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•
05:18 min
January 10th, 2019
DOI :
10.3791/57812-v
Chapters
0:04
Title
0:28
Most Probable Number (MPN) Conjugation Frequency Calculation
2:37
Results: Representative Probability of Donor-Initiated Conjugation Between Plasmids
5:01
Conclusion
Transcript
这种方法可以帮助回答微生物学领域关于质粒DNA在不同细菌之间传播率的关键问题。该技术的主要优点是,通过减少背景,我们可以检测出高分辨率的结合频率的小差异。演示这个程序的将是我实验室的研究生科苏克·亚纳吉亚。
要按最可能的数字计算结合频率,请从隔夜供体培养体中过滤一毫升,从隔夜接受者培养体中过滤一毫升,在30摄氏度下进行45分钟,刚才演示。当共同培养孵育时,连续稀释原始捐赠者和接受者培养物,将三分之一电镀到捐赠者 Luria 肉汤(LB),加上卡那霉素,或接受者 LB,再稀释 3
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Summary
为了了解不同条件下各种细菌结合 dna 元素的行为, 我们描述了一种检测共轭频率差异的协议, 具有较高的分辨率, 以估计供体细菌的效率启动共轭。
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