Name: sample preparation for endopeptidomic analysis in human cerebrospinal fluid
Uploaded: 2017-12-04T13:00:00
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Vielen Dank an Tanveer Batth und Kollegen für die Beratung bei der Einrichtung der Pre-Fraktionierung-Methode.
Diese Arbeit wurde unterstützt durch Mittel vom schwedischen Forschungsrat, der Wallström und Sjöblom Foundation, die Waffe und Bertil Stohne Stiftung Stiftelse, Magnus Bergwall Stiftung, Åhlén Stiftung, Alzheimerfonden, Demensförbundet, Stiftelsen för Gamla Tjänarinnor, Knut und Alice Wallenberg Foundation, Frimurarestiftelsen und FoU Västra Götalandsregionen.
Die wichtigsten Empfänger von Zuschüssen für dieses Projekt waren Kaj Blennow, Henrik Zetterberg und Johan Gobom.

Die nachfolgend beschriebene Protokoll ist eine verfeinerte Version des einen in einer früheren Studie verwendet, wo eine große Menge von endogenen Peptiden in menschlichen CSF15identifiziert wurden. Updates für das ursprüngliche Protokoll betreffen kleine Änderungen der chemischen Vorbehandlung von CSF sowie Optimierung des Verlaufs für offline hohem pH-Wert RP HPLC Pre Fraktionierung verwendet.
Ethische Überlegungen
...

<ol>
	<li>Wimo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+worldwide+costs+of+dementia+2015+and+comparisons+with+2010.">The worldwide costs of dementia 2015 and comparisons with 2010.</a> Alzheimers Dement. 13 (1), 1-7 (2017).</li><li>Scheltens, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alzheimer's+disease.">Alzheimer's disease.</a> Lancet. 388 (10043), 505-517 (2016).</li><li>Dubois, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advancing+research+diagnostic+criteria+for+Alzheimer's+disease:+the+IWG-2+criteria.">Advancing research diagnostic criteria for Alzheimer's disease: the IWG-2 criteria.</a> Lancet Neurol. 13 (6), 614-629 (2014).</li><li>Olsson, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CSF+and+blood+biomarkers+for+the+diagnosis+of+Alzheimer's+disease:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">CSF and blood biomarkers for the diagnosis of Alzheimer's disease: a systematic review and meta-analysis.</a> Lancet Neurol. 15 (7), 673-684 (2016).</li><li>Spellman, D. 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T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanding+the+cerebrospinal+fluid+endopeptidome.">Expanding the cerebrospinal fluid endopeptidome.</a> Proteomics. 17 (5), (2017).</li><li>Guldbrandsen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-depth+characterization+of+the+cerebrospinal+fluid+(CSF)+proteome+displayed+through+the+CSF+proteome+resource+(CSF-PR).">In-depth characterization of the cerebrospinal fluid (CSF) proteome displayed through the CSF proteome resource (CSF-PR).</a> Mol Cell Proteomics. 13 (11), 3152-3163 (2014).</li><li>Kroksveen, A. C., Opsahl, J. A., Aye, T. T., Ulvik, R. J., Berven, F. 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W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+Comparison+of+Fractionation+Methods+for+In-depth+Analysis+of+Plasma+Proteomes.">Systematic Comparison of Fractionation Methods for In-depth Analysis of Plasma Proteomes.</a> J Proteome Res. 11 (6), 3090-3100 (2012).</li><li>Chiu, C. W., Chang, C. L., Chen, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+peptide+fractionation+strategies+used+in+proteome+analysis.">Evaluation of peptide fractionation strategies used in proteome analysis.</a> J Sep Sci. 35 (23), 3293-3301 (2012).</li><li>Gilar, M., Olivova, P., Daly, A. E., Gebler, J. 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D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-pH+reversed-phase+chromatography+with+fraction+concatenation+for+2D+proteomic+analysis.">High-pH reversed-phase chromatography with fraction concatenation for 2D proteomic analysis.</a> Expert Rev Proteomics. 9 (2), 129-134 (2012).</li><li>Blennow, K., Hampel, H., Weiner, M., Zetterberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebrospinal+fluid+and+plasma+biomarkers+in+Alzheimer+disease.">Cerebrospinal fluid and plasma biomarkers in Alzheimer disease.</a> Nat Rev Neurol. 6 (3), 131-144 (2010).</li><li>Moglich, A., Krieger, F., Kiefhaber, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+for+the+effect+of+urea+and+guanidinium+chloride+on+the+dynamics+of+unfolded+polypeptide+chains.">Molecular basis for the effect of urea and guanidinium chloride on the dynamics of unfolded polypeptide chains.</a> J Mol Biol. 345 (1), 153-162 (2005).</li><li>Ho&#776;ltta&#776;, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Integrated+Workflow+for+Multiplex+CSF+Proteomics+and+Peptidomics+Identification+of+Candidate+Cerebrospinal+Fluid+Biomarkers+of+Alzheimer&#8217;s+Disease.">An Integrated Workflow for Multiplex CSF Proteomics and Peptidomics Identification of Candidate Cerebrospinal Fluid Biomarkers of Alzheimer&#8217;s Disease.</a> J Proteome Res. 14 (2), 654-663 (2014).</li></ol>

Die Einführung eines hohem pH-Wert RP HPLC Pre Fraktionierung Schritts auf ein zuvor entwickelte Protokoll für die Wiederherstellung von endogenen Peptiden durch Molekulargewicht Ultrafiltration11 relative Probe Komplexität reduziert und dadurch für eine 5-fach größere erlaubt Probenvolumen untersucht werden. Dies wiederum erhöht die Konzentration der Teilmenge von Peptiden in jede Fraktion vertreten und dadurch verbessert die Chancen auf Erkennung von niedrigen reichlich Peptide.
<p cl...

Biomarker im Liquor cerebrospinalis (CSF) sind derzeit verwandelt Forschung in Neurodegenerative Erkrankungen. Bei der Alzheimer-Krankheit die häufigste Neurodegenerative Erkrankung, Auswirkungen auf mehr als 60 Millionen Menschen weltweit1,2, ein Biomarker-Triplett bestehend aus Peptid Amyloid Beta, Mikrotubuli-stabilisierenden Protein Tau, und eine Tau Form phosphoryliert und erkennt die Krankheit mit hoher Sensitivität und Spezifität in der diagnostischen Forschung Kriterien3aufgenommen wurde. In anderen neurodegenerativen Erkrankungen wie Morbus Parkinson und Multiple Sklerose haben Proteomic Studien zahlreiche Biomarker Kandidaten identifiziert einige davon derzeit unter Bewertung klinischer Studien4,5 sind ,6.
Neben Proteinen enthält CSF auch eine Fülle von endogenen Peptiden7,8,9,10,11,12. Spaltprodukte des Gehirns abgeleitet Proteine bilden, stellen diese Peptide auch eine wichtige Quelle der Krankheit Biomarker. Um das Inventar der identifizierten endogene Peptide in menschlichen CSF zu erhöhen und CSF Endopeptidomic Analysen in klinischen Studien zu ermöglichen, wurde eine Methode entwickelt, für die Probenvorbereitung und LC-MS-Analyse (eine kurze Protokollschema ist in Abbildung 1 aufgenommen worden ). Die Anwendung dieser Methode in einer aktuellen Studie wurden fast 16.400 endogenen CSF Peptide in CSF Mischproben aus mehrere Personen der unspezifischen Diagnose, Erweiterung der bekannten CSF Endopeptidome um das Zehnfache13. Die Methode kann optional in Verbindung mit Isobaren Kennzeichnung Ansatz zur Quantifizierung verwendet werden.
Vorbereitung der Probe
Die wichtigste Quelle für Eiweiß Masse in CSF ist Plasma Bestandteile (z.B. Albumin und Immunglobuline) Überfahren der Blut Hirn-Schranke14,15. Ihre hohe Fülle erschwert die Erkennung von niedrig-reichlich, Brain-derived Beispielkomponenten. Endogene Peptide können leicht von der hohen reichlich Proteine, wodurch ein deutlich größeres Volumen von CSF-Peptid-Extrakt für LC-MS-Analyse, damit die Erkennung der unteren reichlich Peptide verwendet werden getrennt werden.
In dem hier vorgestellten Protokoll wurde Molekulargewicht Cut-Off (MWCO) Filtration verwendet die Proteinfraktion CSF Peptide getrennt; eine Methode, die in mehreren früheren verwendet wurde studiert8,9,10,11,12,16. Der Filtrationsschritt folgte ein offline RP HPLC Pre Fraktionierung Schritt über einen Gradienten von hohem pH-Wert mobilen Phase durchgeführt. Durch Schritten zwei RP HPLC im Tandem, mit pH wird der Hauptunterschied, ergibt sich der Unterschied in Selektivität zwischen den zwei Schritten hauptsächlich aus veränderten Peptid Thesaurierung als Folge unterschiedlicher Peptid Ladungszustände. Die Anwendung von hohem pH-Wert Peptid Pre Fraktionierung vor LC-MS unter sauren Bedingungen nachweislich effizient Peptid Identifikation17,18zu erhöhen und zu diesem Zweck in komplexen biologischen überlegen sein Proben im Vergleich zu mehr orthogonal Trennung Modi19, wie starke Katze-Ionenaustausch (SCX) und RP-20. Um die Analyse zu verkürzen, war eine Verkettung Schema verwendet bündeln alle 12th -Fraktion (z.B. Brüche 1, 13, 25, 37 und 49), die durch das hohe Auflösungsvermögen der RP-HPLC Co Elution von Peptiden aus verschiedenen noch weitgehend vermieden, Brüche in der LC-MS Schritt20,21.
Peptid-Identifikation
Peptid-Identifikation in Peptidomic Studien unterscheidet sich von der Proteomik-Studien, dass kein Enzym Spaltung in die Datenbankrecherche angegeben werden kann, und folglich Identifikation Preise in der Regel niedriger11 sind. Eine aktuelle Studie13 zeigte, dass die Identifizierung Preise für endogene Peptide mit Sequest und Maskottchen erhalten wesentlich verbessert wurden, wenn der Standardwert scoring-Algorithmus des jeweiligen Software-Programm mit der adaptive scoring geändert wurde Algorithmus Percolator, darauf hinweist, dass optimale scoring Algorithmen zur endogenen Peptiden unterscheidet sich von der tryptic Peptide13. Studie, Identifikation anhand automatischer Peptid de Novo Sequenzierung mit Hilfe der Software PEAKS (BSI) Ergänzend zu den zwei Fragment Ion fingerprinting-basierten Suchmaschinen gefunden wurde, identifiziert, wodurch eine erheblich größere Anzahl von Peptide.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1564">
	<tbody>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:547px;">&#160;1 M Triethylammonium bicarbonate</td>
			<td style="width:339px;">Fluka, Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:339px;">17902-100ML</td>
			<td style="width:339px;">TEAB</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">&#160;8 M Guanidinium hydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G7294-100ML</td>
			<td>GdnHCl</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:547px;">Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride</td>
			<td>Pierce</td>
			<td>20490</td>
			<td>TCEP</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Iodoacetamide</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>I1149-5G</td>
			<td>IAA</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Hydroxylamine 50% (w/w)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>457804-50ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Acetonitrile, Far UV, HPLC gradient grade</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004-2L</td>
			<td>AcN</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Formic acid</td>
			<td>Fluka, Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>56302-1mL-F</td>
			<td>FA</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Triflouroacetic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T6508-10AMP</td>
			<td>TFA</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Ammonium hydroxide solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td>30501-1L-1M</td>
			<td>NH4OH</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Amicon Ultra-15 Centrifugal Filter Unit with Ultracel-30 membrane</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td>UFC903024</td>
			<td>MWCO-filter</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Sep-Pak C18, 100 mg</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023590</td>
			<td>SPE-column</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Resprep 12-port SPE Manifold&#160;</td>
			<td>Restek</td>
			<td>26077</td>
			<td>Vacuum manifold</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">TMT10plex Isobaric Label Reagent Set</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>90110</td>
			<td>TMT10plex</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">UltiMate 3000 RSLCnano LC System</td>
			<td>Dionex</td>
			<td>5200.0356</td>
			<td>Online sample separation</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Ultimate 3000 RPLC Rapid Separation Binary System</td>
			<td>Dionex</td>
			<td>IQLAAAGABHFAPBMBEZ</td>
			<td>Offline high-pH fractionation</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Orbitrap Fusion Tribrid mass spectrometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td style="width:339px;">IQLAAEGAAPFADBMBCX</td>
			<td>Mass spectrometer for sample analysis</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Proteome Discoverer 2.0&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>IQLAAEGABSFAKJMAUH</td>
			<td>Proteomics search platform</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Mascot v2.4</td>
			<td>Matrix Science</td>
			<td style="width:339px;">&#160;-&#160;</td>
			<td>Proteomics search engine</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Sequest HT</td>
			<td>Thermo</td>
			<td style="width:339px;">&#160;-&#160;</td>
			<td>Proteomics search engine</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">PEAKS v7.5&#160;</td>
			<td>Bioinformatic Solutions Inc.)</td>
			<td style="width:339px;">&#160;-&#160;</td>
			<td>Proteomics search engine</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Acclaim PepMap 100, 75 &#181;m x 2 cm, C18, 100 &#197; pore size, 3 &#181;m particle size</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>164535</td>
			<td>Trap column (nano HPLC)</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Acclaim PepMap C18, 75 &#181;m x 500 mm, 100&#197; pore size,&#160;2 &#181;m particle size</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>164942</td>
			<td>Separation Column (nano HPLC)</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">Savant SpeedVac High Capacity Concentrators</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>SC210A-230</td>
			<td>SpeedVac/Vacuum concentrator</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;">XBridge Peptide BEH C18 Column, 130&#197;, 3.5 &#181;m, 2.1 mm X 250 mm</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186003566</td>
			<td>Separation Column (micro HPLC)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sample preparation for endopeptidomic analysis in human cerebrospinal fluid

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode entwickelt, um die endogene Peptide in menschlichen zerebrospinale Flüssigkeit (CSF) zu identifizieren. Zu diesem Zweck eine zuvor entwickelte Methode basierend auf Molekulargewicht Cut-Off (MWCO) Filtration und massenspektrometrische Analyse wurde mit einer offline hohem pH-Wert umgekehrter Phase HPLC Pre Fraktionierung Schritt kombiniert.
Sekretion in Liquor ist der Hauptweg zur Entfernung von Molekülen durch Zellen des zentralen Nervensystems zu vergießen. So spiegeln sich viele Prozesse in das zentrale Nervensystem im Liquor, eine wertvolle diagnostische Flüssigkeit zu rendern. CSF hat eine komplexe Zusammensetzung enthält Proteine, die einen Konzentrationsbereich von 8-9 Größenordnungen umfassen. Neben Proteinen haben frühere Studien auch die Anwesenheit einer großen Anzahl von endogenen Peptiden gezeigt. Während weniger intensiv erforscht als Proteine, können diese auch potentielles Interesse als Biomarker halten.
Endogene Peptide wurden von der CSF Proteingehalt durch MWCO Filtration getrennt. Einen Großteil der Proteingehalt aus der Probe entfernen, ist es möglich, das Probenvolumen studiert und damit auch der Gesamtbetrag der endogene Peptide zu erhöhen. Die Komplexität der Mischung filtriert Peptid wurde behoben, indem unter anderem einen umgekehrten Phase HPLC (RP) Pre-Fraktionierung Schritt bei alkalischen pH-Wert vor der LC-MS-Analyse. Die Fraktionierung wurde kombiniert mit einem einfachen Verkettung Regelung denen 60 Brüche in 12 gebündelt wurden, konnte Analyse Zeitverbrauch dadurch verringert werden, Co Elution noch weitgehend zu vermeiden.
Automatisierte Peptid Identifikation erfolgte durch mit drei verschiedenen Peptid/Protein-Identifikation-Software-Programme und kombinieren anschließend die Ergebnisse. Die verschiedenen Programme wurden ergänzende als vergleichbar mit weniger als 15 % von Identifikationen, die zwischen den drei überlappt.

Die hier beschriebene Methode wurde angewendet und evaluiert in drei Studien vor der Einführung der Probe vor Fraktionierung (Tabelle 1). Die erste Studie offline LC für spotting CSF Fraktionen auf eine MALDI-Zieltafel verwendet und 730 identifizierten endogene Peptide11ergeben. In den beiden folgenden Studien wurde die Isobaren Kennzeichnung eingesetzt. In erster Linie in einem Fall/Dimmer Studie zur Identifizierung und Charakterisierung potenzieller Biomarker in der CSF Endopeptidome und Prote...

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Sample Preparation for Endopeptidomic Analysis in Human Cerebrospinal Fluid

Eine Methode für die massenspektrometrische Analyse von endogenen Peptiden in menschlichen zerebrospinale Flüssigkeit (CSF) wird vorgestellt. Durch den Einsatz von Molekulargewicht Cut-off-Filtration, chromatographische Pre-Fraktionierung, massenspektrometrischen Analyse und eine anschließende Kombination von Peptid-Identifikation-Strategien, war es möglich, die bekannten CSF Peptidome fast um das Zehnfache im Vergleich zu erweitern zu früheren Studien.

Probenvorbereitung für die Endopeptidomic Analyse im menschlichen Liquor cerebrospinalis

This protocol describes a method developed to identify endogenous peptides in human cerebrospinal fluid (CSF). For this purpose, a previously developed ...

The goal of this protocol is to prepare and analyze human cerebrospinal fluid samples for LC-MS analysis of endogenous peptides.A peptide pre-fractionation step prior to LC-MS increases the number of identified peptides and enables detection of relatively low abundance CSF peptides.Endogenous peptides in CSF are calcium molecules that have not been extensively explored and may potentially include important new biomarkers of neurodegenerative disorders.This method enables extensive characterization of the CSF peptidome by mass spectrometry.The main advantages of this method are that it enables injection of low abundance CSF peptides and is compatible with multiplex isobaric labeling techniques, making it applicable for clinical studies.So far we have mainly applied this method to the analysis of cerebrospinal fluid.But we have preliminary data indicating that with minor modifications, it can also be used for analysis of plasma and tissue samples.Begin by thawing 1.5 milliliter aliquots of CSF at room temperature on roller mixer.Once thawed, transfer the contents to 10 milliliter polypropylene tubes.And add 80 microliters of one molar TAB as a buffering agent.Then add 0.65 milliliters of a eight molar guanidinium hydrochloride to dissolve protein aggregates and vortex gently at room temperature for 10 minutes.Next, at 60 microliters of 200 millimolar aqueous TCEP, and incubate at 55

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In Vivo Imaging of Cerebrospinal Fluid Transport through the Intact Mouse Skull using Fluorescence Macroscopy

In Vivo Imaging von Cerebrospinalfluid Transport durch den intakten Mausschädel mittels Fluoreszenz-Makroskopie

Cerebrospinal fluid (CSF) flow in rodents has largely been studied using ex vivo quantification of tracers. Techniques such as two-photon microscopy and ...

3D Kinematic Analysis for the Functional Evaluation in the Rat Model of Sciatic Nerve Crush Injury

3D Kinematische Analyse zur funktionellen Bewertung im Rattenmodell von Ischias-Nerven-Crush-Verletzungen

Compared to the Sciatic Functional Index (SFI), kinematic analysis is a more reliable and sensitive method for performing functional evaluations of ...

Cochlear Surface Preparation in the Adult Mouse

Cochlea-Oberflächenvorbereitung in der Erwachsenenmaus

Auditory processing in the cochlea depends on the integrity of the mechanosensory hair cells. Over a lifetime, hearing loss can be acquired from numerous ...

A Pilot Study on the Repetitive Transcranial Magnetic Stimulation of A&#946; and Tau Levels in Rhesus Monkey Cerebrospinal Fluid

Eine Pilotstudie zur repetitiven transkraniellen Magnetstimulation von Aβ- und Tau-Spiegeln in der Rhesusaffen-Zerebrospinalflüssigkeit

Previous studies have demonstrated that a non-invasive light-flickering regime and auditory tone stimulation could affect A&#946; and tau metabolism in ...

Comprehensive Understanding of Inactivity-Induced Gait Alteration in Rodents

Umfassendes Verständnis der inaktivitätsinduzierten Gangveränderung bei Nagetieren

It is well known that disuse affects neural systems and that joint motions become altered; however, which outcomes properly exhibit these characteristics ...

Liquor- und Blutentnahme bei Ratten mit gleichzeitiger EEG-Aufzeichnung

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Autor im Rampenlicht: Gewinnung hochwertiger Liquor- und Blutproben für die Entdeckung von Epilepsie-Biomarkern 

Entnahme von Liquor und Blut aus der seitlichen Schwanzvene bei Ratten während EEG-Aufzeichnungen

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...