Name: preparation of primary acute lymphoblastic leukemia cells in different cell cycle phases by centrifugal elutriation
Uploaded: 2017-11-10T14:00:00
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이 작품은 NIH CA109821 (TCC)에 의해 지원 되었다. 우리 감사 베크 Coulter 아낌없이 간행물 비용을 충당 하기 위해 자금을 제공 하 고 설정 및 elutriation 시스템의 운영 기술 지원. 우리는 제공 하는 초기 기본 모든 문화에 대 한 박사 프레드 Falkenburg 감사 합니다.

참고:이 프로토콜 기본 B-모든 세포 직경 약 8 µ m (G1 단계)에서 13 µ m (G2/M 단계)에서 범위에 대 한 최적화 되었습니다. 따라서, 특정 원심 분리기 속도 펌프 유량 수 없습니다 다른 크기 범위에 있는 셀에 적용. 그럼에도 불구 하 고, 적절 한 elutriation 매개 변수 침전 비율 방정식을 사용 하 여 추정 될 수 있습니다. 셀 설명된 16 10 6 셀/mL x 1-3의 최적의 밀도 정의 된 혈 ?...

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	<li>Beach, D., Piper, M., Shall, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+newly-initiated+DNA+from+the+early+S+phase+of+the+synchronous+eukaryote,+Physarum+polycephalum.">Isolation of newly-initiated DNA from the early S phase of the synchronous eukaryote, Physarum polycephalum.</a> Exp cell res. 129, 211-221 (1980).</li><li>Sevcikova, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Completion+of+cell+division+is+associated+with+maximum+telomerase+activity+in+naturally+synchronized+cultures+of+the+green+alga+Desmodesmus+quadricauda.">Completion of cell division is associated with maximum telomerase activity in naturally synchronized cultures of the green alga Desmodesmus quadricauda.</a> FEBS letters. 587, 743-748 (2013).</li><li>Rosner, M., Schipany, K., Hengstschlager, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Merging+high-quality+biochemical+fractionation+with+a+refined+flow+cytometry+approach+to+monitor+nucleocytoplasmic+protein+expression+throughout+the+unperturbed+mammalian+cell+cycle.">Merging high-quality biochemical fractionation with a refined flow cytometry approach to monitor nucleocytoplasmic protein expression throughout the unperturbed mammalian cell cycle.</a> Nat protoc. 8, 602-626 (2013).</li><li>Banfalvi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+cell+synchronization.">Overview of cell synchronization.</a> Meth mol biol. 761, 1-23 (2011).</li><li>Langan, T. 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우리 CCE를 사용 하 여 세포 주기의 다른 단계에 기본을 얻기위한 방법 모든 셀을 설명 했습니다. 최적의 조건에서 셀 g 1 단계에의 근본적으로 순수한 인구와 G2/M 단계에 있는 세포의 매우 풍부한 인구 쉽게 얻어질 수 우수한 수율, 그리고 셀 S 단계에서 매우 풍성 하 게 얻어질 수 있다 또한 원하는 경우. 여기에 제시 된 결과 독립적인 문화, 모든-215주 모든 문화 (특히, 모든-5), 그?...

배양된 세포는 일반적으로 비동기적으로 성장 하 고 개별 세포는 세포 주기의 다른 단계에 존재. 일부 생물 자연스럽 게 동기 세포 주기 전시 또는 특정 생리 적인 자극에 의해 동기화 할 수 있습니다. 예를 들면 점액 형 Physarum polycephalum 의 거 대 한 plasmodia 내 핵 매우 동기 패션1와 Desmodesmus quadricauda 는 빛과 어둠을 번갈아 하 여 동기화 할 수 있습니다 녹색 조류의 세포 분 기간2. 이러한 생물 독특한 실험 특성을 제공, 그들은 부적당 하 게 포유류 세포의 복잡 한 모델. 포유류 세포 인구를 인위적으로 동기화 하는 기능 세포 주기 규칙의 우리의 이해 및 세포 주기 검문소의 분자 기준 발전 중심 되었습니다. 일반적인 방법에는 혈 청 부족, 화학 블록 및 릴리스 또는 물리적 특성3,4악용 포함 됩니다. 혈 청의 철수 자주 세포 정지, 입력 하 고 g 1 단계5에 세포 주기 재입국을 촉진 하는 혈 청의 다시 추가 합니다. 화학 억제제 초과 티 미 딘 또는 G1/S 경계에서 세포를 차단 hydroxyurea microtubule 억제제는 일반적으로 M 단계3,4에 셀을 체포 대리인을 포함 합니다. Mitotic 쉐이크-오프 이후 그들은 덜 interphase 셀6보다 부착에 mitotic 세포에 대 한 풍부 하 게 사용할 수 있는 물리적 특성을 악용 하는 방법이 포함 합니다. 그러나, 이러한 모든 기술 잠재적인 단점이 있다. 예를 들어 모든 셀 형식 mitotic 억제제와 사전 동기화 없이 제한 mitotic 쉐이크-오프 후 혈 청 또는 화학 억제제의 존재의 부재와 셀의 수익률에서 생존을 유지 합니다.
어디 셀 점차적으로 감소 크기에 그들은7분할 초기 배아 세포 주기를 제외 하 고 대부분의 세포 주기를 통해 발전 성장 단계를 받아야 더 큰 되 고. 이 속성은 특히 원심 elutriation (CCE) 크기에 서로 다른 세포를 분리 하는 데 사용할 수 있으며 따라서 세포 주기에서8,9단계 기법에 악용 됩니다. CCE, 동안 세포는 2 개의 반대 세력의 영향 아래: 회전의 축에서 셀 드라이브, 원심력과 유체 속도 (특히), 회전 (그림 1)의 축으로 셀 드라이브. Elutriation 챔버에 셀이이 힘 같은지는 평형 위치에 도달 합니다. 평형 위치를 지시 하는 핵심 요소는 셀 직경 및 밀도 있습니다. 버퍼 솔루션의 속도 증가 흐름으로 원심력을 능가 하는 특히 끌기 힘, 새로운 균형을 설립, 챔버 내부 셀의 위치에 변화를 일으키는. 모든 세포는 특히 속도 충분히 증가 하 여 그들의 출구를 홍보를 때까지 더 큰 셀 챔버 내에 유지 하는 반면 먼저 챔버를 떠나 작은 것 들의 결과로 챔버 출구 쪽으로 이동 했다. 특히 속도 연속 증가와 elutriation 챔버 탈출 셀 특정 분수에 수집 될 수 있습니다 고 각 분수 순차적으로 증가 하는 크기의 셀을 포함 합니다. 특히 속도 증분 증가와 elutriation 실시, 대신 원심 분리 속도 감소 하 여 원심력에 순차 감소 동일한 결과 달성할 것 이다. Elutriation 과정 세포 유형과 elutriation 버퍼, 사용 하는 특정 장치에 따라 최적화를 있어야 합니다. 이러한 조건에서 셀의 침전 속도 최고의 Stokes 법칙에 의해 설명: SV = [d2(ρp-ρm) / 18η].ω2r, 어디 SV = 침전 속도; d =; 입자의 직경 Ρp =; 입자의 밀도 Ρm = 버퍼;의 밀도 Η =; 버퍼의 점성 Ω; 회전자의 각 속도 = 그리고 r = 입자의 방사형 위치. 따라서, SV는 셀 직경 및 밀도에 비례 하 고 직경 두 번째 전력 발생, 이후 그것은 일반적으로 세포 주기를 통해 상수는 밀도 보다 더 크게 기여.
CCE의 중요 한 장점은 셀 화학 치료 또는 영양 부족의 가혹한 조건에 적용 되지 않습니다 우수한 수익률 본질적으로 교란된에 복구할 수 있습니다. 요구는 문제의 세포 직경, 적어도 30%의 상당한 증가 받게 세포 주기 통과. 주요 단점은 특수 원심 분리기, 회전자, 및 액세서리의 비용입니다. 그럼에도 불구 하 고, 셀 CCE에 의해 특정 세포 주기 단계에서 풍성 하 게 준비 하는 능력은 크게 포유류 세포9,10에서 효 모 유기 체에서 세포 주기 연구를 촉진 했다. 또한, 최근 발전 암 조직, 이질적인 혼합물에서 특정 종류의 세포 immunotherapy9에 대 한 생산을 다른 세포 유형의 분리 대 건강 한에서 세포의 분리에 사용을 확산 되고있다.
우리의 주요 관심 vinca 알 카 로이드, taxanes 등 에이전트 (Mta)를 대상으로 하는 microtubule의 행동의 메커니즘을 이해 하고있다. 이 약은 유사 분열, 스핀 들 microtubule 함수11,12, 차단에 독점적으로 행동 생각 했다 하지만 최근 증거 그들은 또한 interphase microtubules13,14을 대상 수 있습니다 나왔다. 우리는 최근 주 급성 림프 구성 백혈병 (ALL) 셀 받 다 죽음에 g 1 단계 또는 m에서 vincristine, 세포 주기 의존적인 방식으로15에서 다른 Mta로 치료 하면 단계를 했다. CCE에 의해 다른 세포 주기 단계에 모든 세포를 분리 하는 기능은이 결론에 도달에서 쓸모 있었다. 이 문서에서는, 우리는 기술적인 세부 사항을 설명 하 고 다른 세포 주기 단계에서 모든 셀 기본 준비에 CCE의 응용 프로그램에 대 한 실용적인 팁을 제공.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1542">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">Hanks&#39; balanced salt solution</td>
			<td style="width:108px;">Lonza</td>
			<td style="width:119px;">10-508Q</td>
			<td style="width:780px;">1 L bottle</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">Fetal Plus bovine serum</td>
			<td style="width:108px;">Atlas Biologicals</td>
			<td style="width:119px;">FP-0500-A</td>
			<td>500 mL bottle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">2-napthol-6,8-disulfonic acid dipotassium salt</td>
			<td style="width:108px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">212-672-4</td>
			<td>100 g powder</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">50 mL concial tubes</td>
			<td style="width:108px;">Denville Scientifics</td>
			<td style="width:119px;">C1062-P</td>
			<td>500/case</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">PES Membrane 0.22 &#181;m filter unit</td>
			<td style="width:108px;">Millipore</td>
			<td style="width:119px;">SLGP033RB</td>
			<td>250/pack</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Avanti J-26S XPI w/ Elut. Non-IVD - 50/60 Hz, 200/208/240V</td>
			<td style="width:108px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:119px;">B14544</td>
			<td>centrifuge compatible with elutriation system</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">JE 5.0 elutriator rotor kit</td>
			<td style="width:108px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:119px;">356900</td>
			<td>rotor kit which includes the rotor, T-handle hex wrench, the quick release assembly (w/o the elutriation chamber), anchoring cable, and the strobe assembly</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Chamber, standard, 4-mL, &#34;A&#34;</td>
			<td style="width:108px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:119px;">356943</td>
			<td>standard elutriation chamber&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">Masterflex L/S Easy-Load pump head</td>
			<td style="width:108px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-07518-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">Masterflex L/S Variable-Speed Drive</td>
			<td style="width:108px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-07528-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">Masterflex BioPharm platinum-cured silicone pump tubing, L/S 16</td>
			<td style="width:108px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">EW-96420-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">25 G x 1.5 Precision Glide needle</td>
			<td style="width:108px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">305127</td>
			<td>sterile, single-use needles</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">10 mL Luer-Lok syringe</td>
			<td style="width:108px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309604</td>
			<td>sterile, single-use syringes</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">Vi-Cell XR</td>
			<td style="width:108px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:119px;">383556</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">PI/RNase staining buffer</td>
			<td style="width:108px;">BD Pharmingen</td>
			<td style="width:119px;">550825</td>
			<td>propidium iodide/RNase staining buffer</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">cyclin B1 (GNS1) mouse monoclonal IgG antibody</td>
			<td style="width:108px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">sc-245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">cyclin D1 (DCS-6) mouse monoclonal IgG antibody</td>
			<td style="width:108px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:119px;">sc-20044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">P-Rb (S807/811) (D20B12) XPR rabbit monoclonal antibody</td>
			<td style="width:108px;">Cell Signaling Technology</td>
			<td style="width:119px;">8516s</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:535px;">GAPDH (14C10) rabbit monoclonal antibody</td>
			<td style="width:108px;">Cell Signaling Technology</td>
			<td style="width:119px;">2118s</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">Goat anti-mouse IgG (H+L)-HRP conjugate</td>
			<td style="width:108px;">BioRad</td>
			<td style="width:119px;">170-6516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:535px;">Goat anti-rabbit IgG (H+L)-HRP conjugate</td>
			<td style="width:108px;">BioRad</td>
			<td style="width:119px;">170-6515</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of primary acute lymphoblastic leukemia cells in different cell cycle phases by centrifugal elutriation

셀을 동기화 하는 기능 세포 주기 규칙의 우리의 이해를 발전의 중심이 되었습니다. 일반적인 기술이 포함 혈 부족; 화학 물질 세포에서 다른 세포 주기 단계; 체포 또는 mitotic 쉐이크-오프는 그들의 감소 된 준수 악용의 사용. 그러나, 이러한 모든 단점이 있다. 예를 들어 혈 청 기아 잘 정상 세포에 대 한 하지만 덜 oncogene 활성화 나 종양 억제기 손실로 인해 손상 된 세포 주기 검문소와 종양 세포에 대 한 잘 작동합니다. 마찬가지로, 화학적 치료 세포 인구는 약물 유발 손상 항구 하 고 스트레스 관련 변경 표시 수 있습니다. 이러한 문제를 circumvents는 기술 셀 2 개의 반대 힘, 원심력과 유체 속도, 크기 및 밀도 기준으로 셀의 분리에 어떤 결과를 받게 됩니다 특히 원심 elutriation (CCE) 이다. 때문에 세포 주기를 통해 일반적으로 발전 확대, CCE 다른 세포 주기 단계에 셀을 사용할 수 있습니다. 여기 우리가 기본 급성 림프 구성 백혈병 세포에이 기술을 적용. 최적의 조건에서 우수한 수익률에 g 1 단계 셀의 근본적으로 순수한 인구와 G2/M 단계에 있는 세포의 매우 풍부한 인구를 얻을 수 있습니다. 이러한 세포 인구를 항 암 제 약물의 행동의 공부 세포 주기-종속 메커니즘 및 다른 응용 프로그램에 대 한 적합 합니다. 우리는 또한 어떻게 표준 절차 수 있습니다 수정 최적이 아닌 성능 결과 보여 하 고 기술의 한계를 논의. 응용 프로그램 및 다른 종류의 세포에 기술 탐구 상세한 방법론 제시 용이 해야.

기본 모든 셀 (3-4 × 108) 원심 elutriation 대상이 되었고 프로토콜에 설명 된 대로 두 세척 분수와 20 메인 분수, 수집. 표 1 각 분수 해당 회전자 속도 있는 셀의 총 수 제시는 대표 데이터를 보여 줍니다. 전반적인 항복이 했다 일반적으로 80% 이상. 개별 분수에 셀 직경의 측정 확인 해당 셀 직경 elutriation (그림 2) 진출 증가. 이러한 결과 두 개의 독...

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Preparation of Primary Acute Lymphoblastic Leukemia Cells in Different Cell Cycle Phases by Centrifugal Elutriation

이 프로토콜의 다른 세포 주기 단계에 기본 급성 림프 구성 백혈병 세포를 분리 하는 원심 elutriation 사용을 설명 합니다.

원심 Elutriation에 의해 다른 세포 주기 단계에서 기본 급성 림프 구성 백혈병 세포의 준비

The ability to synchronize cells has been central to advancing our understanding of cell cycle regulation. Common techniques employed include serum ...

The overall goal of this procedure, is to isolate cells into different cell cycle phases using centrifugal elutriation. This method can help answer key questions in the cancer therapeutics field. Because the isolation of cells into separate phases, allows for the interrogation of phase dependent affects of anti-cancer compounds.The main advantage of this technique is that it allows for separation of cells into specific phases using physical properties, rather than chemical perturbations. To start the experiment, install the strobe assembly into the centrifuge such that the power cord is fed out of the chamber through the port on the left. Adjust the strobe flash lamp so that it lines up with the viewing window, when the centrifuge is closed.Secure the assembly in place, by tightening two phillips head screws, at the top of each bracket. And then by tightening the thumb screws at the bottom of the bracket. Plug the power cord into the strobe power port, located at the back of the centrifuge.Next, set the rotors straight down onto the centrifuge drive hub, and firmly secure it with a T handle hex wrench. Then, place the assembly containing the elutriation chamber, counterbalance, rotating seal assembly, and a mounting plate onto the rotor. Push down evenly, placing one hand on the elutriation chamber, and the other hand on the counterbalance, until the bolts on the rotor snap into place.Place the pin, located at one end of the cable, into the hole in the rotating seal assembly. And secure the eyehole, at the other end, with one of the phillips head screws, affixed onto the bracket to connect the anchoring cable. To assemble the flow system, to pump buffer into and out of the elutriation chamber, connect size 16 tubing to a variable speed pump.Insert one free end of this tubing through a port at the top left of the centrifuge chamber, such that it enters into the chamber. Attach a fitting to the free end of this tube, and then insert the fitting into the input hole of the rotating seal assembly. Lastly, insert the output tubing, through a port, to attach it to the transfer tube at the top of the rotating seal assembly.Once the elutriation system is assembled, sterilize it by placing the other free end of the input tubing into a 500 milliliter bottle, filled with 5%bleach. And placing the output tubing into an empty one liter waste bottle. Next, turn on the pump, and allow the bleach to flow all the way through the elutriation system, until it is pumped out into the waste bottle.Now, turn the centrifuge on and allow it to come to the maximum designated speed to release bubbles and back pressure. Once the set speed is reached, stop the centrifuge. After the rotor has stopped completely, open the lid and inspect the chamber for any leaks.Next, in a similar fashion, as previously described, run sterile water through the system for 10 minutes. After flushing with water, replace the water reservoir with a sterile glass bottle filled with 100 milliliters of elutriation buffer. Place the input tubing into this bottle, so that it is at the very bottom.Start the centrifuge, and allow the buffer to flow through the system. After the reservoir bottle is close to empty, and water is fully flushed out of the system, move the output tubing from the waste bottle into the reservoir so that buffer is continuously recycled through the system. Finally, switch on the strobe lamp, and turn the elutriation knob to the extreme left.Now, adjust the viewing window by slowly turning the knob to the right, so that the elutriation chamber is clearly seen, and the strobe light is in sync with the rotor's speed. Prepare the cell sample as described in the text protocol. Add the resuspended cells into the reservoir bottle containing the recycling elutriation buffer.Allow the cells to enter into the system and reach equilibrium within the elutriation chamber. To ensure that all cells are retained in the chamber, take a drop of the eluent on a glass slide, and view it under a microscope. If the sample is devoid of intact cells, it confirms the retention in the chamber.Once all the cells have entered into the chamber, and a distinct boundary at the whitest part of the chamber, containing cells and equilibrium is seen, begin collecting fractions. Move the output tubing to a pre-chilled 50 milliliter conical tube, labeled W1.Collect 50 milliliters of elutriation buffer in this tube and store on ice. Soon after collecting the W1 fraction, lower the centrifuge speed to 821 G.And move the output tube to the conical tube, labeled W2, and collect 50 milliliters more at this speed.Continue changing the speed, and collecting fractions. Make sure there is medium in the reservoir tank, and always store the collected fractions on ice. After all fractions have been collected, stop the centrifuge, and collect 50 milliliters in a conical tube, labeled stop.Pellet cells collected in each of the fractions, and using downstream analysis, such as flow cytometry, or western blotting, as required. A line graph displaying the average diameter of cells in successive elutriation fractions, is shown. Note that the larger the cell diameter, the higher the fraction number at which it elutes.Results from fluorescents activated cells sorting analysis, show the DNA content of cells in each of the 20 elutriation fractions. Early fractions, F1 to F5, contain almost exclusively cells with 2N DNA content representing cells in G1 phase. A mixture of cells in G1 and S phases, was seen in intermediate fractions, F6 to F9.And cells with 4N DNA content, representing cells in G2 to M, were observed starting in F10.Shown here, are western blot results from probing the levels of cell cycle related proteins in pooled fractions of cells in G1 phase, and G2 to M phase. The G2 to M Pool had higher levels of Phospho-Rb and Cyclin B one, compared to the G1 Pool, as expected. Cyclin D one signal was weak, but nonetheless was detectable in the G1 Pool, and undetectable in the G2 to M Pool.Once mastered, this technique can be done in three hours if it is performed properly. While attempting this procedure, it is important to remember to take your time, and make sure that the elutriation system is assembled properly, and that all materials and solutions are prepared. Following this procedure, other methods such as cell cycle analysis, cell viability assays and immunoblots can be performed in order to interrogate how therapeutic compounds may be acting in a cell cycle phase dependent manner.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Comprehensive Protocol to Sample and Process Bone Marrow for Measuring Measurable Residual Disease and Leukemic Stem Cells in Acute Myeloid Leukemia

샘플을 측정 하는 측정 가능한 잔여 질환과 급성 골수성 백혈병에 Leukemic 줄기 세포에 대 한 프로세스 골 포괄적인 프로토콜

Response criteria in acute myeloid leukemia (AML) has recently been re-established, with morphologic examination utilized to determine whether patients ...

연구

암 연구학

Flow Cytometry to Estimate Leukemia Stem Cells in Primary Acute Myeloid Leukemia and in Patient-derived-xenografts, at Diagnosis and Follow Up

Flow Cytometry 최대 백혈병 줄기 세포 주 급성 골수성 백혈병 및 환자-파생-xenografts, 진단에 따라 추정 하

Acute myeloid leukemia (AML) is a heterogeneous, and if not treated, fatal disease. It is the most common cause of leukemia-associated mortality in ...

Generation and Isolation of Cell Cycle-arrested Cells with Complex Karyotypes

생성 및 복잡 한 Karyotypes 셀 세포 주기 검거의 절연

Chromosome mis-segregation leads to aneuploidy, a condition in which cells harbor an imbalanced chromosome number. Several lines of evidence strongly ...

Assessment of the Metabolic Profile of Primary Leukemia Cells

기본 백혈병 세포의 신진 대사 프로필의 평가

The metabolic requirement of cancer cells can negatively influence survival and treatment efficacy. Nowadays, pharmaceutical targeting of metabolic ...

Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

뮤린 조혈 줄기 및 선조 세포 및 MLL-AF9 구동 백혈병에서 미토콘드리아 반응성 산소 종의 유동 세포 분석

We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

위암 환자 유래 이종이식 모델 및 1차 세포주 구축

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

Semi-automatic PD-L1 Characterization and Enumeration of Circulating Tumor Cells from Non-small Cell Lung Cancer Patients by Immunofluorescence

면역형광에 의한 비소세포 폐암 환자의 순환 종양 세포의 반자동 PD-L1 특성화 및 열거

Circulating tumor cells (CTCs) derived from the primary tumor are shed into the bloodstream or lymphatic system. These rare cells (1&#8722;10 cells per mL ...

Cell Cycle-specific Measurement of &#947;H2AX and Apoptosis After Genotoxic Stress by Flow Cytometry

유세포측정에 의한 유독성 응력 후 γH2AX 및 세포자멸의 세포 주기별 측정

The presented method or slightly modified versions have been devised to study specific treatment responses and side effects of various anti-cancer ...

Subcellular Fractionation of Primary Chronic Lymphocytic Leukemia Cells to Monitor Nuclear/Cytoplasmic Protein Trafficking

핵/세포질 단백질 인신 매매를 모니터링하기 위한 1차 만성 림프구성 백혈병 세포의 세포 분열

Nuclear export of macromolecules is often deregulated in cancer cells. Tumor suppressor proteins, such as p53, can be rendered inactive due to aberrant ...

Two Flow Cytometric Approaches of NKG2D Ligand Surface Detection to Distinguish Stem Cells from Bulk Subpopulations in Acute Myeloid Leukemia

급성 골수성 백혈병의 대량 하위 집단으로부터 줄기 세포를 구별하기 위해 NKG2D 리간드 표면 검출의 두 개의 흐름 세포 측정 접근법

Within the same patient, absence of NKG2D ligands (NKG2DL) surface expression was shown to distinguish leukemic subpopulations with stem cell properties ...