成年大鼠脊髓侧性横断与不对称行为评估

该协议提供了一个可靠的动物模型的脊髓横向半交，模仿布朗-塞夸德综合征在人类，并一个新的组合行为量表，以评估不对称的行为缺陷。这种小鼠半月分模型可以进一步理解在人类中发生的布朗-塞夸德综合征的神经损伤。与上述评估不同，我们新的组合行为量表可应用于任何需要评估不对称、机车和实验室内缺陷的模具。

利用这种一致、自然的半截面模型，可以促进基础与翻译研究实验结果的比较。对于初学者来说，使用此模型的一致结果可能很困难。关键步骤是将针头垂直放置到中线，作为诱导损伤的指导。

看完这段视频后，你应该对如何执行手术和行为程序有一个很好的理解。手术当天，用70%乙醇清洁手术台，并在桌子上放置预热垫。用无菌手术窗帘覆盖手术区域后，确认麻醉大鼠对手趾捏缺乏反应。

在动物的眼睛上涂抹软膏，防止角膜干燥，并剃光胸椎的头发。然后，用三种交替的碘基和乙醇磨砂清洁裸露的皮肤。当动物准备好时，找到第十三根肋骨，并沿着肋骨进行跟踪，以确定其与T-13椎骨骼的连接。

数上识别T-9椎骨，并使用15个手术刀刀片，使三到四厘米的中线皮肤切口在8至11个椎骨旋转过程。在手术显微镜下移动大鼠，钝解剖和分离的副脊髓肌肉横向从旋转过程到T-9和T-10椎骨的两侧。用经过修改的稳定支架去消滑脊柱，在侧椎骨的两侧进行缝隙，并在外露的横向工艺面下滑动支架的不锈钢手臂。

拧紧螺钉以固定支架，并使用量角器将 T-8 暴露至 11 椎骨层和旋转过程。使用荣高尔，狙击掉T-9旋转过程，并尽可能横向地取出一小部分的层，向左至中线和整个右侧部分。然后轻轻地将龙骨插入层下，一次剪断一小块骨头，直到完成所需的拉明切除术区域。

接下来，识别脊髓和弦的后半线，并插入一个30量针垂直通过中线，进入脊髓和弦，一路到椎道的腹壁，斜面朝右。用一小块无菌凝胶泡沫止血，插入一对虹细胞切除术微手术剪刀的一尖穿过针道的中线，另一个尖端沿着右半角的横向表面，在右侧半角上完全切割。使用与刀相同的针头的横向边缘，切开病变间隙，以确认完全右半伤。

并可视化椎管的底部，验证右半角的完整。使用水泥混合物在海绵上架起狭窄的桥梁，以及T-8和T-10旋转工艺。然后，用4/0丝线分别缝合肌肉和皮肤层，并注射0.9%无菌盐水皮，以保持水化。

在第一周每天按两到三次膀胱，以及以下几周一到两次，直到自发性膀胱排空返回。在手术后的适当实验时间点，将成年大鼠放入开放领域实验，并检查动物的运动4分钟。使用该表，为每个行为类别分配一个"是"的值 1 和 0，并求和该值，以给出最终的单边半月分步进分数 0-8。

对于门耦合分析，记录实验动物在狭窄的跑道设备上行走，并为每个耦合类别分配 0 的"1"和/或"笨拙"和 2 的"正常"。对于接触放置评估，将动物保持垂直位置，以便两个后肢都可用于放置响应，并将一个后肢的后肢的后肢轻轻向前刷向表面边缘。观察脚部放置到表面上，并分配后肢接触放置分数 0 表示无放置'和 1 用于放置'对于网格行走评估，将大鼠放置在高三十六由三十八厘米塑料涂层线网网格上，并视频记录大鼠在平台上自由行走 30 步，以便量化每个肢体的脚部失误数，以确定运动缺陷的严重程度。

在损伤震中横截面的氨基荧光染色显示右半截完全丧失。和保存左下边对伤害。单个门评估措施的分数可以单独分析，也可以在切除分数后组合成复合组合行为。

在受伤后的头三天，大鼠失去了步进能力，在受伤后7天开始出现步进式动作。大多数步骤是后步。到T-9下半月切除后28天，大鼠可以在几乎正常的协调下采取植物性步骤。

相比之下，在受伤后头五天内，单边截肢得分下降，并在受伤后第10天回到基线，因此，反向后肢的中断较小。对于总闸口耦合试验，在损伤后头五天，损伤后协调的稳定性和适应性均显著降低。动物开始采取植物性步骤时，动物后肢的接触放置和网格行走也会受到影响，通常恢复。

很难产生清洁伤害。在中间放置针头是确保组织完全分离的有用指南。