Name: preparation of keratin hydrolysate from chicken feathers and its application in cosmetics
Uploaded: 2017-11-27T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics at JoVE.com

Denna artikel skrevs med stöd av projektet IGA/FT/2017/007 av Tomas Bata University i Zlin.

Frivilliga rekryterades bland anställda och studenter vid vårt universitet. Metoden för att välja genomfördes enligt ”internationella etiska riktlinjer för medicinsk forskning involvera försökspersoner. Rådet för internationella organisationer för medicinska vetenskaper, Geneva (2002) ”. KH är en vanlig kosmetisk ingrediens som används i hårvård produkter (schampo, balsam, etc.) och därmed krävs inte godkännande från den institutionella Granskningsnämnden.
1. pr...

<ol>
	<li>United States Department of Agriculture - National Agricultural Statistics Services. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Poultry Slaughter, 2016 Summary. , (2016).</li><li>McGovern, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recycling+poultry+feathers:+more+bang+for+the+cluck.">Recycling poultry feathers: more bang for the cluck.</a> Environ.Health Perspect. 108 (8), A336-A339 (2000).</li><li>Gousterova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Degradation+of+keratin+and+collagen+containing+wastes+by+newly+isolated+thermoactinomycetes+or+by+alkaline+hydrolysis.">Degradation of keratin and collagen containing wastes by newly isolated thermoactinomycetes or by alkaline hydrolysis.</a> Lett. Appl. Microbiol. 40 (5), 335-340 (2005).</li><li>Yamauchi, K., Yamauchi, A., Kusunoki, T., Khoda, A., Konishi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+stable+aqueous+solution+of+keratins,+and+physiochemical+and+biodegradational+properties+of+films.">Preparation of stable aqueous solution of keratins, and physiochemical and biodegradational properties of films.</a> Biomed. Mater. Res. 31 (4), 439-444 (1996).</li><li>Schrooyen, P. M. M., Dijkstra, P. J., Oberthur, R. C., Bantjes, A., Feijen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partially+carboxymethylated+feather+keratins.+2.+Thermal+and+mechanical+properties+of+films.">Partially carboxymethylated feather keratins. 2. Thermal and mechanical properties of films.</a> J. Agric. Food Chem. 49 (1), 221-230 (2001).</li><li>Mark, H. F., Gaylord, N. G., Bikales, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Polymer Science Technology: vol. 8: Keratin to Modacrylic Fibers. , (1968).</li><li>Bertsch, A., Cello, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+biotechnological+process+for+treatment+and+recycling+poultry+feathers+as+a+feed+ingredient.">A biotechnological process for treatment and recycling poultry feathers as a feed ingredient.</a> Bioresour. Technol. 96 (15), 1703-1708 (2005).</li><li>Grazziotin, A., Pimentel, F. A., de Jong, E. V., Brandelli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nutritional+improvement+of+feather+protein+by+treatment+with+microbial+keratinase.">Nutritional improvement of feather protein by treatment with microbial keratinase.</a> Animal Feed Sci. Technol. 126 (1-2), 135-144 (2006).</li><li>Brandelli, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+keratinases:+useful+enzymes+for+bioprocessing+agroindustrial+wastes+and+beyond.">Bacterial keratinases: useful enzymes for bioprocessing agroindustrial wastes and beyond.</a> Food Bioprocess Technol. 1 (2), 105-116 (2008).</li><li>Gusta, R., Ramnani, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbial+keratinases+and+their+prospective+applications:+an+overview.">Microbial keratinases and their prospective applications: an overview.</a> Appl.Microbiol. Biotechnol. 70 (1), 21-33 (2006).</li><li>Vasileva-Tonkova, E., Gousterova, A., Neshev, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ecologically+safe+method+for+improved+feather+wastes+biodegradation.">Ecologically safe method for improved feather wastes biodegradation.</a> International Biodeterior &amp; Biodegradation. 63 (8), 1008-1012 (2009).</li><li>Lod&#233;n, M., Barel, A. O., Paye, M., Maibach, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrating+Substance.">Hydrating Substance.</a> Handbook of Cosmetic Science and Technology. , 107-119 (2009).</li><li>Teglia, A., Secchi, G., Goddard, E. D., Gruber, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+9:+Proteins+in+Cosmetics.">Chapter 9: Proteins in Cosmetics.</a> Principles of Polymer Science and Technology in Cosmetics and Personal Care. , (1999).</li><li>Magdassi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delivery+systems+in+cosmetics.">Delivery systems in cosmetics.</a> Colloids and Surfaces A: Physicochem. Engin. Aspects. 123-124, 671-679 (1997).</li><li>Dahms, G., Jung, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+producing+a+protein+hydrolysate.">Method for producing a protein hydrolysate.</a> U.S. Patent. , (2014).</li><li>Pons, R., Carrera, I., Erra, P., Kunieda, G., Solans, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+preparation+methods+for+highly+concentrated+water-in-oil+emulsions.">Novel preparation methods for highly concentrated water-in-oil emulsions.</a> Colloids and Surfaces A: Physicochem. Engin. Aspects. 91 (3), 259-266 (1994).</li><li>Mokrejs, P., Hrncirik, J., Janacova, D., Svoboda, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+keratin+waste+of+meat+industry.">Processing of keratin waste of meat industry.</a> Asian J. Chem. 24 (4), 1489-1494 (2012).</li><li>Mokrejs, P., Svoboda, P., Hrncirik, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+poultry+feathers+into+keratin+hydrolysate+through+alkaline-enzymatic+hydrolysis.">Processing poultry feathers into keratin hydrolysate through alkaline-enzymatic hydrolysis.</a> Waste Manage. Res. 29 (3), 260-267 (2011).</li><li>Mokrejs, P., Krejci, O., Svoboda, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Producing+keratin+hydrolysates+from+sheep+wool.">Producing keratin hydrolysates from sheep wool.</a> Orient. J. Chem. 27 (4), 1303-1309 (2011).</li><li>Mokrejs, P., Krejci, O., Svoboda, P., Vasek, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+technological+conditions+for+breakdown+of+waste+sheep+wool.">Modeling technological conditions for breakdown of waste sheep wool.</a> Rasayan J. Chem. 4 (4), 728-735 (2011).</li><li>Polaskova, J., Pavlackova, J., Vltavska, P., Mokrejs, P., Janis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Moisturizing+effect+of+topical+cosmetic+products+applied+to+dry+skin.">Moisturizing effect of topical cosmetic products applied to dry skin.</a> J. Cosmet. Sci. 64 (5), 329-340 (2013).</li><li>Polaskova, J., Pavlackova, J., Egner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+vehicle+on+the+performance+of+active+moisturizing+substances.">Effect of vehicle on the performance of active moisturizing substances.</a> Skin Res. Technol. 21 (4), 403-412 (2015).</li><li>Verdier-S&#233;vrain, S., Bont&#233;, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+hydration:+a+review+on+its+molecular+mechanisms.">Skin hydration: a review on its molecular mechanisms.</a> J. Cosmet. Dermatol. 6 (2), 75-82 (2007).</li><li>Darlenski, R., Sassning, S., Tsankov, N., Fluhr, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+in+vivo+methods+for+investigation+of+the+skin+barrier+physical+properties.">Non-invasive in vivo methods for investigation of the skin barrier physical properties.</a> Eur. J. Pharm. Biopharm. 72 (2), 295-303 (2009).</li><li>Berardesca, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EEMCO+guidance+for+assessment+of+stratum+corneum+hydration:+electrical+methods.">EEMCO guidance for assessment of stratum corneum hydration: electrical methods.</a> Skin Res. Technol. 3 (2), 126-132 (1997).</li><li>Rogiers, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EEMCO+guidance+for+the+assessment+of+transepidermal+water+loss+in+cosmetic+sciences.">EEMCO guidance for the assessment of transepidermal water loss in cosmetic sciences.</a> Skin Pharmacol. Appl. Skin Physiol. 14 (2), 117-128 (2001).</li><li>Ali, S. M., Yosipovitch, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+pH:+from+basic+science+to+basic+skin+care.">Skin pH: from basic science to basic skin care.</a> Acta Derm. Venereol. 93 (3), 261-267 (2013).</li><li>Agache, P., Humbert, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Measuring the Skin. , (2004).</li><li>Council for International Organizations of Medical Sciences. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> International Ethical Guidelines for Biomedical Research Involving Human Subjects. , (2002).</li><li>Ruland, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transdermal+permeability+and+skin+accumulation+of+amino+acids.">Transdermal permeability and skin accumulation of amino acids.</a> Int. J. Pharm. 72 (2), 149-155 (1991).</li><li>Draelos, Z. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+moisturizers.">Therapeutic moisturizers.</a> Dermatol. Clin. 18 (4), 597-607 (2000).</li><li>Courage and Khazaka Electronic GmbH, Technical Charges. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Information and Operating Instructions for the Multi probe Adapter MPA and its Probe. , (2013).</li></ol>

Fördelen med alkaliska-enzymatisk hydrolys är att det kan modifieras enligt framtida tillämpningar av KH. Till exempel i hårvård kosmetika applikationer där en lätt brunaktig färg på en produkt inte är ett hinder, kan en högre temperatur i hydrolys tillämpas leder till en högre avkastning av KH. Dessutom längre handläggningstiden under båda stadier av det tekniska förfarandet väsentligt påverkar den övergripande processen effektivitet – avkastningen av KH stiger till 85%.
<p class="jove_content"...

Slakterier, livsmedelsindustrin och garveriindustrin producerar årligen enorma mängder av solid keratin biprodukter – ull, fjädrar, borst, hovar, klor, horn och liknande. Enligt de senaste statistiska uppgifterna är den totala levande vikten av kycklingar, kalkoner, ankor och andra slaktade fjäderfän i USA 62,5 miljarder pounds per år1; i EU är det cirka 28,7 miljarder pounds per år. Med tanke på att fjädrar upp till 8,5% av totala fjäderfä vikt, producerar USA ensam årligen ca 5,3 miljarder pounds av avfall fjädrar2.
Keratin är ett protein som uppvisar hög kemisk resistens eftersom det är starkt korslänkad med disulfidbryggor som återger dess bearbetning svårt. Att erhålla vattenlösliga produkter kräver klyva tvärbindningar och eventuellt utföra hydrolys av peptidbindningar3. Klyvning av disulfide broar kan fortsätta genom en reaktion av tiol anjon enligt följande mönster4,5:
Sen– + – SbSc– ↔ – Sb– + – SenSc–
Med ett mycket högt pH-nivå visas hydrolys av disulfide broar också, enligt det mönster6
– SS– , OH– → – S- + – SOH
Under milda förhållanden (pH ca 8) rum även sulfitolysis äger enligt följande mönster:
– SS – + HSO3– → – SH + – SSO3–
Det mest ekonomiska sättet att förnedrande keratin är mikrobiell nedbrytning, som kännetecknas av mild reaktion villkor under bearbetning och höga nedbrytningen effektivitet (ca 90%)7,8. Keratinases produceras av vissa bakterier som isolerats från jord och keratin avfall9. Mikrobiella keratinases hydrolyserar styvt och starkt korslänkad keratin strukturer10 och den resulterande KH beredd är rik på lösliga proteiner, utan förlust i essentiella aminosyror som upptäckts i det11.
För att införliva ett protein i kosmetiska preparat (t.ex., emulsioner, krämer och geler), kraven se till att sådana proteiner är lösliga i vatten, de givna system är transparent och att åter aggregering av peptiderna undviks tack vare hydrofoba interaktioner. Därför är en gemensam praxis att tillämpa hydrolysat av proteiner, såsom hydrolyserat kollagen, elastin och keratin. När du lägger hydrolysat i kosmetiska emulsioner, åtgärder för att säkerställa att Hydrolysatet löses först i vatten. I vissa fall är det önskvärt att proteinet (eller Hydrolysatet) är lösliga i alkohol eller andra organiska lösningsmedel12.
KH är normalt med i schampo, balsam, lotion och närande serum för hår, samt mascara, nagellack och eye make-up agenter. KH effekterna förklarat brukar inkludera bildar en skyddande film, jämna ut håret eller nail struktur, ökad plasticitet och utseende av behandlade bildandet, reglera konsistensen av produkter, och att uppmuntra bildandet av skum13 , 14. det har också visat att KH minskar ytspänningen, därav tillskott i kosmetika kan underlätta nedsättning av emulgeringsmedel lagt till att stabilisera krämer. KH begränsa effekterna av irritation som utlöses av rengöringsmedel (tensider) till hud, ögon och hår, vilket minskar eventuella biverkningar av rengöringsmedel på vävnad (t.ex., det uttorkning av huden, hårdhet, och nedsatt barriärfunktion av huden). Den höga buffring kapaciteten av hydrolysat utnyttjas också för att stabilisera pH-värdet i kosmetika; peptider av kortare längd har en större buffert effekt15,16. Även om KHs har etablerat sig som standardkomponenter i hår och Nagel kosmetika samt utnyttjades i produkter för hudvård, studier av återfuktande effekten av KH inte visas i samtida litteratur.
Alkaline-enzymatisk teknik har utvecklats för bearbetning keratin biprodukter till KH och aktiv testning pågår på effekterna av ett antal kosmetiska tillsatsämnen17,18,19,20 , 21 , 22. fördelen med tvåstegs alkaliska-enzymatisk hydrolys med mikrobiell proteaser för kyckling fjädrar uppnår hög effektivitet under mild reaktion villkor och kvaliteten på KH är mycket hög i motsats till hydrolys sysselsatt i starka syror eller alkalier. I den första etappen inkuberas fjädrar vid en högre temperatur i alkalisk miljö, som delvis stör strukturen keratin och sväller fjädrar; efter justering pH, är fjädrarna hydrolyserat med ett proteolytiskt enzym under milda förhållanden i den andra etappen. Dialyzed KH besitter en hög halt av proteiner.
Tillämpningen av den metod som beskrivs här är bearbetning fjäderfä fjädrar till en KH genom alkaliska-enzymatisk hydrolys och testa effekten av återfuktande egenskaper hos KH tillämpas på O/W kosmetiska emulsion. De fuktgivande egenskaperna utreds av instrumental icke-invasiva metoder i vivo. De vanligaste metoderna för att mäta hudens återfuktning och barriär-funktion för SC inkluderar mätning av elektriska egenskaper hos huden (konduktans eller kapacitans). Olika metoder för att undersöka SC återfuktning inkluderar nära infraröd Multispektrala föreställa metod (NIM), kärnmagnetisk resonans, optisk koherenstomografi eller övergående termotransfer23. Barriär-funktion för SC korrelerar till TEWL av SC och mätas det av ventilerade kammare metod, ovädrade chamber metoden och öppen kammare metod24.
Egenskaper av modell formuleringar bestäms med Multi sonden adapter MPA 5 med tre typer av sonder. Den första corneometer CM 825, åtgärder hud återfuktning genom att bedöma förändringar i den elektriska kapaciteten av hudens yta; mäta kondensatorn visar förändringar i kapacitans av hudytan i corneometric enheter. Corneometer ger endast en relativ bedömning av huden återfuktning25. För TEWL används andra sonden, Tewametern TM 300, för att mäta täthetlutningen av vattenavdunstning (i en öppen kammare instrument baserat på Ficks diffusion lag) från huden indirekt av de två par av sensorer (temperatur och relativ fuktighet) som anger mängden vatten som transporteras per ett definierat område och tidsperiod (g/m2/h). Denna metod kan upptäcka även de minsta störningar av hudens barriär funktion26. Huden pH är en indikator av barriären och anti-mikrobiella funktion för SC27. Surhetsgraden i huden manteln mättes genom en (tredje) hud PH 905 sond ansluten till MPA 5 station. Detta specialdesignade sonden består av en platt-topped glaselektrod för fullständig hudkontakt, ansluten till en voltmeter. Systemet mäter potentiella förändringar på grund av aktiviteten av väte katjoner kring det mycket tunna lagret av halvfast former mätt överst i sonden. Förändringar i spänning visas som pH28.
Vi presenterar experiment uppdelad i tre delar: (1) förberedelse av KH från kyckling fjädrar av tvåstegs alkaliska-enzymatisk hydrolys och dess rening genom dialys (ta bort salter och low-molecular fraktioner), (2) förberedelse av kosmetiska beredningar innehållande 2, 4 och 6% KH, och (3) provning egenskaperna för KH genom att mäta hudens återfuktning, TEWL, och huden pH. Tester genomfördes på 10 kvinnor med medelålder 27,2 år och 10 män med en medelålder på 26,2 år. Metoden för att välja frivilliga och själva Testerna genomfördes i enlighet med internationella etiska principer för biomedicinsk forskning utnyttja mänskliga försökspersoner29; alla personer gav sitt samtycke före införandet i studien. Före testning påbörjades, ombads frivilliga fylla i ett frågeformulär på deras hälsostatus. De frivilliga som åtagit sig för att undvika att tillämpa någon kosmetisk produkt till provplatser och omgivande regioner under 24 h före och under testperioden; Dessutom tilläts de endast kort kväll tvättar med rinnande vatten.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material or chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIPEX 100T</td>
			<td>Novozymes</td>
			<td>LJP30020</td>
			<td>Lipex - enzyme produced by submerged fermentation of a genetically-modified microorganism, activity 100 KLU/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Savinase Ultra 16L</td>
			<td>Novozymes</td>
			<td>PXN40001</td>
			<td>Savinase - enzyme produced by submerged fermentation of a genetically-modified microorganism, activity 16 KNPU-S/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hydroxide, KOH</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>302510289</td>
			<td>Potassium hydroxide, KOH, 97,0 %, Mr 56,11</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric acid solution, H3PO4</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>W290017</td>
			<td>Phosphoric acid solution, H3PO4, 85 wt. % concentration in water, Mr 98,00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride physiological solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>52455</td>
			<td>Tablets of BioUltra NaCl physiological solution; 1 tablet in 1000 mL of water yields 0.9 % NaCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide, NaOH</td>
			<td>Penta s.r.o.</td>
			<td>40216</td>
			<td>Sodium hydroxide, NaOH, 97,0 %, Mr 40,00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AmiFarm (Cremor base-A)</td>
			<td>Fagron</td>
			<td>608425</td>
			<td>Hydrophilic oil in water (O/W) cream base; the composition: aqua, paraffin, paraffin liquid, cetearyl alkohol, Laureth 4, sodium hydroxide, carbomer, methylparaben, propylparaben.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IKA EUROSTAR POWER control-visc stirrers</td>
			<td>IKA-labortechnik</td>
			<td>Z404020</td>
			<td>Digital laboratory stirrer, for tasks up to the high viscosity range, 230V, 1/cs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IKA Propeller stirrer, 3-bladed</td>
			<td>IKA-labortechnik</td>
			<td>R 1381</td>
			<td>Propeller stirrer, 3-bladed, stirrer &#216;: 45 mm, shaft &#216;: 8 mm, shaft length: 350 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing closures</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z371017-10EA</td>
			<td>Dialysis tubing closures, red, size 110 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing cellulose membrane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D9402-100FT</td>
			<td>Dialysis tubing cellulose membrane, average flat width 76 mm (3.0 in.)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DOMO Pot with stailess, LCD</td>
			<td>DOMO Elektronic</td>
			<td>DO42325PC</td>
			<td>Preserving boiler stainless steel, 2000 W, 27-L container (diameter 37 cm, height 30 cm), temperature control 30-100 &#176; C, operation LCD display</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hettich zentrifugen Universal 32</td>
			<td>Gemini bv</td>
			<td>2770 GS1R</td>
			<td>Mid bench centrifuge, speed 18000 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LT 3 shaking device</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>6470.0002</td>
			<td>Orbital shaking device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KERN 440-47N</td>
			<td>Kern</td>
			<td>440-47N</td>
			<td>Laboratory balance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KERN 770</td>
			<td>Kern</td>
			<td>770 -N</td>
			<td>Laboratory analytical balance</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VENTICELL 222 - Komfort</td>
			<td>BMT, MMM Group</td>
			<td>C 131749</td>
			<td>Drying oven, temperature control 30-100 &#176; C, air circulation control</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacucell 55 - EVO</td>
			<td>BMT, MMM Group</td>
			<td>B 050328</td>
			<td>Vacuum drying oven, temperature control 30-100 &#176; C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PULVERISETTE 19</td>
			<td>Fritsch</td>
			<td>19.1030.00</td>
			<td>Universal cutting mill, rotor with V-cutting edges and fixed knives</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multi Probe Adapter System MPA 5</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td>10225237</td>
			<td>MPA 5 Station - equipment for measurement hydratation, TEWL and pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Skin pH-meter PH 905 probe</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td></td>
			<td>Probe to specifically measure the pH on the skin surface or the scalp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneometer CM 825 probe</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td></td>
			<td>Probe to determine the hydration level of the skin surface (Stratum corneum).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tewameter TM 300</td>
			<td>Courage &#38; Kazaka Electronic</td>
			<td></td>
			<td>Probe for the assessment of the transepidermal water loss (TEWL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidolph RZR 2020</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>13-225-007-03-1</td>
			<td>Overhead stirrer, mechanical speed setting and stepless transmission; speed range 40-2000 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heidolph mechanical stirrer BR 10</td>
			<td>Heidolph</td>
			<td>Z336688-1EA</td>
			<td>Blade impeller crossed stirrer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fagor FS 12</td>
			<td>Fagor</td>
			<td>BTT-138</td>
			<td>Laboratory refrigerator with freezer space</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WTW bench pH/mV meter</td>
			<td>WTW</td>
			<td>Z313165</td>
			<td>High-performance bench pH and pH/conductivity meters for routine and high precision laboratory measurements in research or quality control laboratories</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Container</td>
			<td>RPC Superfos</td>
			<td></td>
			<td>13-L plastic bucket, diameter 26 cm, height 26 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office 2010</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C+K software</td>
			<td colspan="2">Courage and Khazaka Electronic GmbH</td>
			<td>MPA 5 station operating software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of keratin hydrolysate from chicken feathers and its application in cosmetics

Keratin hydrolysat (KHs) är etablerad standard komponenter i kosmetik för hår. Det är fördelaktigt för hudvård kosmetika att förstå mjukgörande effekterna av KH. Målen i protokollet är: (1) att behandla kyckling fjädrar till KH alkaliska-enzymatisk hydrolys och rena det genom dialys, och (2) för att testa om att lägga till KH i en salva bas (OB) ökar återfuktning av huden och förbättrar hudens barriär av minskande Transepidermal vattenförlust (TEWL). Under alkaliska-enzymatisk hydrolys inkuberas fjädrar först vid en högre temperatur i alkalisk miljö och sedan, under milda förhållanden, hydrolyseras med proteolytiska enzym. Lösningen av KH är dialyseras, vakuum torkas och mals till ett fint pulver. Kosmetiska formuleringar bestående av olja i vatten emulsion (O/W) innehållande 2, tillagas 4 och 6 vikt % av KH (baserat på vikt OB). Testa de fuktgivande egenskaperna hos KH utförs på 10 män och 10 kvinnor med intervall på 1, 2, 3, 4, 24 och 48 h. testad beredningar sprids på avfettade volar underarmen platser. Återfuktningen av hornlagrets (stratum Corneum) bedöms genom att mäta kapacitans i huden, som är en av de mest world-wide används och enkla metoderna. TEWL bygger på att mäta mängden vatten som transporteras per ett definierat område och tid från huden. Båda metoderna är helt icke-invasiv. KH gör för en utmärkt ocklusiv; beroende på tillägg av KH i OB medför det en minskning med 30 procent av TEWL efter applicering. KH fungerar även som ett Fuktighetsbevarande medel, eftersom det binder vatten från de lägre skikten av epidermis till SC; vid optimal KH tillägg i OB inträffar upp till 19% ökning av återfuktning i män och 22% ökning av kvinnor.

KH upprättad enligt proceduren presenteras här (se figur 2) är gul i färgen, lättlösligt i vatten med hög proteinhalt (oorganiska fasta ämnen representerar < 2,0%), 1,0% lösning av KH pH är 5.3 och uppfyller kraven för kosmetiska-grade hydrolysat. Utbytet av KH från 50 g råvara är ca 30%. Molekylvikt distribution av KH bestämdes av SDS-PAGE och visas i figur 3.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-pa...

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics at JoVE.com

Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

Beredning av Keratin hydrolysat från kyckling fjädrar och dess tillämpning i kosmetika

Syftet med protokollet är att förbereda keratin hydrolysat från kyckling fjädrar av alkaliska-enzymatisk hydrolys och testa om att lägga till keratin hydrolysat in en kosmetika salva bas förbättrar hudens barriär (skärper återfuktning och minskande transepidermal vattenförlust). Tester utförs på män och kvinna volontärer.

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Preparation and Delivery of Protein Microcrystals in Lipidic Cubic Phase for Serial Femtosecond Crystallography

Beredning och leverans av protein mikrokristaller i lipida kubiska fasen för Serial Femtosecond Kristallografi

Membrane proteins (MPs) are essential components of cellular membranes and primary drug targets. Rational drug design relies on precise structural ...

Sample Preparation for Mass Spectrometry-based Identification of RNA-binding Regions

Provberedning för Mass Spectrometry-baserade identifiering av RNA-bindande regioner

Noncoding RNAs play important roles in several nuclear processes, including regulating gene expression, chromatin structure, and DNA repair. In most ...

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolation and Respiratory Measurements of Mitochondria from Arabidopsis thaliana

Isolering och respiratoriska mätningar av mitokondrier från Arabidopsis thaliana.

Mitochondria are essential organelles involved in numerous metabolic pathways in plants, most notably the production of adenosine triphosphate (ATP) from ...

Genetic Incorporation of Biosynthesized L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) and Its Application to Protein Conjugation

Genetic Incorporation of Biosynthesized L-dihydroxyphenylalanine DOPA and Its Application to Protein Conjugation

Genetiska införlivandet av biosyntetiseras L-dihydroxifenylalanin (DOPA) och dess tillämpning på Protein konjugation

L-dihydroxyphenylalanine (DOPA) is an amino acid found in the biosynthesis of catecholamines in animals and plants. Because of its particular biochemical ...

Preparation of Chloroplast Sub-compartments from Arabidopsis for the Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics

Beredning av kloroplast sub fack från Arabidopsis för analys av Protein lokalisering av Immunoblotting eller proteomik

Chloroplasts are major components of plant cells. Such plastids fulfill many crucial functions, such as assimilation of carbon, sulfur and nitrogen as ...

Isolation of Lipoprotein Particles from Chicken Egg Yolk for the Study of Bacterial Pathogen Fatty Acid Incorporation into Membrane Phospholipids

Isolering av Lipoproteinpartiklar från kyckling äggula för studiet av bakteriell patogen fettsyra inkorporering i Membranfosfolipider

Staphylococcus aureus and other Gram-positive pathogens incorporate fatty acids from the environment into membrane phospholipids. During infection, the ...

Application of Biolayer Interferometry (BLI) for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription

Application of Biolayer Interferometry BLI for Studying Protein-Protein Interactions in Transcription

Tillämpning av Biolayer interferometri (BLI) för att studera protein-proteininteraktioner vid transkription

A transcription factor&#160;(TF) is a protein that regulates gene expression by interacting with the RNA polymerase, another TF, and/or template DNA. GrgA ...

Preparation of High-Quality Fermented Fish Product

Beredning av högkvalitativ fermenterad fisk produkt

This protocol provides a method for preparation of industrialized fermented fish product with sturgeon (Aquilaria sinensis) meat product. The procedures ...

JUMPn: A Streamlined Application for Protein Co-Expression Clustering and Network Analysis in Proteomics

JUMPn: En strömlinjeformad applikation för protein-samuttryckskluster och nätverksanalys inom proteomik

With recent advances in mass spectrometry-based proteomics technologies, deep profiling of hundreds of proteomes has become increasingly feasible. ...

Exploring Biomolecular Interaction Between the Molecular Chaperone Hsp90 and Its Client Protein Kinase Cdc37 using Field-Effect Biosensing Technology

Utforska biomolekylär interaktion mellan molekylär chaperon Hsp90 och dess klientproteinkinas Cdc37 med hjälp av fälteffektbiosensingteknik

Biomolecular interactions play versatile roles in numerous cellular processes&#160;by regulating and coordinating functionally relevant biological events. ...