Name: live cell fluorescence microscopy to observe essential processes during microbial cell growth
Uploaded: 2017-11-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth at JoVE.com

Vi takker Michael VanNieuwenhze (Indiana University) for gaven af FDAAs bruges i figur 2 og figur 4. Vi takke medlemmerne af de brune lab for feedback under forberedelsen af dette manuskript. Forskning i brun lab på A. tumefaciens cellevækst og division er støttet af National Science Foundation (IOS1557806).

1. vækst af A. tumefaciens stammer
<ol><li>
Dyrkning A. tumefaciens stammer
	<ol>
<li>Bruge en steril træ stick eller pipette tip til podes 1 mL af ATGN vækst medier (Se materialer liste for opskriften) med en enkelt koloni af den ønskede stamme. Bemærk: For A. tumefaciens udtynding stammer, bør ATGN indeholder 1 mM IPTG som en inducer at opretholde biosyntesen af den essentielle protein.</li>
		<li>Vokse A. tumefaciens stammer overnatning i ATGN ved 28 ° C...

Denne protokol indeholder en række procedurer for undersøgelse af A. tumefaciens vildtype, mutant og udtynding stammer. Det er værd at bemærke, at alle de procedurer, der er anført i afsnittet protokol kan let tilpasses til andre bakterielle stammer med yderligere ændringer for at tage højde for vækst medier, temperaturer og vækstrater.
Brugen af mål-specifikke farvestoffer er et værdifuldt redskab til at give en detaljeret karakterisering af cellecyklus begivenheder i bakt...

Progression gennem den bakterielle cellecyklus kræver koordinering af mange processer herunder membran og cellevæg biosyntesen, DNA-replikation og segregation og celledeling. Fuldt ud at forstå kompleksiteten af bakteriel cellebiologi, er det nødvendigt at studere disse væsentlige begivenheder; men dette er en ikke-trivielle opgave, da cellernes levedygtighed er kompromitteret, når centrale elementer i disse veje er mutagenized. Epifluorescensmikroskop mikroskopi kombineret med target-specifikke farvestoffer er en kraftfuld tilgang til sonde disse væsentlige processer i vildtype og mutant bakteriestammer.
Peptidoglycan-specifikke farvestoffer omfatter fluorescerende antibiotika (vancomycin-FL, bocillin-FL) og fluorescerende-d-amino syrer (for eksempel 7-hydroxycoumarin-3-carboxylic syre-3-amino-d-alanin, Holm, 4-chloro-7-nitrobenzofurazan-3-amino-d-alanin , NADA; tetramethylrhodamine-3-amino-d-alanin; TADA). Gram-positive bakterier, har brugen af subletale koncentrationer af fluorescerende antibiotika analoger til sonde lokaliteter af peptidoglycan biosyntesen været en effektiv strategi til at afsløre peptidoglycan indsættelse mønstre1,2, 3,4. Mens fluorescerende vancomycin mærkning er blevet brugt til at få indsigt i peptidoglycan indsættelse mønstre i faste Gram-negative bakterier5, giver den ydre membran generelt en permeabilitet barriere, der forhindrer brug af fluorescerende antibiotika som en sonde til peptidoglycan biosyntese i levende celler. I kontrast, label korte pulser af fluorescerende-d-aminosyrer eller d-aminosyrer med biorthogonal funktionelle grupper kovalent regioner i de seneste peptidoglycan indsættelse i en bred vifte af levende bakterieceller6,7. Mønstre af peptidoglycan indsættelse, der er blevet observeret med syntetisk d-aminosyrer omfatte punktformet og septal (Escherichia coli og Bacillus subtilis), polære og septal (Agrobacterium tumefaciens og Listeria monocytogenes), septal eneste (Staphylococcus aureus) og apikale (Streptomyces venezuelae)6,7. Disse observationer viser at bakterier udviser forskellige mønstre af cellevæggen Biogenese og at brugen af syntetiske d-amino syrer som sonder til at undersøge vækst mønster er en værdifuld strategi i mange bakterier.
Farvestoffer, at mærke bakterielle kromosomer omfatter deoxyribonukleinsyre (DNA) specifikke mindre groove bindemiddel (4,6-diamidino-2-phenylindole; DAPI) og høj affinitet cyanine farvestoffer (grøn og Orange; Se materialer liste). DAPI farvning af faste celler hjælper med tælling af bakterier fra miljøprøver8, hvorimod DAPI farvning af levende celler bruges til at angive bakteriel levedygtighed9. Derimod farvestoffer cyanine som Orange og grøn er ofte beskrevet som membran impermeant "døde" celle pletter optælles ikke-levedygtige celler9. Bemærkelsesværdigt, når disse reagenser, der anvendes til at probe morfologi af den bakterielle nucleoid under cellevækst, DAPI, Orange og grøn blev alle vist sig at være membran permeant og i stand til at mærkning levende celler10. Lever E. coli celler, DAPI farvning af DNA vises diffus på grund af auto-fluorescens fra cytoplasmaet og gentagne engagementer DAPI-farvede celler med ultraviolet (UV) lys perturbs nucleoid struktur10. Farvning E. coli eller B. subtilis med Orange afslører at dette farvestof er membran permeant og giver langvarig fluorescens ved binding til DNA i levende celler uden at påvirke cellevækst, DNA-replikation, eller kromosom adskillelse10 . Disse observationer tyder på at cyanine DNA farvestoffer kan bruges til at overvåge morfologi af Xanthophyta under cellevækst i mange bakterier.
Phospholipid-specific stryl farvestoffer såsom N-(3-triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(diethylamino) phenyl) hexatrienyl) pyridinium dibromide (4-64; Se materialer liste) er kationiske stoffer og knytte fortrinsvis med negativt ladede fosfolipider som cardiolipin og phosphatidylglycerol11. Forskellige mønstre overholdes når 4-64 bruges til at mærke membranen af forskellige bakterier. I Escherichia coli, 4-64 er beriget med polakkerne i bands langs den laterale væg, og i de division websteder for sent pre-divisional celler12. I Bacillus subtilis, 4-64 mærkning giver mulighed for visualisering af lipid spiraler13. I Agrobacterium tumefaciens, 4-64 etiketter den ydre membran og er observeret i en karakteristisk "hestesko" mønster, hvor vækst pole er blottet for mærkning14,15. Disse observationer viser, at disse bakterier udviser heterogene lipid distributioner på grund af tilstedeværelsen af lipid domæner, som bidrager til cellulære asymmetri. Ændringer i 4-64 mærkning mønstre såsom tilstedeværelsen af diffuse mærkning, blebs eller blærer, invaginations eller membran svind kan være informative i kendetegner mutanter, der påvirker distribution eller biosyntesen af lipider.
Ud over farvning celler, er bestemmelse af funktionen af proteiner deltager i væsentlige processer nødvendige. Karakterisering af væsentlige proteiner er teknisk udfordrende, fordi det ikke er muligt at slette væsentlige gener og studere de fænotypiske konsekvenser. Således er alternative tilgange, der nedbryder proteinet opstået. For eksempel kan et vigtigt gen sættes under kontrol af en inducerbar promotor snarere end dens indfødte promotor. Inducerbar initiativtagere er lydhøre over for små molekyler såsom; zink16, isopropylalkohol β-d-1-thiogalactopyranoside (IPTG)17,18,19,20,21, arabinose22, vanillate17,23, og xylose23, således transskription af target gen ophører og protein af interesse er forarmet når Induceren er fjernet. Alternative tilgange til nedbryder væsentlige proteiner af interesse omfatter syntetiske riboswitches24 som hjælp lille molekyle-RNA interaktioner for at hindre transkription af gener, target, CRISPR indblanding25,26 til blok transskription af target gener og inducerbar protein nedbrydning27,28 , som bruger peptid koder for proteiner, mål for nedbrydning af ClpXP protease. Udtynding stammer giver kun en kort tid for karakterisering før cellerne mister levedygtighed, derfor mikroskopisk billeddannelse af celler med tiden under protein nedbrydningen er en kraftfuld tilgang til karakterisering. Faktisk, mikroskopi af levende bakterieceller har aktiveret forskere at få indblik i grundlæggende biologiske processer, herunder mekanismerne af celle figur vedligeholdelse, sekretion og opdelingen29.
A. tumefaciens er en bakteriel plante patogen30 og naturlige genetiske ingeniør31,32. Således mekanismer relateret til patogenicitet, herunder vært-patogen interaktioner33,34,35, sekretion36og vært transformation30,31, 37 er blevet grundigt undersøgt. Udforme strategier, der forhindre A. tumefaciens medieret sygdom eller forbedre plante transformation ved de processer, der er afgørende for A. tumefaciens overlevelse har brug at blive bedre forstået. Brugen af mål-specifikke farvestoffer og den nylige udvikling af en protein nedbrydning strategi for A. tumefaciens18 giver mulighed for at undersøge væsentlige processer.
Her, leveres detaljerede protokoller til mikroskopisk analyse af vildtype, mutant og protein nedbrydning stammer fra A. tumefaciens . De to første protokoller beskrive hvordan du forbereder celler og mærke dem med target-specifikke farvestoffer. Den tredje protokol indeholder trinvise anvisninger for at forberede Agarosen pads (figur 1) og imaging bakterieceller (figur 2, figur 3, figur 4). Disse protokoller kan også være egnet til andre bakterier med yderligere tilpasninger for at tage højde for forskellige medier betingelser, vækstrater, ilt krav og cellestrukturer.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bacterial Strains</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agrobacterium tumefaciens C58</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>33970</td>
			<td>Watson B, Currier TC, Gordon MP, Chilton MD, Nester EW. 1975. Plasmid required for virulence of Agrobacterium tumefaciens. J Bacteriol 123:255-264.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agrobacterium tumefaciens C58&#916;tetRA::mini-Tn7T-GM-Ptac-ctrA &#916;ctrA</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Figueroa-Cuilan W, Daniel JJ, Howell M, Sulaiman A, Brown PJB. 2016. Mini-Tn7 insertion in an artificial attTn7 site enables depeltion of the essentail master regulator CtrA in the phytopathogen Agrobacterium tumefaciens. Appl Environ Microbiol. 82:5015-5025.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Media Components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATGN Minimal Medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To 1 L of sterilized water add 50 ml 20X Buffer, 50 ml 20X Salts, 12.5 ml 40% glucose. For plates, add 15 g Bacto Agar to 1 L of water and autoclave. Cool to 55 &#176;C and add 50 ml 20X Buffer, 50 ml 20X Salts, 12.5 ml 40% glucose.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20X AT Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add 214 g/L KH2PO4 to water and adjust pH to 7.0 with sodium hydroxide. Autoclave.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP359</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>P288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20X AT Salts</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add 40 g/L (NH4)2SO4, 3.2 g/L MgSO4&#8226;7H2O, 0.2 g/L CaCl2&#8226;2H2O, and 0.024 g/L MnSO4&#8226;H2O to water. Autoclave.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(NH4)2SO4</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>A701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP213</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#8226;2H2O</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnSO4&#8226;H2O</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>M114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D16</td>
			<td>Prepare 40% stock in water. Filter sterilize.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacto Agar</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP1423</td>
			<td>Add 15 g to 1 L of water when preparing plates.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optional Media Additives</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kanamycin</td>
			<td>GoldBio</td>
			<td>K-120</td>
			<td>Prepare as a 100 mg/ml stock solution in water and filter sterilize. Use at final concentration of 200 &#181;g/ml.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG</td>
			<td>GoldBio</td>
			<td>I2481C5</td>
			<td>Prepare as a 1 M stock solution in water and filter sterilize. Use at final concentration of 1 mM as needed for induction.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopy Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-550D</td>
			<td>25 X 75 X 1.0 mm. Clean with Sparkle glass cleaner.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Cover Glass</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-541-B</td>
			<td>22 X 22 mm. No. 1.5. Clean with Sparkle glass cleaner.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sparkle Glass Cleaner</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>203261385</td>
			<td>Ammonia and alcohol free.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra Pure Agarose</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16500-100</td>
			<td>Add to water, PBS, or media to a final concentration of 1 - 1.5%. Melt in microwave and place on 70 C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP399500</td>
			<td>10X solution to be diluted to 1X with sterile water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-999</td>
			<td>Laboratory film used as gasket in agarose pad preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VALAP</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add equal weights of lanolin, parafin wax, and petroleum jelly to a conical tube. Heat tube in 70 &#176;C dry, bead or water bath to melt and mix. Apply VALAP while still molten.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lanolin Butter</td>
			<td>SAAQIN</td>
			<td>SQ-LAB-R1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petroleum Jelly</td>
			<td>Target Corp.</td>
			<td>06-17644</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Wax</td>
			<td>Crafty Candles</td>
			<td>263012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Target-specific dyes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP231-1</td>
			<td>Use to dilute stock solutions of dyes as needed.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FDAAs (NADA, HADA,TADA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>FDAAs can be synthesized or acquired through agreement with Mike VanNieuwenhze (Indiana University). Prepare 100 mM stock solution in DMSO. Use at a final concentration of 5 mM.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>62247</td>
			<td>Prepare 1 mg/ml stock solution in DMSO. Use at final concentration of 1 &#181;g/ml.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYTOX Orange Nucleic Acid Stain</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S11368</td>
			<td>Stock concentration is 5 mM in DMSO. Use at final concentration of 5 &#181;M.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FM4-64</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>T3166</td>
			<td>Prepare 8 mg/ml stock solution in DMSO. Use at final concentration of 8 &#181;g/ml.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry bath</td>
			<td>Sheldon Manufacturing, Inc.</td>
			<td>52120-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metallic thermal beads</td>
			<td>Lab Armor</td>
			<td>42370-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope equipped with an EMCDD camera</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Nikon Eclipse TiE equipped with a QImaging Rolera em-c2 1K electron-multiplying charge-coupled-device (EMCCD) camera is used in this work.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

live cell fluorescence microscopy to observe essential processes during microbial cell growth

Core cellulære processer såsom DNA-replikation og segregation, proteinsyntese, cellevæg biosyntese og celledeling stole på funktionen af proteiner, som er afgørende for bakteriel overlevelse. En række mål-specifikke farvestoffer kan bruges som sonder til bedre forstår disse processer. Farvning med lipofile farvestoffer giver mulighed for observation af membran struktur, visualisering af lipid microdomains og påvisning af membran blebs. Brug af fluorescerende-d-amino syre (FDAAs) at sonde lokaliteter af peptidoglycan biosyntesen kan oplyse potentielle defekter i cellevæggen Biogenese eller celle vækst mønster. Endelig kan nukleinsyre pletter indikere mulige fejl i DNA replikation eller kromosom adskillelse. Cyanine DNA pletter etiketten lever celler og er velegnet til time-lapse mikroskopi at aktivere realtids observationer af nucleoid morfologi under cellevækst. Protokoller for celle mærkning kan påføres protein nedbrydning mutanter til at identificere fejl i membran struktur, cellevæg Biogenese eller kromosom adskillelse. Time-lapse mikroskopi kan desuden bruges til at overvåge morfologiske ændringer som et vigtigt protein er fjernet og kan give yderligere indsigt i protein funktion. For eksempel, resulterer nedbrydningen af væsentlige celledeling proteiner i filamentation eller forgrening, der henviser til, at nedbrydningen af celle vækst proteiner kan forårsage celler bliver kortere eller rundere. Protokoller for cellevækst, target-specifik mærkning og time-lapse mikroskopi er her fastsat bakteriel plante-patogen Agrobacterium tumefaciens. Sammen, target-specifikke farvestoffer og time-lapse mikroskopi aktiverer karakterisering af væsentlige processer i A. tumefaciens. Endelig, de protokoller findes kan let modificeret til at probe væsentlige processer i andre bakterier.

Target-specifik mærkning af vildtype A. tumefaciens celler For at illustrere at celle morfologi er ikke påvirket af wash skridt eller behandling med 1% DMSO (som bruges til at fortynde de fluorescerende farvestoffer), celler blev afbildet direkte fra kulturen (figur 2A, længst til venstre panel), efter vask celler ved centrifugering som beskrevet i punkt 1.2 (figur 2A</str...

Watch this Scientific Journal Video about Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth at JoVE.com

Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth

Forstå funktionen af væsentlige processer i bakterier udfordrende. Fluorescens mikroskopi med target-specifikke farvestoffer kan give vigtig indsigt i mikrobiel celle vækst og celle cyklus progression. Her, bruges Agrobacterium tumefaciens som en model bakterie fremhæve metoder for levende celle imaging til karakterisering af væsentlige processer.

Live celle Fluorescens mikroskopi for at observere væsentlige processer under mikrobielle cellevækst

Core cellular processes such as DNA replication and segregation, protein synthesis, cell wall biosynthesis, and cell division rely on the function of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy (FSM)

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy FSM

In this protocol we describe the use of Fluorescent Speckle Microscopy (FSM) to capture high-resolution images of actin dynamics in PtK1 cells. A unique ...

Cell Electrofusion Visualized with Fluorescence Microscopy

Cell electrofusion is a safe, non-viral and non-chemical method that can be used for preparing hybrid cells for human therapy. Electrofusion involves ...

Fluorescence-based Measurement of Store-operated Calcium Entry in Live Cells: from Cultured Cancer Cell to Skeletal Muscle Fiber

Fluorescens-baserede Måling af Store betjente Calcium indtastning i levende celler: fra kulturperler kræftcellen til at Skeletmuskel Fiber

Store operated Ca2+ entry (SOCE), earlier termed capacitative Ca2+ entry, is a tightly regulated mechanism for influx of extracellular Ca2+ into cells to ...

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

Kvantitative levende celler fluorescens-mikroskopi Analyse af Fission Yeast

Several microscopy techniques are available today that can detect a specific protein within the cell. During the last decade live cell imaging using ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Levende Imaging af Apoptotisk Cell Clearance under<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryogenese

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Visualizing Stromule Frequency with Fluorescence Microscopy

Visualisere Stromule Frekvens med Fluorescence Microscopy

Stromules, or "stroma-filled tubules", are narrow, tubular extensions from the surface of the chloroplast that are universally observed in plant cells but ...

Examination of Mitotic and Meiotic Fission Yeast Nuclear Dynamics by Fluorescence Live-cell Microscopy

Undersøgelse af mitotisk og meiotisk fission gær nuklear dynamik ved fluorescens levende celle mikroskopi

Live-cell imaging is a microscopy technique used to examine cell and protein dynamics in living cells. This imaging method is not toxic, generally does ...

Live-Cell Imaging of the Life Cycle of Bacterial Predator Bdellovibrio bacteriovorus using Time-Lapse Fluorescence Microscopy

Live-Cell Imaging of the Life Cycle of Bacterial Predator Bdellovibrio bacteriovorus using Time-Lapse Fluorescence Microscopy

Live-Cell Imaging af livscyklus bakteriel Predator Bdellovibrio bacteriovorus ved hjælp af Time-Lapse Fluorescens mikroskopi

Bdellovibrio bacteriovorus is a small gram-negative, obligate predatory bacterium that kills other gram-negative bacteria, including harmful pathogens. ...

Quantitative Analysis of Aspergillus nidulans Growth Rate using Live Microscopy and Open-Source Software

Quantitative Analysis of Aspergillus nidulans Growth Rate using Live Microscopy and Open-Source Software

Kvantitativ analyse af Aspergillus nidulans vækstrate ved hjælp af Live Microscopy og Open Source Software

It is well established that colony growth of filamentous fungi, mostly dependent on changes in hyphae/mycelia apical growth rate, is macroscopically ...

Measuring Cell-Edge Protrusion Dynamics during Spreading using Live-Cell Microscopy

Måling af cellekantfremspringsdynamik under spredning ved hjælp af levende cellemikroskopi

The development and homeostasis of multicellular organisms rely on coordinated regulation of cell migration. Cell migration is an essential event in the ...