Name: highly multiplexed, super-resolution imaging of t cells using madstorm
Uploaded: 2017-06-24T12:30:00
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हम STORM माइक्रोस्कोप तक पहुंच के लिए Xufeng वू धन्यवाद इस शोध को नेशनल कैंसर इंस्टीट्यूट (एनसीआई) के कैंसर अनुसंधान केंद्र और राष्ट्रीय हार्ट फेफड़े और रक्त संस्थान (एनएचएलबीआई) के अंदरूनी अनुसंधान कार्यक्रम द्वारा समर्थित किया गया था।

सावधानी: कृपया उपयोग करने से पहले सभी प्रासंगिक सामग्री सुरक्षा डेटा शीट (एमएसडीएस) से परामर्श लें। इस प्रोटोकॉल में प्रयुक्त कई रसायनों विषाक्त और कार्सिनोजेनिक हैं। इंजीनियरिंग नियंत्रण (फ्यूम हु...

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	<li>Betzig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+intracellular+fluorescent+proteins+at+nanometer+resolution.">Imaging intracellular fluorescent proteins at nanometer resolution.</a> Science. 313 (5793), 1642-1645 (2006).</li><li>Hess, S. T., Girirajan, T. P., Mason, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-high+resolution+imaging+by+fluorescence+photoactivation+localization+microscopy.">Ultra-high resolution imaging by fluorescence photoactivation localization microscopy.</a> Biophys J. 91 (11), 4258-4272 (2006).</li><li>Rust, M. J., Bates, M., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sub-diffraction-limit+imaging+by+stochastic+optical+reconstruction+microscopy+(STORM).">Sub-diffraction-limit imaging by stochastic optical reconstruction microscopy (STORM).</a> Nat Methods. 3 (10), 793-795 (2006).</li><li>van de Linde, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+stochastic+optical+reconstruction+microscopy+with+standard+fluorescent+probes.">Direct stochastic optical reconstruction microscopy with standard fluorescent probes.</a> Nat Protoc. 6 (7), 991-1009 (2011).</li><li>Mortensen, K. I., Churchman, L. S., Spudich, J. A., Flyvbjerg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+localization+analysis+for+single-molecule+tracking+and+super-resolution+microscopy.">Optimized localization analysis for single-molecule tracking and super-resolution microscopy.</a> Nat Methods. 7 (5), 377-381 (2010).</li><li>Thompson, R. E., Larson, D. R., Webb, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precise+nanometer+localization+analysis+for+individual+fluorescent+probes.">Precise nanometer localization analysis for individual fluorescent probes.</a> Biophys J. 82 (5), 2775-2783 (2002).</li><li>Rieger, B., Stallinga, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+lateral+and+axial+localization+uncertainty+in+super-resolution+light+microscopy.">The lateral and axial localization uncertainty in super-resolution light microscopy.</a> Chemphyschem. 15 (4), 664-670 (2014).</li><li>Pertsinidis, A., Zhang, Y., Chu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subnanometre+single-molecule+localization,+registration+and+distance+measurements.">Subnanometre single-molecule localization, registration and distance measurements.</a> Nature. 466 (7306), 647-651 (2010).</li><li>Bates, M., Jones, S. A., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stochastic+optical+reconstruction+microscopy+(STORM):+a+method+for+superresolution+fluorescence+imaging.">Stochastic optical reconstruction microscopy (STORM): a method for superresolution fluorescence imaging.</a> Cold Spring Harb Protoc. (6), 498-520 (2013).</li><li>Yi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=madSTORM:+a+superresolution+technique+for+large-scale+multiplexing+at+single-molecule+accuracy.">madSTORM: a superresolution technique for large-scale multiplexing at single-molecule accuracy.</a> Mol Biol Cell. 27 (22), 3591-3600 (2016).</li><li>Bates, M., Huang, B., Dempsey, G. T., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicolor+super-resolution+imaging+with+photo-switchable+fluorescent+probes.">Multicolor super-resolution imaging with photo-switchable fluorescent probes.</a> Science. 317 (5845), 1749-1753 (2007).</li><li>Dempsey, G. T., Vaughan, J. C., Chen, K. H., Bates, M., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+fluorophores+for+optimal+performance+in+localization-based+super-resolution+imaging.">Evaluation of fluorophores for optimal performance in localization-based super-resolution imaging.</a> Nat Methods. 8 (12), 1027-1036 (2011).</li><li>Erdelyi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correcting+chromatic+offset+in+multicolor+super-resolution+localization+microscopy.">Correcting chromatic offset in multicolor super-resolution localization microscopy.</a> Opt Express. 21 (9), 10978-10988 (2013).</li><li>Gerdes, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+multiplexed+single-cell+analysis+of+formalin-fixed,+paraffin-embedded+cancer+tissue.">Highly multiplexed single-cell analysis of formalin-fixed, paraffin-embedded cancer tissue.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (29), 11982-11987 (2013).</li><li>Jungmann, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplexed+3D+cellular+super-resolution+imaging+with+DNA-PAINT+and+Exchange-PAINT.">Multiplexed 3D cellular super-resolution imaging with DNA-PAINT and Exchange-PAINT.</a> Nat Methods. 11 (3), 313-318 (2014).</li><li>Nanguneri, S., Flottmann, B., Horstmann, H., Heilemann, M., Kuner, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+tomographic+super-resolution+fluorescence+imaging+of+serially+sectioned+thick+samples.">Three-dimensional tomographic super-resolution fluorescence imaging of serially sectioned thick samples.</a> PLoS One. 7 (5), e38098 (2012).</li><li>Schubert, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+proteome+topology+and+function+by+automated+multidimensional+fluorescence+microscopy.">Analyzing proteome topology and function by automated multidimensional fluorescence microscopy.</a> Nat Biotechnol. 24 (10), 1270-1278 (2006).</li><li>Tam, J., Cordier, G. A., Borbely, J. S., Sandoval Alvarez, A., Lakadamyali, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-talk-free+multi-color+STORM+imaging+using+a+single+fluorophore.">Cross-talk-free multi-color STORM imaging using a single fluorophore.</a> PLoS One. 9 (7), e101772 (2014).</li><li>Valley, C. C., Liu, S., Lidke, D. S., Lidke, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequential+superresolution+imaging+of+multiple+targets+using+a+single+fluorophore.">Sequential superresolution imaging of multiple targets using a single fluorophore.</a> PLoS One. 10 (4), e0123941 (2015).</li><li>Hoebe, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+light-exposure+microscopy+reduces+photobleaching+and+phototoxicity+in+fluorescence+live-cell+imaging.">Controlled light-exposure microscopy reduces photobleaching and phototoxicity in fluorescence live-cell imaging.</a> Nat Biotechnol. 25 (2), 249-253 (2007).</li><li>Kiuchi, T., Higuchi, M., Takamura, A., Maruoka, M., Watanabe, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multitarget+super-resolution+microscopy+with+high-density+labeling+by+exchangeable+probes.">Multitarget super-resolution microscopy with high-density labeling by exchangeable probes.</a> Nat Methods. 12 (8), 743-746 (2015).</li><li>Campi, G., Varma, R., Dustin, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actin+and+agonist+MHC-peptide+complex-dependent+T+cell+receptor+microclusters+as+scaffolds+for+signaling.">Actin and agonist MHC-peptide complex-dependent T cell receptor microclusters as scaffolds for signaling.</a> J Exp Med. 202 (8), 1031-1036 (2005).</li><li>Sarkar, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wide-field+in+vivo+background+free+imaging+by+selective+magnetic+modulation+of+nanodiamond+fluorescence.">Wide-field in vivo background free imaging by selective magnetic modulation of nanodiamond fluorescence.</a> Biomed Opt Express. 5 (4), 1190-1202 (2014).</li></ol>

मैडस्टोरम में अनुक्रमिक बहुसंकेतन, बहाव सुधार, और संरेखण प्रक्रिया कोशिकाओं में हीटरोजीनस संरचनाओं के सटीक, अत्यधिक मल्टीप्लेक्स दृश्य की अनुमति देते हैं। 10 इसके अलावा, मैडमस्टोर रंगीन अवर...

प्रकाश माइक्रोस्कोपी (~ 200 एनएम) की विवर्तन सीमा को दूर करने के लिए सुपर-रिज़ोल्यूशन माइक्रोस्कोपी तकनीकों की एक किस्म विकसित की गई है। इनमें से एक एकल तकनीक है, जिसे एकल अणु स्थानीयकरण माइक्रोस्कोपी (एसएमएलएम) कहा जाता है, जिसमें फोटो-सक्रियण स्थानीयकरण माइक्रोस्कोपी (पाम) और स्टोचस्टिक ऑप्टिकल पुनर्निर्माण माइक्रोस्कोपी (स्टोर्म) शामिल हैं। एसएमएलएम तकनीकों फ्लोराफोर्स के उपयोग में हिस्सा लेती हैं जो कि (फ्लोरोसेंट) और ऑफ (अंधेरे / फोटो-स्विचेटेड) राज्यों के बीच स्विच की जा सकती हैं, जो एकल अणुओं 1 , 2 , 3 से प्रतिदीप्ति के अनुक्रमिक स्थानीयकरण की अनुमति देता है। व्यावसायिक रूप से उपलब्ध रंजक और सूक्ष्मदर्शी के साथ इसकी संगतता के कारण, सीधी STORM (डीएसटीओआरएम) एक व्यापक रूप से अपनाया गया एसएमएलएम तकनीक 4 बन गया है। डीएसटीओआरएम नियमित रूप से ~ 10 एनएम स्थानीयकरण परिशुद्धता प्राप्त कर सकता है, जिसे अंतर के केंद्र की गणना में अनिश्चितता के रूप में परिभाषित किया गया हैआयन-सीमित बिंदु प्रसार समारोह (पीएसएफ) हालांकि, उच्च परिशुद्धता के बावजूद स्थानीयकरण एल्गोरिदम 5 , 6 , 7 का उपयोग करते हुए , कई मुद्दों के द्वारा एकल अणुओं की वास्तविक स्थिति के सटीक निर्धारण को बाधित किया गया है। सबसे पहले, छवि अधिग्रहण के दौरान माइक्रोस्कोप मंच के यांत्रिक आंदोलन स्थानीयकरण परिशुद्धता के लिए महत्वपूर्ण अनिश्चितता कहते हैं। चूंकि एसएमएलएम छवियां हज़ारों समय-सीमाबद्ध फ्रेमों पर प्राप्त होती हैं, सूक्ष्मदर्शी चरण के नैनो पैमाने पर आंदोलनों अंतिम सुपर-रिजोल्यूशन 8 छवि की सटीकता को काफी समझौता कर सकती हैं। इमेज अधिग्रहण के दौरान मंच आंदोलन के लिए क्षतिपूर्ति करने के लिए, स्टेज ड्राफ्ट का आमतौर पर प्रतिबिंब-आधारित फिटिंग का चित्र खुद से (क्रॉस कॉरलेशन) या फेड्यूशियल मार्करों (फ़िड्यूअल सुधार) 1 , 9 के अनुक्रमिक स्थानीयकरण से अनुमान लगाया गया है। Howevएर, इन तरीकों से प्रत्येक छवि स्टैक के लिए कई मापदंडों के अनुकूलन की आवश्यकता होती है, और मैकेनिकल कंपन जैसे कम समय के स्तर पर चरण आंदोलनों के लिए खाता नहीं लगा सकता है। सोना नैनो कण और बहु ​​रंग के फ्लोरोसेंट मोती एसएमएलएम में एफिड्यूशियल मार्कर के रूप में उपयोग किए गए हैं, लेकिन वे फोटो-स्थिर नहीं हैं, और नाइट्रोजन रिक्ति-केंद्र फ्लोरोसेंट नैनो-हीरे (एफडीएस) की तुलना में बहाव सुधार के बाद काफी कम सटीक परिणाम हैं मैडमस्टोर 10 में विवर्तन सीमा के अलावा, हल्के माइक्रोस्कोपी को वर्णक्रमीय सीमाओं के द्वारा प्रतिबंधित किया जाता है। कई लक्ष्यों के साथ-साथ विज़न को फ्लोरोसेंट जांच की आवश्यकता होती है, गैर-अतिव्यापी वर्णक्रमीय प्रोफाइल, आम तौर पर प्रतिदीप्ति-आधारित प्रकाश माइक्रोस्कोपी को 6 रंगों और एसएमएलएम को 2-3 रंगों 4 , 11 , 12 पर सीमित करता है। इसके अलावा, गैर-रैखिक रंगीन विपथन बहुरंगा छवियों के misalignment का कारण बनता है, डब्ल्यूइस के लिए बहु-रंगीन Fiducial मार्करों 8 , 13 का उपयोग करते हुए व्यापक संरेखण प्रक्रियाओं की आवश्यकता है। इन सीमाओं पर काबू पाने के लिए, पिछले अध्ययनों में दोहराव वाले फोटोबलीचिंग या अनुक्रमिक रूप से बाध्य फ्लोरोफोर्स 14 , 15 , 16 , 17 , 18 , 1 9 की रासायनिक शमन का उपयोग करते हुए कई लक्ष्य बनाए गए हैं। हालांकि ये पद्धति माइक्रोस्कोपी की वर्णक्रमीय सीमाओं को दूर कर सकती हैं, प्रतिदीप्ति विरंजन को विषाक्त प्रक्रिया 20 माना जाता है, और लंबे समय तक विरंजन या शमन से अवांछित दुष्प्रभाव हो सकते हैं जैसे क्रॉस्लिंकिंग का नुकसान। इसके अलावा, फ्लोरोसेंट जांच का संग्रह नमूना में बाध्यकारी साइटों के अवरोधन को रोक सकता है, बड़े पैमाने पर मल्टीप्लेक्सिंग और एपोटॉप के मजबूत लक्ष्य को रोक सकता है। इस तरह के कठोर हस्तक्षेप से बचने के लिए, हाल ही में एसट्यूडीआई ने मल्टीप्लेक्सिंग को स्टेचस्टिक एक्सचेंज का उपयोग करके स्वतंत्र रूप से प्रोटीन टुकड़ों को फैलाना 21 जबकि इस पद्धति से सेलुलर संरचनाओं के घने लेबलिंग की अनुमति होती है, पेप्टाइड के टुकड़े को अलग करने के लिए इसे व्यापक जैव रासायनिक तैयारी की आवश्यकता होती है, एकल अणु स्थितियों का पता नहीं लगा सकता है, और व्यावसायिक रूप से उपलब्ध जांचों का उपयोग करते हुए बड़े पैमाने पर मल्टीप्लेक्सिंग की आसानी से सुविधा नहीं देता है। हम एक विस्तृत विडियो प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं जो मृदुप्लेकृत, एंटीबॉडी आकार-सीमित डीएसटीओआरएम (मैडमस्टोरएम) इमेजिंग के लिए अनुक्रमिक बंधन और फ्लोरोसेंटली एंटीबॉडी के क्षीणन का वर्णन करते हैं, और सटीक बहाव सुधार और संरेखण प्राप्त करने के लिए फ्लोरोसेंट नैनो हीरे का उपयोग करते हैं।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="598">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:269px;">8 well coverslip chamber</td>
			<td style="width:117px;">Lab-tek</td>
			<td style="width:124px;">155409</td>
			<td style="width:88px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.1% Poly-L-Lysine solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">NV-100nm Fluorescent Nano-diamond</td>
			<td>Adamas</td>
			<td>Red FND</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">anti-CD3&#949; antibody</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>555329</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine serum albumin, Fraction V</td>
			<td>KSE Scientific</td>
			<td>98-100P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Triton-X</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9284</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10% Paraformaldehyde</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15712</td>
			<td>Carcinogen</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Gelatin from fresh water fish skin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G7041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alexa 647 antibody labeling kit</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A20186</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Magnesium Chloride hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>138924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PIPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6757</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween-20</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP337-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">2-Mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7154</td>
			<td>Highly toxic, air sensitive</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cysteamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30070</td>
			<td>Highly toxic&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyclooctatetraene 98%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>138924</td>
			<td>Highly toxic, air sensitive</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10x PBS</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>RGF-3210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">10x TBS</td>
			<td>KD Medical</td>
			<td>RGF-3385</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

highly multiplexed, super-resolution imaging of t cells using madstorm

एकल अणु स्थानीयकरण माइक्रोस्कोपी का उपयोग करते हुए विषम सेलुलर संरचनाओं को इमेजिंग अपर्याप्त स्थानीयकरण परिशुद्धता और बहुसंकेतन क्षमता द्वारा बाधित किया गया है। फ्लोरोसेंट नैनो-डायमंड फेड्यूशियल मार्कर का उपयोग करके, हम एक अणु स्थानीयकरण माइक्रोस्कोपी में उच्च सटीकता प्राप्त करने के लिए आवश्यक बहाव सुधार और संरेखण प्रक्रियाओं का वर्णन करते हैं। इसके अलावा, एक नई मल्टीप्लेज़िंग रणनीति, मैडमस्टोरम, को वर्णित किया गया है जिसमें एक ही सेल में कई अणुओं को लक्षित किया जाता है ताकि अनुक्रमिक बाध्यकारी और फ्लोरोसेंट एंटीबॉडी के क्षीणन का उपयोग किया जा सके। मैथमस्टोरम को एक सक्रिय टी सेल पर प्रदर्शित किया जाता है जिससे टी-सेल रिसेप्टर माइक्रोकोल्स्टर नामक एक झिल्ली-बाध्य, बहु-प्रोटीन संरचना के भीतर विभिन्न घटकों के स्थानों की कल्पना की जाती है। इसके अतिरिक्त, मल्टी-प्रोटीन संरचनाओं के विज़ुअलाइजेशन के लिए सामान्य उपकरण के रूप में मदस्टोरम के आवेदन पर चर्चा की जाती है।

एक सक्रिय जर्कट टी सेल ( चित्रा 1 , आंकड़ा संरेखण की जाँच करें) में माइक्रोकॉल्स्टर्स और अन्य संरचनाओं की मल्टीप्लेक्सेड मदस्टोरम छवि का उत्पादन करने के लिए अनुक्रमिक क्षीणन और ?...

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Highly Multiplexed, Super-resolution Imaging of T Cells Using madSTORM

हम अनुक्रमिक बाध्यकारी और फ्लोरोसेंटली लेबल एंटीबॉडी के क्षीणन का उपयोग करते हुए एकल अणु सटीकता पर विषम नैनो-संरचनाओं के भीतर छवि के कई अणुओं को प्रदर्शित करते हैं।

बेहद मल्टीप्लेक्जड, सुपरस्टोयलिंग इमेजिंग टी सेल

Imaging heterogeneous cellular structures using single molecule localization microscopy has been hindered by inadequate localization precision and ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

माउस टी कोशिकाओं में टी सेल रिसेप्टर्स की रेट्रोवायरल transduction

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

Ex vivo Imaging of T Cells in Murine Lymph Node Slices with Widefield and Confocal Microscopes

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Widefield और confocal सूक्ष्मदर्शी के साथ murine लसीका नोड स्लाइसें में टी कोशिकाओं की पूर्व vivo इमेजिंग

Na&iuml;ve T cells continuously traffic to secondary lymphoid organs, including peripheral lymph nodes, to detect rare expressed antigens. The migration ...

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion of Human Peripheral Blood  ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells using Zoledronate

मानव परिधीय रक्त का विस्तार γδ टी Zoledronate का उपयोग कक्ष

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human Na&iuml;ve and Memory T Cells

Generation of Induced Regulatory T Cells from Primary Human NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve and Memory T Cells

प्राथमिक मानव भोले और स्मृति टी कोशिकाओं से प्रेरित विनियामक टी कोशिकाओं की पीढ़ी

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कीटाणु केन्द्रों की अत्यधिक हल intravital धारीदार रोशनी माइक्रोस्कोपी

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Averaging of Viral Envelope Glycoprotein Spikes from Electron Cryotomography Reconstructions using Jsubtomo

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The glass-supported planar lipid bilayer system has been utilized in a variety of disciplines. One of the most useful applications of this technique has ...

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संरचित रोशनी माइक्रोस्कोपी डेटा की spatio- लौकिक छवि सहसंबंध स्पेक्ट्रोस्कोपी द्वारा मात्रा टी कोशिकाओं में cortical एक्टिन प्रवाह

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