Name: a novel mammary fat pad transplantation technique to visualize the vessel generation of vascular endothelial stem cells
Uploaded: 2017-08-03T13:00:00
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Este trabalho foi apoiado pela National Natural Science Foundation of China (31530045 e 31371500 a YAZ, 31401245 a QCY), o Ministério da Ciência e Tecnologia da China (2014CB964800), a Academia Chinesa de Ciências (XDB19000000 a YAZ) e os chineses Sociedade de Biologia Celular (Early Career Fellowship to QCY).

Os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso de Animais do Instituto de Bioquímica e Biologia Celular de Xangai, Academia Chinesa de Ciências, sob o protocolo aprovado SIBCB-NAF-15-002-S335-003. 1. Isolamento de VESCs da glândula mamária do mouse <ol><li> Colheita de glandes mamárias e digestão de tecidos. <ol><li> Use ratos repórteres virgens maduros Actin-GFP de 8 semanas de idade, com pesos entre 20 e 25 g, como doadores ...

<ol>
	<li>Thomas, E. D., Lochte, H. L., Lu, W. C., Ferrebee, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravenous+infusion+of+bone+marrow+in+patients+receiving+radiation+and+chemotherapy.">Intravenous infusion of bone marrow in patients receiving radiation and chemotherapy.</a> N Engl J Med. 257 (11), 491-496 (1957).</li><li>Chao, M. P., Seita, J., Weissman, I. 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C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Redefining+endothelial+progenitor+cells+via+clonal+analysis+and+hematopoietic+stem/progenitor+cell+principals.">Redefining endothelial progenitor cells via clonal analysis and hematopoietic stem/progenitor cell principals.</a> Blood. 109 (5), 1801-1809 (2007).</li><li>Snippert, H. J., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracking+adult+stem+cells.">Tracking adult stem cells.</a> Embo Rep. 12 (2), 113-122 (2011).</li><li>Yu, Q. C., Song, W., Wang, D., Zeng, Y. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+blood+vascular+endothelial+stem+cells+by+the+expression+of+protein+C+receptor.">Identification of blood vascular endothelial stem cells by the expression of protein C receptor.</a> Cell Res. 26 (10), 1079-1098 (2016).</li><li>Rios, A. C., Fu, N. Y., Lindeman, G. J., Visvader, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+identification+of+bipotent+stem+cells+in+the+mammary+gland.">In situ identification of bipotent stem cells in the mammary gland.</a> Nature. 506, 322-327 (2014).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+stem+cells+in+small+intestine+and+colon+by+marker+gene+Lgr5.">Identification of stem cells in small intestine and colon by marker gene Lgr5.</a> Nature. 449, 1003-1007 (2007).</li><li>Wang, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+multipotent+mammary+stemcells+by+protein+C+receptor+expression.">Identification of multipotent mammary stemcells by protein C receptor expression.</a> Nature. 517, 81-U201 (2015).</li><li>Stahl, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mouse+Retina+as+an+Angiogenesis+Model.">The Mouse Retina as an Angiogenesis Model.</a> Invest Ophth Vis Sci. 51 (6), 2813-2826 (2010).</li><li>Mammoto, T., Mammoto, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+Fibrin+Gel+on+Mouse+Lung+to+Study+Lung-specific+Angiogenesis.">Implantation of Fibrin Gel on Mouse Lung to Study Lung-specific Angiogenesis.</a> J. Vis. Exp. (94), e52012 (2014).</li><li>Snippert, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+crypt+homeostasis+results+from+neutral+competition+between+symmetrically+dividing+Lgr5+stem+cells.">Intestinal crypt homeostasis results from neutral competition between symmetrically dividing Lgr5 stem cells.</a> Cell. 143 (1), 134-144 (2010).</li><li>Soriano, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generalized+lacZ+expression+with+the+ROSA26+Cre+reporter+strain.">Generalized lacZ expression with the ROSA26 Cre reporter strain.</a> Nat Genet. 21 (1), 70-71 (1999).</li><li>Barker, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lgr5(+ve)+stem+cells+drive+self-renewal+in+the+stomach+and+build+long-lived+gastric+units+in+vitro.">Lgr5(+ve) stem cells drive self-renewal in the stomach and build long-lived gastric units in vitro.</a> Cell Stem Cell. 6 (1), 25-36 (2010).</li><li>Solar, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+exocrine+duct+cells+give+rise+to+insulin-producing+beta+cells+during+embryogenesis+but+not+after+birth.">Pancreatic exocrine duct cells give rise to insulin-producing beta cells during embryogenesis but not after birth.</a> Dev Cell. 17 (6), 849-860 (2009).</li></ol>

Os ensaios de angiogênese representam uma boa abordagem experimental para estudar a dinâmica vascular. A vasculatura da retina do mouse, que se desenvolve pós-natal, provou ser um modelo atraente para estudar angiogênese 12 . Apesar de ser relativamente acessível, a manipulação real dentro do retículo vascular é bastante difícil. Até agora, o transplante in vivo melhor descrito foi o ensaio de plugue, que encerra células dentro de uma massa de matriz de membrana basal e impla...

Durante o desenvolvimento e a homeostase, o crescimento vascular e a remodelação ocorrem fielmente de acordo com o crescimento e reparo de órgãos. A angiogênese descreve a geração de novos vasos a partir de vasos sanguíneos pré-existentes e é considerada uma força importante que medeia essas mudanças vasculares dinâmicas. Cada vaso sanguíneo é revestido internamente com uma camada de células endoteliais (ECs), e eles parecem ser o fundamento da arquitetura do vaso. Durante muito tempo, o mecanismo através do qual o pool da CE é reabastecido durante a homeostase permaneceu obscuro, e os argumentos foram levantados sobre se o turnover vascular é o resultado da proliferação madura da CE ou é o contributo das atividades vasculares das células-tronco / progenitoras. Devido à falta de evidências fisiológicas diretas, a existência e a identidade celular das células-tronco endoteliais vasculares (VESCs) também permaneceram controversas. Uma das abordagens mais comuns utilizadas para verificar o comportamento das células-tronco é através do transplanProdução de células estaminais putativas em camundongos receptores. Este método mede o potencial de haste de células-tronco candidatas in vivo. O transplante foi aplicado pela primeira vez ao estudo de células-tronco da medula óssea 1 , o que contribuiu para o estabelecimento das características hierárquicas do sistema hematopoiético 2 . No campo endotelial, um tampão da matriz da membrana basal ( por exemplo, matrigel) inserido subcutaneamente sob a pele do flanco foi um ensaio padrão de angiogênese in vivo usado para abordar as capacidades de formação de vasos das CE transplantadas. Múltiplos métodos experimentais, incluindo a formação de colônias em sistemas de cultura 3D e transplante, sugeriram potenciais populações de progenitores EC / VESC 3 , 4 , 5 , 6 . No entanto, uma vez que as EC incorporadas na matriz da membrana basal são relativamente separadas deO tecido circundante, isso não fornece o melhor ambiente de nicho necessário para explorar completamente o potencial angiogênico das células transplantadas. Como resultado, os vasos formados dentro do plugue da matriz são predominantemente capilares e são funcionalmente incomensuráveis. A glândula mamária se desenvolve pós-natal, com o crescimento mais robusto ocorrido durante a puberdade e a gravidez. No estágio puberal, o epitélio mamário sofre uma expansão rápida, para ocupar toda a almofada de gordura mamária, acompanhada pela remodelação eficiente das estruturas vasculares circundantes. Assim, a glândula mamária oferece um excelente modelo para o estudo da angiogênese. Fornece estímulos angiogênicos espaciais, matriciais e ricos do epitélio mamário em crescimento e, portanto, é um local de enxerto ideal para avaliar o potencial angiogênico de células exógenas. Além disso, a almofada de gordura mamária permite que os vasos exógenos formados se integrem com o sistema de circulação do hospedeiro, permitindo mais fAvaliação uncional e representando uma vantagem sobre o transplante subcutâneo. Embora os ensaios de cultura e transplante in vitro sejam um modo tão eficaz de investigar as propriedades de regeneração de uma população de células, é sabido que tais ensaios podem estimular a plasticidade à medida que as células são retiradas dos seus habitats nativos e as mudanças podem ser induzidas quando as células são desconectadas de Seu ambiente fisiológico 7 . Portanto, a obtenção de evidência direta in vivo de destino celular é a abordagem chave para avançar a compreensão atual do comportamento das populações endoteliais. O mapeamento do destino genético ( ou seja, o rastreamento de linhagem in vivo ) é imperativo para a identificação de VESCs e para a investigação de suas propriedades no sistema corporal, pois pode revelar o comportamento de células estaminais in vivo em seu contexto fisiológico e a estabilidade real pode ser Avaliado. Traçados de linhagemNg fornece evidências diretas da persistência a longo prazo ( isto é, auto-renovação) dos VESC candidatos e sua capacidade de produzir tipos de células para o tecido de origem ( ou seja, potência de diferenciação). Este protocolo descreve uma nova técnica de transplante de almofada de gordura mamária e um método de rastreamento de linhagem para observar a capacidade de geração de vasos de VESCs. Essas técnicas superam as deficiências dos ensaios atualmente disponíveis e fornecem uma nova maneira de avaliar otimamente as propriedades das células-tronco dos VESCs. Essas abordagens são ferramentas eficientes que podem ser usadas para avaliar o comportamento e as propriedades de formação de vasos das populações endoteliais, bem como para determinar a alteração da potência celular vascular dentro de um ambiente patológico.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1265">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:407px;">0.05% Trypsin-Ethylene Diamine Tetraacetic Acid(EDTA) (1X)</td>
			<td style="width:263px;">Gibco (Life Technologies)</td>
			<td style="width:208px;">25300-062</td>
			<td style="width:387px;">0.05% Trypsin</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.22 &#181;m Filter Unit</td>
			<td>Merck Millipore Ltd.</td>
			<td>SLGP033RB</td>
			<td>0.22 &#181;m Filter</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2-Methylbutanol-2, ReagentPlus</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>24, 048-6</td>
			<td>Tert Amyl Alcohol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">222, Tribromethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-25g</td>
			<td>222, Tribromethanol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole(DAPI)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>D1306</td>
			<td>DAPI</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">70 &#181;m Cell Strainer</td>
			<td>BD FAL</td>
			<td>352350</td>
			<td>70 &#181;m Cell Strainer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Adhesion Microscope Slides</td>
			<td>CITOGLAS</td>
			<td>188105</td>
			<td>Glass slides</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-mouse CD105 APC</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>17-1051-82, clone MJ7/18</td>
			<td>for FACS analusis use at 1 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-mouse CD201 Biotin</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>13-2012-82</td>
			<td>for FACS analusis use at 2.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-mouse CD31 PE-Cyanine 7</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>25-0311-82, clone 390</td>
			<td>for FACS analusis use at 1 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BD FACSJazz Cell Sorter</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>655489</td>
			<td>FACS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>100190332</td>
			<td>BSA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5810R</td>
			<td>Centrifuge</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Collagenase type 3</td>
			<td>Worthington-Biochem</td>
			<td>#LS004183</td>
			<td>Collagenase III</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Confocal microscopy</td>
			<td>Leica</td>
			<td>sp8</td>
			<td>Confocal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Deoxyribonuclease I from bovine pancreas</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2463-5VL</td>
			<td>Dnase I</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Donkey anti-Rat Cy3</td>
			<td>Jackson ImmunResearch</td>
			<td>712-165-150</td>
			<td>Secondary antibody, use at 0.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont Forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>500342</td>
			<td>Froceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont Forceps - Micro-Blunted Tips</td>
			<td>FST</td>
			<td>11253-20</td>
			<td style="width:387px;">Forceps</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SH30396.03</td>
			<td>FBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FITC Ms CD3/Gr1/CD11b/CD45R(B220)/Ter-119</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>78022</td>
			<td>Blood lineage cocktail for FACS analysis, use at 25 &#181;l per test</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Glycerol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6279</td>
			<td>Glycerol</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Iscov&#39;s Modified Dulbecco&#39;s Medium</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>12440-053</td>
			<td>IMDM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isolectin GS-IB4 from Griffonia Simplicifolia, Alexa Fluora&#160; 647</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z32450</td>
			<td>Isolectin-647</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel&#160; Matrix (growth factor reduced)</td>
			<td>BD</td>
			<td>356231</td>
			<td>Matrigel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse strain (Actin-GFP)</td>
			<td>Jax Laboratories</td>
			<td>3773</td>
			<td>Actin-GFP</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse strain (C57BL/6)</td>
			<td>SLAC</td>
			<td>C57BL/6</td>
			<td>C57BL/6</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse strain&#160; (BALB/c nude)</td>
			<td>SLAC</td>
			<td>BALB/c nude</td>
			<td>Nude mice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
			<td>PFA</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Penicilin Streptomycin</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>5140-122</td>
			<td>Pen/Strep</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline (pH7.2) 1X</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>c20012500BT</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PRIM1640</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>c11875500CP</td>
			<td>PRIM1640</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ProLong Gold antifade reagent</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>P36934</td>
			<td>Mounting Medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat anti CD144</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>550548</td>
			<td>for whole-mount analysis, anti-VE-Cadherin / Cdh5 antibdy for endothelial tight junction, use at 2.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rat anti CD31-biotin</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553371</td>
			<td>for whole-mount analusis, anti-CD31/PECAM1 antibody for endothelial surface adhesion molecule, use at 10 ug/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Red Cell Lysis Buffer</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7767-100ML</td>
			<td>Red blood cell lysing buffer</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Straight/Sharp-Blunt/10cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>14028-10</td>
			<td>Fine Scissors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Streptavidin eFluor 450</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>48-4317-82</td>
			<td>for FACS analysis use at 0.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>101551374</td>
			<td>TAM</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787-250ML</td>
			<td>TritonX</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Wax Coated Braided Silk (Size 5-0 USP (1 Metric), 18 inches (45 cm) BLACK on C-1 Needle)</td>
			<td>COVIDIEN</td>
			<td>S1173</td>
			<td>Suture&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sterile Disposable Scaplels</td>
			<td>Swann Morton</td>
			<td>#10</td>
			<td>Scalpel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Betadine</td>
			<td>Yifeng Medical</td>
			<td align="right">20160101</td>
			<td>Antiseptic solution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel mammary fat pad transplantation technique to visualize the vessel generation of vascular endothelial stem cells

As células endoteliais (ECs) são os blocos fundamentais da arquitetura vascular e medem o crescimento vascular e a remodelação para assegurar o desenvolvimento adequado dos vasos e a homeostase. No entanto, os estudos sobre a hierarquia da linhagem endotelial permanecem evasivos devido à falta de ferramentas para obter acesso, bem como para avaliar diretamente seu comportamento in vivo . Para resolver esta deficiência, um novo modelo de tecido para estudar angiogênese usando a almofada de gordura mamária foi desenvolvido. A glândula mamária desenvolve-se principalmente nos estádios pós-natais, incluindo a puberdade e a gravidez, durante os quais a proliferação robusta do epitélio é acompanhada de uma vasta remodelação vascular. As almofadas de gordura mamárias fornecem estímulos angiogênicos espaciais, matriciais e ricos do epitélio mamário em crescimento. Além disso, as almofadas de gordura mamária estão localizadas fora da cavidade peritoneal, tornando-os um local de enxerto facilmente acessível para avaliar o potencial angiogênico de células exógenas. Este trabalho também descreve uma eficiênciaAbordagem de rastreamento nt usando ratos repórter fluorescentes para rotular especificamente a população alvo de células-tronco endoteliais vasculares (VESCs) in vivo . Este método de rastreamento de linhagem, acoplado com o microscópio subseqüente de todo o tecido, permite a visualização direta de células direcionadas e seus descendentes, através das quais a capacidade de proliferação pode ser quantificada e o compromisso de diferenciação pode ser mapeado pelo destino. Usando esses métodos, uma população de receptores de proteína Bipotente (Procr) expressando VESCs recentemente foi identificada em sistemas vasculares múltiplos. Procr + VESCs, dando origem a novas ECs e pericítas, contribuem ativamente para a angiogênese durante o desenvolvimento, homeostase e reparação de lesões. No geral, este manuscrito descreve um novo transplante de almofadas de gordura mamária e técnicas de rastreamento de linhagem in vivo que podem ser usadas para avaliar as propriedades das células-tronco dos VESCs.

Isolamento mamário VESCs: Para isolar a população endotelial para o subsequente teste de transplante, as glândulas mamárias de camundongo virgem (8 semanas de idade) foram colhidas como material doador. As células endoteliais foram isoladas utilizando uma técnica de classificação de células baseada em anticorpos. Lotes representativos da análise FACS da população VESC em ratinhos C57BL / 6 glândula mamaria de 8 sema...

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A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Este trabalho demonstra uma nova abordagem para avaliar a proliferação, diferenciação e potencial de formação de vasos de células-tronco endoteliais vasculares (VESCs) através do transplante de almofada de gordura mamária, seguido de preparação de tecido total para a observação microscópica. Também é apresentada uma estratégia de rastreamento de linhagem para investigar o comportamento de VESC in vivo .

Uma nova técnica de transplante de almofada de gordura mamária para visualizar a geração de vasos de células vasculares endoteliais vasculares

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

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An Efficient Method to Obtain Dedifferentiated Fat Cells

Um método eficiente para obter células de gordura desdiferenciado

Tissue engineering and cell therapy hold great promise clinically. In this regard, multipotent cells, such as mesenchymal stem cells (MSCs), may be used ...

Transfer of Mammary Gland-forming Ability Between Mammary Basal Epithelial Cells and Mammary Luminal Cells via Extracellular Vesicles/Exosomes

Transferência de capacidade de formação de glândulas mamárias entre células epiteliais basais mamárias e células luminal mamárias através de vesículas / exossos extracelulares

Cells can communicate via exosomes, ~100-nm extracellular vesicles (EVs) that contain proteins, lipids, and nucleic acids. Non-adherent/mesenchymal ...

Horizontal Whole Mount: A Novel Processing and Imaging Protocol for Thick, Three-dimensional Tissue Cross-sections of Skin

Horizontal Whole Mount: um protocolo de processamento e imagem de Novel para secções transversais grossas de tecidos tridimensionais

Processing a tissue of interest to generate a microscopic image that supports a scientific argument can be challenging. The acquisition of high-quality ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Análise computacional do Germline Caenorhabditis elegans , para estudar a distribuição de núcleos, as proteínas e o citoesqueleto

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Geração de organoides pele 3D do cordão hemoderivados induzida por células-tronco pluripotentes

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Na geração de Vitro do Somite derivados de humanos induzida por células tronco pluripotentes

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...

Generation of Induced Neural Stem Cells from Peripheral Mononuclear Cells and Differentiation Toward Dopaminergic Neuron Precursors for Transplantation Studies

Geração de células-tronco neurais induzidas de células mononucleares periféricas e diferenciação para precursores de neurónios dopaminérgicos para estudos de transplante

Parkinson&#39;s disease (PD) is caused by degeneration of dopaminergic (DA) neurons at the substantia nigra pars compacta (SNpc) in the ventral ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

Avaliação de danos oxidativos nas células de superfície ocular/células-tronco do rato primário em resposta ao dano ultravioleta-C (UV-C)

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...

Isolation of Endocardial and Coronary Endothelial Cells from the Ventricular Free Wall of the Rat Heart

Isolamento das Células Endocárdicas e Coronárias da Parede Livre Ventricular do Coração de Rato

It has been shown that endocardial endothelial cells (EECs) and coronary endothelial cells (CECs) differ in origin, development, markers, and functions. ...