Name: in vitro assays to assess blood-brain barrier mesh-like vessel formation and disruption
Uploaded: 2017-06-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Assays to Assess Blood-brain Barrier Mesh-like Vessel Formation and Disruption at JoVE.com

Леон Тай финансируется фондами начальных фондов Чикагского университета штата Иллинойс.

Все эксперименты следуют за протоколами Университета штата Иллинойс, Чикагский институт по уходу за животными и их использованию. 1. Общая подготовка ПРИМЕЧАНИЕ. Линия микрососудистой эндотелиальной клетки мозга (hCMEC / D3) представляет собой широко охаракт...

<ol>
	<li>Abbott, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-brain+barrier+structure+and+function+and+the+challenges+for+CNS+drug+delivery.">Blood-brain barrier structure and function and the challenges for CNS drug delivery.</a> J Inherit Metab Dis. 36 (3), 437-449 (2013).</li><li>Engelhardt, B., Liebner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+into+the+development+and+maintenance+of+the+blood-brain+barrier.">Novel insights into the development and maintenance of the blood-brain barrier.</a> Cell Tissue Res. 355 (3), 687-699 (2014).</li><li>Abbott, N. J., Patabendige, A. A., Dolman, D. E., Yusof, S. R., Begley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+function+of+the+blood-brain+barrier.">Structure and function of the blood-brain barrier.</a> Neurobiol Dis. 37 (1), 13-25 (2010).</li><li>Zlokovic, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurovascular+pathways+to+neurodegeneration+in+Alzheimer's+disease+and+other+disorders.">Neurovascular pathways to neurodegeneration in Alzheimer's disease and other disorders.</a> Nat Rev Neurosci. 12 (12), 723-738 (2011).</li><li>Pardridge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+delivery+of+protein+and+gene+medicines+through+the+blood-brain+barrier.">Targeted delivery of protein and gene medicines through the blood-brain barrier.</a> Clin Pharmacol Ther. 97 (4), 347-361 (2014).</li><li>Tai, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+APOE+in+cerebrovascular+dysfunction.">The role of APOE in cerebrovascular dysfunction.</a> Acta Neuropathol. 131 (5), 709-723 (2016).</li><li>Biron, K. E., Dickstein, D. L., Gopaul, R., Jefferies, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+triggers+extensive+cerebral+angiogenesis+causing+blood+brain+barrier+permeability+and+hypervascularity+in+Alzheimer's+disease.">Amyloid triggers extensive cerebral angiogenesis causing blood brain barrier permeability and hypervascularity in Alzheimer's disease.</a> PLoS One. 6 (8), e23789 (2011).</li><li>Cameron, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's-related+peptide+amyloid-beta+plays+a+conserved+role+in+angiogenesis.">Alzheimer's-related peptide amyloid-beta plays a conserved role in angiogenesis.</a> PLoS One. 7 (7), e39598 (2012).</li><li>Boscolo, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta+amyloid+angiogenic+activity+in+vitro+and+in+vivo.">Beta amyloid angiogenic activity in vitro and in vivo.</a> Int J Mol Med. 19 (4), 581-587 (2007).</li><li>Paris, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+angiogenesis+in+a+transgenic+mouse+model+of+cerebral+amyloidosis.">Impaired angiogenesis in a transgenic mouse model of cerebral amyloidosis.</a> Neurosci Lett. 366 (1), 80-85 (2004).</li><li>Kitaguchi, H., Ihara, M., Saiki, H., Takahashi, R., Tomimoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+beds+are+decreased+in+Alzheimer's+disease,+but+not+in+Binswanger's+disease.">Capillary beds are decreased in Alzheimer's disease, but not in Binswanger's disease.</a> Neurosci Lett. 417 (2), 128-131 (2007).</li><li>Jantaratnotai, N., Ryu, J. K., Schwab, C., McGeer, P. L., McLarnon, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Vascular+Perturbations+in+an+Abeta-Injected+Animal+Model+and+in+AD+Brain.">Comparison of Vascular Perturbations in an Abeta-Injected Animal Model and in AD Brain.</a> Int J Alzheimers Dis. 2011, 918280 (2011).</li><li>Donnini, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abeta+peptides+accelerate+the+senescence+of+endothelial+cells+in+vitro+and+in+vivo,+impairing+angiogenesis.">Abeta peptides accelerate the senescence of endothelial cells in vitro and in vivo, impairing angiogenesis.</a> FASEB J. 24 (7), 2385-2395 (2010).</li><li>Tai, L. M., Holloway, K. A., Male, D. K., Loughlin, A. J., Romero, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-beta-induced+occludin+down-regulation+and+increased+permeability+in+human+brain+endothelial+cells+is+mediated+by+MAPK+activation.">Amyloid-beta-induced occludin down-regulation and increased permeability in human brain endothelial cells is mediated by MAPK activation.</a> J Cell Mol Med. 14 (5), 1101-1112 (2010).</li><li>Tai, L. M., Loughlin, A. J., Male, D. K., Romero, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=P-glycoprotein+and+breast+cancer+resistance+protein+restrict+apical-to-basolateral+permeability+of+human+brain+endothelium+to+amyloid-beta.">P-glycoprotein and breast cancer resistance protein restrict apical-to-basolateral permeability of human brain endothelium to amyloid-beta.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 29 (6), 1079-1083 (2009).</li><li>Tai, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polarized+P-glycoprotein+expression+by+the+immortalised+human+brain+endothelial+cell+line,+hCMEC/D3,+restricts+apical-to-basolateral+permeability+to+rhodamine+123.">Polarized P-glycoprotein expression by the immortalised human brain endothelial cell line, hCMEC/D3, restricts apical-to-basolateral permeability to rhodamine 123.</a> Brain Res. 1292, 14-24 (2009).</li><li>Koster, K. P., Thomas, R., Morris, A. W., Tai, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+growth+factor+prevents+oligomeric+amyloid-beta+induced+angiogenesis+deficits+in+vitro.">Epidermal growth factor prevents oligomeric amyloid-beta induced angiogenesis deficits in vitro.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 36 (11), 1865-1871 (2016).</li><li>Weksler, B., Romero, I. A., Couraud, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hCMEC/D3+cell+line+as+a+model+of+the+human+blood+brain+barrier.">The hCMEC/D3 cell line as a model of the human blood brain barrier.</a> Fluids Barriers CNS. 10 (1), 16 (2013).</li><li>Weksler, B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood-brain+barrier-specific+properties+of+a+human+adult+brain+endothelial+cell+line.">Blood-brain barrier-specific properties of a human adult brain endothelial cell line.</a> FASEB J. 19 (13), 1872-1874 (2005).</li><li>Welser-Alves, J. V., Boroujerdi, A., Milner, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+primary+mouse+brain+endothelial+cells.">Isolation and culture of primary mouse brain endothelial cells.</a> Methods Mol Biol. 1135, 345-356 (2014).</li><li>Dahlgren, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oligomeric+and+fibrillar+species+of+amyloid-beta+peptides+differentially+affect+neuronal+viability.">Oligomeric and fibrillar species of amyloid-beta peptides differentially affect neuronal viability.</a> J Biol Chem. 277 (35), 32046-32053 (2002).</li><li>Carpentier, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+Analyzer.">Angiogenesis Analyzer.</a> ImageJ News. , (2012).</li><li>Thomas, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+growth+factor+prevents+APOE4+and+amyloid-beta-induced+cognitive+and+cerebrovascular+deficits+in+female+mice.">Epidermal growth factor prevents APOE4 and amyloid-beta-induced cognitive and cerebrovascular deficits in female mice.</a> Acta Neuropathol Commun. 4 (1), 111 (2016).</li><li>Tai, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+APOE+in+cerebrovascular+dysfunction.">The role of APOE in cerebrovascular dysfunction.</a> Acta Neuropathol. 131 (5), 709-723 (2016).</li><li>Ambrose, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroangiogenesis:+a+vascular+basis+for+Alzheimer's+disease+and+cognitive+decline+during+aging.">Neuroangiogenesis: a vascular basis for Alzheimer's disease and cognitive decline during aging.</a> J Alzheimers Dis. 32 (3), 773-788 (2012).</li><li>Ambrose, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+therapeutic+approach+for+senile+dementias:+neuroangiogenesis.">A therapeutic approach for senile dementias: neuroangiogenesis.</a> J Alzheimers Dis. 43 (1), 1-17 (2015).</li><li>Ambrose, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Role+of+Capillaries+in+the+Lesser+Ailments+of+Old+Age+and+in+Alzheimer's+Disease+and+Vascular+Dementia:+The+Potential+of+Pro-Therapeutic+Angiogenesis.">The Role of Capillaries in the Lesser Ailments of Old Age and in Alzheimer's Disease and Vascular Dementia: The Potential of Pro-Therapeutic Angiogenesis.</a> J Alzheimers Dis. 54 (1), 31-43 (2016).</li></ol>

Описанные методы могут быть использованы для решения ряда фундаментальных биологических вопросов, связанных с охватом мозгового кровообращения 24 . В частности, они могут идентифицировать, какие рецепторы и сигнальные пути играют роль в ангиогенезе, покрытии сосудов в ра?...

<html> Гематоэнцефалический барьер (ВВВ) мозговых капилляров является самым большим связующим звеном между контактом крови и мозга и играет центральную роль в гомеостазе центральной нервной системы (ЦНС) 1 , 2 . Динамические процессы на BBB предотвращают поглощение нежелательных молекул из крови, удаляют отходы из ЦНС, подают необходимые питательные вещества и сигнальные молекулы в ЦНС и модулируют нейровоспаление 1 , 2 , 3 , 4 , 5 . Ущерб ВВВ распространен во время старения и несколько нейродегенеративных расстройств, включая болезнь Альцгеймера (AD), рассеянный склероз и инсульт 1 , 2 , 3 , 4 , 5 ,Ass = &quot;xref&quot;&gt; 6. Следовательно, дисфункция ВВВ может играть ключевую роль в нейродегенеративных нарушениях, в том числе в качестве терапевтической цели. Сохранение покрытия судна важно для гомеостатических функций ВВВ. Тем не менее, in vivo и in vitro данные противоречат тому, являются ли процессы, связанные с нейродегенеративными нарушениями, более высоким или более низким охватом BBB 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , особенно в AD. Таким образом, существует сильное обоснование для разработки моделей in vitro с использованием соответствующих типов клеток для оценки и более всестороннего понимания динамики охвата ВВВ. Церебральные капилляры состоят из астроцитов, перицитов и эндотелиальных клеток мозга (BECs) <sUp class = &quot;xref&quot;&gt; 3. Все типы клеток вносят вклад в функцию ВВВ через структурную поддержку и посредством секреции эффекторных молекул, таких как ангиогенные факторы роста, цитокины и хемокины, которые действуют как паракрин- и аутокриноподобный. Однако основными эффекторными ячейками ВВВ являются БЭК 3 . В общем, методы клеточной культуры для оценки функции ВВВ представляют собой анализы проницаемости, проводимые на клетках, выращенных на фильтрационных вставках, или на оценку уровней ключевых белков BEC как после добавления стрессоров 14 , 15 , 16 . Хотя важно, эти анализы не фокусируются на охвате мозгового кровообращения. Здесь наши предыдущие методы 17 подробно описаны для оценки охвата BEC и структур, подобных сетке, с использованием единых культур увековеченных человеческих BEC, одиночных культур первичных мышей BEC и гуманизированной тройной культуры(БЭК, астроциты и перициты) ВВВ. Целью было продемонстрировать пагубное влияние oAβ, которое считается важным фактором развития AD, на покрытие BEC. Защитный эффект эпидермального фактора роста (EGF) подчеркивает потенциал метода в качестве терапевтического инструмента для скрининга. Этот метод имеет несколько широких применений для фундаментальных и прикладных исследований, в том числе: 1) определение роли конкретных путей ангиогенеза и покрытия сосудов; 2) оценка влияния болезней и факторов, связанных с старением, на ангиогенез и покрытие сосудов; 3) выявление фармакологических цели.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="847">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">hCMEC/D3 cells</td>
			<td style="width:183px;">Milipore</td>
			<td style="width:119px;">SCC066</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">EBM-2 basal media&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-3156</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Collagen Type 1</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:119px;">A1064401&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">HBSS, calcium, magnesium, no phenol red</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:119px;">14025092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">HBSS, no calcium, no magnesium, no phenol red</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:119px;">14175095</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Trypsin-EDTA (0.25%)</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td style="width:119px;">25200056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:379px;">Final concentrations of the SingleQuot growth factor supplements for EBM2 media</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-4147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">5% FBS</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-4147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Ascorbic acid</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-4147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Gentamycin sulphate</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-4147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">25% Hydrocortisone</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-4147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:379px;">1/4 volume of the supplied growth factors: fibroblast growth factor, epidermal growth factor, insulin-like growth factor, vascular endothelial growth factor</td>
			<td style="width:183px;">Lonza</td>
			<td>CC-4147</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Puromycin hydrochloride</td>
			<td style="width:183px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">80503-312</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">MEM-HEPES&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Thermo Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">12360-038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Papain cell dissociation system (papain and DNase1)</td>
			<td style="width:183px;">Worthington Biochemical</td>
			<td style="width:119px;">LK003150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Human pericytes</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Pericyte basal media</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>1201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Pericyte growth supplement</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>1252</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Human Astrocytes</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Astrocyte media</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>1801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Astrocyte growth supplement</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>1852</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Basement membrane (Matrigel Growth Factor Reduced)&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">356231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Angiogenesis m-plates (96-well)</td>
			<td style="width:183px;">ibidi</td>
			<td style="width:119px;">89646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Human Epidermal growth factor&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Shenendoah Biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">100-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CellTracker green&#160;</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td>C7025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CellTracker orange</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td>C34551</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CellTracker blue&#160;</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher</td>
			<td>C2110</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Poly-l-lysine</td>
			<td style="width:183px;">Sciencell</td>
			<td>0403</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">10% Neutral Buffered Formalin</td>
			<td style="width:183px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT5012-60ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">C57BL mice</td>
			<td style="width:183px;">Jackson Laboratory</td>
			<td style="width:119px;">na</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">PCR tube strips</td>
			<td style="width:183px;">GeneMate</td>
			<td style="width:119px;">T-3014-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:379px;">Zeiss stereo discover v.8 dissecting microscope</td>
			<td style="width:183px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;">na</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro assays to assess blood-brain barrier mesh-like vessel formation and disruption

Охват гематоэнцефалического барьера (ВВВ) играет центральную роль в гомеостазе центральной нервной системы (ЦНС). BBB динамически поддерживается астроцитами, перицитами и эндотелиальными клетками мозга (BECs). Здесь мы подробно описываем методы оценки охвата ВВВ с использованием единых культур увековеченных человеческих BEC, одиночных культур первичных мышей BEC и гуманизированной модели тройной культуры (BEC, астроциты и перициты) BBB. Чтобы подчеркнуть применимость анализов к болезненным состояниям, мы описываем эффект олигомерного амилоида-β (oAβ), который является важным фактором развития болезни Альцгеймера (AD) при охвате BBB. Кроме того, мы используем эпидермальный фактор роста (EGF), чтобы осветить потенциал скрининга лекарственного средства этих методов. Наши результаты показывают, что одиночные и тройные культивированные BEC формируют сетчатые структуры в базовых условиях и что oAβ разрушает это образование ячеистых ячеек и дегенерирует предварительно сформированные сетчатые структуры,Но EGF блокирует это нарушение. Таким образом, описанные методы важны для анализа фундаментальных и связанных с заболеванием процессов, которые модулируют покрытие ВВВ.

В отдельных культурах как клетки hCMEC / D3 ( фиг. 3A ), так и первичные мышиные BEC ( фиг. 3B ) образуют сетчатые структуры во всей лунке. Структуры характеризуются сеткой взаимосвязанных узлов ( рис. 3 ). Во всех описанных парадигма?...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Assays to Assess Blood-brain Barrier Mesh-like Vessel Formation and Disruption at JoVE.com

In Vitro Assays to Assess Blood-brain Barrier Mesh-like Vessel Formation and Disruption

Поддержание охвата кроветворного мозга является ключевым фактором гомеостаза центральной нервной системы. Этот протокол описывает методы in vitro для определения фундаментальных и патологических процессов, которые модулируют покрытие гематоэнцефалического барьера.

В анализах in vitro для оценки образования и разрушения сосудов типа мозгового барьера

Blood-brain barrier (BBB) coverage plays a central role in the homeostasis of the central nervous system (CNS). The BBB is dynamically maintained by ...

Research

JoVE Journal

Medicine

In Vitro Assays to Assess Blood-brain Barrier Mesh-like Vessel Formation and Disruption

MRI-guided Disruption of the Blood-brain Barrier using Transcranial Focused Ultrasound in a Rat Model

МРТ наведением Нарушение гематоэнцефалический барьер использованием транскраниальной сфокусированным ультразвуком в крысиной модели

Focused ultrasound (FUS) disruption of the blood-brain barrier (BBB) is an increasingly investigated technique for circumventing the BBB1-5. The BBB is a ...

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Крыса Модель гематоэнцефалический барьер Нарушение чтобы позволить Целевые нейрососудистой терапии

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

An in vivo Assay to Test Blood Vessel Permeability

<em&gt; В естественных условиях</em&gt; Анализ для тестирования проницаемости кровеносных сосудов

This method is based on the intravenous injection of Evans Blue in mice as the test animal model. Evans blue is a dye that binds albumin. Under ...

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells (cEND) as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Stretch in Brain Microvascular Endothelial Cells cEND as an In Vitro Traumatic Brain Injury Model of the Blood Brain Barrier

Растянуть в мозге эндотелиальные клетки микрососудов (CEND) в качестве<em&gt; In Vitro</em&gt; Травматические повреждения мозга Модель из гематоэнцефалического барьера

Due to the high mortality incident brought about by traumatic brain injury (TBI), methods that would enable one to better understand the underlying ...

Setting-up an In Vitro Model of Rat Blood-brain Barrier (BBB): A Focus on BBB Impermeability and Receptor-mediated Transport

Setting-up an In Vitro Model of Rat Blood-brain Barrier BBB: A Focus on BBB Impermeability and Receptor-mediated Transport

Наладка<em&gt; Экстракорпоральное</em&gt; Модель крысы гематоэнцефалического барьера (ГЭБ): Фокус на BBB Герметичность и рецептор-опосредованного транспорта

The blood brain barrier (BBB) specifically regulates molecular and cellular flux between the blood and the nervous tissue. Our aim was to develop and ...

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction

Кислород-Глюкоза Лишение и реоксигенации в<em&gt; In Vitro</em&gt; Ишемии Травмы моделью для изучения гематоэнцефалического барьера дисфункции

Ischemia-Reperfusion (IR) injury is known to contribute significantly to the morbidity and mortality associated with ischemic strokes. Ischemic ...

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

Подход к выборке с четырьмя сосудами для интегративных исследований физиологии плаценты человека<em&gt; В Виво</em

The human placenta is highly inaccessible for research while still in utero. The current understanding of human placental physiology in vivo is therefore ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

Улучшен метод для создания в Vitro гематоэнцефалического барьера модель, основанная на эндотелиальных клеток свиного мозга

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

Micro-dissection of Enamel Organ from Mandibular Incisor of Rats Exposed to Environmental Toxicants

Микро рассечение эмаль органа от нижней челюсти резцы крыс воздействию экологических токсикантов

Enamel defects resulting from environmental conditions and ways of life are public health concerns because of their high prevalence. These defects result ...

Vessel-sparing Excision and Primary Anastomosis

Судно щадящие иссечение и первичных анастомоза

Urethroplasty is considered to be the standard treatment for urethral strictures since it provides excellent long-term success rates. For isolated short ...