यह प्रोटोकॉल रीढ़ की हड्डी के पार्श्व हेमिक्शन का एक विश्वसनीय पशु मॉडल प्रदान करता है जो मनुष्यों में ब्राउन-सेक्वार्ड सिंड्रोम की नकल करता है, और असममित व्यवहार घाटे का आकलन करने के लिए एक नया संयुक्त व्यवहार पैमाना प्रदान करता है। यह माउस हेमिसेक्शन मॉडल मनुष्यों में ब्राउन-सेक्वार्ड सिंड्रोम में होने वाली न्यूरोलॉजिकल हानि के बारे में हमारी समझ को आगे बढ़ा सकता है। अपने उल्लेख किए गए आकलन के विपरीत, हमारे नए संयुक्त व्यवहार पैमाने को किसी भी मोल्ड पर लागू किया जा सकता है जो मूल्यांकन विषम, लोकोमोटिव और इन-लैब घाटे की आवश्यकता होती है।
इसका उपयोग करके, सुसंगत, प्राकृतिक हेमी-सेक्शन मॉडल बुनियादी और अनुवाद अनुसंधान के बीच प्रायोगिक परिणाम की तुलना की सुविधा प्रदान कर सकता है। इस मॉडल के साथ लगातार परिणाम का उपयोग करना शुरुआती लोगों के लिए मुश्किल हो सकता है। महत्वपूर्ण कदम सुई को मिडलाइन में खड़ी रख रहा है, चोट को प्रेरित करने के लिए मार्गदर्शन के रूप में।
इस वीडियो को देखने के बाद, आपको इस बात की अच्छी समझ होनी चाहिए कि सर्जिकल और व्यवहार प्रक्रियाओं दोनों को कैसे किया जाए। प्रक्रिया के दिन, 70% इथेनॉल के साथ सर्जिकल टेबल को साफ करें, और टेबल पर एक पूर्व-गर्म हीटिंग पैड रखें। एक बाँझ सर्जिकल कपड़ा के साथ सर्जिकल क्षेत्र को कवर करने के बाद, एक एनेस्थेटाइज्ड चूहे में अंगुली-चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करें।
कॉर्नियल सुखाने को रोकने के लिए जानवर की आंखों पर मरहम लगाएं, और वक्ष कशेरुकी को ओवरलाइंग बालों को शेव करें। फिर, तीन बारी आयोडीन आधारित और इथेनॉल स्क्रब के साथ उजागर त्वचा को साफ करें। जब जानवर तैयार हो जाता है, तो तेरहवीं पसली का पता लगाएं और टी-13 कशेरुका के साथ अपने कनेक्शन की पहचान करने के लिए रिब डोरसैली का पालन करें।
टी-9 कशेरुका की पहचान करने के लिए गिनें, और आठ से ग्यारहवें कशेरुकी स्पिनस प्रक्रियाओं पर तीन से चार सेंटीमीटर मिडलाइन त्वचा चीरा बनाने के लिए एक नंबर पंद्रह स्केलपेल ब्लेड का उपयोग करें। चूहे को एक शल्य माइक्रोस्कोप के नीचे ले जाएं, और स्पष्ट रूप से विच्छेदन करें और दोनों तरफ टी-9 और टी-10 कशेरुकी के पहलुओं की ओर स्पिनस प्रक्रियाओं से बाद में पैरास्पिनल मांसपेशियों को अलग करें। एक संशोधित स्थिर धारक के साथ रीढ़ को अक्षम करें, पार्श्व कशेरुकी हड्डी के दोनों किनारों पर एक भट्ठा बनाएं, और उजागर ट्रांसवर्स प्रक्रिया पहलुओं के तहत धारक के स्टेनलेस स्टील की बाहों को स्लाइड करें।
धारक को सुरक्षित करने के लिए शिकंजा कसें, और टी-8 से 11 कशेरुकी लैमिना और स्पिनस प्रक्रियाओं को बेनकाब करने के लिए एक प्रोट्रैक्टर का उपयोग करें। एक रोंगर का उपयोग करके, टी-9 स्पिनस प्रक्रिया को दूर करें, और लैमिना के एक छोटे से हिस्से को हटा दें, मिडलाइन और लैमिना के पूरे दाहिने हिस्से को छोड़ दें, जैसा कि संभव हो सके। फिर लैमिना के नीचे धीरे-धीरे रंगूर डालें, और एक समय में हड्डी के एक छोटे से टुकड़े को स्निप करें, जब तक कि लेमिनेक्टॉमी का वांछित क्षेत्र पूरा न हो जाए।
इसके बाद, रीढ़ की हड्डी के तार के पृष्ठीय मिडलाइन की पहचान करें, और रीढ़ के तार में, कशेरुकी नहर की वेंट्रल दीवार के लिए सभी तरह से, दाईं ओर बेवेल का सामना करने के साथ, मिडलाइन के माध्यम से खड़ी 30 गेज सुई डालें। बाँझ जेल फोम के एक छोटे से टुकड़े के साथ किसी भी रक्तस्राव को रोकें, और सुई ट्रैक के मिडलाइन के माध्यम से इरिडेक्टॉमी माइक्रो-सर्जरी कैंची की एक जोड़ी का एक टिप डालें, और सही हेमीचॉर्ड की पार्श्व सतह के साथ दूसरी नोक, सही हेमीकोर्ड पर पूरी तरह से कटौती करने के लिए। एक चाकू के रूप में एक ही सुई के पार्श्व किनारे का उपयोग करें, घाव के अंतर के माध्यम से कटौती करने के लिए एक पूर्ण सही हेमीस्क्शन की पुष्टि करें ।
और सही हेमिक्शन की पूर्णता को सत्यापित करने के लिए कशेरुकी नहर के नीचे की कल्पना करें। स्पंज पर संकरे पुल और टी-8 और टी-10 स्पाइनल प्रोसेस बनाने के लिए सीमेंट के मिश्रण का इस्तेमाल करें । फिर, 4/0 रेशम धागे के साथ मांसपेशियों और त्वचा की परतों को अलग से सीवन करें, और हाइड्रेशन बनाए रखने के लिए 0.9% बाँझ नमकीन को कम से इंजेक्ट करें।
मूत्राशय को पहले सप्ताह के लिए दैनिक दो से तीन बार दबाना, और अगले सप्ताहों में एक से दो बार, जब तक सहज मूत्राशय रिटर्न को शून्य नहीं करता। प्रक्रिया के बाद उचित प्रयोगात्मक समय बिंदुओं पर, वयस्क चूहे को एक खुले क्षेत्र के प्रयोग में रखें, और चार मिनट के लिए जानवर के लोकोमोशन की जांच करें। तालिका का उपयोग करके, प्रत्येक व्यवहार श्रेणी के लिए हां और 0 के लिए 1 का मूल्य असाइन करें, और 0-8 का अंतिम एकतरफा हेमिक्शन स्टेपिंग स्कोर देने के लिए कुल मूल्य का योग करें।
गेट कपलिंग विश्लेषण के लिए, एक संकीर्ण रनवे डिवाइस पर चलने वाले प्रयोगात्मक जानवर को रिकॉर्ड करें, और प्रत्येक युग्मन श्रेणी के लिए नियमित रूप से और/या अनाड़ी ' और सामान्य के लिए 2 के लिए 0 का स्कोर असाइन करें । संपर्क रखने के आकलन के लिए, जानवर को एक ऊर्ध्वाधर स्थिति में रखें, ताकि दोनों हिंद अंग रखने की प्रतिक्रिया के लिए उपलब्ध हों, और एक हिंद अंग की पृष्ठीय सतह को सतह के किनारे की ओर हल्के से आगे ब्रश करें। सतह पर पैर प्लेसमेंट का निरीक्षण करें, और कोई प्लेसमेंट के लिए 0 के स्कोर रखने के एक हिंद अंग संपर्क आवंटित ' और ग्रिड चलने मूल्यांकन के लिए प्लेसमेंट के लिए 1, एक ऊंचा छत्तीस से ३८ सेंटीमीटर प्लास्टिक लेपित तार जाल ग्रिड पर 3 सेमी चुकता उद्घाटन के साथ चूहा जगह है, और वीडियो रिकॉर्ड 30 कदम के लिए मंच भर में स्वतंत्र रूप से चलने चूहा प्रत्येक अंग के लिए पैर गलत कदम की संख्या की मात्रा की अनुमति के लिए मोटर घाटे की गंभीरता का निर्धारण ।
चोट उपरिकेंद्र में एक क्रॉस-सेक्शन के अमीनो फ्लोरोसेंट धुंधला सही हेमिकोर्ड का पूरा नुकसान दिखाता है । और बाएं हेमिकोर्ड का संरक्षण चोट के विपरीत। व्यक्तिगत गेट मूल्यांकन उपायों के स्कोर का अलग से विश्लेषण किया जा सकता है, या उन्हें हेमिसेक्शन स्कोर के बाद एक समग्र संयुक्त व्यवहार में जोड़ा जा सकता है।
चोट के बाद पहले तीन दिनों में, चूहों कदम उठाने की क्षमता खो देते हैं, कदम की तरह आंदोलनों के साथ चोट के बाद ७ १० दिन में ipsilesional पक्ष पर फिर से प्रकट करने के लिए शुरू । और अधिकांश चरणों के साथ पृष्ठीय कदम हैं। टी-9 हेमसेक्शन के 28 दिन बाद तक चूहे लगभग सामान्य समन्वय के साथ पौधेदार कदम उठा सकते हैं ।
तुलना करके, कॉन्ट्रोवर्सी हिंद अंग चोट के बाद पहले पांच दिनों के भीतर एकतरफा हेमीक्शन स्कोर छोड़ने के साथ कम बाधित होता है, और 10 दिन तक बेसलाइन पर लौटता है, चोट के बाद। कुल गेट कपलिंग परीक्षण के लिए, हेमिस्ेक्शन के बाद समन्वय की स्थिरता और अनुकूलनशीलता दोनों को चोट के बाद पहले पांच दिनों के दौरान स्पष्ट रूप से कम कर दिया जाता है । इप्सिल्टरल हिंद अंग के संपर्क रखने और ग्रिड-वॉकिंग भी प्रभावित होते हैं, आमतौर पर ठीक हो जाते हैं जब जानवर पौधे के कदम उठाना शुरू कर देता है।
साफ-सुथरी चोट पैदा करना मुश्किल हो सकता है। बीच में एक सुई रखना ऊतक के पूर्ण पृथक्करण का बीमा करने के लिए एक उपयोगी दिशानिर्देश हो सकता है।