Name: micro-dissection of enamel organ from mandibular incisor of rats exposed to environmental toxicants
Uploaded: 2018-03-29T13:30:00
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Este trabalho foi financiado pela Universidade Paris-Diderot, o Instituto Nacional francês de saúde e pesquisa médica (INSERM) e o Instituto Francês de pesquisa odontológica (IFRO).

Todos os animais utilizados neste estudo foram mantidos de acordo com as orientações para o cuidado e o uso de animais de laboratório do Ministério da agricultura (A-75-06-12).
1. animal exposição a substâncias tóxicas
<ol><li>Antes de realizar este protocolo, obter aprovação institucional necessária e certifique-se de cumprir todas as orientações de cuidados com animais.</li>
	<li>Aplica o design do protocolo de pesquisa que permite a constituição de diferentes grupos experim...

<ol>
	<li>Jedeon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enamel+defects+reflect+perinatal+exposure+to+bisphenol+A.">Enamel defects reflect perinatal exposure to bisphenol A.</a> Am J Pathol. 183, 108-118 (2013).</li><li>Jedeon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+Exposure+to+Bisphenol+a+Exacerbates+Dental+Fluorosis+in+Growing+Rats.">Chronic Exposure to Bisphenol a Exacerbates Dental Fluorosis in Growing Rats.</a> J Bone Miner Res. 31, 1955-1966 (2016).</li><li>Alaluusua, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+dental+aberrations+after+the+dioxin+accident+in+Seveso.">Developmental dental aberrations after the dioxin accident in Seveso.</a> Environ Health Perspect. 112, 1313-1318 (2004).</li><li>Chapple, I. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+of+lifestyle,+behaviour+or+systemic+diseases+with+dental+caries+and+periodontal+diseases:+consensus+report+of+group+2+of+the+joint+EFP/ORCA+workshop+on+the+boundaries+between+caries+and+periodontal+diseases.">Interaction of lifestyle, behaviour or systemic diseases with dental caries and periodontal diseases: consensus report of group 2 of the joint EFP/ORCA workshop on the boundaries between caries and periodontal diseases.</a> J Clin Periodontol. 44, S39-S51 (2017).</li><li>Nanci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enamel:+Composition,+Formation,+and+Structure.">Enamel: Composition, Formation, and Structure.</a> Ten Cate's Oral Histology Development, Structure, and Function. , 122-164 (2012).</li><li>Leite, G. A., Sawan, R. M., Teofilo, J. M., Porto, I. M., Sousa, F. B., Gerlach, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+lead+exacerbates+dental+fluorosis.">Exposure to lead exacerbates dental fluorosis.</a> Arch Oral Biol. 56, 695-702 (2011).</li><li>Jedeon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enamel+hypomineralization+due+to+endocrine+disruptors.">Enamel hypomineralization due to endocrine disruptors.</a> Connect Tiss Res. 55, 1-5 (2014).</li><li>Jedeon, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Androgen+receptor+involvement+in+rat+amelogenesis:+an+additional+way+for+endocrine+disrupting+chemicals+to+affect+enamel+synthesis.">Androgen receptor involvement in rat amelogenesis: an additional way for endocrine disrupting chemicals to affect enamel synthesis.</a> Endocrinology. 157, 4287-4296 (2016).</li><li>Weerheijm, K. L., Jalevik, B., Alaluusua, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molar-incisor+hypomineralisation.">Molar-incisor hypomineralisation.</a> Caries Res. 35, 390-391 (2001).</li><li>J&#228;levik, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+Diagnosis+of+Molar-Incisor-+Hypomineralisation+(MIH):+A+systematic+review.">Prevalence and Diagnosis of Molar-Incisor- Hypomineralisation (MIH): A systematic review.</a> Eur Arch Paediatr Dent. 11, 59-64 (2010).</li><li>Alaluusua, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aetiology+of+Molar-Incisor+Hypomineralisation:+A+systematic+review.">Aetiology of Molar-Incisor Hypomineralisation: A systematic review.</a> Eur Arch Paediatr Dent. 11, 53-58 (2010).</li><li>Jedeon, K., Berdal, A., Babajko, S., Gibert, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tooth,+target+organ+of+Bisphenol+A,+could+be+used+as+a+biomarker+of+exposure+to+this+agent.">The tooth, target organ of Bisphenol A, could be used as a biomarker of exposure to this agent.</a> Bisphenol A: Sources, Risks of Environmental Exposure and Human Health Effects. , 205-225 (2015).</li><li>Fejerskov, O., Larsen, M. J., Richards, A., Baelum, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dental+tissue+effects+of+fluoride.">Dental tissue effects of fluoride.</a> Adv Dent Res. 8, 15-31 (1994).</li><li>Robinson, C., Connell, S., Kirkham, J., Brookes, S. J., Shore, R. C., Smith, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+fluoride+on+the+developing+tooth.">The effect of fluoride on the developing tooth.</a> Caries Res. 38, 268-276 (2004).</li><li>Sahlberg, C., Pavlic, A., Ess, A., Lukinmaa, P. L., Salmela, E., Alaluusua, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+effect+of+amoxicillin+and+sodium+fluoride+on+the+structure+of+developing+mouse+enamel+in+vitro.">Combined effect of amoxicillin and sodium fluoride on the structure of developing mouse enamel in vitro.</a> Arch Oral Biol. 58, 1155-1164 (2013).</li><li>Pritchett-Corning, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Euthanasia+of+neonatal+rats+with+carbon+dioxide.">Euthanasia of neonatal rats with carbon dioxide.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 48, 23-27 (2009).</li><li>Hiller, C. R., Robinson, C., Weatherell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+the+composition+of+developing+rat+incisor+enamel.">Variations in the composition of developing rat incisor enamel.</a> Calcif Tissue Res. 18, 1-12 (1975).</li><li>Robinson, C., Kirkham, J., Nutman, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+enamel+formation+and+eruption+rate+in+rat+mandibular+incisors.">Relationship between enamel formation and eruption rate in rat mandibular incisors.</a> Cell Tissue Res. 254, 655-658 (1988).</li><li>Smith, C. E., Nanci, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+sampling+the+stages+of+amelogenesis+on+mandibular+rat+incisors+using+the+molars+as+a+reference+for+dissection.">A method for sampling the stages of amelogenesis on mandibular rat incisors using the molars as a reference for dissection.</a> Anat Rec. 225, 257-266 (1989).</li><li>Chavez, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+dental+epithelial+stem+cells+from+the+adult+mouse+incisor.">Isolation and culture of dental epithelial stem cells from the adult mouse incisor.</a> J Vis Exp. (87), (2014).</li><li>Brookes, S. J., Kingswell, N. J., Barron, M. J., Dixon, M. J., Kirkham, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+the+32-kDa+fragment+the+functional+enamelin+unit+in+all+species?.">Is the 32-kDa fragment the functional enamelin unit in all species?.</a> Eur J Oral Sci. 119, 345-350 (2011).</li><li>Babajko, S., Jedeon, K., Houari, S., Loiodice, S., Berdal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+Steroid+Axis,+a+New+Paradigm+for+Molar+Incisor+Hypomineralization+(MIH).">Disruption of Steroid Axis, a New Paradigm for Molar Incisor Hypomineralization (MIH).</a> Front Physiol. 8, 343 (2017).</li><li>Houari, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asporin+and+the+mineralization+process+in+fluoride-treated+rats.">Asporin and the mineralization process in fluoride-treated rats.</a> J Bone Min Res. 29, 1446-1455 (2014).</li><li>Denbesten, P., Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+fluoride+toxicity:+dental+fluorosis.">Chronic fluoride toxicity: dental fluorosis.</a> Monographs in oral science. 22, 81-96 (2011).</li><li>Kirkham, J., Robinson, C., Phull, J. K., Shore, R. C., Moxham, B. J., Berkovitz, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+rate+of+eruption+on+periodontal+ligament+glycosylaminoglycan+content+and+enamel+formation+in+the+rat+incisor.">The effect of rate of eruption on periodontal ligament glycosylaminoglycan content and enamel formation in the rat incisor.</a> Cell Tissue Res. 274, 413-419 (1993).</li><li>Lacruz, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+novel+candidate+genes+involved+in+mineralization+of+dental+enamel+by+genome-wide+transcript+profiling.">Identification of novel candidate genes involved in mineralization of dental enamel by genome-wide transcript profiling.</a> J Cell Physiol. 227, 2264-2275 (2012).</li><li>Wen, X., Paine, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iron+deposition+and+ferritin+heavy+chain+(Fth)+localization+in+rodent+teeth.">Iron deposition and ferritin heavy chain (Fth) localization in rodent teeth.</a> BMC research notes. 6, 1 (2013).</li><li>Houari, S., Loiodice, S., Jedeon, K., Berdal, A., Babajko, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+Steroid+Receptors+in+Ameloblasts+during+Amelogenesis+in+Rat+Incisors.">Expression of Steroid Receptors in Ameloblasts during Amelogenesis in Rat Incisors.</a> Front Physiol. 7, 503 (2016).</li><li>Kawano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+dental+epithelial+cell+line+(HAT-7)+and+the+cell+differentiation+dependent+on+Notch+signaling+pathway.">Establishment of dental epithelial cell line (HAT-7) and the cell differentiation dependent on Notch signaling pathway.</a> Connect Tissue Res. 43, 409-412 (2002).</li><li>Zhou, Y. L., Snead, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+CCAAT/enhancer-binding+protein+alpha+as+a+transactivator+of+the+mouse+amelogenin+gene.">Identification of CCAAT/enhancer-binding protein alpha as a transactivator of the mouse amelogenin gene.</a> J Biol Chem. 275, 12273-12280 (2000).</li><li>Nakata, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+and+characterization+of+a+spontaneously+immortalized+mouse+ameloblast-lineage+cell+line.">Establishment and characterization of a spontaneously immortalized mouse ameloblast-lineage cell line.</a> Biochem Biophys Res Commun. 308, 834-839 (2003).</li><li>Harada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+ameloblastoma+cell+line,+AM-1.">Establishment of ameloblastoma cell line, AM-1.</a> Journal of oral pathology &amp; medicine: official publication of the International Association of Oral Pathologists and the American Academy of Oral Pathology. 27, 207-212 (1998).</li><li>Jussila, M., Thesleff, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+networks+regulating+tooth+organogenesis+and+regeneration,+and+the+specification+of+dental+mesenchymal+and+epithelial+cell+lineages.">Signaling networks regulating tooth organogenesis and regeneration, and the specification of dental mesenchymal and epithelial cell lineages.</a> Cold Spring Harb Perspect Biol. 4, a008425 (2012).</li><li>Tucker, A., Sharpe, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cutting-edge+of+mammalian+development;+how+the+embryo+makes+teeth.">The cutting-edge of mammalian development; how the embryo makes teeth.</a> Nat Rev Genet. 5, 499-508 (2004).</li><li>Vos, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Years+lived+with+disability+(YLDs)+for+1160+sequelae+of+289+diseases+and+injuries+1990-2010:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010.">Years lived with disability (YLDs) for 1160 sequelae of 289 diseases and injuries 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010.</a> Lancet. 380, 2163-2196 (2012).</li><li>Marcenes, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+burden+of+oral+conditions+in+1990-2010:+a+systematic+analysis.">Global burden of oral conditions in 1990-2010: a systematic analysis.</a> J Dent Res. 92, 592-597 (2013).</li><li>. Dental Caries (Tooth Decay) in Adults (Age 20 to 64) Available from: <a target="_blank" href="https://www.nidcr.nih.gov/DataStatistics/FindDataByTopic/DentalCaries/DentalCariesAdults20to64.htm">https://www.nidcr.nih.gov/DataStatistics/FindDataByTopic/DentalCaries/DentalCariesAdults20to64.htm</a> (2017)</li></ol>

Atividade Ameloblasto alterado e/ou interrompidos Ameloblasto proliferação, diferenciação e liderança de processos de maturação a defeitos de esmalte irreversível e, por sua vez, a caracterização de defeitos de esmalte pode ajudar a desenvolver a compreensão de que a alteração Ameloblasto atividade durante a Amelogênese. Assim, os estudos sobre o órgão do esmalte isoladas são determinantes para elucidar os eventos patológicos levando a esmalte defeitos seja qual for a sua origem, ambiental ou genética....

Muitos defeitos de esmalte do desenvolvimento podem resultar da exposição a tóxicos ambientais e/ou estilo de vida inadequado1,2,3,4. Caracterização de perturbar eventos e moléculas de Amelogênese usando o procedimento descrito neste momento irá promover o uso de defeitos de esmalte resultante como primeiros marcadores de exposição à várias substâncias tóxicas e pode ajudar a reconstituir a história da saúde de cada paciente durante o período perinatal, quando o esmalte é synthetized1,2. Síntese de esmalte pode ser dividido em quatro fases principal, dependendo do Ameloblasto atividade5. O primeiro passo reagrupa proliferação de célula e pre-Ameloblasto precursor. Durante a segunda etapa, ameloblastos diferenciados secretam proteínas da matriz esmalte (EMPs), principalmente amelogenina, enamelin e ameloblastin, que determinam a espessura do esmalte final. Assim, qualquer interrupção da síntese de EMP leva a defeitos quantitativos do esmalte. Após a deposição da espessura de esmalte cheia, começa a fase de maturação. Durante este estágio, crescimento de apatita do cristalite em largura e espessura permite que o esmalte alcançar a mais elevada relação de mineralização encontrada em um tecido biológico, com até 96% em peso. Defeitos de esmalte desreguladoras eventos que ocorrem durante a liderança da fase maturação qualitativa. Finalmente, ameloblastos entram numa fase de post-maturação, também chamada de pigmentação em roedores e sofrem apoptose durante a erupção do dente fazendo defeitos de esmalte (se houver) irreparáveis e irreversíveis, assim, defeitos fornecem potencial gravação retrospectiva de Ameloblasto salienta. Em roedores, Amelogênese segue uma sequência semelhante de eventos com a particularidade que os incisivos estão crescendo continuamente, o que os torna um modelo adequado para estudar o processo geral de Amelogênese. Assim, qualquer interrupção da Amelogênese resulta em alterações da qualidade do esmalte e/ou quantidade, dependendo da janela de tempo do evento perturbador. Nesse sentido, a exposição a dioxinas, chumbo e sistema endócrino (CDE) como bisfenol A (BPA), genisteína e vinclozolina, têm sido mostrados para gerar esmalte hypomineralizations1,2,3 ,6,7,8. Assimétricos brancos opacos pontos foram identificados sobre os incisivos de ratos expostos a uma dose BPA de baixa dose durante o período fetal e o primeiro mês após o nascimento1. Estes defeitos de esmalte em ratos e aqueles de hipomineralização humana molar incisivo (MIH), possuem características semelhantes de clínicas, estruturais e bioquímicas. MIH é uma patologia de esmalte dental recentemente descrito, para que a etiologia ainda permanece incerto9,10 , apesar de muitos fatores causais tendo sido a hipótese de9,10,11 ,12.
Outra patologia de hipomineralização esmalte importantes devido a fatores ambientais é a fluorose dental (DF), que é a consequência da absorção excessiva de flúor (> 0,1 mg/kg/dia)13,14. A principal fonte de flúor é a água potável que é completada ou naturalmente enriquecida com flúor. Flúor é também muitas vezes prescrito para prevenir a cárie dentária, mas a dose profilática é 50% menor do que a um tóxico (≤0.05 mg/kg/dia). MIH e DF, duas patologias frequentes resultantes da exposição a fatores ambientais, podem apresentar características comuns que precisam ser caracterizados devido a potencialização dos efeitos hypomineralizing de flúor combinado com outras substâncias tóxicas como CDE2 ou amoxicilina15.
Microdissecação do órgão do esmalte rato contendo ameloblastos em fases diferentes de diferenciação vai ajudar a entender o mecanismo de ação das moléculas capazes de interromper a atividade Ameloblasto e causar defeitos de esmalte ser diagnosticada após a erupção do dente. Em outras palavras, a caracterização das alterações do esmalte gene expressão e esmalte matriz composição devido a tóxicos ambientais permite a reconstituição da história de exposição a substâncias tóxicas e facilita o monitoramento de segurança ambiental para o público saúde.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bisphenol A</td>
			<td>Sigma Aldrich, Saint Louis MO</td>
			<td>239658</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>formalin 10%</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO</td>
			<td>HT5012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tri-Reagent</td>
			<td>Euromedex, France</td>
			<td>TR118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RLT buffer</td>
			<td>Qiagen, Les Ulis, France</td>
			<td>74126</td>
			<td>RNeasy Protect Mini Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Androgen receptor antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA)</td>
			<td>sc-816</td>
			<td>rabbit polyclonal antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 10x</td>
			<td>EUOMEDEX</td>
			<td>ET330.A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium fluoride (NaF)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Saint Louis, MO</td>
			<td>S-1504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraplast regular</td>
			<td>Leica microsystems, Nanterre cedex,&#160;France</td>
			<td>39601006</td>
			<td>called was/parafin in the text</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tissue OCT</td>
			<td>VWR, Fontenay-sous-Bois, France</td>
			<td>411243</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra Fine Bonn Scissors - Straight/8.5 cm</td>
			<td>PHYMEP , Paris, France</td>
			<td>14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handle for Scalpel Blades - 12.5 cm</td>
			<td>PHYMEP, Paris, France</td>
			<td>10035-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Scalpel Blade</td>
			<td>PHYMEP , Paris, France</td>
			<td>10035-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting Knife - Fine/Straight Tip</td>
			<td>PHYMEP , Paris, France</td>
			<td>10055-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circle Knife</td>
			<td>PHYMEP, Paris, France</td>
			<td>10059-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scalpel blades n&#176;11 Swann-Morton</td>
			<td>VWR, Fontenay-sous-Bois, France</td>
			<td>233-0024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>binocular lens</td>
			<td>Leica biosystems, Nanterre cedex,&#160;France</td>
			<td>MZFLIII</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

micro-dissection of enamel organ from mandibular incisor of rats exposed to environmental toxicants

Esmalte defeitos resultantes de condições ambientais e as formas de vida são preocupações de saúde pública por causa de sua alta prevalência. Estes defeitos resultam de actividade alterada das células responsáveis pela síntese de esmalte chamado ameloblastos, que apresentam no órgão do esmalte. Durante a Amelogênese, ameloblastos seguem uma sequência específica e precisa dos acontecimentos de proliferação, diferenciação e morte. Um rato continuamente crescendo incisivos é um modelo experimental adequado para estudar Ameloblasto fases de atividade e diferenciação em condições fisiológicas e patológicas. Aqui, descrevemos um método confiável e consistente para microdissecar o órgão do esmalte de ratos expostos a tóxicos ambientais. O epitélio dental microdissecado conter secreção e maturação-estágio ameloblastos que podem ser utilizados para experiências qualitativas, tais como ensaios de imuno-histoquímica e hibridação in situ , bem como para análises quantitativas como RT-qPCR, RNA-seq e mancha ocidental.

Muitos esmalte defeitos, tais como fluorose dentária12,13, pode resultar de condições ambientais devido à absorção excessiva de flúor ou esmalte hipomineralização semelhante a MIH devido à exposição a alguns CDE1, 7,22. Esses defeitos no desenvolvimento do esmalte podem ser reproduzidos experimentalmente em ratos (<strong cla...

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Micro-dissection of Enamel Organ from Mandibular Incisor of Rats Exposed to Environmental Toxicants

Noções básicas sobre esmalte formação e possíveis alterações requer o estudo da atividade do Ameloblasto. Aqui, descrevemos um método confiável e consistente para microdissecar o esmalte órgãos contendo ameloblastos fase de maturação e de secreção que podem ser utilizados para procedimentos experimentais mais quantitativos e qualitativos.

Microdissecação do órgão do esmalte do incisivo de ratos expostos a tóxicos ambientais

Enamel defects resulting from environmental conditions and ways of life are public health concerns because of their high prevalence. These defects result ...

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Automated Measurement of Pulmonary Emphysema and Small Airway Remodeling in Cigarette Smoke-exposed Mice

Automáticos de medição de enfisema pulmonar e das vias aéreas pequenas Reformas em cigarro expostas ao fumo Mice

COPD is projected to be the third most common cause of mortality world-wide by 2020(1).  Animal models of COPD are used to identify molecules that ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

O cateterismo cardíaco em camundongos para medir o volume Pressão do relacionamento: Investigando o efeito Bowditch

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Murine Prostate Micro-dissection and Surgical Castration

Murino próstata Micro-dissecção e castração cirúrgica

Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has ...

Generation of Organ-conditioned Media and Applications for Studying Organ-specific Influences on Breast Cancer Metastatic Behavior

Geração de mídia e aplicativos Organ-condicionado para o Estudo Influências específicas do órgão em cancro da mama metastático Comportamento

Breast cancer preferentially metastasizes to the lymph node, bone, lung, brain and liver in breast cancer patients. Previous research efforts have focused ...

Isolation and Cultivation of Mandibular Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Rats

Isolamento e Cultivo de Células-Tronco Mesenquimais de Medula Óssea Mandibular em Ratos

Here we present an efficient method for isolating and culturing mandibular bone marrow mesenchymal stem cells (mBMSCs) in vitro to rapidly obtain numerous ...

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

Constrição aórtica transversal operacional com sutura absorvível para obter hipertrofia miocárica transitória

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate ...

3D Imaging of PDL Collagen Fibers during Orthodontic Tooth Movement in Mandibular Murine Model

Imagem 3D de fibras de colágeno PDL durante movimento dentário ortodôntico no modelo de murina mandibular

Orthodontic tooth movement is a complex biological process of altered soft and hard tissue remodeling as a result of external forces. In order to ...

Establishing a Silicosis Rat Model via Exposure of Whole-Body to Respirable Silica

The major cause of silicosis is the inhalation of silica in the occupational environment. Despite some anatomical and physiological differences, rodent ...