマウスへの導入。この方法は、 インビボで候補幹細胞の幹細胞の可能性を測定する。移植は、骨髄幹細胞1の研究に最初に適用され、これは造血系2の階層的特徴の確立に寄与した。内皮の分野では、側面皮膚の下に皮下に挿入された基底膜マトリックス（ 例えば、マトリゲル）プラグは、移植されたECの血管形成能力に対処するために使用される標準的なin vivo血管形成アッセイであった。 3D培養系及び移植におけるコロニー形成を含む、複数の実験方法は、潜在的なEC前駆/ VESC集団3、4、5、6を示唆しています。しかし、基底膜マトリックスに埋め込まれたECは、これは、移植された細胞の血管形成能を完全に探索するのに必要な最適なニッチ環境を提供しない。その結果、マトリックスプラグ内に形成された血管は、主に毛細管様であり、機能的に測定不可能である。 乳腺は出生後に発達し、最も堅牢な成長が思春期および妊娠中に起こる。思春期段階では、乳房上皮は急速に拡大し、周囲の血管構造の効率的なリモデリングを伴う乳房脂肪パッド全体を占有する。したがって、乳腺は、血管新生の研究のための優れたモデルを提供する。これは、成長する乳房上皮からの空間、マトリックス、および豊富な血管新生刺激を提供し、したがって、外因性細胞の血管新生能力を評価するための理想的な移植部位である。さらに、乳房脂肪パッドは、形成された外因性血管を宿主循環系と統合することを可能にし、さらなるf皮下移植に対する優位性を表す。 インビトロ培養および移植アッセイは、細胞集団の再生特性を調べるのに有効な方法であるが、そのようなアッセイは、細胞がそれらの天然生息地から取り除かれるにつれて可塑性を刺激することがあり、細胞が切断されると彼らの生理的環境7 。したがって、細胞運命の直接インビボ証拠を得ることは、内皮集団の行動の現在の理解を進めるための重要なアプローチである。 VESCの同定および身体系におけるそれらの特性の調査のためには、生理学的状況におけるインビボでの幹細胞の挙動を明らかにすることができるため、遺伝的運命マッピング（ すなわち、インビボ系譜の追跡）が不可欠であり、実際の幹細胞は、評価される。リネージュtraci候補VESCの長期持続（ すなわち、自己再生）および起源組織（ すなわち、分化能力）のための細胞型を産生するそれらの能力の直接的な証拠を提供する。 このプロトコルは、VESCの血管発生能力を観察するための新規の乳房脂肪パッド移植技術および系譜追跡方法を記載する。これらの技術は、現在利用可能なアッセイの欠点を克服し、VESCの幹細胞特性を最適に評価する新しい方法を提供する。これらのアプローチは、内皮集団の挙動および血管形成特性を評価し、病理学的環境内の血管細胞効力変化を決定するために使用できる効率的なツールである。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1265">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">0.05% Trypsin-Ethylene Diamine Tetraacetic Acid(EDTA) (1X)</td>
			<td style="width:263px;">Gibco (Life Technologies)</td>
			<td style="width:208px;">25300-062</td>
			<td style="width:387px;">0.05% Trypsin</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.22 &#181;m Filter Unit</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>SLGP033RB</td>
			<td>0.22 &#181;m Filter</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2-Methylbutanol-2, ReagentPlus</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>24, 048-6</td>
			<td>Tert Amyl Alcohol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">222, Tribromethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-25g</td>
			<td>222, Tribromethanol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole(DAPI)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>D1306</td>
			<td>DAPI</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70 &#181;m Cell Strainer</td>
			<td>BD FAL</td>
			<td>352350</td>
			<td>70 &#181;m Cell Strainer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Adhesion Microscope Slides</td>
			<td>CITOGLAS</td>
			<td>188105</td>
			<td>Glass slides</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-mouse CD105 APC</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>17-1051-82, clone MJ7/18</td>
			<td>for FACS analusis use at 1 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-mouse CD201 Biotin</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>13-2012-82</td>
			<td>for FACS analusis use at 2.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-mouse CD31 PE-Cyanine 7</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>25-0311-82, clone 390</td>
			<td>for FACS analusis use at 1 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BD FACSJazz Cell Sorter</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>655489</td>
			<td>FACS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>100190332</td>
			<td>BSA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810R</td>
			<td>Centrifuge</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Collagenase type 3</td>
			<td>Worthington-Biochem</td>
			<td>#LS004183</td>
			<td>Collagenase III</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Confocal microscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td>sp8</td>
			<td>Confocal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2463-5VL</td>
			<td>Dnase I</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Donkey anti-Rat Cy3</td>
			<td>Jackson ImmunResearch</td>
			<td>712-165-150</td>
			<td>Secondary antibody, use at 0.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont Forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>500342</td>
			<td>Froceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont Forceps - Micro-Blunted Tips</td>
			<td>FST</td>
			<td>11253-20</td>
			<td style="width:387px;">Forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30396.03</td>
			<td>FBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FITC Ms CD3/Gr1/CD11b/CD45R(B220)/Ter-119</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>78022</td>
			<td>Blood lineage cocktail for FACS analysis, use at 25 &#181;l per test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6279</td>
			<td>Glycerol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Iscov&#39;s Modified Dulbecco&#39;s Medium</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>12440-053</td>
			<td>IMDM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isolectin GS-IB4 from Griffonia Simplicifolia, Alexa Fluora&#160; 647</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z32450</td>
			<td>Isolectin-647</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel&#160; Matrix (growth factor reduced)</td>
			<td>BD</td>
			<td>356231</td>
			<td>Matrigel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse strain (Actin-GFP)</td>
			<td>Jax Laboratories</td>
			<td>3773</td>
			<td>Actin-GFP</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse strain (C57BL/6)</td>
			<td>SLAC</td>
			<td>C57BL/6</td>
			<td>C57BL/6</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse strain&#160; (BALB/c nude)</td>
			<td>SLAC</td>
			<td>BALB/c nude</td>
			<td>Nude mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
			<td>PFA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Penicilin Streptomycin</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>5140-122</td>
			<td>Pen/Strep</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline (pH7.2) 1X</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>c20012500BT</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PRIM1640</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>c11875500CP</td>
			<td>PRIM1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ProLong Gold antifade reagent</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>P36934</td>
			<td>Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat anti CD144</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550548</td>
			<td>for whole-mount analysis, anti-VE-Cadherin / Cdh5 antibdy for endothelial tight junction, use at 2.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat anti CD31-biotin</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553371</td>
			<td>for whole-mount analusis, anti-CD31/PECAM1 antibody for endothelial surface adhesion molecule, use at 10 ug/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Red Cell Lysis Buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7767-100ML</td>
			<td>Red blood cell lysing buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Straight/Sharp-Blunt/10cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>14028-10</td>
			<td>Fine Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Streptavidin eFluor 450</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>48-4317-82</td>
			<td>for FACS analysis use at 0.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>101551374</td>
			<td>TAM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787-250ML</td>
			<td>TritonX</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Wax Coated Braided Silk (Size 5-0 USP (1 Metric), 18 inches (45 cm) BLACK on C-1 Needle)</td>
			<td>COVIDIEN</td>
			<td>S1173</td>
			<td>Suture&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile Disposable Scaplels</td>
			<td>Swann Morton</td>
			<td>#10</td>
			<td>Scalpel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Betadine</td>
			<td>Yifeng Medical</td>
			<td align="right">20160101</td>
			<td>Antiseptic solution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel mammary fat pad transplantation technique to visualize the vessel generation of vascular endothelial stem cells

内皮細胞（EC）は、血管構造の基本的な構築ブロックであり、適切な血管発達およびホメオスタシスを確実にするための血管成長およびリモデリングを媒介する。しかしながら、内皮系統の階層に関する研究は、アクセスを獲得し、インビボでのその行動を直接評価するためのツールがないため、依然として分かり難い。この欠点に対処するために、乳房脂肪パッドを用いて血管新生を研究するための新しい組織モデルが開発されている。乳腺は主に、思春期および妊娠を含む出生後の段階で発症し、その間に堅牢な上皮増殖が広範囲の血管リモデリングを伴う。乳房脂肪パッドは、成長する乳房上皮からの空間、マトリックス、および豊富な血管形成刺激を提供する。さらに、乳房脂肪パッドは、腹膜腔の外側に位置し、外因性細胞の血管新生能を評価するための容易に接近可能な移植部位となる。この作品はまた、効率インビボで血管内皮幹細胞（VESC）の標的とされた集団を特異的に標識するために蛍光レポーターマウスを用いるntトレースアプローチ。この系譜追跡法は、その後の組織全面顕微鏡法と組み合わせて、標的細胞およびその子孫の直接的な可視化を可能にし、増殖能力を定量化し、分化のコミットメントを運命マッピングすることができる。これらの方法を用いて、VESCを発現する二重性プロテインCレセプター（Procr）の集団が最近、複数の血管系において同定されている。新たなECおよび周皮細胞の両方を生じるProcr + VESCは、発生、ホメオスタシス、および傷害修復の間に血管新生に積極的に寄与する。全体として、この原稿は、VESCsの幹細胞特性を評価するために使用することができる新しい乳房脂肪パッド移植およびインビボ系譜追跡技術を記載している。

乳腺VESC単離： その結果の移植アッセイのための内皮集団を単離するために、成熟（8週齢）の未処理マウス乳腺をドナー材料として採取した。内皮細胞は、抗体に基づく細胞選別技術を用いて単離された。 8週齢のC57BL / 6乳腺ECにおけるVESC集団のFACS分析の代表的プロットを図1に示す（図8?...

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A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

この研究は、顕微鏡観察のための全マウント組織調製に続く、乳房脂肪パッド移植による血管内皮幹細胞（VESC）の増殖、分化および血管形成能を評価するための新規アプローチを実証する。 インビボでのVESCの挙動を調べる系統的な追跡戦略も提示される。

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核の分布、蛋白質および細胞骨格を研究する線虫生殖細胞の解析

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

臍帯血由来から 3 D 肌 Organoid の生成誘導多能性幹細胞

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

体節誘導体誘導される人間からの体外世代多能性幹細胞します。

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Generation of Induced Neural Stem Cells from Peripheral Mononuclear Cells and Differentiation Toward Dopaminergic Neuron Precursors for Transplantation Studies

末梢単核細胞からの誘導神経幹細胞の生成と移植研究におけるドーパミン作動性ニューロン前駆体への分化

Parkinson&#39;s disease (PD) is caused by degeneration of dopaminergic (DA) neurons at the substantia nigra pars compacta (SNpc) in the ventral ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

紫外C(UV-C)損傷に対する主なマウス眼表面細胞/幹細胞における酸化的損傷の評価

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...

Isolation of Endocardial and Coronary Endothelial Cells from the Ventricular Free Wall of the Rat Heart

ラット心臓の心室自由壁からの心内膜細胞と冠状動脈内皮細胞の分離

It has been shown that endocardial endothelial cells (EECs) and coronary endothelial cells (CECs) differ in origin, development, markers, and functions. ...