JoVE Logo

Sign In

ניתוח מחזור תא

Overview

מחזור התא מתייחס למערך האירועים שדרכם גדל תא, משכפל את הגנום שלו, ובסופו של דבר מתחלק לשני תאי בת בתהליך של מיטוזה. מכיוון שכמות הדנ"א בתא מראה שינויים אופייניים לאורך המחזור, ניתן להשתמש בטכניקות המכונות ניתוח מחזור התאים כדי להפריד אוכלוסיית תאים בהתאם לשלבים השונים של מחזור התאים בהם הם נמצאים, בהתבסס על תוכן ה- DNA המשתנה שלהם.

וידאו זה יכסה את העקרונות מאחורי ניתוח מחזור התא באמצעות מכתים DNA. אנו נסקור פרוטוקול כללי לביצוע הכתמים באמצעות ברומודוקסיורידין (BrdU, אנלוגי תימידין המשולב בגדילי DNA מסונתזים חדשים) ופרופידיום יודיד (PI, צבע DNA שמכתים את כל ה- DNA), ואחריו ניתוח של התאים המוכתמים עם ציטומטריית זרימה. במהלך ציטומטריית הזרימה, השעיית תא בודד של תאים בעלי תווית פלואורסצנטית מועברת דרך מכשיר עם קרן לייזר והפלואורסצנטיות של כל תא נקראת. לאחר מכן נדון כיצד לפרש נתונים ממגרשי פיזור ציטומטריים של זרימה, ולבסוף, נבחן כמה יישומים של טכניקה זו.

Procedure

מחזור התא מתייחס למערך התהליכים התאיים והביוכימיים המתרחשים בתוך תא המוביל לחלוקתו. תא עובר בשלבים שונים של המחזור, והזמן שנדרש להשלמת תהליך זה הוא כמעט קבוע עבור סוג תא. כל סטייה ממשך זמן זה מעידה על חלוקת תאים חריגה. לכן, ניתוח מחזור התא הופך להיות כלי שימושי מאוד עבור ביולוגים המעוניינים ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags

Skip to...

0:00

Overview

0:56

Principle Behind Cell Cycle Analysis

3:33

Generalized Protocol for BrdU and PI Staining

5:43

Flow Cytometric Analysis

7:26

Applications

9:07

Summary

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved