Name: mating-based overexpression library screening in yeast
Uploaded: 2018-07-06T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mating-based Overexpression Library Screening in Yeast at JoVE.com

Мы благодарны за вдумчивого обсуждения с членами Ju лаборатория и Лаборатория Чжун и финансовой поддержке Райт государственный университет.

Примечание: Протокол, описанные здесь предназначен для отбора библиотека плазмид, содержащихся в десяти 96-луночных пластины, но можно вычислить по маштабу вверх или вниз соответственно. Протокол должен быть повторен для завершения проверки всей библиотеки. Обычно скрининг против 10 пл?...

<ol>
	<li>Dujon, B. A., Louis, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+diversity+and+evolution+in+the+budding+yeasts+(Saccharomycotina).">Genome diversity and evolution in the budding yeasts (Saccharomycotina).</a> Genetics. 206 (2), 717-750 (2017).</li><li>Khurana, V., Lindquist, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+neurodegeneration+in+Saccharomyces+cerevisiae:+why+cook+with+baker's+yeast.">Modelling neurodegeneration in Saccharomyces cerevisiae: why cook with baker's yeast.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11 (6), 436-449 (2010).</li><li>Willingham, S., Outeiro, T. F., DeVit, M. J., Lindquist, S. L., Muchowski, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yeast+genes+that+enhance+the+toxicity+of+a+mutant+huntingtin+fragment+or+alpha-synuclein.">Yeast genes that enhance the toxicity of a mutant huntingtin fragment or alpha-synuclein.</a> Science. 302 (5651), 1769-1772 (2003).</li><li>Outeiro, T. F., Lindquist, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yeast+cells+provide+insight+into+alpha-synuclein+biology+and+pathobiology.">Yeast cells provide insight into alpha-synuclein biology and pathobiology.</a> Science. 302 (5651), 1772-1775 (2003).</li><li>Cooper, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alpha-synuclein+blocks+ER-Golgi+traffic+and+Rab1+rescues+neuron+loss+in+Parkinson's+models.">Alpha-synuclein blocks ER-Golgi traffic and Rab1 rescues neuron loss in Parkinson's models.</a> Science. 313 (5785), 324-328 (2006).</li><li>Treusch, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+links+between+Abeta+toxicity,+endocytic+trafficking,+and+Alzheimer's+disease+risk+factors+in+yeast.">Functional links between Abeta toxicity, endocytic trafficking, and Alzheimer's disease risk factors in yeast.</a> Science. 334 (6060), 1241-1245 (2011).</li><li>Ju, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+yeast+model+of+FUS/TLS-dependent+cytotoxicity.">A yeast model of FUS/TLS-dependent cytotoxicity.</a> PLoS Biology. 9 (4), 1001052 (2011).</li><li>Sun, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+determinants+and+genetic+modifiers+of+aggregation+and+toxicity+for+the+ALS+disease+protein+FUS/TLS.">Molecular determinants and genetic modifiers of aggregation and toxicity for the ALS disease protein FUS/TLS.</a> PLoS Biology. 9 (4), 1000614 (2011).</li><li>Johnson, B. S., McCaffery, J. M., Lindquist, S., Gitler, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+yeast+TDP-43+proteinopathy+model:+Exploring+the+molecular+determinants+of+TDP-43+aggregation+and+cellular+toxicity.">A yeast TDP-43 proteinopathy model: Exploring the molecular determinants of TDP-43 aggregation and cellular toxicity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (17), 6439-6444 (2008).</li><li>Fleming, M. S., Gitler, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+yeast+plasmid+overexpression+screen.">High-throughput yeast plasmid overexpression screen.</a> Journal of Visualized Experiments. (53), e2836 (2011).</li><li>Herskowitz, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+cycle+of+the+budding+yeast+Saccharomyces+cerevisiae.">Life cycle of the budding yeast Saccharomyces cerevisiae.</a> Microbiological Reviews. 52 (4), 536-553 (1988).</li><li>Suter, B., Auerbach, D., Stagljar, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Yeast-based+functional+genomics+and+proteomics+technologies:+the+first+15+years+and+beyond.">Yeast-based functional genomics and proteomics technologies: the first 15 years and beyond.</a> Biotechniques. 40 (5), 625-644 (2006).</li><li>Barmada, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amelioration+of+toxicity+in+neuronal+models+of+amyotrophic+lateral+sclerosis+by+hUPF1.">Amelioration of toxicity in neuronal models of amyotrophic lateral sclerosis by hUPF1.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (25), 7821-7826 (2015).</li><li>Jackson, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+forelimb+function+by+UPF1+gene+therapy+in+a+rat+model+of+TDP-43-induced+motor+paralysis.">Preservation of forelimb function by UPF1 gene therapy in a rat model of TDP-43-induced motor paralysis.</a> Gene Therapy. 22 (1), 20-28 (2015).</li></ol>

Здесь мы описываем протокол для выполнения экран гиперэкспрессия плазмида с помощью спаривания представить библиотеку плазмида в модель дрожжей дрожжи. Используя этот подход, несколько моделей дрожжи токсичности белка нейродегенеративные заболевания может проверяться с помощью то?...

Многообещающий дрожжей Saccharomyces cerevisiae широко используется в фундаментальных научных исследований1 понять клеточных процессов, непосредственно связанных с заболеваниями человека. Кроме того он был использован в качестве модельного организма для изучения человеческих болезней связанных белков, таких как те связаны с наиболее распространенными нейродегенеративных заболеваний, включая болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона и амиотрофический Склероз (ALS)2. Преимуществом дрожжевых модели является легкость, с которой геном широкий экран может выполняться для выявления клеточных пути, относящиеся к токсичности белков, связанных с заболеванием, таким образом давая понять механизм их токсичности. Один такой экран называется гиперэкспрессия библиотека экрана, в котором каждый из 5500 дрожжи генов в библиотеку выстроились превращается в модель дрожжи для определения, какие гены могут изменять токсичности при оверэкспрессировали. Этот метод отбора успешно применяется в моделях дрожжи несколько нейродегенеративные заболевания связанных белков, включая гентингтина для болезни Гентингтона3, α-synuclein для болезни Паркинсона4,5 , Значения для болезни Альцгеймера6и Фу и TDP-43 ALS7,8,9. Хотя обычно это делается в манере высок объём10, наиболее трудоемкий этап экрана индивидуально преобразования 5500 дрожжей гены от выстроились библиотеки. Этот шаг должен выполняться каждый раз, когда показ повторяется, и всякий раз, когда модель недавно созданной дрожжи необходимо изучить. Важно найти более эффективный способ для решения этой задачи.
Стабильно дрожжевых клеток может существовать в haploid и диплоидных форм. Существует два противоположных спаривания типы клеток haploid, спаривания типа и α. Haploid клетки каждого спаривания типа производят и выделяют их собственных конкретных спаривания феромонов, которому только напротив спаривания типа клетки реагируют. Это позволяет спаривания между и α клетки для производства стабильных диплоидных клетках, a/α. Этот процесс является спонтанным и высокоэффективных11. Мы можем воспользоваться этой уникальной жизненного цикла S. cerevisiae представить библиотеку плазмиды. Говоря более конкретно каждый ген в библиотеке выстроились плазмиды будет преобразован в haploid клетки одного брачного типа, т.е., α клеток. Эти клетки, содержащие гены библиотека затем будут храниться на складе глицерина в формате выстроились 96-луночных. Для каждой модели дрожжей, который должен быть показан, дрожжевые клетки, содержащие гены библиотеки можно разморозить из глицерина запасов, и скрининга может быть сделано путем спаривания с моделью дрожжи интереса к противоположной спаривания, то есть, спаривания типа type. Эта идея использования спаривания объединить два генов в дрожжи не является новым. Она успешно применялась в высок объём дрожжей, которые скрининг 2 гибрида, в котором приманку (т.е., Gal4-ДНК связывающих домена сплавливания) построить в одном типе спаривания приняли участие путем спаривания с добычей конструкции из выстроились библиотеки 12. Тем не менее, эта стратегия никогда не применялась в гиперэкспрессия библиотека фильмов, которые всегда использовали методы традиционной трансформации.
Наша лаборатория ранее установленные дрожжи модель ALS-связанные Белка FUS7. Через гиперэкспрессия библиотека скрининга с помощью метода преобразования мы обнаружили пять дрожжи генов(ECM32, NAM8, SBP1, SKO1и VHR1), которые спасти токсичность FUS, когда оверэкспрессировали. Эти выводы были независимо подтверждены с аналогичного исследования другой группы8. hUPF1, человека гомолога ECM32, позднее было показано для подавления токсичности в первичной нейрональные клетки13 и в животной модели ALS14 также. Используя эти пять гены как подтверждение принципа, мы демонстрируем, что все пять гены аналогичным образом спасти FUS токсичности, когда они будут введены в модель дрожжи FUS путем спаривания. Поскольку дрожжи клетки, содержащие гены библиотека может хранятся постоянно на складе глицерина и возродил всякий раз, когда необходимо, этот метод, основанный на спаривание будет удалить времени шаг преобразования каждый раз, когда библиотека должна проверяться против. После спаривания высокоэффективных с без преобразования плазмида участвующих, эта стратегия также существенно снижает затраты, связанные с очищения и преобразования библиотеки большой плазмиды. Мы будем успешно применять этот метод в библиотеке, скрининг против дрожжи модели FUS.
Процедура отбора на основе спаривания кратко описана на рисунке 1. Первоначально выстроились плазмида библиотека превращается в haploid дрожжей спаривания типа α, с помощью протокола преобразования высокой пропускной способностью дрожжи в котором каждой скважины 96-луночных плиты содержит дрожжи преобразована с определенной библиотеки плазмиды. Эта коллекция преобразованные дрожжей сохраняется как глицерин запас, который может быть оттаяла и возродил для использования позже. Дрожжи модель интереса, в данном случае FUS токсичности, должен быть создан в haploid дрожжей с противоположным типом спаривания (спаривания типа). В духе высокой пропускной способности, с помощью стерильных 96-контактный репликаторы штамм FUS и штаммов дрожжей, содержащий библиотеку плазмида переданы 96-луночных пластины, содержащие богатые средства массовой информации и разрешено мат. После спаривания, небольшой объем от каждой скважины спаривания культуры передается 96-луночных пластины, содержащие синтетические отсева СМИ в котором только диплоидных дрожжи, содержащие оба FUS и библиотека гены могут расти. Роботизированная машина пятнистость затем используется для передачи культуры дрожжей от каждой скважины на плиты агара, где индуцируется выражение FUS и библиотека генов.  Кроме того дрожжевая культура выставляется для управления где FUS и библиотека гены не выразили плиты агара. После роста на плитах агара будут определены гены, которые спасти или усугубить FUS токсичности.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:555px;" width="554">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">salmon Sperm DNA (SS-DNA)</td>
			<td style="width:127px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:99px;">&#160; D1626</td>
			<td style="width:147px;"></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:183px;">YPD broth</td>
			<td style="width:127px;">Research Products International (RPI)</td>
			<td style="width:99px;">Y20090</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Granulated Agar</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">BP97445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:183px;">D-(+)-Glucose</td>
			<td style="width:127px;">Research Products International (RPI)</td>
			<td style="width:99px;">G32040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:183px;">D-(+)-Galactose</td>
			<td style="width:127px;">Research Products International (RPI)</td>
			<td style="width:99px;">G33000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:183px;">D-(+)-Raffinose Pentahydrate</td>
			<td style="width:127px;">Research Products International (RPI)</td>
			<td style="width:99px;">R20500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Ammonium Sulfate</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">A702-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Synthetic Ura- drop out medium</td>
			<td style="width:127px;">Clontech</td>
			<td style="width:99px;">630416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:183px;">Yeast amino acid drop out supplement -Histidine/-Uracil</td>
			<td>Clontech</td>
			<td>630422</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:183px;">Yeast Nitrogen Base without Amino Acids and Ammonium Sulfate</td>
			<td style="width:127px;">Research Products International (RPI)</td>
			<td style="width:99px;">Y20060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Dimethyl Sulfoxide (DMSO)</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">S67496</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Lithium acetate, anhydrous</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">AC268640010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Polyethylene Glycol 3350 (PEG-3350)</td>
			<td style="width:127px;">Spectrum Chemical&#160;</td>
			<td style="width:99px;">PO125-12KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">96 Pin Replicator&#160;</td>
			<td style="width:127px;">Scinomix</td>
			<td style="width:99px;">SCI-5010-OS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Nunc OmniTray</td>
			<td style="width:127px;">Thermo Sci</td>
			<td>140156</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:183px;">Corning Costar 96 well assay plate, round bottom with lid</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">07-200-760</td>
			<td>non-treated, sterile</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Eppendorf&#160;Research plus Multichannel Pipette</td>
			<td style="width:127px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:99px;">TI13690052</td>
			<td>30-300ul volume</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:183px;">Fisherbrand&#160;Isotemp Digital Dry Baths/Block Heaters</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">88-860-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Eppendorf&#160;MixMate</td>
			<td style="width:127px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:99px;">21-379-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Eppendorf 5810R Centrifuge</td>
			<td style="width:127px;">Fisher Sci</td>
			<td style="width:99px;">05-413-112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:183px;">Avanti J-26 XPI Centrifuge</td>
			<td style="width:127px;">Beckman</td>
			<td style="width:99px;">393127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">MultiFlo FX Multi-Mode Dispenser</td>
			<td style="width:127px;">BioTek</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:183px;">Rotor HDA&#160;&#160;</td>
			<td style="width:127px;">Singer Instruments</td>
			<td style="width:99px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mating-based overexpression library screening in yeast

Многообещающий дрожжи широко используется как модель в изучении белков, связанные с заболеваниями человека. Генетический скрининг генома общесистемной является мощным инструментом, широко используется в исследованиях дрожжей. Выражение целого ряда нейродегенеративные заболевания связанных белков в дрожжей вызывает цитотоксичности и совокупных формирования, изложив выводы, видел у больных с этими расстройствами. Здесь мы описываем метод для проверки модель дрожжи связанные боковой амиотрофический склероз Белка FUS для модификаторов его токсичности. Вместо преобразования, эта новая платформа скрининга зависит спаривания дрожжей, чтобы внедрить библиотеку выстроились плазмид в модель дрожжей. Спаривания метод имеет две явные преимущества: во-первых, она очень эффективна; Во-вторых, предварительно преобразованные выстроились библиотека плазмиды могут храниться для долгосрочного как глицерин запас и быстро прикладной для других экранов без трудоемкого шаг преобразования в модель дрожжи каждый раз. Мы демонстрируем, как этот метод может успешно использоваться для экран для генов, которые изменяют токсичность FUS.

ALS-связанные Белка FUS, белок, связывающий РНК/ДНК, был ранее учился в haploid дрожжи7,,8. Генетический скрининг с использованием метода на основе преобразования обнаружил несколько дрожжи генов, которые подавляют FUS токсичности. Человека гомо?...

Watch this Scientific Journal Video about Mating-based Overexpression Library Screening in Yeast at JoVE.com

Mating-based Overexpression Library Screening in Yeast

Эта статья представляет метод, основанный на спаривания, для облегчения гиперэкспрессия скрининга в многообещающий дрожжей с использованием библиотеки выстроились плазмиды.

На основе спаривания гиперэкспрессия библиотека скрининга в дрожжи

Budding yeast has been widely used as a model in studying proteins associated with human diseases. Genome-wide genetic screening is a powerful tool ...

Research

JoVE Journal

Genetics

Targeted in Situ Mutagenesis of Histone Genes in Budding Yeast

Targeted in Situ Mutagenesis of Histone Genes in Budding Yeast

целевое<em&gt; В Ситу</em&gt; мутагенеза гистона Гены в почкующихся дрожжах

We describe a PCR- and homologous recombination-based system for generating targeted mutations in histone genes in budding yeast cells. The resulting ...

A Universal Protocol for Large-scale gRNA Library Production from any DNA Source

Универсальный протокол для крупномасштабных gRNA библиотека производства из любого источника ДНК

The popularity of the CRISPR/Cas9 system for both genome and epigenome engineering stems from its simplicity and adaptability. An effector (the Cas9 ...

Robust DNA Isolation and High-throughput Sequencing Library Construction for Herbarium Specimens

Надежные ДНК изоляции и высокопроизводительного секвенирования строительство библиотеки для образцов гербария

Herbaria are an invaluable source of plant material that can be used in a variety of biological studies. The use of herbarium specimens is associated with ...

Gene-targeted Random Mutagenesis to Select Heterochromatin-destabilizing Proteasome Mutants in Fission Yeast

Джин целевой случайных мутагенеза выбрать дестабилизирующих гетерохроматин протеасом мутантов в деления дрожжевой

Random mutagenesis of a target gene is commonly used to identify mutations that yield the desired phenotype. Of the methods that may be used to achieve ...

Ultralow Input Genome Sequencing Library Preparation from a Single Tardigrade Specimen

Сверхнизкое ввода геном последовательность подготовки библиотеки от Tardigrade единичная

Tardigrades are microscopic animals that enter an ametabolic state called anhydrobiosis when facing desiccation and can return to their original state ...

Single Molecule Fluorescence In Situ Hybridization (smFISH) Analysis in Budding Yeast Vegetative Growth and Meiosis

Single Molecule Fluorescence In Situ Hybridization smFISH Analysis in Budding Yeast Vegetative Growth and Meiosis

Одной молекулы флуоресценции In Situ гибридизация (smFISH) анализ многообещающий вегетативного роста дрожжей и мейоз

Single molecule fluorescence in situ hybridization (smFISH) is a powerful technique to study gene expression in single cells due to its ability to detect ...

Characterizing Histone Post-translational Modification Alterations in Yeast Neurodegenerative Proteinopathy Models

Характеризуя гистона столб-поступательные изменения изменения в моделях Neurodegenerative Proteinopathy дрожжей

Neurodegenerative diseases, such as amyotrophic lateral sclerosis (ALS) and Parkinson&#39;s disease (PD), cause the loss of hundreds of thousands of lives ...

A Deep-sequencing-assisted, Spontaneous Suppressor Screen in the Fission Yeast Schizosaccharomyces pombe

A Deep-sequencing-assisted, Spontaneous Suppressor Screen in the Fission Yeast Schizosaccharomyces pombe

При содействии Deep последовательности, спонтанное подавитель экран в деления дрожжевой Делящиеся дрожжи

A genetic screen for mutant alleles that suppress phenotypic defects caused by a mutation is a powerful approach to identify genes that belong to closely ...

HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA Library Screening Identifying Critical CTCF Boundaries

HOX Loci Focused CRISPR/sgRNA Library Screening Identifying Critical CTCF Boundaries

Гомеозисные Локусов Focused ТРИФОСФАТЫ/sgRNA библиотека скрининга выявление критических CTCF границы

CCCTC-binding factor (CTCF)-mediated stable topologically associating domains (TADs) play a critical role in constraining interactions of DNA elements ...

Expression, Purification, and Liposome Binding of Budding Yeast SNX-BAR Heterodimers

Выражение, очищение и липосома Связывание подающих надежды дрожжей SNX-BAR Heterodimers

SNX-BAR proteins are an evolutionarily conserved class of membrane remodeling proteins that play key roles in sorting and trafficking of protein and ...