Name: spectral reflectometric microscopy on myelinated axons in situ
Uploaded: 2018-07-02T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spectral Reflectometric Microscopy on Myelinated Axons In Situ at JoVE.com

Эта работа была поддержку Института фундаментальной науки (IBS-R015-D1) и основные программы исследований науки через национальных исследований фонда из Кореи (NRF) финансируется министерством образования (2017R1A6A1A03015642).

Все хирургические процедуры были утверждены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) Университета Сонгюнгван.
1. Пробоподготовка
Примечание: Автоклав всех хирургических инструментов до обработки животных. Проведение всех хирургическ...

<ol>
	<li>Fernandez-Moran, H., Finean, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electron+microscope+and+low-angle+x-ray+diffraction+studies+of+the+nerve+myelin+sheath.">Electron microscope and low-angle x-ray diffraction studies of the nerve myelin sheath.</a> Journal of Cell Biology. 3, (1957).</li><li>Blaurock, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+spaces+between+membrane+bilayers+within+PNS+myelin+as+characterized+by+X-ray+diffraction.">The spaces between membrane bilayers within PNS myelin as characterized by X-ray diffraction.</a> Brain Research. 210, 383-387 (1981).</li><li>Shim, S. -. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super-resolution+fluorescence+imaging+of+organelles+in+live+cells+with+photoswitchable+membrane+probes.">Super-resolution fluorescence imaging of organelles in live cells with photoswitchable membrane probes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. , 13978-13983 (2012).</li><li>Urban, N. T., Willig, K. I., Hell, S. W., N&#228;gerl, U. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=STED+nanoscopy+of+actin+dynamics+in+synapses+deep+inside+living+brain+slices.">STED nanoscopy of actin dynamics in synapses deep inside living brain slices.</a> Biophysics Journal. 101, 1277-1284 (2011).</li><li>Manley, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-density+mapping+of+single-molecule+trajectories+with+photoactivated+localization+microscopy.">High-density mapping of single-molecule trajectories with photoactivated localization microscopy.</a> Nature Methods. 5, 155-157 (2008).</li><li>Peters, A., Sethares, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+there+remyelination+during+aging+of+the+primate+central+nervous+system?.">Is there remyelination during aging of the primate central nervous system?.</a> Journal of Comparative Neurology. 460, 238-254 (2003).</li><li>De Campos Vidal, B., Silveira Mello, M. L., Caseiro-Filho, A. C., Godo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anisotropic+properties+of+the+myelin+sheath.">Anisotropic properties of the myelin sheath.</a> Acta Histochemica. 66, 32-39 (1980).</li><li>Schain, A. J., Hill, R. A., Grutzendler, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Label-free+in+vivo+imaging+of+myelinated+axons+in+health+and+disease+with+spectral+confocal+reflectance+microscopy.">Label-free in vivo imaging of myelinated axons in health and disease with spectral confocal reflectance microscopy.</a> Nature Medicine. 20, 443-449 (2014).</li><li>Kwon, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Label-free+nanoscale+optical+metrology+on+myelinated+axons+in+vivo.">Label-free nanoscale optical metrology on myelinated axons in vivo.</a> Nature Communication. 8, 1832 (2017).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+Animal+Perfusion+Fixation+for+Rodents.">Whole Animal Perfusion Fixation for Rodents.</a> JoVE. (65), e3564 (2012).</li><li>Segev, A., Garcia-Oscos, F., Kourrich, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-cell+Patch-clamp+Recordings+in+Brain+Slices.">Whole-cell Patch-clamp Recordings in Brain Slices.</a> JoVE. (112), e54024 (2016).</li><li>Waldchen, S., Lehmann, J., Klein, T., Van De Linde, S., Sauer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light-induced+cell+damage+in+live-cell+super-resolution+microscopy.">Light-induced cell damage in live-cell super-resolution microscopy.</a> Scientific Reports. 5, 15348 (2015).</li><li>Chang, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Iterative+expansion+microscopy.">Iterative expansion microscopy.</a> Nature Methods. 14, 593-599 (2017).</li><li>Polishchuk, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlative+light-electron+microscopy+reveals+the+tubular-saccular+ultrastructure+of+carriers+operating+between+Golgi+apparatus+and+plasma+membrane.">Correlative light-electron microscopy reveals the tubular-saccular ultrastructure of carriers operating between Golgi apparatus and plasma membrane.</a> Journal of Cell Biology. 148, 45-58 (2000).</li></ol>

Сфере является новый лейбл бесплатная изображений механизм на основе спектральных интерферометрии, который в первый раз, предлагает наноразмерных информацию в прямом Миелинизированные аксоны. В протоколе текущего приобретения, пространственное разрешение для axon диаметр составляет ...

В нервной системе млекопитающих миелина обеспечивает быстрое нервной проводимости и аксональной целостность, обертыванием аксон волокон с многослойных мембранных влагалищ. Многослойная структура состоит из чередующихся наноразмерных тонких пленок-состоящий из плазменных мембран (~ 5 Нм), цитозоле (~ 3 Нм) и внеклеточного пространства (~ 7 Нм)1,2. Оптическая микроскопия, включая недавние суперразрешением микроскопии, не подходят для наблюдений за наноразмерных миелина динамика из-за их недостаточной резолюции вследствие дифракции3,4,5. Хотя электронная микроскопия может предоставить мелких деталей из наноструктурированных миелина, это не совместимо с живых биологических систем из-за очень инвазивных образец подготовки с участием химической фиксации и ultrasectioning6,7 . До недавнего времени, там было не техника применяется для наблюдения за наноразмерных динамика Миелинизированные аксоны в situ.
Schain et al. ранее сообщалось, что Миелинизированные аксоны exhibit красочные светоотражения8. Приняв спектроскопического анализа на отраженный свет, мы разработали новый механизм изображений для визуализации наноразмерных Миелинизированные аксонов, названный спектральных рефлектометрии (сфере)9. Сфере на основе тонкопленочных вмешательства, происходящих в многослойной структуре Миелиновые оболочки (рис. 1). По оптического моделирования на различных аксонов, мы показали, что спектр отражения является периодическая функция волновое и его периодичность (<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57965/57965eq1.jpg">) пропорциональна аксон диаметр (d). Этот простой отношения (<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57965/57965eq2.jpg">) предлагает снисходительный количественная оценка диаметра аксона от сфере данных. Используя это, мы показали распространены аксона, выпуклые под легкой черепно-мозговой травмы в нашем предыдущем докладе.
Сфере система основана на confocal микроскопии и состоит из специализированных лазерного источника и фильтров (рис. 2). Источник ввода является белый свет лазера, предоставление широкополосного спектральных вывода видимых инфракрасных регионов. Для спектрального сканирования, система оснащена двумя акустооптические устройства: акустооптические перестраиваемый фильтр (AOTF) для доставки выбранной длине волны от источника входного сигнала широкополосные и splitter луча Акусто оптический (AOBS) для руководства выбранного отражение Длина волны до детектора. Программное обеспечение для гиперспектрального confocal микроскопии (см. Таблицу материалы) предоставляет настраиваемый спектрального сканирования вариант последовательно получить отражения изображения на различных длинах волн ввода. Кроме того хроматические аберрации критически может вмешиваться в спектральных измерений; Поэтому рекомендуется использовать Апохромат объектива.
Следует отметить белый свет лазеры производства неравномерным спектральных и оптических компонентов также влияет на спектральные профиль. Таким образом полученные спектры должны быть откалиброваны для последующего количественного анализа. Охраняемых Серебряное зеркало обычно используется как ссылка, которая обеспечивает практически постоянный коэффициент отражения (> 97%) над полностью видимой области. Полученные спектры затем делится на ссылку спектров от зеркала.
Размер спектральных шаг спектрального сканирования определяет скорость приобретения; Таким образом он должен быть оптимизирован. Как большие аксона имеет высокий спектральных период, он требует тонкой спектральных выборки. К примеру, аксон с диаметром 10 мкм, один из крупнейших физиологического аксоны, имеет спектральный период ~ 8 Нм. Применив критерии отбора проб Найквиста, мы заняты спектральный интервал 4 Нм для покрытия всех физиологических аксоны в нервных тканях мыши. Этот подход обычно занимает более нескольких секунд для полного спектрального сканирования и таким образом не подходит для приложений в естественных условиях , где физиологическое движение (например дыхание и сердцебиение) мешает стабильной спектральных приобретения. Ранее мы решили этот вопрос путем инструментирования микроскопом заказной вертикально, предназначена для получения полного спектра для каждой точки, с помощью массива спектрометр (приобретение скорость ≈ 30 мс на пиксель).
В настоящем докладе, мы описываем подробный протокол на сфере изображений на кусочек фиксированной мозга, которые могут быть выполнены в коммерческих гиперспектрального микроскоп (см. Таблицу материалы). Таким образом протокол может быть дополнено экспериментаторов без опыта в оптических приборов. Мы также охватывать потенциальные проблемы и устранение неполадок для сбора и анализа данных сфере.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Glass cutter</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Can be purchased in a local convenience store or online stores.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nail polish</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
			<td>Can be purchased in a local convenience store or online stores.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Apochromat objective 40&#215;, NA 1.1</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>15506357</td>
			<td>Water-immersion type</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoromyelin Green</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>F34651</td>
			<td>Alternatively, Fluoromyelin Red (F34652) can be used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica SP8 TCS microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>SP8</td>
			<td>Refer to the &#34;Configuration of microscope&#34; in Introduction Section for details.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging software</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>LAS-X</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td>-</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mirror</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>PF10-03-P01</td>
			<td>Coated with protected silver.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (PBS)</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>14190-136</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Biosolution</td>
			<td>BP031a</td>
			<td>4% v/v in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>3306</td>
			<td>Thickness: #1 (0.13 to 0.17 mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide glass</td>
			<td>Muto Pure Chemicals</td>
			<td>5116-20F</td>
			<td>Thickness: ~1 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super glue</td>
			<td>Henkel</td>
			<td>Loctite 406</td>
			<td>Use a dispensing equipment to avoid skin or eye contact.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Brainetree Scientific</td>
			<td>BS-8000 DUAL</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vibratome</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>VT1200S</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White-light laser</td>
			<td>NKT photonics</td>
			<td>EXB-6</td>
			<td>EXB-6 was discontinued and replaced by EXU-6.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spectral reflectometric microscopy on myelinated axons in situ

В млекопитающих нервной системы миелина обеспечивает электрической изоляции, обертыванием аксон волокон в многослойных спираль. Вдохновленный архитектурой субцеллюлярные высоко организованной, мы недавно разработали новый механизм визуализации, именем спектральных рефлектометрии (сфере), который позволяет беспрецедентную лейбл свободных наноразмерных изображений живой Миелинизированные аксоны в situ. Основополагающий принцип заключается в получении информации наноструктурных, проанализировав отражения спектр многослойных субцеллюлярные структуры. В этой статье мы опишем подробные пошаговые протокол для выполнения основной сфере изображений нервных тканей, с использованием коммерческих конфокальный микроскопические системы, с белый свет лазера и перестраиваемый фильтр. Мы охватывают процедуры пробоподготовки, приобретение спектральных данных и обработки для получения сведений о наноструктурных изображений.

Согласно протоколу, ломтиком фиксированной мозга был подготовлен с экзогенной окрашивание, Флюорофор ориентации миелина (см. Таблицу материалы). Сфере изображений была исполнена на срез мозга, с использованием коммерческих гиперспектрального конфокального...

Watch this Scientific Journal Video about Spectral Reflectometric Microscopy on Myelinated Axons In Situ at JoVE.com

Spectral Reflectometric Microscopy on Myelinated Axons In Situ

Спектральная Рефлектометрические микроскопия на Миелинизированные аксоны в Situ

Здесь мы представляем пошаговые протокол для визуализации Миелинизированные аксоны в кусочек фиксированной мозга, используя ярлык свободный наноразмерных изображения метод, основанный на спектральные рефлектометрии.

In a mammalian nervous system, myelin provides an electrical insulation by enwrapping the axon fibers in a multilayered spiral. Inspired by its ...

This technique can help answer key questions in the myelin field, such as myelin plasticity and demyelination. The main advantage of this technique is that it allows the study of the nanostructure of myelinated axon in intact brain tissue without any complex labeling or a sample preparation. Here, we will demonstrate on the application in a brain slice, but this technique can be extended to living animals.After fixing and slicing mouse brain tissue according to the text protocol, prepare one glass slide and two cover glasses for each tissue slice. Use a glass cutter to cut one of the square cover glasses in half. Then, create a spacer by using superglue to attach the two pieces onto the glass slide.Using a brush or a pipette, harvest a brain slice and lay the tissue on a glass slide between the spacer, taking care not to fold the tissue. Dispense 100 microliters of PBS on the tissue surface. Then, place the second square cover glass on the top of the tissue while avoiding the introduction of air bubbles.Use nail polish to seal around the cover glass to prevent evaporation of PBS and contamination by dust during the subsequent imaging session. At least one hour before imaging, switch on the microscope to allow thermal stabilization of the laser source. Then turn on the software for spectral scanning and click the acquire button on top of the GUI.Turn on the software shutter for the white light laser and photomultiplier tube. Under acquisition mode, select the XY lambda mode on the dropdown list. The laser input mode is then automatically changed from constant percent to constant power.Under lambda excitation, lambda scan settings, uncheck the automatic SP movement box and set the spectral window for the input laser to 470 to 670 nanometers and the spectral step size to four nanometers. Set the spectral range of PMT to 450 to 690 nanometers by double-clicking or moving the adjustment bar for spectral range. Select a water-immersion objective lens suitably with a high numerical aperture.Give any value to the PMT and laser power to activate the AOBS configuration and live scan button. Under AOBS configuration, switch to the optical path by checking reflection. Next, mount a reference mirror on the microscope's stage with the surface facing the objective lens.If it is not easy to put the mirror on the microscope stage, adhere a mirror onto the flat plate. Adjust the microscope's stage to align the focal plane to the mirror's surface. Then, adjust the PMT gain and the laser power, considering the dynamic range of the detector.Under a pseudocolor, check that there is no saturation throughout the wavelength range. If saturation is observed, lower the laser power. Then run the lambda scan acquisition.Remove the mirror from the stage and repeat the same acquisition without a sample in order to obtain the dark reference. Then save the data in a multi-stacked TIF format. To carry out SpeRe image acquisition, place the mounted tissue on the microscope's stage.To roughly align the tissue to the focal plane of the objective lens, through an eyepiece use wide-field fluorescence mode. With the live scan on, control the microscope's stage to align the focal plane to the region of interest in the tissue. To avoid background noise from the coverslip, select a target region of at least 15 micrometers in depth from the glass tissue interface.Acquire the spectral image stack for the target region using the same procedure as demonstrated earlier in this video. Then save the data for the tissue and the dark offset in multi-stacked TIF format. To process the images in ImageJ, open the spectral data for the reference mirror and brain tissue.Select the ROIs for the opened image stacks, the central area for the reference mirror, and the segment of an axon fiber for the brain tissue. Then run image, stacks, plots Z-axis profile to acquire the raw spectra for the selected ROIs. The axon fibers may be structurally heterogeneous along their lengths, hence, selecting the ROI on a small axon segment typically less than five micrometers is recommended to minimize partial volume artifacts.Open the dark offset data, one taken for the reference mirror and the other taken for the brain tissue, and plot the Z-axis profile as just demonstrated. Then use the copy and paste options to save all acquired options. To carry out baseline correction and SpeRe signal analysis, subtract the offset spectra from the spectra of the reference mirror and the brain tissues.Normalize each spectrum by dividing the maximum intensity of the spectrum. Enter the wavenumber by taking the reciprocal of wavelength used in experiment, normalize the spectrum of the axon by dividing that of the reference mirror, and subtract DC offset from the normalized spectrum. And then obtain the wavenumber frequency by fitting the acquired spectrum to a sinusoid.Convert the acquired wavenumber frequency to periodicity by taking the reciprocal and convert the wavenumber periodicity to the axon diameter using the equation shown here. In this experiment, fixed brain slices were fluorescently stained against myelin and SpeRe imaging was carried out with a light dose an order of magnitude lower than conventional fluorescence confocal microscopy. The SpeRe signal was localized along the center of the myelinated axons as expected by the geometry of the optical reflection.From the reflectant spectrum of an axon segment, the wavenumber periodicity was obtained, which was subsequently converted to axon diameter. This graph illustrates a transversal profile of fluorescence intensity from the boxed region here, and the diameter measured by SpeRe was found to be in good agreement with the fluorescence-based measurement. The SpeRe imaging is based on optical reflection.Thus, a silica-based coverslip can introduce significant background noise. In the optics setup, the background noise was considerable when the imaging depth from the coverslip was less than five micrometers but was avoided when the imaging depth is greater than 15 micrometers. The calibration step is not required for every experiment but is recommended at least once a week.Once calibration is completed, the imaging procedure can be finished typically within 20 seconds for each field of view. While attempting this procedure, it is important to remember to consider the dynamic latency of the detector for full-spectra scanning. After watching this video, you should have a good understanding of how to obtain the nanostructure from myelinated axons using reflectance images.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Spectral Reflectometric Microscopy on Myelinated Axons In Situ

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

In vivo Visualization of Synaptic Vesicles Within Drosophila Larval Segmental Axons

В естественных условиях Визуализация синаптических пузырьков В дрозофилы личинок Сегментные Аксоны

Elucidating the mechanisms of axonal transport has shown to be very important in determining how defects in long distance transport affect different ...

Live Imaging of Dorsal Root Axons after Rhizotomy

Живая съемка Спинной Аксоны Корневая после ризотомия

The primary sensory axons injured by spinal root injuries fail to regenerate into the spinal cord, leading to chronic pain and permanent sensory loss. ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

Функциональные нейровизуализации с использованием ультразвуковых Гематоэнцефалический Разрушение барьеров и марганца-МРТ

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Voltage-sensitive Dye Recording from Axons, Dendrites and Dendritic Spines of Individual Neurons in Brain Slices

Напряжение чувствительные краски Запись с аксонов, дендритов и дендритных шипиков отдельных нейронов в срезах мозга

Understanding the biophysical properties and functional organization of single neurons and how they process information is fundamental for understanding ...

Analyzing Murine Schwann Cell Development Along Growing Axons

Анализируя мышиной сотовых шванновских развития по Растущие аксоны

The  development of peripheral nerves is an intriguing process. Neurons send out  axons to innervate specific targets, which in humans are often more than ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

В Vivo Двухфотонные изображений зависящие от опыта молекулярные изменения в корковых нейронов

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Laser Nanosurgery of Cerebellar Axons In Vivo

Лазерная нанохирургии мозжечка Аксоны<em&gt; В Vivo</em

Only a few neuronal populations in the central nervous system (CNS) of adult mammals show local regrowth upon dissection of their axon. In order to ...

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons

Живая съемка никотина индуцированной сигнализации кальция и высвобождение нейромедиаторов Наряду вентральной гиппокампа Аксоны

Sustained enhancement of axonal signaling and increased neurotransmitter release by the activation of pre-synaptic nicotinic acetylcholine receptors ...

Rapid In Situ Hybridization using Oligonucleotide Probes on Paraformaldehyde-prefixed Brain of Rats with Serotonin Syndrome

Rapid In Situ Hybridization using Oligonucleotide Probes on Paraformaldehyde-prefixed Brain of Rats with Serotonin Syndrome

Быстрый<em&gt; На месте</em&gt; Гибридизация с использованием олигонуклеотидных зондов на ПАРАФОРМАЛЬДЕГИДОМ префиксом мозге крыс с синдромом серотонина

3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA; ecstasy) toxicity may cause region-specific changes in serotonergic mRNA expression due to acute serotonin ...

Determination of Photoreceptor Cell Spectral Sensitivity in an Insect Model from In Vivo Intracellular Recordings

Determination of Photoreceptor Cell Spectral Sensitivity in an Insect Model from In Vivo Intracellular Recordings

Определение фоторецепторных клеток спектральной чувствительности в насекомых модель от<em&gt; В Vivo</em&gt; Внутриклеточные Записи

Intracellular recording is a powerful technique used to determine how a single cell may respond to a given stimulus. In vision research, intracellular ...