Name: establishing dual resistance to egfr-tki and met-tki in lung adenocarcinoma cells in vitro with a 2-step dose-escalation procedure
Uploaded: 2017-08-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure at JoVE.com

אנו מודים חברי המכון לאונקולוגיה מולקולרית מתחשב הערות, עצות מועילות, Editage לסיוע שלהם עם עריכה בשפה האנגלית. עבודה זו נתמכה על-ידי התוכנית הנתמכות על-ידי MEXT עבור קרן מחקר אסטרטגי באוניברסיטאות פרטי (2012-2016) מ משרד החינוך, תרבות, ספורט, מדע, טכנולוגיה של יפן. Tohru Ohmori קיבל מימון (2015-2016) המחקר Boehringer-Ingelheim (אוסטריה).

1. הקמת תאים עמידים אירסה
<ol>
	<li>לקבוע את הריכוז אירסה הראשונית על ידי 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium ברומיד (MTT) וזמינותו.
	<ol>
		<li>תרבות PC-9 תאים מדיום הגידול (RPMI-1640 בינוני עם 10% FBS ו 1% אנטיביוטיקה (פניצילין: 100 U/mL, סטרפטומיצין: µg 100/mL)), בחממה2 CO 5% ב 37 º C.</li>
		<li>התאם את התאים כדי 1.0 × 105...

<ol>
	<li>Lynch, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activating+mutations+in+the+epidermal+growth+factor+receptor+underlying+responsiveness+of+non-small-cell+lung+cancer+to+gefitinib.">Activating mutations in the epidermal growth factor receptor underlying responsiveness of non-small-cell lung cancer to gefitinib.</a> N Engl J Med. 350 (21), 2129-2139 (2004).</li><li>Paez, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EGFR+mutations+in+lung+cancer:+correlation+with+clinical+response+to+gefitinib+therapy.">EGFR mutations in lung cancer: correlation with clinical response to gefitinib therapy.</a> Science. 304 (5676), 1497-1500 (2004).</li><li>Pao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EGF+receptor+gene+mutations+are+common+in+lung+cancers+from+"never+smokers"+and+are+associated+with+sensitivity+of+tumors+to+gefitinib+and+erlotinib.">EGF receptor gene mutations are common in lung cancers from "never smokers" and are associated with sensitivity of tumors to gefitinib and erlotinib.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (36), 13306-13311 (2004).</li><li>Mitsudomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+gene+predict+prolonged+survival+after+gefitinib+treatment+in+patients+with+non-small-cell+lung+cancer+with+postoperative+recurrence.">Mutations of the epidermal growth factor receptor gene predict prolonged survival after gefitinib treatment in patients with non-small-cell lung cancer with postoperative recurrence.</a> J Clin Oncol. 23 (11), 2513-2520 (2005).</li><li>Sequist, L. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotypic+and+histological+evolution+of+lung+cancers+acquiring+resistance+to+EGFR+inhibitors.">Genotypic and histological evolution of lung cancers acquiring resistance to EGFR inhibitors.</a> Sci Transl Med. 3 (75), 75ra26 (2011).</li><li>Engelman, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MET+amplification+leads+to+gefitinib+resistance+in+lung+cancer+by+activating+ERBB3+signaling.">MET amplification leads to gefitinib resistance in lung cancer by activating ERBB3 signaling.</a> Science. 316 (5827), 1039-1043 (2007).</li><li>Schmidt, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+mutations+of+the+MET+proto-oncogene+in+papillary+renal+carcinomas.">Novel mutations of the MET proto-oncogene in papillary renal carcinomas.</a> Oncogene. 18 (14), 2343-2350 (1999).</li><li>Olivero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+mutation+in+the+ATP-binding+site+of+the+MET+oncogene+tyrosine+kinase+in+a+HPRCC+family.">Novel mutation in the ATP-binding site of the MET oncogene tyrosine kinase in a HPRCC family.</a> Int J Cancer. 82 (5), 640-643 (1999).</li><li>Janne, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AZD9291+in+EGFR+inhibitor-resistant+non-small-cell+lung+cancer.">AZD9291 in EGFR inhibitor-resistant non-small-cell lung cancer.</a> N Engl J Med. 372 (18), 1689-1699 (2015).</li><li>Bean, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MET+amplification+occurs+with+or+without+T790M+mutations+in+EGFR+mutant+lung+tumors+with+acquired+resistance+to+gefitinib+or+erlotinib.">MET amplification occurs with or without T790M mutations in EGFR mutant lung tumors with acquired resistance to gefitinib or erlotinib.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (52), 20932-20937 (2007).</li><li>. NCT02468661 - ClinicalTrials.gov Available from: <a target="_blank" href="https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02468661">https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02468661</a> (2017)</li><li>Yamaoka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquired+Resistance+Mechanisms+to+Combination+Met-TKI/EGFR-TKI+Exposure+in+Met-Amplified+EGFR-TKI-Resistant+Lung+Adenocarcinoma+Harboring+an+Activating+EGFR+Mutation.">Acquired Resistance Mechanisms to Combination Met-TKI/EGFR-TKI Exposure in Met-Amplified EGFR-TKI-Resistant Lung Adenocarcinoma Harboring an Activating EGFR Mutation.</a> Mol Cancer Ther. 15 (12), 3040-3054 (2016).</li><li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+colorimetric+assay+for+cellular+growth+and+survival:+application+to+proliferation+and+cytotoxicity+assays.">Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.</a> J Immunol Methods. 65 (1-2), 55-63 (1983).</li><li>Cifone, M. A., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+patterns+of+anchorage-independent+growth+with+in+vivo+behavior+of+cells+from+a+murine+fibrosarcoma.">Correlation of patterns of anchorage-independent growth with in vivo behavior of cells from a murine fibrosarcoma.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 77 (2), 1039-1043 (1980).</li><li>Ercan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amplification+of+EGFR+T790M+causes+resistance+to+an+irreversible+EGFR+inhibitor.">Amplification of EGFR T790M causes resistance to an irreversible EGFR inhibitor.</a> Oncogene. 29 (16), 2346-2356 (2010).</li><li>Ogino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+epidermal+growth+factor+receptor+T790M+mutation+during+chronic+exposure+to+gefitinib+in+a+non+small+cell+lung+cancer+cell+line.">Emergence of epidermal growth factor receptor T790M mutation during chronic exposure to gefitinib in a non small cell lung cancer cell line.</a> Cancer Res. 67 (16), 7807-7814 (2007).</li><li>Ando, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+sensitivity+to+tumor+necrosis+factor+alpha+in+non-small+cell+lung+cancer+cells+with+acquired+resistance+to+gefitinib.">Enhancement of sensitivity to tumor necrosis factor alpha in non-small cell lung cancer cells with acquired resistance to gefitinib.</a> Clin Cancer Res. 11 (24 Pt 1), 8872-8879 (2005).</li><li>Suda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reciprocal+and+complementary+role+of+MET+amplification+and+EGFR+T790M+mutation+in+acquired+resistance+to+kinase+inhibitors+in+lung+cancer.">Reciprocal and complementary role of MET amplification and EGFR T790M mutation in acquired resistance to kinase inhibitors in lung cancer.</a> Clin Cancer Res. 16 (22), 5489-5498 (2010).</li><li>Shien, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquired+resistance+to+EGFR+inhibitors+is+associated+with+a+manifestation+of+stem+cell-like+properties+in+cancer+cells.">Acquired resistance to EGFR inhibitors is associated with a manifestation of stem cell-like properties in cancer cells.</a> Cancer Res. 73 (10), 3051-3061 (2013).</li><li>Sagawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+three+cisplatin-resistant+endometrial+cancer+cell+lines+using+two+methods+of+cisplatin+exposure.">Establishment of three cisplatin-resistant endometrial cancer cell lines using two methods of cisplatin exposure.</a> Tumour Biol. 32 (2), 399-408 (2011).</li><li>Ritter, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+breast+cancer+cells+selected+for+resistance+to+trastuzumab+in+vivo+overexpress+epidermal+growth+factor+receptor+and+ErbB+ligands+and+remain+dependent+on+the+ErbB+receptor+network.">Human breast cancer cells selected for resistance to trastuzumab in vivo overexpress epidermal growth factor receptor and ErbB ligands and remain dependent on the ErbB receptor network.</a> Clin Cancer Res. 13 (16), 4909-4919 (2007).</li></ol>

הפרוטוקול המתואר כאן יכול לשמש להקמת כפול-ההתנגדות רכשה ב תאים סרטניים באמצעות השיטה של 2-צעד המינון חוץ גופית בתוך. עבודות מחקר רבות דיווחו כי PC-9 תאים פיתחו עמידות (אירסה או טרסבה) EGFR-TKI דרך T790M EGFR מוטציות15,16. עם זאת, אנחנו לא זיהה T790M מוטציות ב אקסון 20 תאי?...

מוטציות oncogenic הקולטן גורם הגדילה באפידרמיס (EGFR) מצויים תת-קבוצה של חולים עם סרטן ריאות תאים שאינם קטנים (NSCLC), חשוב סמנים ביולוגיים חזוי של1,זו מחלה2. אלה מפעיל EGFR מוטציות הנפוצות מתרחשות מחיקה במסגרת ב אקסון 19 (delE746-A750) או מוטציה החלפת לאוצין עם ארגינין-codon 858 של אקסון 21 (L858R) ב- EGFR טירוזין קינאז תחום3,4. טיפול עם מעכבי EGFR-טירוזין קינאז (TKIs) הוא טיפול יעיל קלינית בחולים עם NSCLC מחסה EGFR מוטציות. עם זאת, טיפול זה מוגבל על ידי רכישת התנגדות EGFR-TKIs כגון אירסה טרסבה בלתי נמנע. ההתנגדות רכשה הנפוץ ביותר מתרחשת דרך מוטציה T790M משנית ב אקסון 20 של EGFR, אשר זוהה כ- 60% של חולים אשר רכשה EGFR-TKI (אירסה או טרסבה) התנגדות. מנגנונים מולקולריים אחרים הקשורים עם ההתנגדות רכשה EGFR-TKIs הם הפעלה של מעקף איתות הנגרמת על ידי הגברה MET, טרנספורמציה של סרטן ריאות תא-קטן, ואת המעבר אפיתל-אל-mesenchymal5,6. הקולטן עבור הגורם צמיחה hepatocyte, מקודדת על ידי הגן MET, אשר היא dysregulatedin גידולים רבים, דווחה להיות מועמד חשוב עבור ממוקד טיפולים7,8.
אסטרטגיות להתגברות על ההתנגדות רכשה EGFR-TKIs עוברים עכשיו הערכה קלינית. קליניים וקליניים הראו כי מעכבי EGFR דור שלישי כגון osimertinib יעילים בחולים עם מוטציה T790M9. בנוסף, הצמיחה של סרטן EGFR-מוטציה עם הגברה MET יכול להיות מעוכבים על ידי טיפול בשילוב עם EGFR - ו MET-TKIs6,10. ניסויים קליניים להערכת שילוב של מעכבי MET ו- EGFR בחולים עם ההתנגדות רכשה אירסה, טרסבה הן בעיצומן כעת11.
ללמוד את המנגנון המולקולרי של ההתנגדות רכשה סוכנים כימותרפיות, שורות תאים המגיבות בתחילה מעכבי מטופלים באופן רציף עם מעכבי אלה. שתי שיטות זמינות להקים ההתנגדות רכשה תא שורות. אחד הוא המינון stepwise, והשני הוא חשיפה גבוהה-ריכוז. השיטה הסלמה stepwise כבר יותר בשימוש נפוץ, כי יש לו שיעור הצלחה גבוה יותר. התאים נחשפים לראשונה ריכוזים נמוכים של מעכבי, כמעט עשירית ערך הריכוז המעכב חצי-מקסימלי (IC50), ואת הריכוז ואז גדל בהדרגה על ידי 10-30% עד ריכוז המטרה מושגת. שיטת חשיפה גבוהה-ריכוז כרוך חשיפת התאים המנה הסופית של מעכב במדיום תרבות, וזה יותר מהערך50 IC, כך התאים הורים נהרגים כמעט לחלוטין. שיטה זו חשיפה גבוהה-ריכוז יש הרבה קצב נמוך יותר הצלחה מאשר השיטה stepwise הסלמה.
במחקר הקודם, טיפול משולב עם EGFR-TKI MET-TKI הוצגה יעיל במערכת במבחנה . ההתנגדות רכשה EFGR-TKI, אירסה, הוקמה דרך הסלמה stepwise למשך 12 חודשים, יחד עם MET-הגברה, והיה לכן, קו תא עמידים אירסה שנקרא PC-9MET1000 שנוצר12.
פרוטוקול המובאת כאן היא הליך המינון שני שלבים להשגת מוטציה-EGFR NSCLC PC-9 תאים עם התנגדות כפול EGFR-TKI אירסה, MET TKI, PHA665752 (איור 1). שיטה זו להקמת רכשה עמיד בשורות תא יחסית קל לביצוע, עם אחוזי הצלחה גבוהים. ניתן לשנות את הפרוטוקול המתואר ליישום עם מעכבי של אחרים סמים היעד מולקולרית, וכן ציטוטוקסיות סוכנים.

<table width="970">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">RPMI-1640</td>
			<td style="width:177px;">Wako</td>
			<td style="width:119px;">189-02025</td>
			<td style="width:309px;">with L-Glutamine and Phenol Red</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CellTiter 96</td>
			<td style="width:177px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G4100</td>
			<td>Non-Radioactive Cell Proliferation Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">FBS</td>
			<td style="width:177px;">gibco</td>
			<td style="width:119px;">26140-079</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">Pen Strep</td>
			<td style="width:177px;">gibco</td>
			<td style="width:119px;">15140-163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">gefitinib</td>
			<td style="width:177px;">Selleck</td>
			<td style="width:119px;">S1025</td>
			<td>stocked 10 mM/EMSO at -20&#186;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">PHA665752</td>
			<td style="width:177px;">Selleck</td>
			<td style="width:119px;">S1070</td>
			<td>stocked 10 mM/EMSO at -20&#186;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">96-well plate</td>
			<td style="width:177px;">IWAKI</td>
			<td style="width:119px;">860-096</td>
			<td>flat bottom with lid, low evaporation type</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">TC10 Automated Cell Counter</td>
			<td style="width:177px;">BIO RAD</td>
			<td>#1450010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="width:365px;height:26px;">CellTiter 96 Non-Radioactive Cell Proliferation Assay</td>
			<td style="width:177px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G4100</td>
			<td style="width:309px;">Dye Solution and Solubilization/Stop Solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Powerscan HT microplate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="width:365px;height:26px;">GraphPad Prism v.5.0 software</td>
			<td style="width:177px;">GraphPad Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="width:365px;height:26px;">PC-9</td>
			<td style="width:177px;">Riken BioResource Center</td>
			<td style="width:119px;">RCB4455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">P100 dish</td>
			<td style="width:177px;">FALCON</td>
			<td align="right" style="width:119px;">353003</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishing dual resistance to egfr-tki and met-tki in lung adenocarcinoma cells in vitro with a 2-step dose-escalation procedure

עמידות לתרופות היא אתגר גדול בטיפול בסרטן. הדור של sublines עמיד במבחנה הכרחי לגילוי מנגנונים חדשניים כדי להתגבר על האתגר הזה. הנה, שיטה 2-צעד המינון להקמת כפול-ההתנגדות קולטן גורם הגדילה באפידרמיס (EGFR)-מעכב טירוזין קינאז (TKI), אירסה, MET TKI, PHA665752, מתואר. שיטה זו מבוססת על פשוט stepwise המינון של מעכבי להשראת רכשה עמידות שורות תאים. השיטה החלופית ליצירת sublines עמיד כרוך חשיפת התאים ריכוזים גבוהים של המדכא בצעד אחד. לשיטה stepwise המינון גבוה יותר לאפשרות של גרימת בהצלחה רכשה התנגדות מאשר בשיטה זו. הפעלת EGFR מוטציות הם סמנים ביולוגיים של תגובה לטיפול עם EGFR-TKI, אשר הוא טיפול השורה הראשונה שימושית עבור סרטן ריאה מסוג תאים שאינם קטנים (NSCLC) זה הנמל מוטציות אלה. למרות דיווחים על תגובות אפקטיביות, השימוש של EGFR-TKI זאת, מוגבלת כי גידולים באופן בלתי נמנע לרכוש התנגדות. המנגנונים העיקריים מאחורי ההתנגדות EGFR-TKI כוללים מוטציה משני-האתר שומר הסף, T790M ב אקסון 20 של EGFR ו אות מעקף של המטרופוליטן. לכן, פתרון אפשרי לבעיה זו יהיה שילוב של EGFR-TKI MET-TKI. טיפול משולב זה הוכח כיעיל במודל במחקר במבחנה . אירסה-ההתנגדות רכשה הוקמה באמצעות MET-הגברה מאת stepwise המינון של אירסה ל-12 חודשים, קו תא בשם PC-9MET1000 נוצר במחקר הקודם. להמשיך לחקור את המנגנונים של המטרופוליטן נרכשת-TKI ו- EGFR-TKI ההתנגדות, MET-TKI, PHA665752, היה מנוהל תאים אלה עם stepwise המינון בנוכחות אירסה ל-12 חודשים. פרוטוקול זה גם יושם בהצלחה במשך מספר טיפולים משולבים להקים ההתנגדות רכשה מולקולות אחרות מעכב.

סקירה כללית של פרוטוקול שהוצגו בכתב יד זה מוצג איור 1כולל את אינדוקציה של כפול-ההתנגדות רכשה אירסה ו- PHA665752 PC-9 תאים לפי נוהל 2-צעד המינון. איור 2 מציג ירידה ההתפשטות של תאים PC-9 הורים כמו ריכוז אירסה בעליות. אפשרות זו מציינת כי התאים PC-9 הפך רגי?...

Watch this Scientific Journal Video about Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure at JoVE.com

Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure

מתוארת שיטה במבחנה להקמת התנגדות כפול של EGFR-TKI ו- MET-TKI בתאים סרטניים. שיטה זו שימושית לפיתוח טיפולים עבור חולים עם EGFR-מוטציות, אשר מוצג התקדמות המחלה למרות הטיפול EGFR-TKI עם MET-הגברה. זה גם יכול להיות שונה עבור מעכבי מיקוד מולקולות אחרות.

יצירת עמידות כפול EGFR-TKI ו- TKI פגש ריאות אדנוקרצינומה תאי במבחנה עם הליך דו-שלבי המינון

Drug resistance is a major challenge in cancer therapy. The generation of resistant sublines in vitro is necessary for discovering novel mechanisms to ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure

Long-term High-Resolution Intravital Microscopy in the Lung with a Vacuum Stabilized Imaging Window

לטווח ארוך ברזולוציה גבוהה מיקרוסקופית Intravital בריאה עם חלון הדמיה מיוצב אבק

Metastasis to secondary sites such as the lung, liver and bone is a traumatic event with a mortality rate of approximately 90% 1. Of these sites, the lung ...

Using RNA-sequencing to Detect Novel Splice Variants Related to Drug Resistance in In Vitro Cancer Models

Using RNA-sequencing to Detect Novel Splice Variants Related to Drug Resistance in In Vitro Cancer Models

שימוש-רצף RNA כדי זיהוי וריאנטים אחוי Novel הקשורות עמידות לתרופות ב<em&gt; במבחנה</em&gt; מודלי סרטן

Drug resistance remains a major problem in the treatment of cancer for both hematological malignancies and solid tumors. Intrinsic or acquired resistance ...

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

Moving Upwards: A Simple and Flexible In Vitro Three-dimensional Invasion Assay Protocol

נעים כלפי מעלה: פשוט וגמיש במבחנה הפלישה תלת מימדי Assay פרוטוקול

Although 3D invasion assays have been developed, the challenge remains to study cells without affecting the integrity of their microenvironment. ...

Orthotopic Transplantation of Syngeneic Lung Adenocarcinoma Cells to Study PD-L1 Expression

Orthotopic השתלת ריאות Syngeneic תאים אדנוקרצינומה ללמוד ביטוי PD-L1

The use of mouse models is indispensable for studying the pathophysiology of various diseases. With respect to lung cancer, several models are available, ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

בידוד תאי גזע mesenchymal זולה רקמות, תרבות משותפת עם תאים סרטניים ללמוד אינטראקציות שלהם

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Establishment and Characterization of Three Afatinib-resistant Lung Adenocarcinoma PC-9 Cell Lines Developed with Increasing Doses of Afatinib

הקמה ואפיון של שלוש מנות העמידות Afatinib של ריאה אדנוקרצינומה PC-9 תאים שפותחו עם הגדלת מינונים של Afatinib

Acquired resistance to molecular target inhibitors is a severe problem in cancer therapy. Lung cancer remains the leading cause of cancer-related death in ...

In Vitro Assay to Study Tumor-macrophage Interaction

בתוך שיטת חוץ גופית כדי ללמוד גידול-מקרופאג אינטראקציה

Tumor associated macrophages (TAMs) account for a large percentage of cells in the tumor mass for different types of cancers. Glioblastoma (GBM), a ...

In Vitro Evaluation of Oncogenic Transformation in Human Mammary Epithelial Cells

הערכה במבחנה של טרנספורמציה אונקוגנית בתאי אפיתל ממ"ר אנושיים

Tumorigenesis is a multi-step process in which cells acquire capabilities&#160;that allow their growth, survival, and dissemination under hostile ...

Using Computer-based Image Analysis to Improve Quantification of Lung Metastasis in the 4T1 Breast Cancer Model

שימוש בניתוח תמונה מבוסס מחשב כדי לשפר את כימות גרורות הריאות במודל סרטן השד 4T1

Breast cancer is a devastating malignancy, accounting for 40,000 female deaths and 30% of new female cancer diagnoses in the United States in 2019 alone. ...

Chemical Conjugation of a Purified DEC-205-Directed Antibody with Full-Length Protein for Targeting Mouse Dendritic Cells In Vitro and In Vivo

Chemical Conjugation of a Purified DEC-205-Directed Antibody with Full-Length Protein for Targeting Mouse Dendritic Cells In Vitro and In Vivo

הטיות כימיות של נוגדן מטוהר מכוון DEC-205 עם חלבון באורך מלא למיקוד תאים דנדריטיים של עכבר במבחנה וב- In Vivo

Targeted antigen delivery to cross-presenting dendritic cells (DC) in vivo efficiently induces T effector cell responses and displays a valuable approach ...