Name: optical cross-sectional muscle area determination of drosophila melanogaster adult indirect flight muscles
Uploaded: 2018-03-31T13:00:00
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लेखक इस प्रोटोकॉल पर फीड-बैक और सुधार के लिए शोधों जीनोमिक्स Group और कॅथ्रीन J Hanson के सदस्यों का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं । इस परियोजना को अनुसंधान अनुदान SAF2015-64500-R के साथ किया गया, जिसमें यूरोपीय क्षेत्रीय विकास निधियां शामिल हैं, Ministerio de Economia y Competitividad द्वारा आर ए को संमानित किया गया ।

1. निर्धारण और राल embedding
<ol><li>Anesthetize के साथ मक्खियों को कार्बन डाइऑक्साइड (CO2) या एक आइस ब्लॉक का उपयोग कर हाइपोथर्मिया के माध्यम से । एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप का प्रयोग करें (पूरी मक्खी को देखने के लिए कम आ?...

<ol>
	<li>Fernandes, J., Bate, M., Vijayraghavan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+the+indirect+flight+muscles+of+Drosophila.">Development of the indirect flight muscles of Drosophila.</a> Development. 113, 67-77 (1991).</li><li>Fernandes, J. J., Keshishian, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterning+the+dorsal+longitudinal+flight+muscles+(DLM)+of+Drosophila:+insights+from+the+ablation+of+larval+scaffolds.">Patterning the dorsal longitudinal flight muscles (DLM) of Drosophila: insights from the ablation of larval scaffolds.</a> Development. 122, 3755-3763 (1996).</li><li>Hartenstein, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atlas+of+Drosophila+Development.">Atlas of Drosophila Development.</a> Atlas Drosoph. Dev. , 1-57 (1993).</li><li>Tomlinson, A., Ready, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+fate+in+the+Drosophila+ommatidium.">Cell fate in the Drosophila ommatidium.</a> Dev. Biol. 123, 264-275 (1987).</li><li>Griffith, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osmium+Tetroxide+And+Its+Applications.">Osmium Tetroxide And Its Applications.</a> Platin Met Rev. 18, 94-96 (1974).</li><li>Bird, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myotonic+Dystrophy+Type+1.">Myotonic Dystrophy Type 1.</a> GeneReviews. 1, 1-23 (1993).</li><li>Bargiela, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+autophagy+and+apoptosis+contribute+to+muscle+atrophy+in+a+myotonic+dystrophy+type+1+Drosophila+model.">Increased autophagy and apoptosis contribute to muscle atrophy in a myotonic dystrophy type 1 Drosophila model.</a> Dis Model Mech. 8, 679-690 (2015).</li><li>Llamusi, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscleblind,+BSF+and+TBPH+are+mislocalized+in+the+muscle+sarcomere+of+a+Drosophila+myotonic+dystrophy+model.">Muscleblind, BSF and TBPH are mislocalized in the muscle sarcomere of a Drosophila myotonic dystrophy model.</a> Dis. Model. Mech. 6, 184-196 (2012).</li><li>Garc&#237;a-L&#243;pez, A., Llamus&#237;, B., Orz&#225;ez, M., P&#233;rez-Pay&#225;, E., Artero, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+discovery+of+a+peptide+that+prevents+CUG-RNA+hairpin+formation+and+reverses+RNA+toxicity+in+myotonic+dystrophy+models.">In vivo discovery of a peptide that prevents CUG-RNA hairpin formation and reverses RNA toxicity in myotonic dystrophy models.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 11866-11871 (2011).</li><li>van der Plas, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Dystrophin+is+required+for+integrity+of+the+musculature.">Drosophila Dystrophin is required for integrity of the musculature.</a> Mech. Dev. 124, 617-630 (2007).</li><li>Lloyd, T. E., Taylor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flightless+flies:+Drosophila+models+of+neuromuscular+disease.">Flightless flies: Drosophila models of neuromuscular disease.</a> Ann New York Acad Sci. , 1184 (2010).</li><li>Babcock, D. T., Ganetzky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+accurate+and+rapid+measurement+of+flight+performance+in+Drosophila.">An improved method for accurate and rapid measurement of flight performance in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. , e51223 (2014).</li></ol>

यह प्रदर्शित किया गया है कि Drosophila melanogaster मानव neuromuscular रोगों का अध्ययन करने के लिए एक उपयोगी मॉडल है7,10,11, सहित Myotonic Dystrophies, जो की उपस्थिति की विशेषता है पेशी शोष । यहां प्रस्तुत...

फल मक्खी के छाती उड़ान मांसपेशियों, जो कार्यात्मक, शारीरिक और anatomically अलग कर रहे हैं की दो अलग वर्गों में शामिल हैं । इन मांसपेशियों रहे हैं: अप्रत्यक्ष उड़ान की मांसपेशियों (IFM), जो dorso-अनुदैर्ध्य (DLM) और dorso-ventral (DVM) की मांसपेशियों (चित्रा 1), और तुल्यकालिक उड़ान नियंत्रण मांसपेशियों1,2से बना रहे हैं । इन मांसपेशियों को एक साथ ऊंचा यांत्रिक उड़ान के लिए आवश्यक शक्ति उत्पन्न करते हैं । IFMs के आकार, वितरण और rostro-caudal स्वभाव आड़ा के लिए एक आसान उन्मुखीकरण की अनुमति देते हैं3 (चित्रा 2a). इस कारण से, हम Drosophila melanogasterमें मांसपेशी शोष का अध्ययन करने के लिए इन मांसपेशियों का चयन किया है ।
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56179/56179fig1.jpg"> चित्र 1. अप्रत्यक्ष उड़ान मांसपेशियों (IFMs) व्यवस्था दिखा फल मक्खी के छाती के आरेख । (बाएँ) एक पार्श्व दृश्य का प्रतिनिधित्व करता है और (दाएँ) छाती के एक पार अनुभाग का प्रतिनिधित्व करता है. IFMs Dorso-अनुदैर्ध्य (DLM) की मांसपेशियों (लाल में) और Dorso-ventral (DVM) की मांसपेशियों (हरे रंग में) से बना रहे हैं ।
ऊतक संरचना के संरक्षण और ऊतकवैज्ञानिक वर्गों के dorso-ventral अक्ष अभिविन्यास पर नियंत्रण मांसपेशी पार अनुभागीय क्षेत्र का उचित आकलन सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण हैं. मांसपेशी संरचना हम एक निर्धारण Tomlinson एट अल से संशोधित मिश्रण का इस्तेमाल किया संरक्षण । 4 . इसके अलावा, क्योंकि मांसपेशियों आंतरिक ऊतकों हैं, Drosophilaके exoskeleton की पारगम्यता निर्धारण मिश्रण लक्ष्य ऊतकों में प्रवेश नहीं कर सकते के रूप में एक समस्या है । इस समस्या को दरकिनार, हम मक्खी सिर, पैर, पंख और पेट के अंतिम दो क्षेत्रों छेद है कि निर्धारण मिश्रण में प्रवेश करने की अनुमति बनाने के लिए हटा दिया । निर्धारण प्रोटोकॉल के भाग के रूप में हम आज़मियम tetroxide (OsO4)5है, जो बड़े पैमाने पर वसा को ठीक करने की क्षमता की वजह से प्रयोग किया जाता है के साथ उपचार शामिल ट्राइग्लिसराइड्स सहित । OsO4 सबसे संरचनाओं बहुत अच्छी तरह से बरकरार रखता है, विशेष रूप से कोशिकाविज्ञान स्तर पर और एक ही समय में छवि के विपरीत प्रदान करता है । निर्धारण के बाद, Drosophila thoraces आड़ा अर्द्ध पतली खोदी (1.5 µm) के लिए राल में एंबेडेड थे । सुधार इसके विपरीत के लिए, ऊतक इसके अतिरिक्त toluidine नीले रंग के साथ दाग हो सकता है । पूरी thoraces की छवियाँ 10x और मांसपेशी क्षेत्र में लिया गया था binarizing छवियों (समान आयामों के) द्वारा quantified गया था और कुल से बाहर मांसपेशी ऊतक (ब्लैक पिक्सल) के लिए इसी पिक्सल के प्रतिशत को बढ़ाता है, ImageJ सॉफ्टवेयर के साथ.
ऊतक तैयारी और निर्धारण मिश्रण पर संशोधन, OsO की एकाग्रता की वृद्धि के रूप में4 और glutaraldehyde समाधान, इस प्रोटोकॉल में शुरू की मांसपेशी ऊतक के अद्वितीय संरक्षण की अनुमति दी । यह इसलिए है क्योंकि प्रोटोकॉल क्षरण और ऊतक के विकृति से बचा जाता है, नमूने के पीछे विश्लेषण और भी उच्च एट्रोफिक Myotonic Dystrophy (डीएम) जैसे neuromuscular अपक्षयी रोगों से संबंधित स्थितियों में विश्वसनीय बना । इसके अधिक सामांय रूप में, डीएम प्रकार 1, इस दुर्लभ आनुवंशिक विकार के बारे में विस्तार से सीयूजी दोहराता द्वारा लाया जाता है myotonic dystrophy प्रोटीन कळेनासे (DMPK) टेप । उत्परिवर्ती DMPK आरएनए समुच्चय फार्म ribonuclear घावों कि एकांत Muscleblind-like नाभिकीय आरएनए-बाइंडिंग प्रोटीन (MBNL1-3; Muscleblind (Mbl) मे Drosophila)6. हमने दमदार मायोसिन हैवी चेन प्रमोटर (Mhc-Gal4) के तहत 250 CTG को दोहराता व्यक्त करते हुए Myotonic Dystrophy का Drosophila मॉडल जेनरेट किया । मॉडल मक्खियों एक ठेठ ' ऊपर आयोजित ' पंख phenotype के साथ उड़ान भरी थी और उनके IFMs में गंभीर मांसपेशी शोष था (चित्रा बी) । हमारे प्रयोगशाला में प्रदर्शन पिछले अध्ययनों से पता चला है कि IFMs की मांसपेशी क्षेत्र का निर्धारण एक विश्वसनीय तरीका है इन मॉडल में मांसपेशी शोष के विभिन्न रासायनिक या आनुवंशिक संशोधक के प्रभाव को बढ़ाता है7मक्खियों । एक उदाहरण के रूप में, Mbl isoform सी के व्यक्त मक्खियों में 250 CTG दोहराता व्यक्त की मांसपेशी में, मांसपेशी क्षेत्र का बचाव हासिल किया, ज़ब्ती द्वारा Mbl कमी के रूप में DM1 रोगजनन में ट्रिगर कारक है8 (चित्रा 2c). पेशी क्षेत्र भी डीएम को खिलाने के बाद बचाया गया था मॉडल Abp1 के साथ मक्खियों, सिद्ध विरोधी DM1 गतिविधि के साथ एक hexapeptide9 (चित्रा 2d) ।
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56179/56179fig2.jpg"> चित्र 2. राल के dorsoventral वर्गों के ठहराव-एंबेडेड वयस्क thoraces । (A-D) संकेत संगत पादी के साथ Drosophila melanogaster की अप्रत्यक्ष उड़ान मांसपेशियां । (क) नियंत्रण मक्खियों (yw) । (ख) की अभिव्यक्ति 250 गैर कोडिंग मांसपेशी में CTG दोहराता (यूएएस-CTG (250) x) नियंत्रण मक्खियों की तुलना में DLMs में मांसपेशियों के क्षेत्र की कमी हुई । (ग) इस मांसपेशी शोष phenotype Muscleblind (MblC) (यूएएस-CTG (250) एक्स यूएएस-MblC) और (घ) मॉडल hexapeptide Abp1 (यूएएस-CTG (250) एक्स Abp1) के साथ मक्खियों खिला द्वारा बचाया गया था । सभी छवियों में पृष्ठीय पक्ष शीर्ष पर है । Transgenes एक मायोसिन भारी चेन प्रमोटर (Mhc)-Gal4 का उपयोग कर मांसपेशियों को प्रेरित किया गया । (ङ) ठहराव नियंत्रण मक्खियों के सापेक्ष मांसपेशी क्षेत्र के प्रतिशत की पुष्टि की है कि मतभेद महत्वपूर्ण थे । हिस्टोग्राम शो का अर्थ है ± S.E.M. * *p< 0.01 और * p < 0.05 (छात्र ´ S t-test) । स्केल बार: 200 µm. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56179/56179fig2large.jpg" target="_blank">इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें.</a>
यहां विधि की रिपोर्ट ब्याज की मांसपेशियों के विकास, रखरखाव और उंर बढ़ने, रोग विकृति और दवा परीक्षण पर ध्यान केंद्रित के रूप में यह कैसे मांसपेशी ऊतक दोनों अंतर्जात और बाह्य कारकों का जवाब के बारे में विश्वसनीय जानकारी प्रदान करता है होगा ।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Image-J software</td>
			<td>National Institutes of Health</td>
			<td></td>
			<td>https://imagej.nih.gov/ij/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultramicrotome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica UC6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Leica MZ6</td>
			<td>Bright field technique.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor blades</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>71970</td>
			<td>Several alternative providers exist.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>World Precision World</td>
			<td>14003</td>
			<td>Several alternative providers exist.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding molds</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>70900</td>
			<td>Several alternative providers exist.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutaraldehyde</td>
			<td>Fluka (Sigma)</td>
			<td>49624</td>
			<td>Toxic.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OsO4</td>
			<td>Polyscience</td>
			<td>0972A</td>
			<td>Extremely toxic.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propylene oxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>82320-250ML</td>
			<td>Extremely toxic.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>resin (Durcupan)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>44611-44614</td>
			<td>Carcinogenic when it is unpolymerized.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toluidine blue</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>251176</td>
			<td>Toxic.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mountant Medium (DPX)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>44581</td>
			<td>Dangerous.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6148-500G</td>
			<td>Harmful.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>122507</td>
			<td>0.2 M dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>121677</td>
			<td>0.2 M dilution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borax</td>
			<td>Panreac</td>
			<td>3052</td>
			<td>Toxic.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

optical cross-sectional muscle area determination of drosophila melanogaster adult indirect flight muscles

स्नायु द्रव्यमान बर्बाद कर, मांसपेशी शोष के रूप में जाना जाता है, neuromuscular रोगों के Drosophila मॉडल में एक आम phenotype है । हम अप्रत्यक्ष उड़ान की मांसपेशियों (IFMs) मक्खियों का इस्तेमाल किया है, विशेष रूप से dorso-अनुदैर्ध्य मांसपेशियों (DLM), के रूप में प्रयोगात्मक एट्रोफिक phenotype को मापने के विषय के रूप में विभिंन आनुवंशिक कारणों से लाया । इस प्रोटोकॉल में, हम कैसे अर्द्ध पतली अनुभाग, मांसपेशियों और आसपास के ऊतकों के बीच एक अच्छा विपरीत प्राप्त करने के लिए उड़ना छाती मांसपेशियों को एंबेड करने के लिए का वर्णन है, और कैसे quantifiable डेटा के semiautomatic अधिग्रहण के लिए ऑप्टिकल माइक्रोस्कोप छवियों को संसाधित करने के लिए और विश्लेषण. हम methodological पाइपलाइन के तीन विशिष्ट अनुप्रयोगों का वर्णन । सबसे पहले, हम बताते हैं कि कैसे विधि एक myotonic dystrophy मक्खी मॉडल में मांसपेशियों के अध-पतन के लिए लागू किया जा सकता; दूसरा, मांसपेशी पार अनुभागीय क्षेत्र के माप जीन की पहचान करने में मदद कर सकते है कि या तो को बढ़ावा देने या मांसपेशी शोष और/ तीसरे, इस प्रोटोकॉल निर्धारित करने के लिए कि एक उंमीदवार यौगिक काफी एक दिया एट्रोफिक एक रोग द्वारा प्रेरित phenotype-उत्परिवर्तन के कारण या एक पर्यावरण ट्रिगर द्वारा संशोधित करने में सक्षम है लागू किया जा सकता है ।

यह यों तो है कि MblC या Abp1 के प्रशासन के व्यक्त Myotonic Dystrophy मक्खी मॉडल हम DLMs, जो IFMs का हिस्सा है पर ध्यान केंद्रित की एट्रोफिक phenotype में कोई प्रभाव था (चित्रा 1) । हम निर्धारित किया है कि मॉडल मक्...

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Optical Cross-Sectional Muscle Area Determination of Drosophila Melanogaster Adult Indirect Flight Muscles

ऑप्टिकल क्रॉस- Drosophila Melanogaster वयस्क अप्रत्यक्ष उड़ान मांसपेशियों के अनुभागीय मांसपेशी क्षेत्र निर्धारण

हम एक विधि की रिपोर्ट करने के लिए मांसपेशियों क्षेत्र है, जो एक अप्रत्यक्ष विधि के लिए Drosophila वयस्कों में मांसपेशियों का निर्धारण है । हम Myotonic Dystrophy रोग के एक Drosophila मॉडल में अप्रत्यक्ष उड़ान मांसपेशियों का विश्लेषण करके हमारी कार्यप्रणाली के अनुप्रयोग का प्रदर्शन करते हैं ।

Muscle mass wasting, known as muscle atrophy, is a common phenotype in Drosophila models of neuromuscular diseases. We have used the indirect flight ...

The overall goal of this procedure is to quantify the muscle area in the Drosophila adult muscles as a means to indirectly quantify muscle mass and correctly size the generation or muscle atrophy. For this purpose, we focused on dorsal longitudinal muscles because of their size, distribution, and also count on this position, a low and easy orientation for transversal sectioning. One, fixation and resin embedding.The first step of the procedure is to anesthetize the flies with CO2, and, with the help of scissors and forceps, remove the legs, the wings, and the terminal part of the abdomen. Secondly, carefully transfer the carcasses, to avoid the deformation of the thorax, to a one point five milliliter tube on ice, placing a maximum of six individuals per tube containing 200 microliters of solution one. The carcasses cannot remain in this solution for more than 20 minutes.Finally, add 200 microliters of solution two and incubate on ice for 30 minutes. After incubation, remove all of the liquid, add 200 microliters of solution two, and incubate the carcasses on ice for one to two hours. The next step is to remove the solution and dehydrate the samples through a graded ethanol series.Incubate the samples twice in propylene oxide for ten minutes each incubation. Then, replace the propylene oxide with a mixture of 500 microliters resin and 500 microliters propylene oxide and incubate the samples at room temperature overnight. The next day, replace the mixture with 100 percent resin and incubate the samples for four hours.Afterwards, transfer the carcasses to plastic molds containing new resin, making sure you put one carcass in each well of the mold. With a wooden stick, orient the carcasses in the wells and let the resin polymerase overnight in a pasteur oven at 70 degrees Celsius. To discard the resin, bake it at 70 degrees Celsius for 24 hours, because solid, baked resin is not toxic.Two, trimming and sectioning of blocks. With the help of razor blades, trim away the resin and form a trapezoidal shape surrounding the carcass to give the appropriate orientation in the microtome. Check in the microscope that the muscles are perfectly oriented.After this, cut one point five micrometer thick sections with an ultramicrotome, and transfer the sections into water drops over gelatinized slides. Finally, place the slides containing the sections on a heating block at 70 to 80 degrees Celsius until all the water evaporates. Three, staining IFM sections.Cover the sections with toluidine blue for approximately 30 seconds on the heating block. Then, rinse in several changes of water and leave the slides on a warm plate to evaporate the water. Four, mounting IFM sections.Taking the slides, put one or two drops of mountant medium on the sections and put on a long coverslip. Five, acquisition of images and quantification of muscle area. Use ImageJ software to select an area containing only the DLMs.Taking as a control the dimensions of the image of the fly with the biggest muscle area, finerize the images, and delete the areas, or pixels, that do not correspond to the muscles of interest. Quantify the percentage of pixels corresponding to muscle tissue out of total with the command analyze, measurement, and select the option, area fraction. This percentage of area is an estimation of the DLM muscular mass of each fly.Representative results. We determined that the model flies, which express 250 noncoding CTG repeats throughout the musculature, driven by the myosin heavy chain promoter, MhC Gal four, had a 50 percent reduction of muscle area compared to control flies. In contrast, co expression of muscle blind C and expanded CTG repeats with the same driver strongly suppressed such phenotype and cross sectional muscle area was 70 percent of control flies.Administration of the Abp1 hexapeptide in the nutritive media similarly suppressed the atrophic phenotype and model flies that had taken the compound showed approximately 60 percent of normal muscle area, instead of 50 percent, that is typical of DF1 flies.Conclusions. The protocol presented here is a useful tool for quantifying the muscle degeneration caused by the onset or progression of a particular disease in a fly model. Finally, this method is also optimized to detect small muscle area differences, or even to quantify the area of different structures such as nephyocytes.Thank you for watching.

Research

JoVE Journal

Biology

Optical Cross-Sectional Muscle Area Determination of Drosophila Melanogaster Adult Indirect Flight Muscles

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High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

उच्च संकल्प प्रौढ़ ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में हरकत की वीडियो ट्रैकिंग

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Visually Mediated Odor Tracking During Flight in Drosophila

दिखने में ड्रोसोफिला में उड़ान के दौरान मध्यस्थता गंध ट्रैकिंग

Flying insects use visual cues to stabilize their heading in a wind stream. Many animals additionally track odors carried in the wind. As such, visual ...

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

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वयस्क से Oenocytes के विच्छेदन ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Paraffin-Embedded and Frozen Sections of Drosophila Adult Muscles

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के आयल - एंबेडेड और जमे हुए वर्गों ड्रोसोफिला वयस्क स्नायु

The molecular characterization of muscular dystrophies and myopathies in humans has revealed the complexity of muscle disease and genetic analysis of ...

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के अलगाव ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर Testes

The testes of Drosophila melanogaster provide an important model for the study of stem cell maintenance and differentiation, meiosis, and soma-germline ...

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इंसुलिन इंजेक्शन और Hemolymph निकालना वयस्क में इंसुलिन संवेदनशीलता उपाय ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Conserved nutrient sensing mechanisms exist between mammal and fruit fly where peptides resembling mammalian insulin and glucagon, respectively function ...

Ex Vivo Assessment of Contractility, Fatigability and Alternans in Isolated Skeletal Muscles

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पृथक कंकाल की मांसपेशियों में सिकुड़ना fatigability, और alternans के पूर्व vivo आकलन

 
Described here is a method to measure contractility of isolated skeletal muscles. Parameters such as muscle force, muscle power, contractile kinetics, ...

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उम्र के मापन में<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

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Large quantities of DNA, RNA, proteins and other cellular components are often required for biochemistry and molecular biology experiments. The short life ...