Name: cannula implantation into the cisterna magna of rodents
Uploaded: 2018-05-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cannula Implantation into the Cisterna Magna of Rodents at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי קרן נובו נורדיסק, המכון הלאומי של הפרעות נוירולוגיות ושבץ, NINDS/NIH (M.N.). A.L.R.X. ו- S.H-R הם מקבלי מלגת פוסט-דוקטורט, מלגת דוקטורט מטעם קרן לונדבק, בהתאמה.

כל ההליכים בוצעו בהתאם האירופית דירקטיבה 2010/63/האיחוד האירופי לחקר בעלי חיים, אושרו על ידי המועצה לניסויים חיה תחת דני שר הסביבה ומזון (2015-15-0201-00535).
1. נוהל תעלות
<ol><li>בצינורית הכנה הערה: להימנע מלגעת את הצינורית עם כפפות שאינו סטרילי.<ol>
<li>לשבור את קצה מחט 30G שיניים באמצעות בע...

<ol>
	<li>Xie, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sleep+Drives+Metabolite+Clearance+from+the+Adult+Brain.">Sleep Drives Metabolite Clearance from the Adult Brain.</a> Science. , 373-377 (2013).</li><li>Iliff, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+paravascular+pathway+facilitates+CSF+flow+through+the+brain+parenchyma+and+the+clearance+of+interstitial+solutes,+including+amyloid+&#946;.">A paravascular pathway facilitates CSF flow through the brain parenchyma and the clearance of interstitial solutes, including amyloid &#946;.</a> Sci. Transl. Med. 4, 147ra111 (2012).</li><li>Jessen, N. A., Munk, A. S. F., Lundgaard, I., Nedergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Glymphatic+System:+A+Beginner's+Guide.">The Glymphatic System: A Beginner's Guide.</a> Neurochem. Res. 40, 2583-2599 (2015).</li><li>Louveau, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+and+functional+features+of+central+nervous+system+lymphatic+vessels.">Structural and functional features of central nervous system lymphatic vessels.</a> Nature. , (2015).</li><li>Aspelund, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dural+lymphatic+vascular+system+that+drains+brain+interstitial+fluid+and+macromolecules.">A dural lymphatic vascular system that drains brain interstitial fluid and macromolecules.</a> J. Exp. Med. 212, 991-999 (2015).</li><li>Kress, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impairment+of+paravascular+clearance+pathways+in+the+aging+brain.">Impairment of paravascular clearance pathways in the aging brain.</a> Ann. Neurol. 76, 845-861 (2014).</li><li>Plog, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomarkers+of+Traumatic+Injury+Are+Transported+from+Brain+to+Blood+via+the+Glymphatic+System.">Biomarkers of Traumatic Injury Are Transported from Brain to Blood via the Glymphatic System.</a> J. Neurosci. 35, 518-526 (2015).</li><li>Jiang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impairment+of+glymphatic+system+after+diabetes.">Impairment of glymphatic system after diabetes.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. , (2016).</li><li>Peng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+glymphatic+fluid+transport+in+a+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Suppression of glymphatic fluid transport in a mouse model of Alzheimer's disease.</a> Neurobiol. Dis. 93, 215-225 (2016).</li><li>Ore&#353;kovi&#263;, D., Klarica, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+formation+of+cerebrospinal+fluid:+Nearly+a+hundred+years+of+interpretations+and+misinterpretations.">The formation of cerebrospinal fluid: Nearly a hundred years of interpretations and misinterpretations.</a> Brain Res. Rev. 64, 241-262 (2010).</li><li>Dusart, I., Schwab, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secondary+Cell+Death+and+the+Inflammatory+Reaction+After+Dorsal+Hemisection+of+the+Rat+Spinal+Cord.">Secondary Cell Death and the Inflammatory Reaction After Dorsal Hemisection of the Rat Spinal Cord.</a> Eur. J. Neurosci. 6, 712-724 (1994).</li><li>Eide, K., Eidsvaag, V. A., Nagelhus, E. A., Hansson, H. -. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+astrogliosis+and+increased+perivascular+aquaporin-4+in+idiopathic+intracranial+hypertension.">Cortical astrogliosis and increased perivascular aquaporin-4 in idiopathic intracranial hypertension.</a> Brain Res. , (2016).</li><li>Pullen, R. G., DePasquale, M., Cserr, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bulk+flow+of+cerebrospinal+fluid+into+brain+in+response+to+acute+hyperosmolality.">Bulk flow of cerebrospinal fluid into brain in response to acute hyperosmolality.</a> Am. J. Physiol. 253, F538-F545 (1987).</li><li>Ichimura, T., Fraser, P. A., Cserr, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+extracellular+tracers+in+perivascular+spaces+of+the+rat+brain.">Distribution of extracellular tracers in perivascular spaces of the rat brain.</a> Brain Res. 545, 103-113 (1991).</li><li>Iliff, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain-wide+pathway+for+waste+clearance+captured+by+contrast-enhanced+MRI.">Brain-wide pathway for waste clearance captured by contrast-enhanced MRI.</a> J. Clin. Invest. 123, 1299-1309 (2013).</li><li>Ratner, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimal-mass-transfer-based+estimation+of+glymphatic+transport+in+living+brain.">Optimal-mass-transfer-based estimation of glymphatic transport in living brain.</a> Proc. SPIE--the Int. Soc. Opt. Eng. 9413, (2015).</li><li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+Body+Posture+on+Brain+Glymphatic+Transport.">The Effect of Body Posture on Brain Glymphatic Transport.</a> J. Neurosci. 35, 11034-11044 (2015).</li><li>Nouri, S., Sharif, M. R., Sahba, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+ferric+chloride+on+superficial+bleeding.">The effect of ferric chloride on superficial bleeding.</a> Trauma Mon. 20, e18042 (2015).</li></ol>

הציגו לנו פרוטוקול המתאר הליך מפורט של תעלות מגנה cisterna (CMc), אשר מציעה שיטה פשוטה כדי לספק מולקולות שכותרתו תא CSF. CMc מאפשר את החזיית העוקבים CSF דינמיקה, גם אין ויוו וגם ex-vivo, באמצעות שיטות הדמיה שונות או היסטולוגיה.
אחד היתרונות העיקריים של הטכניקה CMc טמון שלה גישה ישי?...

נוזל מוחי שדרתי (CSF) מתרחץ מערכת העצבים המרכזית (CNS) ברחבי המערכת חדרית ולאורך את החללים תת-עכבישי, לחלל מוגדר מבחינה אנטומית של רצף עם החדרים, המקיף את המוח ואת חוט השדרה. אחד התפקידים העיקריים של CSF נועד לספק נתיב לאישור של מטבוליטים, מומסים בגבול מ parenchyma המוח. סיווג נעשית באמצעות glymphatic שנתגלתה לאחרונה מערכת1, המוח אנלוגית למערכת הלימפה ההיקפית. במסמך זה, אנו מתארים ולדון cisterna מגנה תעלות (CMc), שיטה פולשנית למסירה ישירה של מולקולות אל תוך שדרתי. CMc היא שיטת המפתח ללמוד את הפונקציה glymphatic. יתר על כן, ניתן גם להחיל CMc עבור חקר הדינמיקה CSF, משלוח מהיר, המוח ברוחב של הלא-דם מוח מחסום (BBB) מולקולות חדיר אל parenchyma המוח, לאורך החלל perivascular.
CMc מנצלת עקרונות פיזיולוגיים של CSF הדינמיקה התנועה דרך מערכת העצבים כדי לספק מעקב שכותרתו מולקולות או סמים לתוך מרחב מלא נוזל מוחי-שדרתי של המלון cisterna (ס מ). מולקולות מוזרקים דרך בצינורית מושתל לתוך כיסוי קרום קרום atlanto-העורף שהמולקולות ס"מ. ואז מתבצעות על ידי נוזל מוחי-שדרתי בצובר מזרימה parenchyma המוח דרך החלל paravascular1. הסוכן נותב או הניגוד מוזרק דרך CMc עוקב אחר תנועת נוזל מוחי-שדרתי, אשר מאפשר את ההערכה של CSF תנועה, זרם glymphatic על ידי לכימות רמות העוצמה של מולקולות שכותרתו מזין parenchyma המוח. CMc הוא תואם עם טכניקות הדמיה שונות, כולל epifluorescence, 2-פוטון מיקרוסקופיה של דימות תהודה מגנטית (MRI). בנוסף, ההערכה ניתן לבצע שני ויוו או ex-vivo. חשוב לציין, CMc מאפשר הפריט החזותי של מערכת glymphatic בהרדמה או במהלך השינה הטבעית, כמו גם בבעלי חיים ערה, נעה בחופשיות.
הטכניקה CMc יכול להיות מנוצל כדי לחקור היבטים שונים של דינמיקה של נוזלים ב- CSF, אבל הוכיחה להיות שימושי במיוחד ללמוד את המערכת glymphatic. Glymphatic פעילות כוננים הזרימה הולכת חום של CSF מן המרחב periarterial דרך תעלות מים aquaporin-4 (AQP-4), אשר הם בסככות הקרום של endfeet וסקולרית גלישת astrocytic. הזרם הולכת חום מאפשרת למחלף של CSF, נוזל בין-תאי (הקרן) בתוך parenchyma המוח. CSF/הקרן המכיל פסולת מטבולית, מומסים בגבול ואז הוסר parenchyma המוח דרך2,שטח perivenous3. בסופו של דבר, CSF/הקרן מגיע הפריפריה דרך כלי הלימפה קרום תיאר לאחרונה4,5. מערכת glymphatic הוכח חיונית עבור פינוי של מטבוליטים פסולת מזיקים כגון עמילואיד-β2. בהמשך, glymphatic סיווג נמצא לקוי הזדקנות6, לאחר פגיעה מוחית טראומטית7, ו במודלים חייתיים של סוכרת8 ו מחלת אלצהיימר9. ראוי לציין, glymphatic פעילות היא מדינה התלויים, מציג פעילות גבוה משמעותית במהלך שינה או הרדמה בהשוואה ערות1. אכן, אפרוחי ומורדמת להפגין את הפעילות glymphatic הגבוהה ביותר. לפיכך, כימות ניסיוני של פעילות glymphatic חיוני כשלמדתי תפקידה מחלה ובריאות.
מספר מחקרים עסקו CSF dynamics ולהחלפה שלה עם נוזל בין-תאי (הקרן) ב- parenchyma המוח. עם זאת, השיטות באמצעותו מועברות שכותרתו מולקולות הן פולשני למדי, מפעילה נזק מוחי parenchyma ושינויים בלחץ תוך גולגולתי (ICP) (ראה סקירת10). כמה דוגמאות הן ע או זריקות intraparenchymal אשר כרוכות גולגולת או קידוח של צמח קוצני חור בגולגולת. הליכים אלה הוכחו לשנות ICP, ובכך לשבש את פעולת הפונקציה glymphatic2. כמו כן, שיטות פולשניות כאלה זירוז astrogliosis ולהגדיל את immunoreactivity AQP-4 בשטח parenchyma פגום המוח,11,שלה הסביבה12. כמו האסטרוציטים ו- AQP-4 הם רכיבי מפתח של מערכת glymphatic, CMc היא השיטה של בחירה ללימודים שלה. היתרונות הגדולים של CMc בהשוואה הליכים פולשניים יותר הם קיום שלם הגולגולת והמוח parenchyma, הימנעות ICP שינויים astrogliosis, בהתאמה. לפיכך, CMc בשילוב עם כלי הדמיה שונים פותח עבור מגוון רחב של אפשרויות ללמוד לא רק את מערכת glymphatic, אלא גם את הדינמיקה ואת מנגנוני זרימה הומאוסטזיס, כמו גם מודלים חייתיים של מחלות נוירולוגיות.
ההליך תעלות (CMc) מגנה cisterna מאפשר גישה קלה וישירה נוזל מוחי שדרתי (CSF). על ידי הזרקת מולקולות שונות (למשל פלורסנט המשדרים, סוכנים בניגוד MRI) הנסיין ניתן לעקוב אחר תנועתם בתוך תא CSF, להעריך את הפעילות של מערכת glymphatic. הפרוטוקול הבא מתאר שני CMc חריפה של, לזריקות מיד לאחר ניתוח ולאחר כרונית השרשת הצינורית, שבו החיה והשיחזור הליך כירורגי זריקה מאוחר יותר. ההבדל החשוב ביותר בין השתלה אקוטי וכרוני הוא ההשתלה כרונית מאפשרת לצורך המחקר של פעילות glymphatic בעכברים ער.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1153">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">SOPIRA Carpule 30G 0.3 x 12mm</td>
			<td style="width:245px;">Kulzer</td>
			<td style="width:257px;">AA001</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Polyethylene Tubing 0.024&#8221; OD x 0.011&#8221; ID</td>
			<td style="width:245px;">Scandidact</td>
			<td>PE10-CL-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">30G x &#189;&#8221; 0.3 x 12 mm Luer-Lock</td>
			<td style="width:245px;">Chirana T. Injecta</td>
			<td>CHINS01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:22px;width:485px;">Chlorhexidine 0.5% (chlorhexidine digluconate)</td>
			<td style="width:245px;">Meda AS</td>
			<td style="width:257px;">no catalogue number, see link in comments</td>
			<td>http://www.meda.dk/behandlingsomrader/desinfektion/desinfektion-af-hud/klorhexidin-sprit-medic-05/</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alcohol Swab 70% Isopropyl Alcohol 30 x 60mm</td>
			<td>Vitrex Medical A/S</td>
			<td>520213</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Viskoese Oejendraeber Ophtha</td>
			<td>Ophtha</td>
			<td>145250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:485px;">Wooden applicator, Double cotton bud (&#216; appr. 4 - 5 mm, length appr. 12 mm)</td>
			<td style="width:245px;">Heinz Herenz</td>
			<td style="width:257px;">1032018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye spears</td>
			<td>Medicom</td>
			<td>A18005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ferric chloride 10% solution</td>
			<td style="width:245px;">Algeos</td>
			<td style="width:257px;">NV0382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Kimtech Science Precision Wipes Tissue Wipers</td>
			<td style="width:245px;">Kimberly Clark Professional</td>
			<td style="width:257px;">05511</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">Loctite Super Glue Precision 5g</td>
			<td style="width:245px;">Loctite</td>
			<td style="width:257px;">no catalogue number, see link in comments</td>
			<td>http://www.loctite-consumer.dk/da/produkter/superglue-liquid.html&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Insta-Set CA Accelerator</td>
			<td style="width:245px;">Bob Smith Industries</td>
			<td style="width:257px;">BSI-152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dental Cement Powder</td>
			<td style="width:245px;">A-M Systems</td>
			<td style="width:257px;">525000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical weld&#160;</td>
			<td style="width:245px;">Kent Scientific Corporation</td>
			<td style="width:257px;">INS750391</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:485px;">Hamilton syringe GASTIGHT&#174; , 1700 series, 1710TLL, volume 100 &#956;L, PTFE Luer lock</td>
			<td>Hamilton syringes</td>
			<td style="width:257px;">1710TLL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">LEGATO 130 Syringe pump</td>
			<td style="width:245px;">KD Scientific</td>
			<td style="width:257px;">788130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Paraformaldehyde powder, 95%</td>
			<td style="width:245px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:257px;">158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Phosphate buffered saline (PBS; 0.01M; pH 7.4)</td>
			<td style="width:245px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:257px;">P3813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Ovalbumin, Alexa Fluor 647 Conjugate</td>
			<td style="width:245px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:257px;">O34784</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:485px;"> 
			DAPI (diamidino-2-phenylindole) Solution (1 mg/mL)</td>
			<td style="width:245px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:257px;">62248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Dextran, Fluorescein, 3000 MW, Anionic</td>
			<td style="width:245px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:257px;">D3305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">E-Z Anesthesia EZ-7000 Classic System</td>
			<td style="width:245px;">E-Z Systems</td>
			<td>EZ-7000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Attane Isofluran 1000 mg/g</td>
			<td style="width:245px;">ScanVet</td>
			<td>55226</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Euthanimal 200mg/mL (sodium pentobarbital)</td>
			<td style="width:245px;">ScanVet</td>
			<td style="width:257px;">545349</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Ketaminol Vet 100 mg/mL (ketamine)</td>
			<td>Intervet International BV</td>
			<td style="width:257px;">511519</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:485px;">Rompin Vet 20 mg/mL (xylazin)</td>
			<td style="width:245px;">KVP Pharma + Veterin&#228;r Produkte GmbH</td>
			<td style="width:257px;">148999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Xylocain 20 mg/mL (lidocain)</td>
			<td style="width:245px;">AstraZeneca</td>
			<td style="width:257px;">158543</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Marcain 2.5 mg/mL (bupivacain)</td>
			<td style="width:245px;">AstraZeneca</td>
			<td style="width:257px;">123918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:485px;">Bupaq Vet 0.3 mg/mL (buprenorphine)</td>
			<td style="width:245px;">Richter Pharma AG</td>
			<td style="width:257px;">185159&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cannula implantation into the cisterna magna of rodents

Cisterna מגנה תעלות (CMc) היא תהליך פשוט המאפשר גישה ישירה נוזל מוחי שדרתי (CSF) ללא נזק פעיל הגולגולת או parenchyma המוח. בחולדות מרדימים, החשיפה של קרום הדורה ע י ניתוח עמום של שרירי הצוואר מאפשר החדרת הצינורית לתוך המלון cisterna (ס מ). הצינורית, חיבר או על ידי מחט משופע בסדר או בורוסיליקט נימי, מחוברת דרך צינור פוליאתילן (PE) מזרק. באמצעות מזרק משאבה, מולקולות יכול אז להיות מוזרק במחירים מבוקרים ישירות לתוך ס מ, אשר היא רציפה עם תת-עכבישי החלל. מן החלל תת-עכבישי, אפשר לאתר CSF פלקסים על ידי זרימת הולכת חום לחלל perivascular סביב רבים חודר, שבו מתרחשת ממס exchange עם נוזל interstitial (ISF). CMc ניתן לבצע זריקות חריפה מיד לאחר הניתוח, או השרשה כרונית, עם הזרקת מאוחר יותר מרדימים או ער, לנוע בחופשיות מכרסמים. כימות של התפלגות מעקב ב- parenchyma המוח יכול להתבצע על ידי epifluorescence, 2-פוטון מיקרוסקופ, דימות תהודה מגנטית (MRI), בהתאם המאפיינים הכימי פיזיקלי של מולקולות מוזרק. לפיכך, CMc בשילוב עם טכניקות הדמיה שונות מציע כלי רב עוצמה עבור הערכה של מערכת glymphatic ו CSF dynamics ובפונקציה. יתר על כן, CMc יכול להיות מנוצל כמו צינור של משלוח מהיר, המוח-רחב של איתות מולקולות ותערובות מטבולית זאת יכולה אחרת לעבור את מחסום הדם מוח (BBB).

על קיבוע של עכברים או חולדות בתוך מסגרת stereotaxic, שרירי הצוואר באזור קרסט העורפית בלשון בוטה גזור כדי לחשוף את מגנה cisterna (ס מ). מבנה משולש ס מ יזוהה בקלות בין החלק סימטרית של הצרבלום לשד (איור 1Aג-1). הצינורית מוכנס 1-2 מ מ לתוך ס מ על ידי בעדינות פירסינג ק?...

Watch this Scientific Journal Video about Cannula Implantation into the Cisterna Magna of Rodents at JoVE.com

Cannula Implantation into the Cisterna Magna of Rodents

השרשה בצינורית לתוך המלון Cisterna של מכרסמים

כאן נתאר פרוטוקול לבצע cisterna מגנה תעלות (CMc), דרך פולשנית כדי לספק קליעים נותבים, מצעים, מולקולות איתות לתוך נוזל מוחי שדרתי (CSF). CMc בשילוב עם שיטות הדמיה שונות, מאפשרת המערכת glymphatic CSF dynamics הערכה, וכן משלוח המוח ברוחב של תרכובות שונות.

Cisterna magna cannulation (CMc) is a straightforward procedure that enables direct access to the cerebrospinal fluid (CSF) without operative damage to ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Isolating Nasal Olfactory Stem Cells from Rodents or Humans

בידוד באף גזע תאים חוש הריח של מכרסמים או בני אדם

The olfactory mucosa, located in the nasal cavity, is in charge of detecting odours. It is also the only nervous tissue that is exposed to the external ...

A Fully Automated and Highly Versatile System for Testing Multi-cognitive Functions and Recording Neuronal Activities in Rodents

מערכת אוטומטי לחלוטין תכליתי מאוד עבור בדיקת ריבוי פונקציות קוגניטיביות ורישום פעילות עצבית במכרסמים

We have developed a fully automated system for operant behavior testing and neuronal activity recording by which multiple cognitive brain functions can be ...

A Method to Make a Craniotomy on the Ventral Skull of Neonate Rodents

שיטה להרוויח Craniotomy על גולגולת הגחון של מכרסמים ילוד

The use of a craniotomy for in vivo experiments provides an opportunity to investigate the dynamics of diverse cellular processes in the mammalian brain ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

עירוי stereotaxic של Oligomeric עמילואיד-ביתא להיפוקמפוס העכבר

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Microelectrode Guided Implantation of Electrodes into the Subthalamic Nucleus of Rats for Long-term Deep Brain Stimulation

Microelectrode מודרך השרשה של אלקטרודות לתוך גרעין Subthalamic של חולדות לטווח ארוך עמוק גירוי המוח

Deep brain stimulation (DBS) is a widely used and effective therapy for several neurologic disorders, such as idiopathic Parkinson&#8217;s disease, ...

Hydraulic Extrusion of the Spinal Cord and Isolation of Dorsal Root Ganglia in Rodents

שחול הידראולי של קורד ובידוד השדרה של גרעיני שורש הגבה במכרסמים

Traditionally, the spinal cord is isolated by laminectomy, i.e. by breaking open the spinal vertebrae one at a time. This is both time consuming and may ...

Operant Protocols for Assessing the Cost-benefit Analysis During Reinforced Decision Making by Rodents

פרוטוקולים operant להערכת ניתוח עלות-תועלת במהלך קבלת החלטות מחוזק על ידי מכרסמים

Reinforcement-guided decision making is the ability to choose between competing courses of action based on the relative value of the benefits and their ...

The Power of Interstimulus Interval for the Assessment of Temporal Processing in Rodents

הכוח של מרווח Interstimulus להערכה של זמני עיבוד בחולדות

Temporal processing deficits have been implicated as a potential elemental dimension of higher-level cognitive processes, commonly observed in ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

הזרקת דם ישירה כפולה לתוך מגנה צ'יסטרנה כודל של דימום Subarachnoid

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Direct Cannula Implantation in the Cisterna Magna of Pigs

השתלת צינורית ישירה ב"ציסטרנה מגנה של חזירים"

The glymphatic system is a waste clearance system in the brain that relies on the flow of cerebrospinal fluid (CSF) in astrocyte-bound perivascular spaces ...