Name: partial lobular hepatectomy: a surgical model for morphologic liver regeneration
Uploaded: 2018-05-31T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Partial Lobular Hepatectomy: A Surgical Model for Morphologic Liver Regeneration at JoVE.com

Wij danken P. Chu voor het uitvoeren van de H & E en histologie; en C. Wang en A. McCarty voor nuttige discussies. Onderzoek werd gesteund door middel van financiering van de Virginia en D. K. Ludwig Fund for Cancer Research; het nationale hart-, Long- en bloed Instituut (R01HL058770 en U01HL099999); en het California Institute voor regeneratieve geneeskunde (RC1 00354) subsidies aan I.W. onder werd gesteund door het Human Frontier Science programma carrière Development Award (CDA00017), de Duitse Research Foundation (2787/1 RI), de Siebel stamcel instituut, en de Thomas en Stacey Siebel Foundation (1119368-104-GHBJI). J.M.T. werd gesteund door de NIH (T32GM007365), de National Research Service Award (1F30DK108561), en Paul en Daisy Soros Fellowship voor nieuwe Amerikanen.

Alle dierproeven werden uitgevoerd in strikte overeenstemming met de richtsnoeren uiteengezet door de vereniging voor de beoordeling en de accreditatie van Laboratory Animal Care International (AAALAC) en Stanford University's administratieve Panel voor proefdier Zorg (APLAC), (protocolnummer #10266) en in de Verenigde Staten, of de Europese Animal Welfare Act, richtlijn 2010/63/EU. Het protocol is goedgekeurd door de Commissie op de ethiek van dier experimenten van de regering van Beieren, Duitsland, en de machtiging ni...

<ol>
	<li>Michalopoulos, G. K., DeFrances, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liver+Regeneration.">Liver Regeneration.</a> Science. 276 (80), 60-66 (1997).</li><li>Ponfick, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+of+the+Liver.">Surgery of the Liver.</a> Lancet. 1, 881 (1890).</li><li>Higgins, G., Anderson, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+Pathology+of+the+liver.+Restoration+of+the+liver+of+the+white+rat+following+partial+surgical+removal.">Experimental Pathology of the liver. Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.</a> Arch. Pathol. 12, 186-202 (1931).</li><li>Miyaoka, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertrophy+and+unconventional+cell+division+of+hepatocytes+underlie+liver+regeneration.">Hypertrophy and unconventional cell division of hepatocytes underlie liver regeneration.</a> Curr. Biol. 22, 1166-1175 (2012).</li><li>Miyaoka, Y., Miyajima, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=To+divide+or+not+to+divide:+revisiting+liver+regeneration.">To divide or not to divide: revisiting liver regeneration.</a> Cell Div. 8, 8 (2013).</li><li>Tsai, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localized+hepatic+lobular+regeneration+by+central-vein-associated+lineage-restricted+progenitors.">Localized hepatic lobular regeneration by central-vein-associated lineage-restricted progenitors.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 114, 3654-3659 (2017).</li><li>Porrello, E. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+regenerative+potential+of+the+neonatal+mouse+heart.">Transient regenerative potential of the neonatal mouse heart.</a> Science. 331, 1078-1080 (2011).</li><li>Shyh-Chang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lin28+enhances+tissue+repair+by+reprogramming+cellular+metabolism.">Lin28 enhances tissue repair by reprogramming cellular metabolism.</a> Cell. 155, 778-792 (2013).</li><li>Yin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+role+of+tumor+necrosis+factor+alpha+in+alcohol-induced+liver+injury+in+mice.">Essential role of tumor necrosis factor alpha in alcohol-induced liver injury in mice.</a> Gastroenterology. 117, 942-952 (1999).</li><li>Gao, B., Bataller, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alcoholic+liver+disease:+pathogenesis+and+new+therapeutic+targets.">Alcoholic liver disease: pathogenesis and new therapeutic targets.</a> Gastroenterology. 141, 1572-1585 (2011).</li><li>Uesugi, T., Froh, M., Arteel, G. E., Bradford, B. U., Thurman, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+4+is+involved+in+the+mechanism+of+early+alcohol-induced+liver+injury+in+mice.">Toll-like receptor 4 is involved in the mechanism of early alcohol-induced liver injury in mice.</a> Hepatology. 34, 101-108 (2001).</li><li>Coen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+metabonomic+investigation+of+acetaminophen+toxicity+in+the+mouse+using+NMR+spectroscopy.">An integrated metabonomic investigation of acetaminophen toxicity in the mouse using NMR spectroscopy.</a> Chem. Res. Toxicol. 16, 295-303 (2003).</li><li>Oz, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diverse+antioxidants+protect+against+acetaminophen+hepatotoxicity.">Diverse antioxidants protect against acetaminophen hepatotoxicity.</a> J. Biochem. Mol. Toxicol. 18, 361-368 (2004).</li><li>Ruepp, S. U., Tonge, R. P., Shaw, J., Wallis, N., Pognan, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics+and+proteomics+analysis+of+acetaminophen+toxicity+in+mouse+liver.">Genomics and proteomics analysis of acetaminophen toxicity in mouse liver.</a> Toxicol. Sci. 65, 135-150 (2002).</li><li>Gunawan, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=c-Jun+N-terminal+kinase+plays+a+major+role+in+murine+acetaminophen+hepatotoxicity.">c-Jun N-terminal kinase plays a major role in murine acetaminophen hepatotoxicity.</a> Gastroenterology. 131, 165-178 (2006).</li><li>Manibusan, M. K., Odin, M., Eastmond, D. a. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postulated+carbon+tetrachloride+mode+of+action:+a+review.">Postulated carbon tetrachloride mode of action: a review.</a> J. Environ. Sci. Health. C. Environ. Carcinog. Ecotoxicol. Rev. 25, 185-209 (2007).</li><li>Recknagel, R. O., Glende, E. a., Dolak, J. a., Waller, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+carbon+tetrachloride+toxicity.">Mechanisms of carbon tetrachloride toxicity.</a> Pharmacol. Ther. 43, 139-154 (1989).</li><li>Sell, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+and+plasticity+of+hepatocyte+lineage+cells.">Heterogeneity and plasticity of hepatocyte lineage cells.</a> Hepatology. 33, 738-750 (2001).</li><li>Malato, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fate+tracing+of+mature+hepatocytes+in+mouse+liver+homeostasis+and+regeneration.">Fate tracing of mature hepatocytes in mouse liver homeostasis and regeneration.</a> J. Clin. Invest. 121, 4850-4860 (2011).</li><li>Greene, A. K., Puder, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+hepatectomy+in+the+mouse:+technique+and+perioperative+management.">Partial hepatectomy in the mouse: technique and perioperative management.</a> J. Invest. Surg. 16, 99-102 (2003).</li><li>Kan, N. G., Junghans, D., Belmonte, J. C. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compensatory+growth+mechanisms+regulated+by+BMP+and+FGF+signaling+mediate+liver+regeneration+in+zebrafish+after+partial+hepatectomy.">Compensatory growth mechanisms regulated by BMP and FGF signaling mediate liver regeneration in zebrafish after partial hepatectomy.</a> FASEB J. 23, 3516-3525 (2009).</li><li>Red-Horse, K., Ueno, H., Weissman, I. L., Krasnow, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coronary+arteries+form+by+developmental+reprogramming+of+venous+cells.">Coronary arteries form by developmental reprogramming of venous cells.</a> Nature. 464, 549-553 (2010).</li><li>Muzumdar, M. D., Tasic, B., Miyamichi, K., Li, L., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Global+Double-Fluorescent+Cre+Reporter+Mouse.">A Global Double-Fluorescent Cre Reporter Mouse.</a> Genesis. 605, 593-605 (2007).</li><li>Poley, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emotionality+related+to+maternal+cannibalism+in+BALB+and+C57BL+mice.">Emotionality related to maternal cannibalism in BALB and C57BL mice.</a> Anim. Learn. Behav. 2, 241-244 (1974).</li><li>Smotherman, W. P., Bell, R. W., Starzec, J., Elias, J., Zachman, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+responses+to+infant+vocalizations+and+olfactory+cues+in+rats+and+mice.">Maternal responses to infant vocalizations and olfactory cues in rats and mice.</a> Behav. Biol. 12, 55-66 (1974).</li></ol>

Acute hepatische letsel is traditioneel bestudeerd met behulp van chemische (paracetamol, ethanol, tetrachloorkoolstof) of chirurgische modellen (70% gedeeltelijke hepatectomy). De regeneratieve reactie na gedeeltelijke hepatectomy van 70% wordt gekenmerkt om globale hepatocyte hypertrofie en meerdere rondes van celdeling4,5te betrekken. Om te stoppen bloedingen, is dit model echter beperkt, zoals de grote bloedvaten moeten worden afgebonden verlaten van een abno...

Het vermogen om een orgaan te regenereren, of om te herstellen van vorm en functie, is gedacht te worden meestal verloren evolutionaire mettertijd. Het regeneratieve potentieel van de volwassen zoogdieren lever na acute chemische of fysische schade is gebleken dat de mobilisatie van alle resterende hepatocyten resulterend in golven van hypertrofie en paar rondes van celdeling, wat resulteert in een functionele maar architectonisch verschillende orgel1,2,3,4,5. Studies hebben onlangs begonnen te karakteriseren de regeneratieve reactie van neonatale zoogdieren organen op schade in de eerste week van leven6,7,8. Deze studies hebben aangetoond dat wanneer gewond tijdens de ontwikkeling van de neonatologie, bepaalde zoogdieren organen met morfologische regeneratie in plaats van compenserende groei of fibrose7,8 reageren.
Recente studies is gebleken dat regeneratie van zowel de globale structuur en de functie tijdens de vroege neonatale periode6,7,8 optreedt. Gevestigde lever schade protocollen betrekken chemische schade of beheer van ethanol9,10,11, paracetamol12,13,14,15 , tetrachloorkoolstof16,17,18,19, 70% gedeeltelijke hepatectomy4,20,21, of verwijdering van links en mediane lobben. Chemische administratie leidt tot de dood van de cel van de hepatocyte, maar vaak laat micro - en macro-structuren intact. Morfologische regeneratie kan niet gemakkelijk in deze context worden bestudeerd, zoals de algemene hepatische architectuur was niet uitgewist. De gedeeltelijke hepatectomy van 70% omvat hechtdraad Afbinding van de grote schepen, die nodig is om te stoppen met bloeden, maar laat een niet-fysiologische omgeving met permanente verstoring van therapieën. Bovendien, deze methode is alleen voor volwassen knaagdieren gebruikt, en de toepassing ervan op pasgeborenen is technisch moeilijk. Met dit in het achterhoofd, ontwikkelden we een methode waarbij 20-30% van de apex van de linker kwab is verwijderd in een pasgeboren P0-muis (figuur 1A-1B). Deze methode is operatief conservatieve, minimaal invasieve, niet technisch uitdagend, en leidt tot verlies van morfologie zonder de afbinding van therapieën, ruimte wordt gelaten voor regeneratie optreden bruto. Het resulterende stapsgewijze protocol, hieronder beschreven, zorgt voor een onderzoeker voor het uitvoeren van een gedeeltelijke lobulair hepatectomy op neonatale muizen om zoogdieren neonatale regeneratie in de vroege stadia van postnatale leven te bestuderen. Deze methode heeft ook duidelijke toepassingen aan vergelijkende studies in regeneratieve geneeskunde en de biologie van de cel van de stam, als het kan worden gebruikt in de lever tijdens latere fasen van het leven.
De meest voorkomende acute lever schade studies zijn chemisch geïnduceerde schade, volwassen lever amputatie of gedeeltelijke hepatectomy van 70%. Chemische schade vaak intraveneuze, intraperitoneaal of orale toediening van paracetamol, tetrachloorkoolstof of ethanol impliceert, en is een relatief eenvoudig en niet-invasieve letsel model. Zoals eerder besproken, chemische schade resulteert in de dood van de cel van de hepatocyte, maar vaak bladeren stroma en parenchym structuren intact, waardoor het moeilijk om te maken beweringen over morfologische regeneratie. Chemische schade vaak gecentreerd op hepatische schepen, waardoor het een nuttige techniek te bestuderen van de site en cel-specifieke schade, maar maakt het ook moeilijk te ondervragen, op het niveau van de hele orgel, andere populaties die verder van schepen kan bevinden en die kan bijdragen tot regeneratie. Ondanks deze beperkingen blijft chemische schade een nuttige en zeer fysiologisch relevante schade-model.
Volwassen 70% gedeeltelijke hepatectomy houdt de verwijdering van de linker- en mediaan kwabben na Afbinding van hepatische therapieën. Het antwoord op hepatectomy was goed gekenmerkt: de geamputeerde lever 14 dagen post 70% gedeeltelijke hepatectomy een grove andere architectuur dan die van de oorspronkelijke onbeschadigd kwab, als de hepatocyten van de resterende rechts en Spiegelse kwab ontwikkelt hypertrofie en een paar rondes van celdeling4,5te ondergaan. Dit maakt verloren massa en functie, maar er niet in slaagt om te regenereren de twee geamputeerde lobben, en daarom is geen vervanging voor bruto morfologie. Dientengevolge, is de reactie van de schade op 70% gedeeltelijke hepatectomy nuttig zijn te onderzoeken van compenserende groei mechanismen met beperkte regeneratie.
Hier beschrijven we een protocol voor een neonatale gedeeltelijke lobulair hepatectomy volledig. De procedure hiervoor passende dierlijke selectie en voorbereiding, chirurgische veld voorbereiding operatie en herstel. Optimalisatie en aanpassing van elk van deze stappen kunnen worden vereist voor andere toepassingen van het protocol.
We hebben uitgebreid uitgevoerd en geoptimaliseerd dit protocol op wild type C57BL/6J pups (JAX 000664), echter studeren andere cel populaties en mechanismen van regeneratie, gebruikten we ook verschillende transgene dieren, met inbegrip van muizen herbergen verschillende Cre en CreERT2 transgenen en/of knock-ins (JAXAxin2CreERT2 018867, en Sox9CreERT2 JAX 018829) in combinatie met fluorescerende verslaggevers, zoals de regenboog en mTmG systemen (R26VT2/GK3, R26 mT/mG) 22 , 23. we vonden geen behoefte om te veranderen van deze methodologie voor verschillende muis stammen, zoals geen verschillen in overleving resultaten of regeneratieve potentieel werden waargenomen.
Naast het gebruik van verschillende dierlijke variëteiten, hebben we ook gedeeltelijke lobulair hepatectomies uitgevoerd op neonatale muizen met kleine molecules, zoals 4-hydroxy-tamoxifen en 5-ethynyl-2 '-deoxyuridine (EdU) behandeld. Dimethylsulfoxide (DMSO) en ethanol werden gebruikt als oplosmiddelen worden gebruikt, zoals bleek dat maïsolie was een belangrijke oorzaak van morbiditeit. We anders gevonden dat intraperitoneale toediening van kleine moleculen niet overleven of regeneratieve uitkomsten beïnvloeden. We voorspellen dat dit protocol aangepast voor gebruik met andere kleine moleculen worden zal te ondervragen van verschillende aspecten van regeneratie.
Neonatale muis chirurgie kunnen technisch uitdagende en bijzondere expertise in dierlijke handling en microscopische dissectie kunnen vereisen. De veehouderij expertise is nodig om te voorkomen dat moeders kannibalisme na chirurgie en tijdens de onmiddellijke herstelperiode.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Animals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mother with litter of day 0 neonatal pups (any strain)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surrogate mother and surrogate litter (optional)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Serum (PBS)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Providine-iodine or equivalent antiseptic solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>ZEMSDV4L MFR # 435421-9901-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3mm straight spring micro scissors</td>
			<td>Vannas</td>
			<td>72932-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5SF Forceps</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>11252-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Kelly forceps</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>17-050G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Sunbeam</td>
			<td>000771-810-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott Labs</td>
			<td>0044-5260-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Anesthesia System</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>1205S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze, 10.16 x 10.16cm</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-761-52</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5ml microcentrifuge tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22363204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 monocryl sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>MCP489G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>&#160;S35839</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet-Aid, Plain, 110V</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>4-000-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mettler Toledo NewClassic ME Analytical Balances</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>01-912-402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low Cost Induction Chamber</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SOMNO-0730</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

partial lobular hepatectomy: a surgical model for morphologic liver regeneration

Morfologische orgel regeneratie na acute weefsel verlies is gemeenschappelijk onder lagere gewervelde dieren, maar wordt zelden waargenomen in zoogdieren postnatale leven. Volwassen lever regeneratie na 70% gedeeltelijke hepatectomy resulteert in hepatocyte hypertrofie met sommige replicatie in resterende lobben met herstel van de metabole activiteit, maar met permanent verlies van de gewonde kwab morfologie en architectuur. Hier, detail we een nieuwe chirurgische methode in de pasgeborene die een fysiologische omgeving dat bevorderlijk is voor de regeneratie laat. Dit model omvat amputatie van de linker kwab apex en een daaropvolgende conservatieve beheer regime, en mist de noodzaak voor afbinding van grote lever schepen of chemische schade, waardoor een fysiologische omgeving waar een regeneratie kan voorkomen. Wij breiden dit protocol amputaties op jonge muizen (P7-14), waarin de benadeelde lever van orgel regeneratie tot compenserende groei door hypertrofie overgangen. Het gepresenteerd, korte 30 min-protocol biedt een kader om te bestuderen van de mechanismen van de regeneratie, de leeftijd-geassocieerde daling bij zoogdieren en de karakterisatie van vermeende hepatische stam of progenitoren.

Figuur 1A detailleert een algemene tijdlijn van de neonatale gedeeltelijke lobulair hepatectomy (schematische in figuur 1B), en de verwachte duur van tijd om te wachten tot de regeneratie wordt waargenomen. Subtiele regeneratie van de linker kwab kan worden waargenomen 7-14 dagen post operatie. Volledige regeneratie werd vaak waargenomen na 56 dagen operatie post. Muizen moeten geen tekenen vertonen van fysiologische afwijkingen ...

Watch this Scientific Journal Video about Partial Lobular Hepatectomy: A Surgical Model for Morphologic Liver Regeneration at JoVE.com

Partial Lobular Hepatectomy: A Surgical Model for Morphologic Liver Regeneration

Gedeeltelijke lobulair Hepatectomy: Een chirurgische Model voor morfologische lever regeneratie

Hier presenteren we een nieuwe methode voor gedeeltelijke resectie van de linker hepatische kwab bij neonatale (dag 0) muizen. Dit nieuwe protocol is geschikt voor de studie van acute lever schade en letsel reactie in de neonatale instelling.

Morphological organ regeneration following acute tissue loss is common among lower vertebrates, but is rarely observed in mammalian postnatal life. Adult ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Kidney Regeneration in Adult Zebrafish by Gentamicin Induced Injury

Nier Regeneratie in Adult zebravis door Gentamicin geïnduceerd letsel

The kidney is essential for fluid homeostasis, blood pressure regulation and filtration of waste from the body. The fundamental unit of kidney function is ...

Deriving Retinal Pigment Epithelium (RPE) from Induced Pluripotent Stem (iPS) Cells by Different Sizes of Embryoid Bodies

Deriving Retinal Pigment Epithelium RPE from Induced Pluripotent Stem iPS Cells by Different Sizes of Embryoid Bodies

Afleiden van retinale pigment epitheel (RPE) van induced pluripotent stem (iPS) cellen door verschillende maten van embryoiden Bodies

Pluripotent stem cells possess the ability to proliferate indefinitely and to differentiate into almost any cell type. Additionally, the development of ...

Hepatocyte-specific Ablation in Zebrafish to Study Biliary-driven Liver Regeneration

Hepatocyt-specifieke Ablation in zebravis-Biliary gedreven leverregeneratie Studie

The liver has a great capacity to regenerate. Hepatocytes, the parenchymal cells of the liver, can regenerate in one of two ways: hepatocyte- or ...

Simultaneous Assessment of Cardiomyocyte DNA Synthesis and Ploidy: A Method to Assist Quantification of Cardiomyocyte Regeneration and Turnover

Gelijktijdig Beoordeling van Cardiomyocyte DNA Synthese en Ploïdie: een methode om Assist Kwantificering van Cardiomyocyte Regeneration en Omzet

Although it is accepted that the heart has a limited potential to regenerate cardiomyocytes following injury and that low levels of cardiomyocyte turnover ...

Development of an Ethanol-induced Fibrotic Liver Model in Zebrafish to Study Progenitor Cell-mediated Hepatocyte Regeneration

Ontwikkeling van een ethanol-geïnduceerde fibrotische lever Model in zebravis om te studeren Progenitor Cell-gemedieerde Hepatocyt Regeneration

Sustained liver fibrosis with continuation of extracellular matrix (ECM) protein build-up results in the loss of cellular competency of the liver, leading ...

Surgical Ablation Assay for Studying Eye Regeneration in Planarians

Chirurgische Ablation Assay voor het bestuderen van Eye Regeneratie in planarians

In the study of adult stem cells and regenerative mechanisms, planarian flatworms are a staple in vivo model system. This is due in large part to their ...

Chemical Amputation and Regeneration of the Pharynx in the Planarian Schmidtea mediterranea

Chemical Amputation and Regeneration of the Pharynx in the Planarian Schmidtea mediterranea

Chemische amputatie en regeneratie van de keelholte in de Planarian Schmidtea mediterranea

Planarians are flatworms that are extremely efficient at regeneration. They owe this ability to a large number of stem cells that can rapidly respond to ...

A Familial Hypercholesterolemia Human Liver Chimeric Mouse Model Using Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocytes

Een familiale hypercholesterolemie menselijke lever chimeer muismodel met behulp van geïnduceerde pluripotente stamcel afkomstige hepatocyten

Familial hypercholesterolemia (FH) is mostly caused by low-density lipoprotein receptor (LDLR) mutations and results in an increased risk of early-onset ...

Methods for the Study of Regeneration in Stentor

Methods for the Study of Regeneration in Stentor

Methoden voor de studie van regeneratie in de Stentor

Cells need to be able to regenerate their parts to recover from external perturbations. The unicellular ciliate Stentor coeruleus is an excellent model ...

A Simplified and Efficient Method to Isolate Primary Human Keratinocytes from Adult Skin Tissue

Een vereenvoudigde en efficiënte methode om te isoleren van de primaire mens keratinocyten van volwassen huidweefsel

Primary human keratinocytes isolated from fresh skin tissues and their expansion in vitro have been widely used for laboratory research and for clinical ...