Name: defined xeno-free and feeder-free culture conditions for the generation of human ipsc-derived retinal cell models
Uploaded: 2018-09-06T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Defined Xeno-free and Feeder-free Culture Conditions for the Generation of Human iPSC-derived Retinal Cell Models at JoVE.com

De auteurs bedank de leden van de Goureau team voor hun inbreng tijdens de opbouw van de hier beschreven methoden en G. Gagliardi, M. Garita voor hun kritische lezing. Dit werk werd gesteund door subsidies van de ANR (GPiPS: ANR-2010-RFCS005; SightREPAIR: ANR-16-CE17-008-02), de vereniging Retina Frankrijk en de technologieoverdracht bedrijf SATT Lutech. Het werd ook uitgevoerd in het kader van de LABEX LIFESENSES (ANR-10-LABX-65) ondersteund door de ANR binnen het Investissements d'Avenir programma (ANR-11-IDEX-0004-02).

Het protocol beschreven in dit document volgt de richtsnoeren van het Institut de la Vision onderzoek ethisch comité. Het Institut de la Vision heeft de manipulatie van menselijk specimen volgens de huidige Franse verordening gekregen. Specimen behandeling volgt patiënt gegevensbescherming overeenkomstig de beginselen van Helsinki, en de nationale regelgevers na de ethische goedkeuring van het "Comité de bescherming des Personnes (CPP) Ile-de-France V".
1. bereiding van de voedingsbodems en d...

<ol>
	<li>Zhao, C., Wang, Q., Temple, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+therapies+for+retinal+diseases:+recapitulating+development+to+replace+degenerated+cells.">Stem cell therapies for retinal diseases: recapitulating development to replace degenerated cells.</a> Development. 144, 1368-1381 (2017).</li><li>Dalkara, D., Goureau, O., Marazova, K., Sahel, J. -. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Let+There+Be+Light:+Gene+and+Cell+Therapy+for+Blindness.">Let There Be Light: Gene and Cell Therapy for Blindness.</a> Human Gene Therapy. 27, 134-147 (2016).</li><li>Wright, L. S., Phillips, M. J., Pinilla, I., Hei, D., Gamm, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+pluripotent+stem+cells+as+custom+therapeutics+for+retinal+repair:+Progress+and+rationale.">Induced pluripotent stem cells as custom therapeutics for retinal repair: Progress and rationale.</a> Experimental Eye Research. 123, 161-172 (2014).</li><li>Leach, L. L., Clegg, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Making+Stem+Cells+Retinal:+Methods+for+Deriving+Retinal+Pigment+Epithelium+and+Implications+for+Patients+with+Ocular+Disease.">Making Stem Cells Retinal: Methods for Deriving Retinal Pigment Epithelium and Implications for Patients with Ocular Disease.</a> Stem Cells. 33, 2363-2373 (2015).</li><li>Gill, K. P., Hewitt, A. W., Davidson, K. C., P&#233;bay, A., Wong, R. C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+Retinal+Ganglion+Cell+Differentiation+From+Pluripotent+Stem+Cells.">Methods of Retinal Ganglion Cell Differentiation From Pluripotent Stem Cells.</a> Translational Vision Science and Technology. 3, 2 (2014).</li><li>Giacalone, J. C., Wiley, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concise+review:+Patient-specific+stem+cells+to+interrogate+inherited+eye+disease.">Concise review: Patient-specific stem cells to interrogate inherited eye disease.</a> STEM CELLS Translational Medicine. 5, 132-140 (2016).</li><li>Nakano, T., Ando, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-formation+of+optic+cups+and+storable+stratified+neural+retina+from+human+ESCs.">Self-formation of optic cups and storable stratified neural retina from human ESCs.</a> Cell Stem Cell. 10, 771-785 (2012).</li><li>Reichman, S., Terray, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+confluent+human+iPS+cells+to+self-forming+neural+retina+and+retinal+pigmented+epithelium.">From confluent human iPS cells to self-forming neural retina and retinal pigmented epithelium.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111, 8518-8523 (2014).</li><li>Meyer, J. S., Howden, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optic+vesicle-like+structures+derived+from+human+pluripotent+stem+cells+facilitate+a+customized+approach+to+retinal+disease+treatment.">Optic vesicle-like structures derived from human pluripotent stem cells facilitate a customized approach to retinal disease treatment.</a> Stem Cells. 29, 1206-1218 (2011).</li><li>Zhong, X., Gutierrez, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+three-dimensional+retinal+tissue+with+functional+photoreceptors+from+human+iPSCs.">Generation of three-dimensional retinal tissue with functional photoreceptors from human iPSCs.</a> Nature Communications. 5, 4047 (2014).</li><li>Mellough, C. B., Collin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IGF-1+Signalling+plays+an+important+role+in+the+formation+of+three+dimensional+laminated+neural+retina+and+other+ocular+structures+from+human+embryonic+stem+cells.">IGF-1 Signalling plays an important role in the formation of three dimensional laminated neural retina and other ocular structures from human embryonic stem cells.</a> Stem Cells. 33, 2416-2430 (2015).</li><li>Gonzalez-Cordero, A., Kruczek, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recapitulation+of+human+retinal+development+from+human+pluripotent+stem+cells+generates+transplantable+populations+of+cone+photoreceptors.">Recapitulation of human retinal development from human pluripotent stem cells generates transplantable populations of cone photoreceptors.</a> Stem Cell Reports. 9, 820-837 (2017).</li><li>Eiraku, M., Takata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-organizing+optic-cup+morphogenesis+in+three-dimensional+culture.">Self-organizing optic-cup morphogenesis in three-dimensional culture.</a> Nature. 472, 51-56 (2011).</li><li>Meyer, J. S., Shearer, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+early+retinal+development+with+human+embryonic+and+induced+pluripotent+stem+cells.">Modeling early retinal development with human embryonic and induced pluripotent stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. , 16698-16703 (2009).</li><li>Reichman, S., Slembrouck, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+storable+retinal+organoids+and+retinal+pigmented+epithelium+from+adherent+human+ips+cells+in+xeno-free+and+feeder-free+conditions.">Generation of storable retinal organoids and retinal pigmented epithelium from adherent human ips cells in xeno-free and feeder-free conditions.</a> Stem Cells. 35, 1176-1188 (2017).</li><li>Chen, G., Gulbranson, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+defined+conditions+for+human+iPSC+derivation+and+culture.">Chemically defined conditions for human iPSC derivation and culture.</a> Nature Methods. 8, 424-429 (2011).</li><li>Croze, R. H., Buchholz, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ROCK+inhibition+extends+passage+of+pluripotent+stem+cell-derived+retinal+pigmented+epithelium.">ROCK inhibition extends passage of pluripotent stem cell-derived retinal pigmented epithelium.</a> Stem Cells Translational Medicine. 3, 1066-1078 (2014).</li><li>Eberle, D., Schubert, S., Postel, K., Corbeil, D., Ader, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+integration+of+transplanted+CD73-positive+photoreceptor+precursors+into+adult+mouse+retina.">Increased integration of transplanted CD73-positive photoreceptor precursors into adult mouse retina.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 52, 6462-6471 (2011).</li></ol>

Dit protocol wordt beschreven hoe RPE cellen en netvlies organoids, met retinale RGCs en researchdieren, van menselijke pluripotente stamcellen in xeno-vrij en feeder-vrij voorwaarden te produceren. Compatibel met het proces van Good Manufacturing Practice (GMP), de methode geteeld hier gepresenteerd staat een grote productie van iPSC-afgeleide netvlies cellen als RPE cellen, RGCs en researchdieren voor de ontwikkeling van stamcel gebaseerde therapieën en drug ontdekking benaderingen voor de toekomstige behandeling van ...

Het netvlies is een integraal onderdeel van het centrale zenuwstelsel (CNS) en heeft een beperkte capaciteit om spontaan regenereren na een traumatisch letsel of ziekten. Daarom, degeneratieve aandoeningen veroorzaken definitieve retinale cel verlies, zoals leeftijdsgebonden Macula Degeneratie (AMD), retinitis pigmentosa (RP), glaucoom en diabetische retinopathie, meestal leiden tot onomkeerbare blindheid. Redden van de ontaarde netvlies is een grote uitdaging waarvoor de stamcel gebaseerde therapieën gericht op het vervangen van de beschadigde of verloren cellen een van de meest beloftevolle benaderingen1,2,3 zijn. Pluripotente stamcellen als menselijke embryonale stamcellen (SER's) cellen of mens-geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) hebben de capaciteit worden uitgebreid voor onbepaalde tijd in cultuur, en ze hebben het potentieel voor de productie van alle celtypes. Vooruitgang in ons begrip van retinale ontwikkeling en de verbetering van de in vitro protocollen voor menselijke iPSC differentiatie hebben geresulteerd in de generatie van retinale organoids7,8,9, 10,11,12. Alle grote netvlies cellen, met inbegrip van retinale peesknoopcellen (RGCs), researchdieren en netvlies gepigmenteerde epitheliale (RPE) cellen, is met succes ligt in gedifferentieerde van menselijke SER's en iPSCs4,5, 6. op basis van de SFEB (serumvrij cultuur van embryoid lichaam-achtige aggregaten) methode ontwikkeld door Eiraku et al. 13, zelf vorming van retinale organoids kan worden verkregen bij de ESC - of iPSC-afgeleide embryoid lichaam-achtige aggregaten in gedefinieerde extracellulaire matrix onderdelen7,10,14. Maar deze protocollen zijn ingewikkeld, vereisen van een groot aantal stappen niet altijd compatibel met de grote productie van cellen voor therapeutische benaderingen of drug screening. Dus, de keuze van de methode voor de productie van menselijke netvlies cellen is kritisch en de methode moet robuust, schaalbaar en efficiënt.
Hier beschrijven we elke stap is gebaseerd op onze eerdere publicatie15, voor een eenvoudige en efficiënte generatie netvlies cellen door retinale organoid zelf vorming van aanhangend menselijke iPSCs gekweekt in een feeder-gratis en xeno-gratis staat. Vanaf routine culturen van aanhangend menselijke iPSCs, vereist dit protocol slechts een eenvoudige opeenvolgende medium wijzigen zodat de generatie van zowel iPS-afgeleide RPE (hiRPE)-cellen en neuroretinal structuren in 4 weken. Na een handmatige isolatie, hiRPE kan worden uitgebreid en de retinale structuren kunnen worden gekweekt als zwevende organoids waar de retinale voorlopercellen zijn bekwaam om te onderscheiden in alle retinale celtypes in een volgorde die consistent is met de mens in vivo retinogenesis. Tot slot, voor onderzoek vooruitgang of klinische vertaling beschrijven we een cryopreservatie methode waardoor de langetermijnopslag van hele netvlies organoids en hiRPE cellen zonder hun fenotypische kenmerken en functionaliteit.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Vitronectin (VTN-N) Recombinant Human Protein, Truncated</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A14700</td>
			<td>Coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTS Vitronectin (VTN-N) Recombinant Human Protein, Truncated</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A27940</td>
			<td>Coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Essential 8 Medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1517001</td>
			<td>medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Essential 6 Medium</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1516401</td>
			<td>medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTS (Cell Therapy Systems) N-2 Supplement</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1370701</td>
			<td>supplement CTS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-2 Supplement (100X)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>17502048</td>
			<td>supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-27 Supplement (50X), serum free</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>17504044</td>
			<td>supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CTS B-27 Supplement, XenoFree</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1486701</td>
			<td>supplement CTS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11320074</td>
			<td>medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-Essential Amino Acids Solution (100X)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11140035</td>
			<td>supplement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15140122</td>
			<td>antibiotic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellStart CTS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1014201</td>
			<td>Matrix CTS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geltrex hESC-Qualified, Ready-To-Use, Reduced Growth Factor Basement Membrane Matrix</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A1569601</td>
			<td>Matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentle Cell Dissociation Reagent</td>
			<td>Stemcell Technologies</td>
			<td>7174</td>
			<td>dissociation solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostem Freezing Media</td>
			<td>clinisciences</td>
			<td>05-710-1D</td>
			<td>Cryopreservation medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibroblast growth factor 2 (FGF2)</td>
			<td>Preprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>FGF2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibroblast growth factor 2 (FGF2) animal free</td>
			<td>Preprotech</td>
			<td>AF-100-18B</td>
			<td>FGF2 Xeno free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AGANI needle 23G</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>AN*2332R1</td>
			<td>Needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 25 cm&#178; Tissue Culture Treated</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353109</td>
			<td>T-25 cm&#178;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 well plate Tissue Culture Treated</td>
			<td>Costar</td>
			<td>3526</td>
			<td>24-well plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 well plate Tissue Culture Treated</td>
			<td>Costar</td>
			<td>3516</td>
			<td>6-well plate</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

defined xeno-free and feeder-free culture conditions for the generation of human ipsc-derived retinal cell models

De productie van gespecialiseerde cellen uit pluripotente stamcellen biedt een krachtig hulpmiddel voor de ontwikkeling van nieuwe benaderingen voor regeneratieve geneeskunde. Het gebruik van mens-geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSCs) is met name aantrekkelijk voor neurodegeneratieve ziekte studies, met inbegrip van retinale dystrophie, waar retinale cel iPSC-afgeleide modellen markeert een belangrijke stap voorwaarts te begrijpen en bestrijden van blindheid. In deze paper beschrijven we een eenvoudige en schaalbare protocol to generate, oudere, and cryopreserve retinale organoids. Op basis van middellange veranderende, het belangrijkste voordeel van deze methode is om te voorkomen dat meerdere en tijdrovende stappen vereist vaak een begeleide differentiatie van iPSCs. Het nabootsen van de vroege fasen van retinale ontwikkeling door opeenvolgende wijzigingen van gedefinieerde media op aanhangend menselijke iPSC culturen, dit protocol kunt gelijktijdige opwekking van zelf vorming neuroretinal structuren en netvlies gepigmenteerde epitheliale (RPE) cellen in een reproduceerbaar en efficiënte wijze in 4 weken. Deze structuren met retinal voorlopercellen (RPC's) kunnen gemakkelijk geïsoleerd voor verdere rijping in een zwevende cultuur voorwaarde waardoor de differentiatie van RPC's in de zeven retinale celtypes in het volwassen menselijke netvlies aanwezig. Daarnaast beschrijven we snelle methoden voor cryopreservatie van retinale organoids en RPE cellen voor langdurige opslag. Samen, zijn de hier beschreven methoden nuttig om te produceren en bank menselijke iPSC afkomstige netvlies cellen of weefsels voor zowel fundamenteel en klinisch onderzoek.

De eerste stap voor menselijke iPSC differentiatie in feeder-vrij voorwaarden16 verbouwd is zelf-vernieuwing machines met behulp van Bi middellange ter bevordering van een spontane differentiatie (figuur 1A) afsluiten. Vervolgens op D2, het Bi-medium wordt aangevuld met een supplement van de N2 om te differentiëren iPSCs cellen naar het neurale en netvlies lineages begeleiden. Dit proces leidt tot de verschijning van neuroretinal topp...

Watch this Scientific Journal Video about Defined Xeno-free and Feeder-free Culture Conditions for the Generation of Human iPSC-derived Retinal Cell Models at JoVE.com

Defined Xeno-free and Feeder-free Culture Conditions for the Generation of Human iPSC-derived Retinal Cell Models

Gedefinieerde Xeno-vrij en kweekomstandigheden Feeder-gratis voor de generatie van menselijke iPSC afkomstige Retinal cel modellen

De productie van gespecialiseerde netvlies cellen uit pluripotente stamcellen is een keerpunt in de ontwikkeling van stamcel gebaseerde therapie voor retinale ziekten. De huidige paper beschrijft een eenvoudige methode voor een efficiënte generatie van retinale organoids en retinale pigment epitheel voor fundamenteel, translationeel, en klinisch onderzoek.

The production of specialized cells from pluripotent stem cells provides a powerful tool to develop new approaches for regenerative medicine. The use of ...

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells from Human Peripheral T Cells Using Sendai Virus in Feeder-free Conditions

Generatie van geïnduceerde pluripotente stamcellen uit menselijke perifere T-cellen met behulp van Sendai Virus in Feeder gratis Voorwaarden

Recently, iPSCs have attracted attention as a new source of cells for regenerative therapies. Although the initial method for generating iPSCs relied on ...

Feeder-free Derivation of Melanocytes from Human Pluripotent Stem Cells

Feeder-vrij Afleiding van melanocyten uit menselijke pluripotente stamcellen

Human pluripotent stem cells (hPSCs) represent a platform to study human development in vitro under both normal and disease conditions. Researchers can ...

Large-Scale Production of Cardiomyocytes from Human Pluripotent Stem Cells Using a Highly Reproducible Small Molecule-Based Differentiation Protocol

Grootschalige productie van cardiomyocyten van menselijke pluripotente stamcellen met behulp van een zeer reproduceerbare Small-Molecule Based Differentiatie Protocol

Maximizing the benefit of human pluripotent stem cells (hPSCs) for research, disease modeling, pharmaceutical and clinical applications requires robust ...

Collection of Serum- and Feeder-free Mouse Embryonic Stem Cell-conditioned Medium for a Cell-free Approach

Het verzamelen van serum en Feeder-vrij muis embryonale stamcellen geconditioneerd medium voor een Cell-free Approach

The capacity of embryonic stem cells (ESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs) to generate various cell types has opened new avenues in the field ...

Production and Administration of Therapeutic Mesenchymal Stem/Stromal Cell (MSC) Spheroids Primed in 3-D Cultures Under Xeno-free Conditions

Production and Administration of Therapeutic Mesenchymal Stem/Stromal Cell MSC Spheroids Primed in 3-D Cultures Under Xeno-free Conditions

Productie en toediening van therapeutische mesenchymale stamcellen / Stromal Cell (MSC) sferoïden primer in 3-D Cultures Onder Xeno-free Voorwaarden

Mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) hold great promise in bioengineering and regenerative medicine. MSCs can be isolated from multiple adult tissues via ...

Defined and Scalable Generation of Hepatocyte-like Cells from Human Pluripotent Stem Cells

Gedefinieerd en Scalable Generatie van hepatocyt-achtige cellen uit menselijke pluripotente stamcellen

Human pluripotent stem cells (hPSCs) possess great value for biomedical research. hPSCs can be scaled and differentiated to all cell types found in the ...

Generation of iPSC-derived Human Brain Organoids to Model Early Neurodevelopmental Disorders

Genereren van iPSC afgeleide Human Brain Organoids naar Early Neurodevelopmental Disorders Model

The restricted availability of suitable in vitro models that can reliably represent complex human brain development is a significant bottleneck that ...

Reprogramming Primary Amniotic Fluid and Membrane Cells to Pluripotency in Xeno-free Conditions

Herprogrammering van de primaire vruchtwater en membraan cellen pluripotent in Xeno-vrij voorwaarden

Autologous cell-based therapies got a step closer to reality with the introduction of induced pluripotent stem cells. Fetal stem cells, such as amniotic ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Hemogenic Endothelium Differentiation from Human Pluripotent Stem Cells in A Feeder- and Xeno-free Defined Condition

Hemogenic endoteel differentiatie van menselijke pluripotente stamcellen in een voeder-en xeno-vrije gedefinieerde voorwaarde

Deriving functional hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) from human pluripotent stem cells (PSCs) have been an elusive goal for autologous ...