Name: establishing dual resistance to egfr-tki and met-tki in lung adenocarcinoma cells in vitro with a 2-step dose-escalation procedure
Uploaded: 2017-08-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure at JoVE.com

Ringraziamo i membri dell'Istituto di oncologia molecolare per i loro commenti riflessivo e consigli utili ed Editage per la loro assistenza con la modifica di lingua inglese. Questo lavoro è stato supportato dal programma MEXT-supportato per la Fondazione di ricerca strategica alle università Private (2012-2016) dal Ministero della pubblica istruzione, cultura, sport, scienza e tecnologia del Giappone. Tohru Ohmori ricevuto (2015-2016) di finanziamento della ricerca da Boehringer-Ingelheim (Ingelheim, Germania).

1. stabilire le cellule resistenti a Gefitinib
<ol>
	<li>Da 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dimethylthiazolyl analisi del bromuro (MTT), determinare la concentrazione iniziale di gefitinib.
	<ol>
		<li>PC-9 cellule in medium di crescita della coltura (medium RPMI-1640 con 10% FBS e 1% antibiotici (penicillina: 100 U/mL e streptomicina: 100 µ g/mL)), in un 5% CO2 incubatore a 37 ° C.</li>
		<li>Regolare le cellule a 1,0 × 105 cellule/mL utilizzando una cella automatizzata conta...

<ol>
	<li>Lynch, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activating+mutations+in+the+epidermal+growth+factor+receptor+underlying+responsiveness+of+non-small-cell+lung+cancer+to+gefitinib.">Activating mutations in the epidermal growth factor receptor underlying responsiveness of non-small-cell lung cancer to gefitinib.</a> N Engl J Med. 350 (21), 2129-2139 (2004).</li><li>Paez, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EGFR+mutations+in+lung+cancer:+correlation+with+clinical+response+to+gefitinib+therapy.">EGFR mutations in lung cancer: correlation with clinical response to gefitinib therapy.</a> Science. 304 (5676), 1497-1500 (2004).</li><li>Pao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EGF+receptor+gene+mutations+are+common+in+lung+cancers+from+"never+smokers"+and+are+associated+with+sensitivity+of+tumors+to+gefitinib+and+erlotinib.">EGF receptor gene mutations are common in lung cancers from "never smokers" and are associated with sensitivity of tumors to gefitinib and erlotinib.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 101 (36), 13306-13311 (2004).</li><li>Mitsudomi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+gene+predict+prolonged+survival+after+gefitinib+treatment+in+patients+with+non-small-cell+lung+cancer+with+postoperative+recurrence.">Mutations of the epidermal growth factor receptor gene predict prolonged survival after gefitinib treatment in patients with non-small-cell lung cancer with postoperative recurrence.</a> J Clin Oncol. 23 (11), 2513-2520 (2005).</li><li>Sequist, L. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotypic+and+histological+evolution+of+lung+cancers+acquiring+resistance+to+EGFR+inhibitors.">Genotypic and histological evolution of lung cancers acquiring resistance to EGFR inhibitors.</a> Sci Transl Med. 3 (75), 75ra26 (2011).</li><li>Engelman, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MET+amplification+leads+to+gefitinib+resistance+in+lung+cancer+by+activating+ERBB3+signaling.">MET amplification leads to gefitinib resistance in lung cancer by activating ERBB3 signaling.</a> Science. 316 (5827), 1039-1043 (2007).</li><li>Schmidt, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+mutations+of+the+MET+proto-oncogene+in+papillary+renal+carcinomas.">Novel mutations of the MET proto-oncogene in papillary renal carcinomas.</a> Oncogene. 18 (14), 2343-2350 (1999).</li><li>Olivero, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+mutation+in+the+ATP-binding+site+of+the+MET+oncogene+tyrosine+kinase+in+a+HPRCC+family.">Novel mutation in the ATP-binding site of the MET oncogene tyrosine kinase in a HPRCC family.</a> Int J Cancer. 82 (5), 640-643 (1999).</li><li>Janne, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AZD9291+in+EGFR+inhibitor-resistant+non-small-cell+lung+cancer.">AZD9291 in EGFR inhibitor-resistant non-small-cell lung cancer.</a> N Engl J Med. 372 (18), 1689-1699 (2015).</li><li>Bean, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MET+amplification+occurs+with+or+without+T790M+mutations+in+EGFR+mutant+lung+tumors+with+acquired+resistance+to+gefitinib+or+erlotinib.">MET amplification occurs with or without T790M mutations in EGFR mutant lung tumors with acquired resistance to gefitinib or erlotinib.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (52), 20932-20937 (2007).</li><li>. NCT02468661 - ClinicalTrials.gov Available from: <a target="_blank" href="https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02468661">https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02468661</a> (2017)</li><li>Yamaoka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquired+Resistance+Mechanisms+to+Combination+Met-TKI/EGFR-TKI+Exposure+in+Met-Amplified+EGFR-TKI-Resistant+Lung+Adenocarcinoma+Harboring+an+Activating+EGFR+Mutation.">Acquired Resistance Mechanisms to Combination Met-TKI/EGFR-TKI Exposure in Met-Amplified EGFR-TKI-Resistant Lung Adenocarcinoma Harboring an Activating EGFR Mutation.</a> Mol Cancer Ther. 15 (12), 3040-3054 (2016).</li><li>Mosmann, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+colorimetric+assay+for+cellular+growth+and+survival:+application+to+proliferation+and+cytotoxicity+assays.">Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays.</a> J Immunol Methods. 65 (1-2), 55-63 (1983).</li><li>Cifone, M. A., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+patterns+of+anchorage-independent+growth+with+in+vivo+behavior+of+cells+from+a+murine+fibrosarcoma.">Correlation of patterns of anchorage-independent growth with in vivo behavior of cells from a murine fibrosarcoma.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 77 (2), 1039-1043 (1980).</li><li>Ercan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amplification+of+EGFR+T790M+causes+resistance+to+an+irreversible+EGFR+inhibitor.">Amplification of EGFR T790M causes resistance to an irreversible EGFR inhibitor.</a> Oncogene. 29 (16), 2346-2356 (2010).</li><li>Ogino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+epidermal+growth+factor+receptor+T790M+mutation+during+chronic+exposure+to+gefitinib+in+a+non+small+cell+lung+cancer+cell+line.">Emergence of epidermal growth factor receptor T790M mutation during chronic exposure to gefitinib in a non small cell lung cancer cell line.</a> Cancer Res. 67 (16), 7807-7814 (2007).</li><li>Ando, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+sensitivity+to+tumor+necrosis+factor+alpha+in+non-small+cell+lung+cancer+cells+with+acquired+resistance+to+gefitinib.">Enhancement of sensitivity to tumor necrosis factor alpha in non-small cell lung cancer cells with acquired resistance to gefitinib.</a> Clin Cancer Res. 11 (24 Pt 1), 8872-8879 (2005).</li><li>Suda, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reciprocal+and+complementary+role+of+MET+amplification+and+EGFR+T790M+mutation+in+acquired+resistance+to+kinase+inhibitors+in+lung+cancer.">Reciprocal and complementary role of MET amplification and EGFR T790M mutation in acquired resistance to kinase inhibitors in lung cancer.</a> Clin Cancer Res. 16 (22), 5489-5498 (2010).</li><li>Shien, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acquired+resistance+to+EGFR+inhibitors+is+associated+with+a+manifestation+of+stem+cell-like+properties+in+cancer+cells.">Acquired resistance to EGFR inhibitors is associated with a manifestation of stem cell-like properties in cancer cells.</a> Cancer Res. 73 (10), 3051-3061 (2013).</li><li>Sagawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+three+cisplatin-resistant+endometrial+cancer+cell+lines+using+two+methods+of+cisplatin+exposure.">Establishment of three cisplatin-resistant endometrial cancer cell lines using two methods of cisplatin exposure.</a> Tumour Biol. 32 (2), 399-408 (2011).</li><li>Ritter, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+breast+cancer+cells+selected+for+resistance+to+trastuzumab+in+vivo+overexpress+epidermal+growth+factor+receptor+and+ErbB+ligands+and+remain+dependent+on+the+ErbB+receptor+network.">Human breast cancer cells selected for resistance to trastuzumab in vivo overexpress epidermal growth factor receptor and ErbB ligands and remain dependent on the ErbB receptor network.</a> Clin Cancer Res. 13 (16), 4909-4919 (2007).</li></ol>

Il protocollo descritto qui può essere utilizzato per la creazione di dual-resistenza acquisita in cellule di cancro usando una dose crescente 2-passo metodo in vitro. Molti documenti di ricerca hanno segnalato che le cellule PC-9 sviluppato EGFR-TKI (gefitinib o erlotinib) resistenza attraverso mutazioni EGFR T790M15,16. Tuttavia, non abbiamo rilevato le mutazioni T790M in essone 20 delle nostre cellule PC-9MET1000 mediante sequenziamento diretto (<str...

Oncogeniche mutazioni nel recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) sono trovate in un sottogruppo di pazienti con carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) e sono importanti biomarcatori predittivi di questa malattia1,2. Questi attivazione delle mutazioni di EGFR più comunemente si verificano come un'omissione in-struttura in essone 19 (delE746-A750) o una mutazione di punto in sostituzione della leucina con arginina a codone 858 dell'esone 21 (L858R) in EGFR tirosin chinasi dominio3,4. Il trattamento con inibitori di EGFR-tirosina chinasi (TKI) è una terapia clinicamente efficace per i pazienti con NSCLC che harboring le mutazioni di EGFR. Tuttavia, questa terapia è limitata dall'inevitabile acquisizione di resistenza all'EGFR-TKI come gefitinib ed erlotinib. La resistenza acquisita più comune si verifica attraverso una mutazione T790M secondaria in essone 20 di EGFR, che è stato rilevato in circa il 60% dei pazienti con EGFR-TKI (gefitinib o erlotinib) resistenza acquisita. Altri meccanismi molecolari associati con resistenza acquisita a EGFR-TKI sono attivazione di bypass segnalazione causato dall'amplificazione di MET, trasformazione di tumori polmonari a piccole cellule e la transizione epiteliale-mesenchimale5,6. Il recettore per il fattore di crescita dell'epatocita, codificato dal gene MET, che è dysregulatedin molti tumori, è stato segnalato per essere un candidato importante per mirate terapie7,8.
Strategie per superare la resistenza acquisita a EGFR-TKI sono ora in fase di valutazione clinica. Studi preclinici e clinici hanno dimostrato che gli inibitori EGFR di terza generazione come osimertinib sono efficaci per i pazienti con la mutazione T790M9. Inoltre, la crescita di tumori EGFR-mutante con MET amplificazione può essere inibita dal trattamento combinato con EGFR e MET TKI6,10. Test clinici che valutano una combinazione di inibitori MET ed EGFR nei pazienti con resistenza acquisita a gefitinib ed erlotinib sono in corso ora11.
Per studiare il meccanismo molecolare della resistenza acquisita agli agenti chemioterapeutici, linee cellulari che inizialmente rispondono agli inibitori sono trattati in continuo con questi inibitori. Due metodi sono disponibili per stabilire la resistenza acquisita in linee cellulari. Uno è incremento graduale della dose, e l'altro è l'esposizione ad alta concentrazione. Il metodo di escalation graduale è stato più comunemente utilizzato, perché ha un più alto tasso di successo. Le cellule sono esposte prima a basse concentrazioni di inibitori, quasi un decimo del valore della concentrazione inibitoria mezzo massima (IC50), e la concentrazione quindi viene gradualmente aumentata del 10-30% fino a quando la concentrazione target è raggiunto. Il metodo di esposizione ad alta concentrazione consiste nel sottoporre le cellule alla dose finale di inibitore nel terreno di coltura, che è maggiore del valore di50 IC, quindi cellule parentali vengono uccisi quasi completamente. Questo metodo di esposizione ad alta concentrazione ha molto un più basso tasso di successo rispetto al metodo graduale escalation.
In uno studio precedente, il trattamento combinato con EGFR-TKI e MET-TKI è stato indicato per essere efficace in un sistema in vitro . Resistenza acquisita ad un EGFR-TKI, gefitinib, è stata stabilita tramite graduale escalation per 12 mesi, insieme a MET-amplificazione, e così, una linea cellulare gefitinib-resistente chiamata PC-9MET1000 è stato generato12.
Il protocollo qui presentato è una procedura di dose-escalation in due fasi per ottenere cellule di NSCLC EGFR-mutato del PC-9 con doppia resistenza all'EGFR-TKI, gefitinib e un MET-TKI, PHA665752 (Figura 1). Questo metodo per stabilire acquisito resistente in linee cellulari è relativamente facile da effettuare, con un alto tasso di successo. Il protocollo descritto può essere modificato per applicazione con inibitori di altri farmaci a bersaglio molecolare e agenti citotossici pure.

<table width="970">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">RPMI-1640</td>
			<td style="width:177px;">Wako</td>
			<td style="width:119px;">189-02025</td>
			<td style="width:309px;">with L-Glutamine and Phenol Red</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">CellTiter 96</td>
			<td style="width:177px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G4100</td>
			<td>Non-Radioactive Cell Proliferation Assay</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">FBS</td>
			<td style="width:177px;">gibco</td>
			<td style="width:119px;">26140-079</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">Pen Strep</td>
			<td style="width:177px;">gibco</td>
			<td style="width:119px;">15140-163</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">gefitinib</td>
			<td style="width:177px;">Selleck</td>
			<td style="width:119px;">S1025</td>
			<td>stocked 10 mM/EMSO at -20&#186;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">PHA665752</td>
			<td style="width:177px;">Selleck</td>
			<td style="width:119px;">S1070</td>
			<td>stocked 10 mM/EMSO at -20&#186;C</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">96-well plate</td>
			<td style="width:177px;">IWAKI</td>
			<td style="width:119px;">860-096</td>
			<td>flat bottom with lid, low evaporation type</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">TC10 Automated Cell Counter</td>
			<td style="width:177px;">BIO RAD</td>
			<td>#1450010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="width:365px;height:26px;">CellTiter 96 Non-Radioactive Cell Proliferation Assay</td>
			<td style="width:177px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G4100</td>
			<td style="width:309px;">Dye Solution and Solubilization/Stop Solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Powerscan HT microplate reader</td>
			<td>BioTek</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="width:365px;height:26px;">GraphPad Prism v.5.0 software</td>
			<td style="width:177px;">GraphPad Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="width:365px;height:26px;">PC-9</td>
			<td style="width:177px;">Riken BioResource Center</td>
			<td style="width:119px;">RCB4455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="width:365px;height:21px;">P100 dish</td>
			<td style="width:177px;">FALCON</td>
			<td align="right" style="width:119px;">353003</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishing dual resistance to egfr-tki and met-tki in lung adenocarcinoma cells in vitro with a 2-step dose-escalation procedure

Resistenza ai farmaci è una sfida importante nella terapia del cancro. La generazione di sublines resistente in vitro è necessaria per scoprire nuovi meccanismi per superare questa sfida. Qui, un metodo 2-passo dose-escalation per stabilire dual-resistenza per un recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR)-inibitore tirosin-chinasi (TKI), gefitinib e un MET-TKI, PHA665752, è descritto. Questo metodo si basa sul semplice incremento graduale della dose di inibitori per l'induzione di resistenza in linee cellulari acquisita. Il metodo alternativo per la generazione di resistente sublines consiste nel sottoporre le cellule ad alte concentrazioni dell'inibitore in un unico passaggio. Il metodo di dose-escalation graduale ha una maggiore possibilità di indurre con successo acquisito resistenza rispetto a questo metodo. Attivazione di EGFR mutazioni sono biomarcatori di una risposta al trattamento con EGFR-TKI, che è un trattamento di prima linea applicato per tumori polmonari non a piccole cellule (NSCLC) che ospitano queste mutazioni. Tuttavia, nonostante i rapporti di risposte efficaci, l'uso di EGFR-TKI è limitato perché i tumori inevitabilmente acquisiscono resistenza. I principali meccanismi dietro resistenza EGFR-TKI comprendono una mutazione secondaria presso il sito di gatekeeper, T790M in essone 20 di EGFR e un segnale di bypass di MET. Così, una potenziale soluzione per questo problema sarebbe una combinazione di EGFR-TKI e MET-TKI. Questo trattamento combinato ha dimostrato di essere efficace in un modello di Studio in vitro . Gefitinib-resistenza acquisita è stata stabilita tramite MET-amplificazione di incremento graduale della dose di gefitinib per 12 mesi, e una linea cellulare denominata PC-9MET1000 è stata generata in uno studio precedente. Per indagare ulteriormente i meccanismi di MET-TKI acquisito ed EGFR-TKI resistenza, un MET-TKI, PHA665752, è stato amministrato a queste cellule con incremento graduale della dose in presenza di gefitinib per 12 mesi. Questo protocollo è stato applicato con successo anche per una serie di terapie di combinazione per stabilire la resistenza acquisita ad altre molecole di inibitore.

Panoramica del protocollo presentato in questo manoscritto è illustrata nella Figura 1, compresa l'induzione di dual-resistenza acquisita a gefitinib e PHA665752 in cellule PC-9 da una procedura 2-passo dose-escalation. La figura 2 Mostra una diminuzione nella proliferazione delle cellule parentali di PC-9 come la concentrazione di gefitinib aumenta. Ciò indica che le cellule PC-9 è diventato sensibile a gefitinib dopo la proc...

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Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure

È descritto un metodo in vitro per stabilire doppia resistenza a un EGFR-TKI e un MET-TKI in cellule tumorali. Questo metodo è utile per lo sviluppo di terapie per i pazienti con mutazioni di EGFR, che esibiscono la progressione di malattia malgrado il trattamento di EGFR-TKI con MET-amplificazione. Può anche essere modificato per gli inibitori di altre molecole di targeting.

Che istituisce la doppia resistenza all'EGFR-TKI e incontrato-TKI nel polmone Adenocarcinoma cellule In Vitro con una procedura 2-passo Dose-escalation

Drug resistance is a major challenge in cancer therapy. The generation of resistant sublines in vitro is necessary for discovering novel mechanisms to ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Establishing Dual Resistance to EGFR-TKI and MET-TKI in Lung Adenocarcinoma Cells In Vitro with a 2-step Dose-escalation Procedure

Long-term High-Resolution Intravital Microscopy in the Lung with a Vacuum Stabilized Imaging Window

A lungo termine ad alta risoluzione intravitale Microscopia nel polmone con un vuoto stabilizzato finestra Imaging

Metastasis to secondary sites such as the lung, liver and bone is a traumatic event with a mortality rate of approximately 90% 1. Of these sites, the lung ...

Ricerca

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Using RNA-sequencing to Detect Novel Splice Variants Related to Drug Resistance in In Vitro Cancer Models

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Utilizzando RNA-sequenziamento per rilevare Novel Splice varianti correlati alla resistenza ai farmaci in<em&gt; In Vitro</em&gt; modelli di cancro

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