Name: ex utero electroporation and organotypic slice cultures of embryonic mouse brains for live-imaging of migrating gabaergic interneurons
Uploaded: 2018-04-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Cultures of Embryonic Mouse Brains for Live-Imaging of Migrating GABAergic Interneurons at JoVE.com

Эта работа была поддержана операционной гранты от Фонда Savoy и лечения эпилепсии Фонда и оборудованием гранты от Канадского фонда для инноваций E.R (Конфокальный микроскоп) и G.H (вращение диска конфокального микроскопа). Е.р. получает премию карьеры от Fonds de recherche дю Квебек-Santé (FRQ-S; Премия Clinician-Scientist) также, как от канадской институтов для медицинских исследований (КНИИЗ; Молодой следователь Award). Г.Х. — старший ученый FRQ-S. ЕГ.Ф является получателем Steriade-Savoy докторантура награду от Фонда Savoy, Чу Сент-Жюстин фонд докторантура премии и премии докторантура FRQ-S, в партнерстве с Фондом звёзд. Этот проект стал возможным мозга Канады через Фонд исследований мозга Канады, при финансовой поддержке Министерства здравоохранения Канады, присуждена л.е.

Все эксперименты с участием животных были одобрены Comité Institutionnel des Bonnes сходной avec les Animaux исследований (CIBPAR) в исследовательском центре Сент-Жюстин Чу и были проведены в соответствии с канадского Совета по животных уход Руководство Уход и использование экспериментальных животных (ред. 2)....

В этой статье мы предоставляем надежный метод для выполнения ex utero электропорации МГЕ мыши на e13.5 и для поколения organotypic культурах эмбриональных мозга фрагментов. Хотя в vitro методы, такие как Пробирная палата Бойден, сравнительно легко выполнить и могут быть использованы для оц...

Корковых интернейронов ГАМК (INs) разнообразны в отношении их биохимических свойств, физиологические свойства и связи, и они посредником различные функции в зрелых сетей1,2,3 ,4,5. Спецификация различные подтипы корковых INs жестко регулируется через генетических каскадов, которые были широко изучены1,2. Большинство (70%) корковых ГАМК INs происходят из прародителей в медиальной Ганглиозный возвышение (MGE), вентрально расположен эмбриональной структурой и необходимо перенести на относительно большие расстояния до корковых пластина1, 2 , 6. Хотя кортикального слоя пирамидальных клеток мигрировать радиально от желудочков зоны (VZ) коры пластины вдоль радиальной глии эшафот, тангенциальная миграции модулей, которые не присоединены к такой леску, требует целого ряда внутренних и внешние сигналы для привлечения мигрирующих нейронов к пластину кортикального слоя, при этом направляя их от не корковых структур2,,78. После выхода клеточного цикла, модули отталкиваются от MGE от химио отвратительный подсказки, выраженных в VZ MGE, который вызывает тангенциальная миграции к корковых плита9,10. Перенос INs избежать стриатума с помощью различных отталкивающим подсказки11 и, после достижения корковых пластины, они с тангенциальным переключиться в режим радиальная миграция и добраться до их окончательного ламинарные позиции, частично в ответ на сигналы от пирамидальной клетки12 и других клеточных популяций13. Миграция модули, что касается других нейрональных популяций, включает в себя различные динамические морфологических изменений разрешить фактическое движение нейрона. Этот так называемый нейронов локомоции характеризуется повторяющихся циклов трех последовательных этапов: удлинение ведущих процесс, активно антероградная движения ядра (nucleokinesis) и Ретракция конечные процесса14. В миграции регулируется многочисленные внутренние и внешние сигналы, которые управляют ветвления и активного ремоделирования ведущих процесса для руководства INs в правильном направлении, определение ориентации и скорость миграции14,15 ,16.
В последние годы1,2,7,,1718,19,20, широко изучены факторы, регулирующие корковых в миграции и нарушения в некоторых из этих молекулярных субъектов было постулировано приведет к нервной расстройств, например педиатрических огнеупорных эпилепсии или аутизм спектра расстройства1,2,21, 22 , 23 , 24. Таким образом, чтобы существенно продвинуть вперед нашу способность изучать этот динамичный процесс, как ранее рассмотренных25проводилась разработки различных подходов in vitro и in vivo . В vitro методы, включая Бойден Пробирной палаты и полоса выбор Assay, обеспечивают быстрый и наиболее воспроизводимого средства оценки требования и клеток автономная воздействия конкретных генов и белков во время миграции нейронов, без влияния других факторов25. Эти анализы являются особенно полезными, когда в сочетании с живой изображений8,,2627. С помощью этих методов модули легко извлекаются из e13.5 МГЕ и изолированные ферментативные и механических диссоциации, после чего можно исследовать различные сигнальные пути и указания подсказки, как показано ранее8,28 . Однако эти анализы проходят в искусственных внеклеточного матрикса в отсутствие трехмерные ткани архитектуры, которые могут изменить нейрональных поведение и ячейки свойства, потенциально влияющие ячейки миграции и/или выживание25. Чтобы обойти эти ограничения, ex vivo МГЕ эксплантов были разработаны как альтернативную инструмент для количественной оценки динамических морфологические изменения, происходящие во время миграции, а также такие параметры, как скорость и ориентации в14, 29. Создание МГЕ эксплантов является относительно простым и была широко описано в других разделах30. Это предполагает покрытие небольшой экстракт МГЕ на монослое смешанных корковых клеток или в смеси matrigel и коллагена в присутствии привлекательным или отталкивающего подсказки25, хотя последние являются Факультативным31. МГЕ эксплантов позволяют высоким разрешением изображений малонаселенных помеченных клеток, упрощение исследования внутриклеточных процессов, таких как цитоскелета реконструкции в процессе ведущих ветвления, как показано ранее32,33 ,34 и в настоящем исследовании. МГЕ эксплантов успешно использовались для оценки динамических цитоскелета изменения во время миграции в 2D среде, например после конкретных фармакологических или эозинофилов манипуляций (см., например, Тиленс et al. 201633) . Однако с этим подходом, INs мигрируют в пределах искусственного матрицы, и это может привести к изменению в поведении и воспроизводимость и значимость экспериментальные результаты.
Напротив в утробе матери электропорации позволяет генетические манипуляции INs в их родной среде и широко используемый метод, чтобы быстро и эффективно оценить влияние выгоды и потери функции гена в обход ограничений дорогостоящей и трудоемкой Выбивное и стук в стратегии25,35. В утробе матери электропорации может быть смещенной в отношении в прародителей, используя ячейки типа конкретных промоутеров и позиционирование электрода к вентромедиального структур, в том числе МГЕ36. Кроме того в утробе матери электропорации позволяет своевременно выражение экспериментальных конструкций в течение 1-2 дней, по сравнению с 7-10 дней, необходимых для конструкции выражения с использованием вирусных векторов25. Однако в утробе матери электропорации из в прародителями клонит быть малой мощности. Действительно, хотя пирамидальной клетке прародителями, расположенных в зоне спинной желудочков может эффективно transfected в утробе матери электропорация, ориентации более вентрально расположен структур, таких как MGE, более технически сложных, особенно в небольших e13.5 эмбрионы и высокий уровень эмбриональных летальность далее уменьшает экспериментальная урожайность25.
Чтобы обойти некоторые технические ограничения, связанные с in vitro МГЕ explant экспериментов и в естественных условиях в утробе электропорация, ex vivo organotypic срез культур были развитыми8,37, 38,39. Мозг organotypic срез культур предложение условия преимущество передразнивать в естественных условиях , будучи менее дорогостоящим и длительным, чем формирование животных моделей25. Действительно эти препараты позволяют легко доступ к MGE, наряду с конкретными визуализации INs и могут быть объединены с фокуса электропорации расследовать конкретные молекулярные пути в Син, перенос в более физиологических окружающей среды8 , 39 , 40 , 41. Поэтому мы оптимизировали подход для organotypic культур38, который мы в сочетании с экс-utero электропорации и time-lapse конфокальная томография, для дальнейшей оценки происходящих морфологических и динамичный процесс во время тангенциального миграции МГЕ-модулей. Настоящий Протокол была адаптирована и оптимизирована от других, которые использовали для изучения миграции пирамидальных клеток42,43 бывших внутриутробно или в утробе матери мозга электропорации и organotypic срез культур и корковых INs36,,3944. В частности обезглавлен эмбрионов мыши и MGE является electroporated ex vivo после внутрижелудочкового введения экспериментальной плазмиды, позволяя более эффективной и точной ориентации МГЕ прародителей чем то, что может быть достигнуто с в утробе матери электропорации. Затем извлекаются мозги и секционного корональных ломтиками весь мозг, которые могут быть культивировали на несколько дней, таким образом позволяя непрерывное отслеживание и изображений из transfected INs. Этот подход обычно этикетки вскользь миграция модули 5-20 на срез мозга, свести к минимуму количество экспериментальных итераций, необходимых для достижения статистической значимости, при маркировке достаточно редкий нейронов населения для обеспечения легко разделение отдельных нейронов для реконструкции и тонкой морфологической оценки. Кроме того по сравнению с МГЕ эксплантов, organotypic культур убедитесь, что миграция модули подвергаются более естественной окружающей среды, включая локально выделяется chemokines и входы от таламуса афферентов. Таким образом, этот подход является хорошо подходит для количественного определения направленности и пути миграции, принятых transfected INs, предлагая достаточно анатомические детали, чтобы позволить характеристика тонкой динамических процессов, таких как ведущий процесс ветвления, nucleokinesis и завершающие процесс отзыва.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Neurobasal Medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>21103049</td>
			<td>Commercially available neuron-specific culture medium. Complete formulation available on this website: https://www.thermofisher.com/ca/en/home/technical-resources/media-formulation.251.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 serum-free supplement</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>17504044</td>
			<td>50X Serum-free neuron specific supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL sterile centrifuge tubes</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s (1X) L-15 Medium (+ L-Glutamine)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11415064</td>
			<td>Commercially available neural-based culture medium supplemented with amino acids, vitamins and inorganic salts. Complete formulation available on the distributor&#39;s website&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>25030-081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum, heat inactivated</td>
			<td>Millipore-Sigma</td>
			<td>H1138-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurocell supplement N-2 100X</td>
			<td>Wisent</td>
			<td>305-016</td>
			<td>Botteinstein&#39;s N-2 Formulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VWR Square PETG Media Bottles 125 mL</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89132-062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Class II Type A Biosafety Cabinet</td>
			<td>Nuaire</td>
			<td>NU-540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>SUC700.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>SOD001.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>S233-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D+ glucose</td>
			<td>Millipore-Sigma</td>
			<td>G7528-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate monobasic anhydrous</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>SPM400.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate&#160;</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>C79-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate heptahydrate</td>
			<td>BiosShop</td>
			<td>MAG522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agarose</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>AGA002.500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL sterile centrifuge tubes</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL centrifuge tubes</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>72.690.001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P-97 Flaming/Brown Micropipette puller</td>
			<td>Sutter Instruments Co.</td>
			<td>Model P-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.4 mm I.D. x 75 mm Capillary Tube</td>
			<td>Drummond scientific</td>
			<td>1-000-800/12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>E193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson &#38; Co</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral Oil (heavy)</td>
			<td>Rougier Pharma</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WPI Swiss Tweezers #5</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>504511</td>
			<td>11 cm, straight, 0.06x0.07mm tips, antimagnetic. You will need 2 of these.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WPI Swiss Tweezers #7</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>504504</td>
			<td>11.5 cm, 0.18x0.2mm, curved tips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HTC Tweezers</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>504617</td>
			<td>11 cm, Straight, flat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating scissors</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501225</td>
			<td>16 cm, Sharp/sharp, straight. You will need 3 of these.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dressing Forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501217</td>
			<td>12.5 cm, straight, serrated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>504478</td>
			<td>10.2 cm, full curve, serrated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey Tissue Forceps</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501996</td>
			<td>15 cm, 45&#176; angle, Delicate Jaw, 1.5mm wide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbran Microspatula with rounded ends</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>21-401-5</td>
			<td>You will need 2 of these.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanoject II Auto-Nanoliter Injector</td>
			<td>Drummond scientific</td>
			<td>3-000-204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TC Dish 60, Standard</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.3901</td>
			<td>60-mm dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.1800</td>
			<td>35-mm dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Black Wax</td>
			<td>FisherScientific</td>
			<td>S17432</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipettes&#160;</td>
			<td>Ultident</td>
			<td>170-CTB700-212</td>
			<td>3 mL, small bulb</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Microscope</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>Leica M80</td>
			<td>In replacement to our stereomicroscope which has been discontinued by the manufacturer (StereoMaster from FisherScientific)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electro Square Porator</td>
			<td>BTX Harvard Apparatus</td>
			<td>ECM 830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tweezertrodes, Plattinum Plated, 3mm</td>
			<td>BTX Harvard Apparatus</td>
			<td>45-0487</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G 1 1/2</td>
			<td>Becton Dickinson &#38; Co</td>
			<td>305127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica VT1000S Vibrating blade microtome</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>VT1000S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GEM, Single edge razor blade</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>71952-10</td>
			<td>Remove the blunt end before inserting in the blade designated space of the vibratome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#181;-Slide 8 well</td>
			<td>Ibidi</td>
			<td>80827</td>
			<td>Pack of 15</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell cell culture insert</td>
			<td>Millipore-Sigma</td>
			<td>PICM0RG50</td>
			<td>30 mm, hydrophilic PTFE, 0.4 &#181;m pore, pack of 50.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica DMi6000 microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning disk confocal head Ultraview Vox</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volocity 6.0 acquisition software</td>
			<td>Improvision/Perkin Elmer</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LiveCell Stage top incubation system</td>
			<td>Pathology devices</td>
			<td>LC30030</td>
			<td>Provides Temperature, CO2 and humidity control.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP8 confocal microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mCherry-Lifeact-7</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>54491</td>
			<td>Gift from Michael Davidson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green FCF</td>
			<td>Millipore-Sigma</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>25G bottle, certified by the Biological Stain Commission</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex utero electroporation and organotypic slice cultures of embryonic mouse brains for live-imaging of migrating gabaergic interneurons

ГАМК интернейронов (INs) являются важнейшими компонентами нейрональных сетей, которые управляют познания и поведения. Модули, предназначенные для заполнения коры мигрируют касательной от их места происхождения в вентральной конечного мозга (в том числе от медиальной и хвостовой Ганглиозный Высокопреосвященства (MGE, КГЭ)) спинной пластины корковых в ответ на разнообразные внутренние и внешние подсказки. Были разработаны различные методологии годами генетически манипулировать конкретные пути и исследовать, как они регулируют динамических цитоскелета изменения, необходимые для правильного в миграции. В утробе матери электропорации широко применяется для изучения эффекта генов репрессий или гиперэкспрессия в конкретных в подтипы оценивая влияние на морфологию и окончательную позицию. Однако, хотя этот подход легко используется для изменения радиально мигрирующих пирамидных клеток, это более технически сложно при ориентации соц.страх в утробе матери электропорации генерирует низкой урожайностью, учитывая снижение выживаемости потомства при Электропорация проводится перед e14.5, как это принято при изучении МГЕ производные INs. В альтернативный подход МГЕ эксплантов обеспечивают легкий доступ к МГЕ и облегчить изображений генетически модифицированных модулей. Однако в этих эксплантов INs мигрируют в искусственных матрицы, лишенный эндогенного указания подсказки и таламуса входов. Это побудило нас, чтобы оптимизировать метод, где модули можно перенести в более натуралистических окружающей среды, в обход технических проблем в утробе матери подходов. В настоящем документе мы описываем сочетание бывших utero электропорации мозги эмбриона мыши следуют organotypic срез культур легко отслеживать, изображения и реконструировать генетически модифицированных модулей мигрируют вдоль их естественные пути в ответ на эндогенные подсказки. Этот подход позволяет для количественной оценки динамических аспектов миграции с покадровой конфокальная томография, а также подробный анализ различных морфологических параметров, с помощью нейронов реконструкций на фиксированной полученных ткани.

В этом разделе мы предоставляем представитель результаты, полученные после бывших utero электропорации управления плазмида или экспериментальной плазмида, ориентация ген интереса, в MGE зародышей мыши e13.5 следуют organotypic срез культур инкубировали при 37 ° C в течение 48...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Cultures of Embryonic Mouse Brains for Live-Imaging of Migrating GABAergic Interneurons at JoVE.com

Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Cultures of Embryonic Mouse Brains for Live-Imaging of Migrating GABAergic Interneurons

Ex-Utero Электропорация и Organotypic срез культуры мозги эмбриона мыши Live-образов миграции интернейронов ГАМК

Здесь мы предлагаем недорогой и надежный метод для создания electroporated мозга organotypic срез культур из эмбрионов мыши подходит для confocal микроскопии и жить изображений техники.

GABAergic interneurons (INs) are critical components of neuronal networks that drive cognition and behavior. INs destined to populate the cortex migrate ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Cultures of Embryonic Mouse Brains for Live-Imaging of Migrating GABAergic Interneurons

Organotypic Hippocampal Slice Cultures

Органотипической гиппокампа культур фрагмент

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Mouse in Utero Electroporation: Controlled Spatiotemporal Gene Transfection

Мышь В утробе матери Электропорация: Пространственно-временные Контролируемые трансфекции генов

In order to understand the function of genes expressed in specific region of the developing brain, including signaling molecules and axon guidance ...

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Organotypic Slice Cultures of Embryonic Ventral Midbrain: A System to Study Dopaminergic Neuronal Development in vitro

Органотипической культур Кусочек Эмбриональные Брюшной мозга: системы по изучению дофаминергической нейронов развития В пробирке</em

The  mouse is an excellent model organism to study mammalian brain development due  to the abundance of molecular and genetic data. However, the ...

The Analysis of Purkinje Cell Dendritic Morphology in Organotypic Slice Cultures

Анализ Пуркинье морфологии дендритных клеток в органотипической культур Slice

Purkinje cells are an attractive model system for studying dendritic development, because they have an impressive dendritic tree which is strictly ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Расширение эмбриональных и взрослых нервных стволовых клеток путем<em&gt; В Utero</em&gt; Электропорации или вирусных Стереотаксическая инъекций

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Live Imaging of Mitosis in the Developing Mouse Embryonic Cortex

Онлайн Визуализация Митоз в развивающихся мышиных эмбриональных Cortex

Although of short duration, mitosis is a complex and dynamic multi-step process fundamental for development of organs including the brain. In the ...

Subtype-selective Electroporation of Cortical Interneurons

Класс-селективный Электропорация корковых интернейронов

The study of central nervous system (CNS) maturation relies on genetic targeting of neuronal populations. However, the task of restricting the expression ...

Organotypic Slice Cultures to Study Oligodendrocyte Dynamics and Myelination

Органотипической срез культуры для изучения олигодендроцит Динамика и миелинизации

NG2 expressing cells (polydendrocytes, oligodendrocyte precursor cells) are the fourth major glial cell population in the central nervous system. During ...

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Time-lapse Confocal Imaging of Migrating Neurons in Organotypic Slice Culture of Embryonic Mouse Brain Using In Utero Electroporation

Время-замедление конфокальной визуализации мигрирующих нейронов в органотипической культуре срезов мозга эмбриональной мыши с использованием<em&gt; В Утеро</em&gt; Электротовары

In utero electroporation is a rapid and powerful approach to study the process of radial migration in the cerebral cortex of developing mouse embryos. It ...

Preparation and Immunostaining of Myelinating Organotypic Cerebellar Slice Cultures

Подготовка и иммуноокрашивания Myelinating Organotypic мозжечка ломтик культур

In the nervous system, myelin is a complex membrane structure generated by myelinating glial cells, which ensheathes axons and facilitates fast electrical ...