Otimizando a incorporação genética do produto químico sondas em GPCRs para mapeamento de foto-reticulação e opaco química em células de mamíferos vivas
Fluorescence-based Screening of Incorporation Efficiencies
4:22
Genetic Incorporation of ncAAs into GPCRs
8:21
Ultrafast Bioorthogonal Labeling of GPCRs on Live Mammalian Cells
11:11
Results: Incorporation of Chemical Probes into GPCRs in Mammalian Cells for Cross-linking and Imaging Studies
12:52
Conclusion
Transcript
The overall goal of this protocol is to enhance the incorporation rate of non-canonical amino acids in mammalian cells to tackle biological questions in live cell settings including mapping of protein-protein interaction surfaces, and bioorthogona
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Um ensaio de fluorescência facile é apresentado para avaliar a eficiência de amino-acil-tRNA-sintetase/tRNA pares incorporando proteínas expressadas em células de mamíferos não-canônicos amino-ácidos (ncAAs). A aplicação de ncAAs estudar receptors G-proteína acoplada (GPCRs) é descrita, incluindo mapeamento de foto-reticulação de binding sites e opaco GPCR rotulagem em células vivas.