Name: intraportal transplantation of pancreatic islets in mouse model
Uploaded: 2018-05-05T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intraportal Transplantation of Pancreatic Islets in Mouse Model at JoVE.com

Wij willen erkennen Gundula Hertl voor haar steun.

Alle procedures in dit protocol zijn goedgekeurd door de Duitse dier welzijn wet en richtsnoeren. Overweeg het gebruik van 10 naar 12-weken oude NMRI naakt muizen en C57Bl/6 muizen (donor: oude vrouw; ontvanger: mannelijke) tijdens de experimenten. Gebruik NMRI naakt muizen voor islet isolatie. Houd de muizen onder welbepaalde omstandigheden lokale dier faciliteit reglementeringen.
1. de inductie van Diabetes door Streptozotocin
<ol><li>Op dag -4, meet u het gewicht van het lichaam van 10 to...

<ol>
	<li>McCall, M., Shapiro, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+islet+transplantation.">Update on islet transplantation.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine. 2 (7), a007823 (2012).</li><li>Shapiro, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+transplantation+in+seven+patients+with+type+1+diabetes+mellitus+using+a+glucocorticoid-free+immunosuppressive+regimen.">Islet transplantation in seven patients with type 1 diabetes mellitus using a glucocorticoid-free immunosuppressive regimen.</a> New England Journal of Medicine. 343 (4), 230-238 (2000).</li><li>Cantarelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+marrow+as+an+alternative+site+for+islet+transplantation.">Bone marrow as an alternative site for islet transplantation.</a> Blood. 114 (20), 4566-4574 (2009).</li><li>Echeverri, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoscopic+gastric+submucosal+transplantation+of+islets+(ENDO-STI):+technique+and+initial+results+in+diabetic+pigs.">Endoscopic gastric submucosal transplantation of islets (ENDO-STI): technique and initial results in diabetic pigs.</a> American Journal of Transplantation. 9 (11), 2485-2496 (2009).</li><li>Korsgren, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimising+islet+engraftment+is+critical+for+successful+clinical+islet+transplantation.">Optimising islet engraftment is critical for successful clinical islet transplantation.</a> Diabetologia. 51 (2), 227-232 (2008).</li><li>Merani, S., Toso, C., Emamaullee, J., Shapiro, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimal+implantation+site+for+pancreatic+islet+transplantation.">Optimal implantation site for pancreatic islet transplantation.</a> British Journal of Surgery. 95 (12), 1449-1461 (2008).</li><li>Lingwal, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+gelatinase+B+(matrix+metalloprotease-9)+activity+reduces+cellular+inflammation+and+restores+function+of+transplanted+pancreatic+islets.">Inhibition of gelatinase B (matrix metalloprotease-9) activity reduces cellular inflammation and restores function of transplanted pancreatic islets.</a> Diabetes. 61 (8), 2045-2053 (2012).</li><li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+intraportal+islet+transplantation+outcome+by+systemic+IKK-beta+inhibition:+NF-kappaB+activity+in+pancreatic+islets+depends+on+oxygen+availability.">Improved intraportal islet transplantation outcome by systemic IKK-beta inhibition: NF-kappaB activity in pancreatic islets depends on oxygen availability.</a> American Journal of Transplantation. 11 (2), 215-224 (2011).</li><li>Wang, Y., Wang, T., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three+aspects+are+critical+for+carrying+out+intraportal+islet+transplants+successfully+in+a+diabetes+mouse+model.">Three aspects are critical for carrying out intraportal islet transplants successfully in a diabetes mouse model.</a> Experimental and Clinical Transplantation. 10 (3), 302-304 (2012).</li><li>Neuman, J. C., Truchan, N. A., Joseph, J. W., Kimple, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+mouse+pancreatic+islet+isolation+and+intracellular+cAMP+determination.">A method for mouse pancreatic islet isolation and intracellular cAMP determination.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), e50374 (2014).</li><li>Zmuda, E. J., Powell, C. A., Hai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+murine+islet+isolation+and+subcapsular+kidney+transplantation.">A method for murine islet isolation and subcapsular kidney transplantation.</a> Journal of Visualized Experiments. (50), (2011).</li><li>Rother, K. I., Harlan, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+facing+islet+transplantation+for+the+treatment+of+type+1+diabetes+mellitus.">Challenges facing islet transplantation for the treatment of type 1 diabetes mellitus.</a> Journal of Clinical Investigation. 114 (7), 877-883 (2004).</li><li>Su, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+islets+are+essential+for+successful+intraportal+transplantation+in+a+diabetes+mouse+model.">Small islets are essential for successful intraportal transplantation in a diabetes mouse model.</a> Scandinavian Journal of Immunology. 72 (6), 504-510 (2010).</li><li>Rekittke, N. E., Ang, M., Rawat, D., Khatri, R., Linn, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regenerative+Therapy+of+Type+1+Diabetes+Mellitus:+From+Pancreatic+Islet+Transplantation+to+Mesenchymal+Stem+Cells.">Regenerative Therapy of Type 1 Diabetes Mellitus: From Pancreatic Islet Transplantation to Mesenchymal Stem Cells.</a> Stem Cells International. 2016, 22 (2016).</li></ol>

In deze studie, is de intraportal route van islet transplantatie onderzocht. Dit protocol is zeer efficiënt in het verlichten van diabetische stress en biedt een uitgebreide mogelijkheid om te verkennen islet transplantatie studies. Dit protocol bevestigt dat ongeveer 350 lymfkliertest eilandjes geschikt zijn voor het omkeren van de hyperglycemic staat. Bovendien, geen van de muizen overleed tijdens de procedure, en glycemische controle werd bereikt in alle geadresseerden. Lichaam gewicht en bloed glucoseniveaus waren r...

Islet Transplantatie is een veelbelovende aanpak voor de behandeling van type 1 diabetes mellitus1. De eerste poging om te brengen een alvleesklier fragment van schapen naar een diabetes patiënt werd uitgevoerd door Watson Williams in 1893. Echter een belangrijke doorbraak in klinische islet transplantatie werd bereikt met de Edmonton-protocol, en daarna, een reeks van nationale programma's waren ontwikkelde2. In het verleden verschillende sites, zoals het beenmerg, omental etui, intramusculaire regio, mucosal maagzijde, milt en nieren capsule, in preklinische modellen werden onderzocht, maar de portal veneuze systeem wordt beschouwd als een van de geschikte en effectieve site voor klinische programma's3,4,5,6.
Exogene toediening van insuline kan worden vervangen door islet infuus in de ader van de portal. Dit wordt beschouwd als een voorkeur site omdat de zuurstoftoevoer vergelijkbaar met die in de inheemse alvleesklier dankzij de ligging stroomafwaarts van de samenvloeiing van de portal slagader en ader is. Bovendien, er is een grote oppervlakte, zodat de driedimensionale structuur van de eilandjes kan worden behouden, en vascularisatie zou vergemakkelijkt5. In een ontvangende diabetische muis, 2.000 mens of varkens islet equivalenten of 350 muis zijn eilandjes voldoende om het omkeren van de7,hyperglycemic staat8. Euglycemic niveaus werden gemeld voor 15 dagen in de ontvangende muismodel van XENOGENECELLEN eilandjes en in de allogene muis-naar-mouse model en voor meer dan 120 dagen in de syngeneic transplantatie van de muis-tot-muis.
Factoren die relevant zijn voor de werkzaamheid van islet transplantatie via portal vein zijn passende anesthesie, methode van lekke band en hemostase9. Verdoving kan worden opgewekt door inademing (5% Isofluraan) of injectie (ketamine, xylazine of pentobarbital), en de stoffen worden vaak gecombineerd. Voor controle van de diepte en tijd van de verdoving, moet aandacht worden besteed aan de staat van de muis, zoals de kleur van de slijmvliezen, ooglid, hoornvlies reflex, ademhaling en lichaamstemperatuur. Het is belangrijk om ervoor te zorgen dat het dier niet worstelt en dat het de operatie overleeft. De temperatuur kan worden gehandhaafd door verwarming van de verschillende apparaten, zoals verwarmingskussens, rode lampen, etc. A warme thermische plaat is gebruikt om een temperatuur van 25-30 ° C tussen de muis en de operatie tafel, waardoor het voorkomen van onderkoeling. De doseringen van de verdoving zijn belangrijk, omdat ze allemaal door de lever worden gemetaboliseerd en hepatische functie Transient worden door de infusie van de schorsing van het eilandje. ontregelde kan De ideale punctie punt voor de portal-ader is de positie tussen de eerste en tweede zijrivier ader.
De uitkomst van de transplantatie, beïnvloeden het aantal eilandjes en het beoogde geïnjecteerde volume ook zoals een overmatig volume de schuifspanning verhogen kan. Een volume 0,2 mL is geschikt geacht voor islet transplantatie in de ader van de portal. De puncturing wond (26-gauge naald) induceert bloeden uit de ader van de portal, die moet worden gestopt in een tijdige en effectieve manier. Steriel gaas of een vinger kan worden toegepast met minimale druk op de site van de lekke band voor ongeveer 6 min om te stoppen met het bloeden. Genomen samen, portal islet injectie is effectief en biedt van verordening ten opzichte van de niveaus van de glucose van het bloed in chemisch geïnduceerde diabetische Muismodellen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="600">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td>C57Bl/6 mice&#160;</td>
			<td>Charles River (Sulzfeld, Germany)</td>
			<td></td>
			<td>(10-12 weeks)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td>BALB/c mice</td>
			<td>Charles River (Sulzfeld, Germany)</td>
			<td></td>
			<td>(10-12 weeks)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td>NMRI nude mice</td>
			<td>Charles River (Sulzfeld, Germany)</td>
			<td></td>
			<td>(10-12 weeks)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ketamine</td>
			<td>Bela-pharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Xylazine</td>
			<td>CEVA TIERGESUNDHEIT GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Syringe, 23G and 26G needle</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Petri Dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>303800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">NaCl</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>351007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterile Gauze</td>
			<td>Fuhrmann</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Shaking Water bath</td>
			<td>Kotterman</td>
			<td>1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Scissors</td>
			<td>Braun</td>
			<td>1501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Glucose Meter&#160;</td>
			<td>One Touch</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Warm Thermal Plate</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;">Braunol (povidone-iodide solution)</td>
			<td>B.Braun Melsungen AG</td>
			<td>3864154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Liposic Edo - Sprinkled Ointment (eye ointment)</td>
			<td colspan="2">Dr. G Mann Chem.-Pharm.&#160; GmbH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Incubator</td>
			<td>Fa. Roth</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;">Flow Bench</td>
			<td>Herdus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ficoll</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>10771</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">5-0 Silk Suture Vicryl</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td>(7.5 *1.75mm)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Michel Clamps (clips)</td>
			<td>Aesculap&#160;</td>
			<td>BN507R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">P/FCS Solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21180-021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">TCM-199 (10x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21180-021</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">FCS</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>S1810-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">HEPES (1 M)</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>L 1613</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Gentamycin</td>
			<td>Ratiopharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ciprofloxacin</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Hank&#39;s Solution</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14060-040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Collagenase</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11213865001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Streptozotocin</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>572204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">OPSITE-spray (wound healer)</td>
			<td>Smith and nephew</td>
			<td>66004978</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;">Reugular food</td>
			<td>Altromin</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Head light LED 16042 (magnifying glass)</td>
			<td>Eschenbach</td>
			<td>16042</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rat anti-mouse PECAM-1(CD31) monoclonal primary antibody</td>
			<td>Millipore, Chemicon</td>
			<td>CBL1337</td>
			<td>Dilution (1:100)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Donkey anti-rat secondary antibody</td>
			<td>Dianova</td>
			<td>712095153</td>
			<td>Dilution (1:400)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Polyclonal guinea pig anti-insulin primay antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>A0564</td>
			<td>Dilution (1:500)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Donkey anti-guinea pig secondary antibody</td>
			<td>Dianova</td>
			<td>706-259-148</td>
			<td>Dilution (1:400)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intraportal transplantation of pancreatic islets in mouse model

Alvleesklier islet transplantatie te verminderen van hyperglycemie is zeer succesvol in knaagdieren met chemisch geïnduceerde diabetes. De meest voorkomende transplantatie site in experimentele islet transplantatie is de capsule van de nier. Echter zoals minder is gekend over de interactie van de alvleesklier eilandjes met bloedbestanddelen, zinvol het ook om gebruik te maken van de aanpak van de portal vein in experimentele islet transplantatie.
Dit protocol toont een intraportal islet transplantatie techniek in NMRI naakt muizen. Streptozotocin (180 mg/kg) is intraperitoneally geïnjecteerd om het induceren van hyperglycemie in ontvangende muizen. Ze worden beschouwd als diabeticus op een niet-vasten bloedglucose niveau groter is dan 20 mmol/L. Een dag voorafgaand aan de transplantatie, zijn muis alvleesklier eilandjes geïsoleerd uit de alvleesklier donor door collagenase spijsvertering; minimaal 350 eilandjes worden gebruikt per diabetische ontvanger. Afhankelijk van de opbrengst van de isolatie islet, worden twee of meer donor muizen gebruikt per ontvanger. Na overnachting cultuur bij 37 ° C, zijn eilandjes in de ontvangende lever via de portal ader toegediend. Na de operatie, de muizen zijn beschermd in rode Makrolon huizen en waargenomen tot wakker zijn. Dit protocol behoudt een glycemische controle voor 120 dagen in syngeneic muizen en 15 dagen bij allogene muizen.

De bekwaamheid van de getransplanteerde eilandjes werd in chemisch geïnduceerde diabetesmuizen bestudeerd. De eilandjes zijn getransplanteerd via de portal veneuze systeem in diabetesmuizen model. De donor-ontvanger-verhouding is 2:1. In de syngeneic muismodel, werden twee donor muizen gebruikt om het verkrijgen van 350 eilandjes. De eilandjes werden vervolgens in diabetesmuizen getransplanteerd. Een afname van de bloedglucose niveau werd waargenomen op dag 1 na de transplantatie, sugger...

Watch this Scientific Journal Video about Intraportal Transplantation of Pancreatic Islets in Mouse Model at JoVE.com

Intraportal Transplantation of Pancreatic Islets in Mouse Model

Alvleesklier islet transplantatie is een manier om normoglycemia bij type 1 diabetes. Dit artikel richt zich op de transplantatie-techniek via de intraportal route om normale glucoseniveaus in diabetesmuizen te handhaven.

Intraportal transplantatie van de alvleesklier eilandjes in Mouse Model

Pancreatic islet transplantation to reduce hyperglycemia is highly successful in rodents with chemically-induced diabetes. The most common transplantation ...

I'm Thomas Linn, principle investigator of the Diabetes Research Group at Justus Liebig University, Giessen, Germany. Pancreatic islet transplantation is a treatment for type-1 diabetes mellitus. Experimental islet transplantation is performed to the kidney capsule, while clinical programs prefer the intra-portal route.Therefore, we believe that more research on intra-portal islet transplantation is needed in preclinical models. For example, islets sites exposed to blood, as the transplantation site is intravascular. Moreover, the microsurgery technique needs some experience.For example, after the injection of the portal vein, bleeding can occur, or there may be issues with anesthesia or with the maintenance of the bodyweight of the recipient mouse. Therefore, we think that visual explanation of the procedure is crucial. This video focuses on the intra-portal route of islet transplantation.To achieve normal glycemia in diabetic mice, it can be used for syngeneic and allogenic transplantation in black mice, but also in syngeneic models in nude mice recipients. Remove the isolated islets from the incubator, and place them under a flow bench. Center the islets with a circular swinging motion of the petri dish.Fill 100-microliter medium in one-ml syringe with the help of blue needle. Then add 350 islets in 300 microliter of Hank's Solution. Keep the syringe in a vertical position to allow the islets to settle.Decrease the volume to 50 microliter. Replace the blue needle with the brown needle. To the same syringe add 150 microliter of density-gradient medium to the top, to reach to the final volume of 200 microliter in the syringe.Avoid the air bubbles. Keep the syringe in vertical position. Rotate it slightly to avoid the clumping of islets.The islets will settle at the cone of syringe within two to three minutes. After three days of streptozotocin injection, check the blood-glucose level by puncturing the tail vein with the help of handheld glucose meter. Anesthetize the mice with dalzylozine and ketamine by intraperitoneal injection.Place the mice in supine position on warm thermal plate. Check the depth anesthesia by pinching the toe. Clean the skin with skinless infectant.To prevent the eyes from drying, keep them moist with eye ointment. Start with electrotomy by holding the skin with forcep and making a two-to-three-centimeter-long middle incision with scissor. Place a sterile wet gauze around the wound edges to keep it moist.Keep the intestine situs to the left and outside the abdominal cavity. Move the duodenum, and locate the pancreas. Use a finger and thumb to expose the portal vein.Inject the islets in 200 microliter slowly into the portal vein. Apply the pressure with the index finger at the puncture site for six minute to stop the bleeding. Carefully place the intestine situs, peritoneum, and abdominal-muscles layer back into the position.Using forcep, lift the skin, close the muscles incision, and upper-skin layer with absorbable silk suture. Apply a wound-healer. Maintain the body temperature at 37 degrees celsius on warm thermal plate.Observe the mouse until it regains sufficient consciousness. Provide tramadol along with fluid to manage pain. After transplantation of islets, a sudden drop in blood-glucose level was observed on day one, from 23 millimolar per liter to 4.6 millimolar per liter in strepto-induced diabetic mice.Normal glycemia was maintained for up to 121 days. The bodyweight and blood-glucose level roughly followed the same pattern. After the streptozotocin injection and surgery, the bodyweight decreased;from day two onwards it tend to rise towards normal, from 25.3 gram to 29.7 gram.In major-histocompatibility-mismatch mice after islet transplantation, the blood-glucose level dropped to 4.4 millimole per liter, and the normal glycemia observed for up to 10 days. Afterward, it starts to reject. The bodyweight of diabetic mice also follows the similar pattern.In successful engraftment of transplanted pancreatic islets into the liver. In this study, the intra-portal route of islet transplantation is explored. This protocol is highly efficient in relieving diabetic stress, and provide an in-depth opportunity to explore islet transplantation.This protocol confirms that about 350 islets are capable of reversing the hyperglycemic state. Moreover, none of the mice died during the procedure, and the glycemic control was maintained.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Mouse Model of in Utero Transplantation

A Mouse Model of in Utero Transplantation

Een muis model van de In Utero Transplantatie

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus.  For example, in ...

Mouse Model of Surgically-induced Endometriosis by Auto-transplantation of Uterine Tissue

Muismodel van chirurgisch geïnduceerde Endometriose door Auto-transplantatie van baarmoeder weefsel

Endometriosis is a chronic, painful disease whose etiology remains unknown. Furthermore, treatment of endometriosis can require laparoscopic removal of ...

Staining Protocols for Human Pancreatic Islets

Kleuring Protocols for Human pancreatische eilandjes

Estimates of islet area and numbers and endocrine cell composition in the adult human pancreas vary from several hundred thousand to several million and ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Chirurgische ingrepen voor een Rat Model van deelspoelen orthotope levertransplantatie met hepatische arteriële reconstructie

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

Verbeterd protocol voor Laser Microdissection der humane pancreatische eilandjes Van Chirurgische Specimens

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantatie van Pulmonary Valve een muis model van Heterotope Heart Transplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Leprdb Mouse Model of Type 2 Diabetes: Pancreatic Islet Isolation and Live-cell 2-Photon Imaging Of Intact Islets

Leprdb Mouse Model of Type 2 Diabetes: Pancreatic Islet Isolation and Live-cell 2-Photon Imaging Of Intact Islets

LepR<sup&gt; Db</sup&gt; Mouse Model van Type 2 Diabetes: eilandjes van Langerhans Isolatie en live-cell 2-Photon Imaging van intacte Eilandjes

Type 2 diabetes is a chronic disease affecting 382 million people in 2013, and is expected to rise to 592 million by 2035 1. During the past 2 decades, ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

Met behulp van de mouw techniek in een muismodel van aorta transplantatie - een instructie Video

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Muismodel voor Pancreas transplantatie met behulp van een gemodificeerde manchet techniek

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

Cardiopulmonale Bypass in een muismodel: een nieuwe benadering

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...