Name: tissue-specific mirna expression profiling in mouse heart sections using in situ hybridization
Uploaded: 2018-09-15T15:00:00
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우리는 아타 나 시오 스 Papangelis, 원고에 대 한 중요 한 의견에 대 한 감사 하 고 싶습니다. FM은 생명 공학 및 생물 과학 연구 위원회 (BBSRC;에 의해 지원 BB/M009424/1). IP는 미국 심장 협회 과학자 개발 그랜트 (17SDG33060002)에 의해 지원 됩니다.

이 연구에 대 한 마우스 심장 조직 샘플 관련 법령 및 기관의 지침에 따라 확인 하 고 예일 대학 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 했다.
1. 솔루션 준비
<ol><li>RNase 무료 ddH2O 준비, 5l ddH2O의 0.1 %diethylpyrocarbonate (DEPC)의 5 mL로 하 여 실 온 (RT)에서 (O/N), 하룻밤. 오토 클레이 브 (121 ° C)에서 DEPC를 비활성화 하려면. 사용 DEPC 처리 ddH2O 준비에 대 한 ...

<ol>
	<li>Bartel, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNAs:+genomics,+biogenesis,+mechanism,+and+function.">MicroRNAs: genomics, biogenesis, mechanism, and function.</a> Cell. 116, 281-297 (2004).</li><li>Denli, A. M., Tops, B. B., Plasterk, R. H., Ketting, R. F., Hannon, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+primary+microRNAs+by+the+Microprocessor+complex.">Processing of primary microRNAs by the Microprocessor complex.</a> Nature. 432, 231-235 (2004).</li><li>Hutvagner, G., Zamore, P. 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T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=miRNA+in+situ+hybridization+in+formaldehyde+and+EDC-fixed+tissues.">miRNA in situ hybridization in formaldehyde and EDC-fixed tissues.</a> Nature Methods. 6, 139-141 (2009).</li></ol>

miRNA 사본 검출 감도, 특이성 및 양적 힘에서 변화 하는 다른 기술을 통해 얻을 수 있습니다. 여기, 우리 미르 교 잡 제자리에 immunostaining와의 커플링을 보여 같은 심장 섹션에 미르와 단백질 분자의 식 레벨의 동시 평가 허용 하는 프로토콜을 설명 하 고. 우리는 먼저 파라핀 포함 심장 섹션에 제자리에서 교 잡 파 표시 된 LNA 미르 프로브를 수행 하는 방법을 보여줍니다. 다음, 우리는 c...

마이크로 RNAs (miRNAs)는 짧은 (18-25의 뉴클레오티드), 단일 가닥, noncoding RNAs는 메신저 RNA (mRNA) 번역 억제 및 홍보 mRNA 저하 여 post-transcriptional 수준에서 유전자 발현의 부정적인 레 귤 레이 터 기능 1. miRNAs는 introns 또는 코딩의 exons에서 복사할 수 또는 noncoding 유전자와 전조 miRNAs (pre-miRNAs), 70 뉴클레오티드2의 짧은 줄기 루프 구조를 DROSHA에 의해 핵에서 죽 습. 세포질 다음 내보내기, 사전 miRNAs 더 성숙한 miRNAs는 18-25의 뉴클레오티드3,4로 DICER에 의해 처리 됩니다. 그 후, RNA 유도 입을 복잡 한 (RISC) 통합이 miRNAs 단일 가닥 RNAs로 그들의 식3,5 억제 하는 3' 되지 않은 지역 (3'-UTR) 그들의 표적 mRNAs의 바인딩을 수 있는 .
그들은 처음으로 확인 했다, 이후 지난 3 년간 내 miRNAs가 유전자 발현, 그 자신의 식 레벨은 긴밀 하 게 제어6의 마스터 레 귤 레이 터 등장 했습니다. 장기 개발7,,89,10,11,12, 항상성13,14의 유지 보수에에서 miRNAs에 대 한 역할 설명 되었습니다. , 질병 컨텍스트 신경15,,1617,18,19, 심혈 관20를 포함 하는 자기 면역 조건21 뿐만 아니라 ,22, 암23,24, 등25. MiRNA 식 패턴의 관련성에 대 한 증가 감사 미르 증명서의 신뢰할 수 있는 검출 방법에 대 한 필요성을 게 앞으로 가져왔다. 이러한 방법 등이 실시간 PCR, microarrays, 북부에 게 더 럽 히기, 제자리에서 교 잡, 사실은 미르 성적표는 짧은 구성 주로 감도, 특이성, 및 양적 발전에 따라 고 매우 일치 순서6.
우리는 최근 미르-182 심근 비 대26, 높은 hemodynamic 요구27,28응답에서 심장의 구조적 적응을 설명 하는 조건 개발에 대 한 중요 한 역할을 했다. 심장 비 대 maladaptive 개장29와 관련 된 경우 심장 마비, 회계 모든 죽음의 8.5%에 기인 심장 혈관 상태에 대 한 위험 증가에 지도할 수 있는 심근 질량에 있는 증가 의해 특징입니다. 질병30.
우리가 현장에서 교 잡은 digoxigenin 표시 (발굴) 잠겨 핵 산 (LNA) 프로브와 결합 마우스 심장 조직 단면도에 미르와 단백질 분자의 동시 검출을 위한 immunostaining에 우리의 프로토콜을 설명 하는 여기, 우리의 심장 비 대의 모델입니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Diethylpyrocarbonate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5758</td>
			<td>DEPC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P4417</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween-20</td>
			<td>American Bioanalytical</td>
			<td>AB02038</td>
			<td>non-ionic surfactant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoclear</td>
			<td>National Diagnostics</td>
			<td>HS-200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K, recombinant, PCR Grade</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>3115879001</td>
			<td>ProK</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td>PFA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>S271</td>
			<td>NaCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride Hexahydrate</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>M33</td>
			<td>MgCl2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T6066</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric Acid Solution, 1 N</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>SA48</td>
			<td>HCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric Acid Solution, 12 N</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>S25358</td>
			<td>HCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-Methylimidazole</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>336092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-(3-Dimethylaminopropyl)-N&#8242;-ethylcarbodiimide hydrochloride</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>39391</td>
			<td>EDC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution H2O2</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>216763</td>
			<td>H2O2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trisodium citrate dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S1804</td>
			<td>Sodium Citrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>miRCURY LNA miRNA ISH Buffer Set (FFPE)</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>339450</td>
			<td>scramble miRNA/U6 snRNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>miRCURY LNA mmu-miR-182 detection probe</td>
			<td>QIagen</td>
			<td>YD00615701</td>
			<td>5&#39;-DIG and 3&#39;-DIG labelled</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levamisol hydrochloride</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>31742</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A9647</td>
			<td>BSA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NBT/BCIP Tablets</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>11697471001</td>
			<td>NBT-BCIP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>P217</td>
			<td>KCl</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI solution (1mg/ml)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>62248</td>
			<td>DAPI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass coverslip</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>12-545E</td>
			<td>Glass coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic coverslip</td>
			<td>Grace Bio-Labs</td>
			<td>HS40 22mmX40mmX0.25mm</td>
			<td>RNA-ase free plastic coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Digoxigenin-AP, Fab fragments</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>11093274910</td>
			<td>DIG antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrophobic barrier pen</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-4000</td>
			<td>Pap pen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Cardiac Troponin T antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab92546</td>
			<td>cTnT antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Rabbit IgG (H+L) Cross-Absorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 568</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A-11011</td>
			<td>anti-rabbit-568 antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Fluorescence Mounting Medium</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>S3023</td>
			<td>mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sheep serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S3772</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized Formamide</td>
			<td>American Bioanalytical</td>
			<td>AB00600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hybridization Oven</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>UVP HB-1000 Hybridizer</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

tissue-specific mirna expression profiling in mouse heart sections using in situ hybridization

마이크로 RNAs (miRNAs) 단일 가닥 RNA 사본 메신저 RNAs (mRNAs) 바인딩할 및 그들의 번역을 억제 또는 그들의 저하를 촉진 하는. 날짜 하려면, miRNAs 미르 증명서의 신뢰할 수 있는 검색 방법에 대 한 필요성을 의미 했다 생물학 및 질병 과정의 많은 수에 연루 되었습니다. 여기, 우리 digoxigenin 분류 (발굴) 잠겨 핵 산 (LNA) 프로브 기반 미르 검색, 마우스 심장 섹션에 단백질 immunostaining와 함께 상세한 프로토콜을 설명 합니다. 첫째, 우리는 현장에서 교 잡 기술을 미르-182 식 제어 및 심장 비 대 쥐에서 심장 섹션에서을 식별 하는 프로브를 사용 하 여 수행. 다음, 우리는 공동 cardiomyocyte 셀 미르-182 지역화를 동일한 섹션에 심장 분 T (cTnT) 단백질에 대 한 immunostaining를 수행 합니다. 이 프로토콜을 사용 하는 알칼리 성 인산 가수분해 효소를 통해 미르-182 기반 색도계 분석 결과, 및 형광 성 얼룩 통해 cTnT 감지할 수 있었습니다. 이 프로토콜은 모든 miRNA LNA 발굴 표시 된 프로브를 통해 관심의 표현 및 마우스 심장 조직 섹션에 관련 된 단백질 표정 감지 하 사용할 수 있습니다.

miRNA에 제자리 교 잡 출 격 miRNA와 U6-snRNA, 부정과 긍정적인 컨트롤을 각각 역임을 사용 하 여 마우스 심장 섹션에 최적화 되었다. 색상 개발의 부족에 의해 표시 됩니다 부정적인 얼룩 동안 파란색, 표시는 긍정적인 얼룩 (그림 1A-1B). 미르-182의 Cardiomyocyte 특정 식 제어 및 PlGF overexpressing 쥐에서 심장 섹션에서 평가 했다. ΑMHC 발기인 ?...

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Tissue-specific miRNA Expression Profiling in Mouse Heart Sections Using In Situ Hybridization

조직 관련 미르 식에서 제자리 교 잡 마우스 심장 섹션 사용 하 여 프로 파일링

마이크로 RNAs (miRNAs) 메신저 RNAs (mRNAs)의 post-transcriptional 레 귤 레이 터로 봉사 하는 짧고 높은 동종 RNA 시퀀스입니다. 현재 미르 탐지 방법 감도 특이성에서 변화 한다. 우리는 현장에서 교 잡 및 마우스 심장 조직 섹션에 미르와 단백질 분자의 동시 검출을 위한 immunostaining를 결합 하는 프로토콜을 설명 합니다.

micro-RNAs (miRNAs) are single-stranded RNA transcripts that bind to messenger RNAs (mRNAs) and inhibit their translation or promote their degradation. To ...

이 방법은 단백질과 microRNA 분자 모두의 상대적 lcalization을 검출하는 도구를 제공함으로써 microRNA 분야의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 동일한 조직 섹션에서 단백질과 microRNA 분자를 모두 검출할 수 있다는 것입니다. 이 프로토콜은 슬라이드 장착 조직의 재수화로 시작됩니다.하이브리드화 오븐에서 슬라이드를 섭씨 60도에서 10분간 데우십시오. 파라핀은 눈에 띄게 녹아야 합니다. 그런 다음, 10 분 동안 시판 가능한 클리어링 에이전트를 포함하는 유리 코플린 항아리에 슬라이드를 배양.두 번 이 작업을 수행합니다. 다음으로 슬라이드를 세척에서 세척으로 옮겨 조직을 수화합니다. 수분을 공급하면 단백질AE K 작업 용액의 조직을 섭씨 37도에서 15분 동안 배양합니다.단백질제 K를 제거하려면 슬라이드를 1x PBS로 두 번 세척합니다. 지금, 조직을 해결합니다. 첫째, 소수성 펜을 사용하여 슬라이드에 있는 저수지를 만들어 준비 주위에 발수 원을 그립니다.다음으로, 장벽 내에 4%PFA 용액의 500마이크로리터를 적용하고 슬라이드를 연기 후드에 배양합니다. 고정을 제거하려면 실온에서 PBS가 들어있는 코플린 항아리에서 슬라이드를 실온에서 2 회 2 회 2 회 세척하십시오. 다음으로, 0.13 어금니 1-메틸리미다졸레로 슬라이드를 10분간 세척합니다.실온에서 연기 후드에이 작업을 수행하고, 두 번 세척을 수행합니다. EDC 고정을 추가하고 연기 후드의 실온에서 1 시간 동안 배양하십시오. 50 밀리머 트리스와 함께 슬라이드를 헹구십시오.혼성화를 준비하기 위해 먼저 가습 챔버를 구축하십시오. 두 개의 필터 또는 티슈 페이퍼를 상자 바닥에 적재하고 포름아미데와 1x SSC의 일대일 혼합물로 종이를 적십니다. 다음으로, 각 슬라이드에 미리 따뜻워진 혼성화 용액 200마이크로리터를 적용하고, 50°C에서 1~3시간 동안 슬라이드의 가습 챔버를 배양한다.인큐베이션 후 하이브리드화 솔루션을 250마이크로리터의 프로브 솔루션으로 교체하고 슬라이드를 RNase 프리 커버 슬립으로 덮습니다. 커버 슬립 아래에 기포가 포획되지 않도록 하십시오. 이제 파라필름으로 챔버를 조심스럽게 밀봉하고 프로브의 RNA 용융 온도 보다 약 섭씨 약 30도에서 밤새 슬라이드를 배양합니다.최적화가 필요할 수 있습니다. 올바른 인큐베이션 온도를 설정하는 것 외에도 상이한 microRNA가 상이한 수준으로 표현되므로 프로브 농도에 대한 최적화도 최적의 신호를 얻기 위해 필요할 수 있습니다. 혼성화 에 따라 문자열 세차를 수행합니다.첫째, 5 분 동안 섭씨 50도에서 2 x SSC에 있었고, 덮개가 느슨해질 때까지. 그런 다음 실온에서 2x SSC로 2개의 세척을 5분 동안 수행합니다. 그런 다음 실온에서 계속하여 0.2x SSC에서 5분 동안 슬라이드를 세척하고 PBST에서 5분, 마지막으로 1x PBS에서 5분 동안 세척합니다.이 시점에서 RNA-RNA 하이브리드는 안정적이며 RNA-엄격한 조건이 더 이상 필요하지 않습니다. DIG 항체 검출을 위해 먼저 소수성 장벽을 터치하고 30 분 동안 블로킹 용액 500 마이크로 리터를 적용하십시오. 가습 챔버에서 실온에서 슬라이드를 배양합니다.다음으로, 차단 용액을 제거하고 DIG 항체 용액의 500 마이크로리터로 대체하십시오. 1 시간 동안 가습 챔버에서 실온에서 슬라이드를 배양. 그런 다음 코플린 항아리를 사용하여 PBST에서 슬라이드를 세 번 씻고 세척 당 5 분 동안 씻습니다.다음으로 슬라이드를 스테인딩 용액으로 두 번 5분간 세척합니다. 그런 다음 슬라이드를 폴리프로필렌 슬라이드 메일러 jar로 옮기고 AP 기판 용액20 밀리리터를 추가합니다. 이제 슬라이드를 섭씨 37도에서 6~24시간 동안 배양하여 빛으로부터 보호합니다.먼저 AP 기판을 사용하는 경우 반응을 따르는 것이 중요합니다. 2시간 간격으로 최적의 잠복기가 결정될 때까지 현미경을 사용하여 슬라이드의 색상 개발을 확인하십시오. 초과 AP 기판을 제거하려면 KTBT 용액에서 슬라이드를 세척당 5분 동안 두 번 세척한 다음 PBS에서 5분간 세척합니다.cTNT 항체를 검출하기 위해 먼저 조직을 한 시간 동안 차단한다. 그런 다음, cTNT 항체 용액의 200 마이크로리터를 적용하고, 가습 챔버에서 섭씨 4도에서 밤새 슬라이드를 배양한다. 다음 날, 5 분 동안 PBS가 들어있는 코플린 항아리에 슬라이드를 씻으십시오.세 번 이 작업을 수행합니다. 이어서, 250마이크로리터의 항토끼 568 항체 용액을 적용하고, 가습챔버에서 실온에서 1시간 동안 슬라이드를 배양한다. 과잉 이차 항체를 씻어 내려면 PBS에서 3 개의 5 분 세척을 사용하십시오.그런 다음 원하는 경우 DAPI 작업 솔루션 250 마이크로리터를 적용하고 슬라이드를 1분 동안 인큐베이션하여 빛으로부터 보호합니다. 과도한 DAPI 얼룩을 제거하려면 5분 PBS 세서히 2개를 사용하고 세동 후 슬라이드를 장착합니다. microRNA 인-시투 혼성화는 음성 제어를 위한 스크램블 마이크로RNA를 사용하여 마우스 심장 단면도에 최적화되었고, U6 snRNA는 양성 대조군으로서 최적화되었다.microRNA-182의 심근 세포 특이적 발현은 대조군 및 PlGF 과잉 발현 마우스로부터 심장 섹션에서 평가되었다. 마우스는 알파-MHC 프로모터의 밑에 PlGF 전염유전자를 운반하고, 심장 비대, 증가한 혈관신생에 이차, 간질 활성화의 6 주 안에 개발했습니다. 염색 프로토콜은 PlGF 마우스의 심혼에 있는 microRNA-182의 증가한 발현을 밝혔습니다.다음으로, 어떤 세포 유형이 microRNA-182를 발현했는지 를 결정하기 위해, 동일한 섹션은 cTNT를 위해 면역염색되었다. DAPI 염색도 사용되었습니다. 대조군과 PlGF 마우스 심장 단면 모두에서, microRNA-182는 cTNT 양성 심근세포 세포의 핵 구획에서 발견되었다.이 비디오를 시청한 후, 당신은 단백질 면역 염색 다음에 microRNAse 혼성화를 수행하는 방법에 대한 좋은 이해가 있어야합니다. 이 절차를 시도하는 동안, 소품 혼성화로 이어지는 모든 단계 동안 하루 종일 RNAse가없는 조건을 유지하는 것을 기억하는 것이 매우 중요합니다. 이 절차에 따라, 실시간 PCR에서 서양 블롯과 같은 다른 방법은 다른 조직에서 이 특정 microRNA의 상대적 발현 수준은 무엇이거나, 또는 동일한 조직 섹션에서 이 특정 단백질과 같은 질문에 대답하기 위하여 수행될 수 있다.PFA 및 ADC와 같은 고정 물질로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있다는 것을 잊지 마십시오. 이 절차를 수행할 때는 장갑과 실험실 코트 착용뿐만 아니라 연기 후드를 사용하는 것이 포함됩니다.

Research

JoVE Journal

Genetics

Tissue-specific miRNA Expression Profiling in Mouse Heart Sections Using In Situ Hybridization

In Situ Labeling of Mitochondrial DNA Replication in Drosophila Adult Ovaries by EdU Staining

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에듀 염색에 의한 초파리 성인 난소에서 미토콘드리아 DNA 복제의 제자리 라벨에

The mitochondrial genome is inherited exclusively through the maternal line. Understanding of how the mitochondrion and its genome are proliferated and ...

연구

유전학

Parallel Measurement of Circadian Clock Gene Expression and Hormone Secretion in Human Primary Cell Cultures

인간의 기본 세포 배양의 일주기 시계 유전자 발현 및 호르몬 분비의 병렬 측정

Circadian clocks are functional in all light-sensitive organisms, allowing for an adaptation to the external world by anticipating daily environmental ...

Optogenetic Random Mutagenesis Using Histone-miniSOG in C. elegans

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히스톤 - miniSOG에서 사용 Optogenetic 무작위 돌연변이 유발<em&gt; C. 엘레</em

Forward genetic screening in model organisms is the workhorse to discover functionally important genes and pathways in many biological processes. In most ...

Detection of Inter-chromosomal Stable Aberrations by Multiple Fluorescence In Situ Hybridization (mFISH) and Spectral Karyotyping (SKY) in Irradiated Mice

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여러 형광에 의한 간 염색체 안정 수차의 검출<em&gt; 현장에서</em&gt; 하이브리드 (mFISH) 및 방사선 조사 마우스의 스펙트럼 핵형 분석 (SKY)

Ionizing radiation (IR) induces numerous stable and unstable chromosomal aberrations. Unstable aberrations, where chromosome morphology is substantially ...

Single-cell Gene Expression Profiling Using FACS and qPCR with Internal Standards

내부 기준에 FACS 및 qPCR에 사용 단일 세포 유전자 발현 프로파일 링

Gene expression measurements from bulk populations of cells can obscure the considerable transcriptomic variation of individual cells within those ...

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

높은 해상도 교 잡 형광 제자리에 초파리 태아와 Tyramide 신호 증폭을 사용 하 여 조직에서

In our efforts to determine the patterns of expression and subcellular localization of Drosophila RNAs on a genome-wide basis, and in a variety of ...

Profiling DNA Replication Timing Using Zebrafish as an In Vivo Model System

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DNA 복제 타이밍 Zebrafish Vivo에서 모델 시스템으로 사용 하 여 프로 파일링

DNA replication timing is an important cellular characteristic, exhibiting significant relationships with chromatin structure, transcription, and DNA ...

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

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제자리에 전체 산 교 잡에 의해 틱 용기에 Microbiota의 시각화

Infectious diseases transmitted by arthropod vectors continue to pose a significant threat to human health worldwide. The pathogens causing these ...

Single Molecule Fluorescence In Situ Hybridization (smFISH) Analysis in Budding Yeast Vegetative Growth and Meiosis

Single Molecule Fluorescence In Situ Hybridization smFISH Analysis in Budding Yeast Vegetative Growth and Meiosis

단일 분자 형광에서 제자리 교 잡 (smFISH) 신진 효 모 무성 한 성장 및 감수 분열 분석

Single molecule fluorescence in situ hybridization (smFISH) is a powerful technique to study gene expression in single cells due to its ability to detect ...

Quantitative Analysis of Alternative Pre-mRNA Splicing in Mouse Brain Sections Using RNA In Situ Hybridization Assay

Quantitative Analysis of Alternative Pre-mRNA Splicing in Mouse Brain Sections Using RNA In Situ Hybridization Assay

대체 사전 mRNA 접합 교 잡 시험 현장에서 RNA를 사용 하 여 마우스 뇌 섹션에서의 정량 분석

Alternative splicing (AS) occurs in more than 90% of human genes. The expression pattern of an alternatively spliced exon is often regulated in a cell ...