Name: live cell fluorescence microscopy to observe essential processes during microbial cell growth
Uploaded: 2017-11-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth at JoVE.com

Vi takker Michael VanNieuwenhze (Indiana University) for gave FDAAs brukes i figur 2 og Figur 4. Vi takker medlemmer av brun laboratoriet for tilbakemelding under utarbeidelsen av dette manuskriptet. Forskning i brun lab på A. tumefaciens cellevekst og deling er støttet av National Science Foundation (IOS1557806).

1. vekst av A. tumefaciens stammer
<ol><li>
Dyrking A. tumefaciens stammer
	<ol>
<li>Bruk en steril tre pinne eller Pipetter tips for å vaksinere 1 mL av ATGN vekst medier (se materialer liste for oppskriften) med en enkelt koloni av ønsket belastningen. Merk: For A. tumefaciens uttømming stammer, ATGN bør inneholde 1 mM IPTG som en induser å opprettholde biosyntesen av viktige protein.</li>
		<li>Vokse A. tumefaciens stammene overnatter i ATGN på 28 ° C me...

Denne protokollen inneholder en rekke prosedyrer for etterforskningen av A. tumefaciens wildtype mutant og uttømming stammer. Det er verdt å merke seg at alle prosedyrene i delen protokollen kan lett tilpasset andre bakterielle stammer med ytterligere modifiseringer å ta hensyn til vekst medier, temperaturer og vekst.
Bruk av mål-spesifikke fargestoffer er et verdifullt verktøy for å gi en detaljert karakterisering av cellen syklus hendelser i bakterielle celler. Her Peptidoglyk...

Fremdrift gjennom bakteriell cellen syklus krever koordinering av mange prosesser inkludert membran og cellevegg biosyntesen, utryddelse og segregering og celledeling. Å fullt ut forstå kompleksiteten av bakteriell cellebiologi, er det nødvendig å studere disse viktige hendelser; men er dette en ikke-triviell oppgave siden cellen levedyktighet er svekket når nøkkelkomponenter av disse er mutagenized. Epifluorescence mikroskopi kombinert med mål-spesifikke fargestoffer er en kraftig tilnærming å undersøke disse viktige prosesser i wildtype og mutant bakteriell stammer.
Peptidoglykan-spesifikke fargestoffer inkluderer fluorescerende antibiotika (vancomycin-FL, bocillin-FL) og fluorescerende-d-aminosyrer (for eksempel 7-hydroxycoumarin-3-karbonoxylsyre syre-3-amino-d-alanin, HADA, 4-chloro-7-nitrobenzofurazan-3-amino-d-alanin , NADA; tetramethylrhodamine-3-amino-d-alanin; TADA). I Gram-positive bakteriene, har bruk av sublethal konsentrasjoner av fluorescerende antibiotika analogs å undersøke områder av Peptidoglykan biosyntesen vært en effektiv strategi å avsløre Peptidoglykan innsetting mønstre1,2, 3,4. Mens fluorescerende vancomycin merking er brukt til å få innsikt i Peptidoglykan innsetting mønstre i fast Gram-negative bakterier5, gir den ytre membranen generelt en permeabilitet barriere som forhindrer bruk av lysrør antibiotika som en sonde for Peptidoglykan biosyntesen i levende celler. Derimot merke korte pulser fluorescerende-d-aminosyrer eller d-aminosyrer med biorthogonal funksjonelle grupper covalently regioner i siste Peptidoglykan innsetting i et bredt spekter av levende bakterieceller6,7. Mønstre av Peptidoglykan innsetting som har blitt observert med syntetisk d-aminosyrer inkluderer vises punctate og septal (Escherichia coli og Bacillus subtilis), polar og septal (Agrobacterium tumefaciens og Listeria monocytogenes), septal eneste (Staphylococcus aureus) og apikale (Streptomyces venezuelae)6,7. Disse observasjonene indikerer at bakterier ha mangfoldig mønstre av cellen vegg biogenesis og at bruken av syntetiske d-aminosyrer som sonder for å undersøke vekst mønster er en verdifull strategi i mange bakterier.
Fargestoffer som etiketten bakteriell kromosomene inkluderer deoksyribonukleinsyre (DNA) bestemt mindre groove dokumentordneren (4,6-diamidino-2-phenylindole; DAPI) og høy affinitet cyanine fargestoffer (grønn og oransje; se materialer liste). DAPI farging av fast celler hjelper opplisting av bakterier fra miljøprøver8, mens DAPI farging av levende celler brukes til å angi bakteriell levedyktighet9. Derimot fargestoffer cyanine som oransje og grønn er ofte beskrevet som membran impermeant "død" celle flekker liste opp ikke-levedyktige celler9. Bemerkelsesverdig, når skal disse reagensene brukes å undersøke morfologi av bakteriell nucleoid under cellevekst, DAPI, oransje og grønn var alle vist seg membran permeant og i stand til merking lever celler10. Lever E. coli celler, DAPI farging av DNA vises diffus på grunn av auto-fluorescens cytoplasma og gjentatte eksponeringer av DAPI-farget celler til ultrafiolett (UV) lys perturbs nucleoid struktur10. Farging E. coli eller B. subtilis med oransje avslører at dette fargestoffet membran permeant og gir langvarig fluorescens ved binding til DNA i lever celler uten at cellevekst, utryddelse eller kromosom raseskille10 . Disse observasjonene foreslår at cyanine DNA fargestoffer kan brukes til å overvåke morfologi av nucleoids under cellevekst i mange bakterier.
Phospholipid-Specific stryl fargestoffer som N-(3-triethylammoniumpropyl)-4-(6-(4-(diethylamino) fenyl) hexatrienyl) pyridinium dibromide (4-64, se materialer liste) er kationisk forbindelser og knytte fortrinnsvis negativt ladet fosfolipider som cardiolipin og phosphatidylglycerol11. Ulike mønstre er observert når 4-64 brukes til å merke membran av forskjellige bakterier. Escherichia coli, 4-64 er beriket i polene, i band langs den laterale veggen, og i divisjon områder av pre-divisional celler12. I Bacillus subtiliskan 4-64 merking visualisering av lipid spiraler13. I Agrobacterium tumefaciens, 4-64 etiketter den ytre membranen og er observert i et karakteristisk "hestesko" mønster der vekst pole er blottet for merking14,15. Disse observasjonene indikerer at disse bakteriene ha heterogene lipid distribusjoner på grunn av tilstedeværelsen av lipid domener som bidrar til mobilnettet asymmetri. Endringer i 4-64 merking mønstre som tilstedeværelse av diffus merking, blebs eller blemmer, invaginations eller membran krymping kan være informativ karakteriserer mutanter som påvirker distribusjon eller biosyntesen av lipider.
Utover flekker celler, er bestemme funksjonen av protein delta i viktige prosesser nødvendig. Karakterisering av essensielle proteiner er teknisk utfordrende fordi det ikke er mulig å slette viktige gener og studere fenotypiske konsekvensene. Dermed har alternative tilnærminger som tømmer protein dukket opp. For eksempel kan en viktig genet settes under kontroll av en induserbart arrangøren i stedet for sitt opprinnelige promoter. Induserbart arrangører er mottakelig for små molekyler som; sink16, isopropyl β-d-1-thiogalactopyranoside (IPTG)17,18,19,20,21, arabinose22, vanillate17,23, xylose23, dermed transkripsjon av målet genet opphører og protein av interesse er oppbrukt når induser fjernes. Alternative tilnærminger for å tappe essensielle proteiner av interesse inkluderer syntetisk riboswitches24 som bruker små molekyl-RNA interaksjoner for å hindre transkripsjon av målet gener, CRISPR forstyrrelser25,26 til blokk transkripsjon av målet gener og induserbart protein fornedrelse27,28 som bruker peptid tags målet proteiner til fornedrelse som ClpXP protease. Uttømming stammer gir bare en kort tid for karakterisering før cellene mister levedyktighet, derfor mikroskopiske imaging celler over tid under protein uttømming er en kraftig metode for karakterisering. Faktisk har mikroskopi levende bakterielle celler aktivert forskere å få innsikt i grunnleggende biologiske prosesser, herunder mekanismer for cellen figur vedlikehold og sekresjon compartmentalization29.
A. tumefaciens er en bakteriell anlegget patogen30 og naturlige genetiske ingeniør31,32. Dermed mekanismer knyttet til virusets, inkludert vert-patogen interaksjoner33,34,35, sekresjon36og vert transformasjon30,31, 37 har blitt grundig undersøkt. Utforme strategier som forhindre A. tumefaciens mediert sykdom eller forbedre anlegget transformasjon, må prosessene avgjørende for A. tumefaciens overlevelse bli bedre forstått. Bruk av mål-spesifikke fargestoffer og den siste utviklingen av en protein uttømming strategi for A. tumefaciens18 gir et middel til å undersøke viktige prosesser.
Her tilbys detaljert protokoller for microscopic analyse av wildtype, mutant og protein uttømming stammer av A. tumefaciens . De første to protokollene beskriver hvordan å forberede celler og merke dem med mål-spesifikke fargestoffer. Tredje protokollen gir trinnvise instruksjoner om forbereder agarose pads (figur 1) og tenkelig bakterieceller (figur 2, Figur 3, Figur 4). Disse protokollene kan også være egnet for andre bakterier med ytterligere tilpasninger å ta hensyn til ulike medier forhold, vekst, oksygen krav og celle strukturer.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bacterial Strains</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agrobacterium tumefaciens C58</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>33970</td>
			<td>Watson B, Currier TC, Gordon MP, Chilton MD, Nester EW. 1975. Plasmid required for virulence of Agrobacterium tumefaciens. J Bacteriol 123:255-264.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agrobacterium tumefaciens C58&#916;tetRA::mini-Tn7T-GM-Ptac-ctrA &#916;ctrA</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Figueroa-Cuilan W, Daniel JJ, Howell M, Sulaiman A, Brown PJB. 2016. Mini-Tn7 insertion in an artificial attTn7 site enables depeltion of the essentail master regulator CtrA in the phytopathogen Agrobacterium tumefaciens. Appl Environ Microbiol. 82:5015-5025.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Media Components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATGN Minimal Medium</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>To 1 L of sterilized water add 50 ml 20X Buffer, 50 ml 20X Salts, 12.5 ml 40% glucose. For plates, add 15 g Bacto Agar to 1 L of water and autoclave. Cool to 55 &#176;C and add 50 ml 20X Buffer, 50 ml 20X Salts, 12.5 ml 40% glucose.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20X AT Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add 214 g/L KH2PO4 to water and adjust pH to 7.0 with sodium hydroxide. Autoclave.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP359</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>P288</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20X AT Salts</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add 40 g/L (NH4)2SO4, 3.2 g/L MgSO4&#8226;7H2O, 0.2 g/L CaCl2&#8226;2H2O, and 0.024 g/L MnSO4&#8226;H2O to water. Autoclave.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>(NH4)2SO4</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>A701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP213</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#8226;2H2O</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP510</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnSO4&#8226;H2O</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>M114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>D16</td>
			<td>Prepare 40% stock in water. Filter sterilize.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bacto Agar</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP1423</td>
			<td>Add 15 g to 1 L of water when preparing plates.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optional Media Additives</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kanamycin</td>
			<td>GoldBio</td>
			<td>K-120</td>
			<td>Prepare as a 100 mg/ml stock solution in water and filter sterilize. Use at final concentration of 200 &#181;g/ml.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG</td>
			<td>GoldBio</td>
			<td>I2481C5</td>
			<td>Prepare as a 1 M stock solution in water and filter sterilize. Use at final concentration of 1 mM as needed for induction.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopy Materials</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-550D</td>
			<td>25 X 75 X 1.0 mm. Clean with Sparkle glass cleaner.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope Cover Glass</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-541-B</td>
			<td>22 X 22 mm. No. 1.5. Clean with Sparkle glass cleaner.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sparkle Glass Cleaner</td>
			<td>Home Depot</td>
			<td>203261385</td>
			<td>Ammonia and alcohol free.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra Pure Agarose</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>16500-100</td>
			<td>Add to water, PBS, or media to a final concentration of 1 - 1.5%. Melt in microwave and place on 70 C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP399500</td>
			<td>10X solution to be diluted to 1X with sterile water.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM-999</td>
			<td>Laboratory film used as gasket in agarose pad preparation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VALAP</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add equal weights of lanolin, parafin wax, and petroleum jelly to a conical tube. Heat tube in 70 &#176;C dry, bead or water bath to melt and mix. Apply VALAP while still molten.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lanolin Butter</td>
			<td>SAAQIN</td>
			<td>SQ-LAB-R1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petroleum Jelly</td>
			<td>Target Corp.</td>
			<td>06-17644</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin Wax</td>
			<td>Crafty Candles</td>
			<td>263012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Target-specific dyes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Fisher BioReagents</td>
			<td>BP231-1</td>
			<td>Use to dilute stock solutions of dyes as needed.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FDAAs (NADA, HADA,TADA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>FDAAs can be synthesized or acquired through agreement with Mike VanNieuwenhze (Indiana University). Prepare 100 mM stock solution in DMSO. Use at a final concentration of 5 mM.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>62247</td>
			<td>Prepare 1 mg/ml stock solution in DMSO. Use at final concentration of 1 &#181;g/ml.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYTOX Orange Nucleic Acid Stain</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S11368</td>
			<td>Stock concentration is 5 mM in DMSO. Use at final concentration of 5 &#181;M.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FM4-64</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>T3166</td>
			<td>Prepare 8 mg/ml stock solution in DMSO. Use at final concentration of 8 &#181;g/ml.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry bath</td>
			<td>Sheldon Manufacturing, Inc.</td>
			<td>52120-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metallic thermal beads</td>
			<td>Lab Armor</td>
			<td>42370-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epifluorescence microscope equipped with an EMCDD camera</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Nikon Eclipse TiE equipped with a QImaging Rolera em-c2 1K electron-multiplying charge-coupled-device (EMCCD) camera is used in this work.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

live cell fluorescence microscopy to observe essential processes during microbial cell growth

Kjernen cellulære prosesser som utryddelse og segregering, proteinsyntese, cellevegg biosyntesen og celledeling stole på funksjon av proteiner som er essensielle for bakteriell overlevelse. En rekke mål-spesifikke fargestoffer kan brukes som sonder bedre forstår disse prosessene. Flekker med lipofile fargestoffer kan observasjon av membran struktur, visualisering av lipid microdomains og oppdagelsen av membran blebs. Bruk av fluorescerende-d-aminosyrer (FDAAs) å undersøke stedene i Peptidoglykan biosyntesen kan angi defekter i cellen vegg biogenesis eller celle vekst mønster. Endelig kan nukleinsyre flekker indikere mulige feil i DNA replikering eller kromosom raseskille. Cyanine DNA flekker etiketten levende celler og er egnet for time-lapse mikroskopi aktivering av real-time observasjoner av nucleoid morfologi under cellevekst. Protokoller for cellen merking kan brukes på protein uttømming mutanter å identifisere feil i membranen struktur, cellevegg biogenesis eller kromosom raseskille. Videre kan time-lapse mikroskopi brukes til å overvåke morfologiske endringer som en viktig protein er fjernet og kan gi ytterligere innsikt i protein-funksjonen. For eksempel fører uttømming av viktige celledeling proteiner til filamentation eller forgrening, mens uttømming av celle vekst proteiner kan føre til at celler blir kortere eller rundere. Her tilbys protokoller for cellevekst, mål-spesifikke merking og time-lapse mikroskopi for bakteriell anlegget patogen Agrobacterium tumefaciens. Sammen, mål-spesifikke fargestoffer og time-lapse mikroskopi aktiverer karakteristikk av viktige prosesser i A. tumefaciens. Til slutt, protokollene gitt kan lett endres for å undersøke viktige prosesser i andre bakterier.

Mål-spesifikke merking av wildtype A. tumefaciens celler For å illustrere at celle morfologi er ikke påvirket av vask trinn eller behandling med 1% DMSO (som brukes til å fortynne de fluorescerende fargestoffer), celler ble fotografert direkte fra kultur (figur 2A, venstre panel), etter vask cellene av sentrifugering som beskrevet i 1.2 (figur 2A, venstre) eller ...

Watch this Scientific Journal Video about Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth at JoVE.com

Live Cell Fluorescence Microscopy to Observe Essential Processes During Microbial Cell Growth

Forstå funksjonen av viktige prosesser i bakterier er utfordrende. Fluorescens mikroskopi med mål-spesifikke fargestoffer kan gi viktig innsikt i mikrobiell celle vekst og celle syklus progresjon. Her brukes Agrobacterium tumefaciens som en modell bakterie for å markere metoder for levende celle bildebehandling for kategorisering av viktige prosesser.

Live celle fluorescens mikroskopi å observere viktige prosesser under mikrobiell cellevekst

Core cellular processes such as DNA replication and segregation, protein synthesis, cell wall biosynthesis, and cell division rely on the function of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy (FSM)

Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy FSM

In this protocol we describe the use of Fluorescent Speckle Microscopy (FSM) to capture high-resolution images of actin dynamics in PtK1 cells. A unique ...

Cell Electrofusion Visualized with Fluorescence Microscopy

Cell electrofusion is a safe, non-viral and non-chemical method that can be used for preparing hybrid cells for human therapy. Electrofusion involves ...

Fluorescence-based Measurement of Store-operated Calcium Entry in Live Cells: from Cultured Cancer Cell to Skeletal Muscle Fiber

Fluorescens-basert Måling av Store-opererte Calcium Entry i levende celler: fra Helstøpt Cancer Cell til Skeletal Muscle Fiber

Store operated Ca2+ entry (SOCE), earlier termed capacitative Ca2+ entry, is a tightly regulated mechanism for influx of extracellular Ca2+ into cells to ...

Quantitative Live Cell Fluorescence-microscopy Analysis of Fission Yeast

Kvantitative Live-Cell fluorescens-mikroskopi Analyse av Fission gjær

Several microscopy techniques are available today that can detect a specific protein within the cell. During the last decade live cell imaging using ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Leve Imaging av apoptotiske Cell Lagersalg under<em&gt; Drosophila</em&gt; Embryogenese

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Visualizing Stromule Frequency with Fluorescence Microscopy

Visualisering Stromule Frequency med Fluorescensmikroskopi

Stromules, or "stroma-filled tubules", are narrow, tubular extensions from the surface of the chloroplast that are universally observed in plant cells but ...

Examination of Mitotic and Meiotic Fission Yeast Nuclear Dynamics by Fluorescence Live-cell Microscopy

Undersøkelse av mitotisk og Meiotic fisjon gjær Nuclear Dynamics av fluorescens Live-Cell mikroskopi

Live-cell imaging is a microscopy technique used to examine cell and protein dynamics in living cells. This imaging method is not toxic, generally does ...

Live-Cell Imaging of the Life Cycle of Bacterial Predator Bdellovibrio bacteriovorus using Time-Lapse Fluorescence Microscopy

Live-Cell Imaging of the Life Cycle of Bacterial Predator Bdellovibrio bacteriovorus using Time-Lapse Fluorescence Microscopy

Live-Cell Imaging av livssyklusen til bakteriell Predator Bdellovibrio bakteriovorus ved hjelp av Time-Lapse Fluorescence Mikroskopi

Bdellovibrio bacteriovorus is a small gram-negative, obligate predatory bacterium that kills other gram-negative bacteria, including harmful pathogens. ...

Quantitative Analysis of Aspergillus nidulans Growth Rate using Live Microscopy and Open-Source Software

Quantitative Analysis of Aspergillus nidulans Growth Rate using Live Microscopy and Open-Source Software

Kvantitativ analyse av Aspergillus nidulans vekstrate ved hjelp av live mikroskopi og programvare med åpen kildekode

It is well established that colony growth of filamentous fungi, mostly dependent on changes in hyphae/mycelia apical growth rate, is macroscopically ...

Measuring Cell-Edge Protrusion Dynamics during Spreading using Live-Cell Microscopy

Måling av cellekantprotruderingsdynamikk under spredning ved hjelp av live-cellemikroskopi

The development and homeostasis of multicellular organisms rely on coordinated regulation of cell migration. Cell migration is an essential event in the ...