Name: minimally invasive embryo transfer and embryo vitrification at the optimal embryo stage in rabbit model
Uploaded: 2019-05-16T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af midler fra ministeriet for økonomi og konkurrenceevne i Spanien (AGL2017-85162-C2-1-R) og Generalitat Valenciana-forskningsprogrammet (PrometeoII 2014/036). Engelsk tekstversion revideret af N. Macowan English Language service

Alle eksperimentelle procedurer, der blev anvendt i dette studie, blev udført i overensstemmelse med direktiv 2010/63/EU om dyreforsøg og revideret og godkendt af det etiske udvalg til forsøg med dyr fra Universitat Politècnica de València. Spanien (forsknings kode: 2015/VSC/PEA/00170). XGD, FMJ, MPVC og JSV er indehaver af et autorisations certifikat udstedt af den valencianske regerings administration til forsøg på dyr. XGD er bemyndiget til på stedet at føre tilsyn med dyrenes velfærd og pasning under forsø...

Siden den første dokumenterede levende fødsel tilfælde fra overførte embryoner9, denne teknik og kanin arter er blevet afgørende i reproduktive undersøgelser. Desuden kræver embryoforskning, der involverer manipulation, produktion, kryopræservering osv. , som et sidste trin evaluering af embryo kapacitet til at generere sundt, fuldtids afkom. Derfor er Embryo Transfer teknik uundværlig13,28. I årenes løb er de kirurgisk...

Med henblik på at omgå menneskelig infertilitet eller forbedre udbredelsen af husdyr af høj genetisk værdi og bevare dyregenetiske ressourcer, en række teknikker kollektivt betegnes assisteret reproduktion teknologier, såsom superovulation, i vitro -befrugtning, embryo kultur eller kryopræservering, blev udviklet1,2. I øjeblikket, hormonelle behandlinger er givet for at stimulere æggestokkene og producere et stort antal af follikeltal ovarde follikler1. Oocytter indsamlet fra disse follikler kan modnes, befrugtet, og udviklet in vitro indtil de er enten nedfrosne eller overføres til surrogat mødre3. Under disse behandlinger udsættes kønsceller og zygotter dog for en række ikke-fysiologiske processer, der kan kræve embryo tilpasning for at overleve under disse betingelser4,5. Denne tilpasning er mulig på grund af tidlig embryo plasticitet, som tillader Foster ændringer i genekspression og udviklingsmæssig programmering6. Men disse ændringer kan påvirke de efterfølgende stadier af embryo udvikling indtil voksenalderen, og det er nu almindeligt accepteret, at metoder, timing, kryopreserverings procedure eller kulturforhold viser forskellige resultater på embryo skæbne7 , 8. for at belyse de specifikke afledte virkninger af ARTs, er brugen af velkarakteriserede dyremodeller derfor uundgåelig.
Den første dokumenterede levende fødsel som følge af overførsel af pattedyr embryoner fandt sted i 18909. I dag er embryo overførsel (ET) til en surrogat kvinde et afgørende skridt i studiet af ART-induceret effekt under præimplantationen på de efterfølgende embryon udviklingsstadier10. ET teknikker afhænger af størrelsen og anatomisk struktur af hvert dyr. I tilfælde af store animalske modeller, har det været muligt at udføre et ved transcervikal ikke-kirurgiske et-teknikker, men i mindre-størrelse arter kateterisering af livmoderhalsen er mere komplekse og kirurgiske teknikker er ofte anvendes11. Men kirurgisk ET kan forårsage hæmoraging, der kan forringe implantation og embryo udvikling, som blodet kan invadere uterus lumen, forårsager embryo død10. Overskridende ikke-kirurgiske et-teknikker anvendes stadig i mennesker, bavian, kvæg, grise og mus12,13,14,15,16,17, men kirurgisk ETS anvendes stadig i arter som geder, får eller andre dyr, der udgør yderligere vanskeligheder10,18,19,20,21, såsom kaniner (to uafhængige cervices) eller mus (lille størrelse). Ikke desto mindre, kirurgisk overførsel metoder tendens til at have gradvist blevet erstattet af mindre invasive metoder. Endoskopi blev brugt til at overføre embryoner, for eksempel i kaniner, svin og små drøvtyggere18,19,20. Disse minimalt invasive endoskopi metoder kan anvendes til at overføre embryoner til ampulla via infundibulum, som er afgørende for kaniner og har påvist gavnlig effekt i nogle arter20. Dette er baseret på betydningen af den korrekte dialog mellem embryo og mor under tidlige embryon stadier i ovikanalen. Som nævnt ovenfor, embryo Remodeling, der finder sted i kaniner under embryo migration gennem ovidukten er afgørende for at opnå embryoner i stand til implantat22,23.
Dyremodeller af større størrelse, såsom kvæg, er interessante, fordi de biokemiske og præimplantations funktioner ligner dem i menneskelige arter24. Store dyr er imidlertid for dyre at bruge i forundersøgelser, og gnavere betragtes som en ideel model (76% modelorganismer er gnavere) til laboratorieforskning25. Ikke desto mindre giver kanin modellen nogle fordele i forhold til gnavere i reproduktionsstudier, da nogle reproduktive biologiske processer udstillet af mennesker er mere ens hos kaniner end hos mus. Mennesker og kaniner præsenterer en lignende kronologisk embryonale genomaktivering, gastrulation og hemochorial placenta struktur. Desuden, ved hjælp af kaniner er det muligt at kende den nøjagtige timing af befrugtning og graviditet stadier på grund af deres induceret ægløsning25. Kanin livscyklus er kort, fuldføre dræningen i 31 dage og nå puberteten på omkring 4-5 måneder; dyret er let at håndtere på grund af sin føjeligt og ikke-aggressive adfærd, og dens vedligeholdelse er meget økonomisk i forhold til bekostning af større dyr. Desuden er det afgørende at nævne, at kaniner har en duplex livmoder med to uafhængige cervixer11,25. Dette placerer kaninen i en privilegeret position, da embryoner fra de forskellige forsøgsgrupper kan overføres til det samme dyr, men til et andet uterin horn. Dette giver os mulighed for at sammenligne både eksperimentelle virkninger, reducere den maternel faktor fra resultaterne.
I dag, ikke-kirurgiske ET-metoder er ikke i brug i kanin. Nogle undersøgelser foretaget i slutningen af 90 ' erne ved hjælp af en transcervikal et teknik resulterede i lave leveringshastigheder spænder fra 5,5% til 20,0%11,26 versus 50-65% ved kirurgiske metoder, blandt dem laparoskopi procedure beskrevet af Besenfelder og brem18. Den lave succesrate for disse ikke-kirurgiske ET-metoder i kaniner sammenfaldende med manglen på den nødvendige embryo remodeling i ovikanalen, som undgås i transkvical ET. Her beskriver vi en effektiv minimalt invasiv laparoskopisk et procedure ved hjælp af kaniner som model organisme. Denne teknik giver en model for yderligere reproduktiv forskning i store dyr og mennesker.
Da kaniner har et særligt snævert tidsvindue til embryo implantation, kræver et i denne art en høj grad af synkronisering mellem fostrets udviklingsfase og den fysiologiske status for recipient27. I nogle tilfælde, efter en reproduktionsbehandling, der bremser embryo udvikling (såsom in vitro -kultur) eller ændrer endometriets modtagelighed (såsom superovulation behandlinger), der er ingen Synchrony mellem embryonet og moderen livmoderen. Disse situationer kan have en negativ indvirkning på udfaldet. For at reagere i disse sammenhænge, beskriver vi en effektiv kanin Morula forglasning protokol, der giver os mulighed for at pause, organisere og genoptage forsøgene. Denne proces er logistisk ønskelig for reproduktive undersøgelser og giver os kapacitet til langtidsopbevaring af embryoner, så deres transport. Den laparoskopiske procedure og kryopreserverings strategier giver bedre planlægning af undersøgelser med færre dyr. Således tilbyder vores metodologi hygiejniske og økonomiske fordele og er i overensstemmelse med konceptet om 3Rs (udskiftning, reduktion og forfinelse) af animalsk forskning med det erklærede mål at forbedre menneskelig behandling af forsøgsdyr. Således, med disse metoder, kaniner udgør en ideel model organisme for in vivo reproduktive assays.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>332</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>626</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buserelin Acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>B3303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clorhexidine digluconate soap</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>0265DCCJ500B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clorhexidine digluconate solution</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>0265DCCA500B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2</td>
			<td>Air Liquide</td>
			<td>99921</td>
			<td>CO2 N48.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Incubator</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>15385194</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl Sulfoxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>W387509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s phosphate-buffered saline (DPBS)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5773</td>
			<td>Without calcium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric razor</td>
			<td>Oster Golden A5</td>
			<td>078005-140-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endoscope camera</td>
			<td>Optomic Spain S.A</td>
			<td>OP-714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endoscope trocar with silicone leaflet valve</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>30114GK</td>
			<td>Lightweight trocar model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enrofloxacin</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>9993046</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epicraneal needle 23G</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>514056353</td>
			<td>Smaller needles can be also used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidural catheter</td>
			<td>Vygon corporate</td>
			<td>187.10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidural needle</td>
			<td>Vygon corporate</td>
			<td>187.10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene Glycol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>102466-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye ointment</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>5273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine hydrochloride</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>184</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laparoscopy equipment</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>26003 AA</td>
			<td>Hopkins&#174; Laparoscope, 0&#186;-mm straight-viewing laparoscope, 30-cm length, 5-mm working channel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source</td>
			<td>Optomic Spain S.A</td>
			<td>Fibrolux 250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Nitrogen</td>
			<td>Air Liquide</td>
			<td>P1505XXX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical CO2 insufflator</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>Endoflator&#174;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>9993501</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, 35-mm</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>CLS430165-500EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic dressing (Nobecutan)</td>
			<td>IBOR medica</td>
			<td>7140028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Straw 0.25 mL</td>
			<td>IMV - technologies</td>
			<td>6431</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodide solution</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>02656DPYS500S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5880</td>
			<td>Any regular surgical grade steel small straight scissors will work.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tube for insufflator</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>20400040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16F</td>
			<td>There are cheaper options such as Leica MZ8 or Nikon SMZ-10 or SMZ-2B, to name a few.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gloves</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>087GL010075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gown</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>12261501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile mask</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>058B15924B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straw Plug</td>
			<td>IMV - technologies</td>
			<td>6431</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S7903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1-mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>11750425</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 5-mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>11773313</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urinary catheter</td>
			<td>IMV - technologies</td>
			<td>17722</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waterbath</td>
			<td>RAYPA</td>
			<td>BAE-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>525225</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbits</td>
			<td>Universitat Polit&#232;cnica de Val&#232;ncia</td>
			<td>Line A</td>
			<td>Other maternal lines, such as Line V or Line HP can be used.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimally invasive embryo transfer and embryo vitrification at the optimal embryo stage in rabbit model

Assisteret reproduktionsteknik (ARTs), såsom in vitro embryo kultur eller embryo kryopræservering, påvirker naturlige udviklingsmønstre med perinatal og postnatale konsekvenser. For at sikre en uskadelighed af ART-anvendelser er det nødvendigt at studere dyremodeller. Desuden kræver embryo udviklingsundersøgelser som et sidste skridt en evaluering af deres evne til at udvikle sunde afkom af fuld varighed. Her, embryo overførsel til livmoderen er uundværlig for at udføre enhver ARTs-relaterede eksperiment.
Kaninen er blevet brugt som en model organisme til at studere pattedyrs reproduktion i over et århundrede. Ud over sin fylogenetiske nærhed til den menneskelige art og dens lille størrelse og lave vedligeholdelsesomkostninger, det har vigtige reproduktive egenskaber såsom induceret ægløsning, en kronologi af tidlig fosterudvikling svarende til mennesker og en kort drægtighed der giver os mulighed for at studere konsekvenserne af ART ansøgning nemt. Desuden anvendes ARTs (såsom intracytoplasmisk sædinjektion, embryo kultur eller kryopræservering) med passende effektivitet i denne art.
Ved hjælp af laparoskopisk Embryo Transfer teknik og cryopreservations protokollen præsenteret i denne artikel, vi beskriver 1) hvordan man kan overføre embryoner gennem en nem, minimalt invasiv teknik og 2) en effektiv protokol for langtidsopbevaring af kanin embryoer for at give tids fleksibel logistisk kapacitet og evnen til at transportere stikprøven. De resultater, der opnås efter overførsel af kanin embryoner på forskellige udviklingsstadier, indikerer, at Morula er det ideelle Stadium for genvinding og overførsel af kanin embryoer. Således, en oviductal embryo overførsel er nødvendig, begrunder den kirurgiske procedure. Endvidere, kanin morulae er med succes vitrificeret og laparoscopover føres, beviser effektiviteten af de beskrevne teknikker.

Minimal invasiv laparoskopisk overførsel af friske eller forglasset embryoner placerer kanin blandt de bedste model dyr til reproduktive undersøgelser. Tabel 1 viser resultaterne af det friske ET-et på forskellige udviklingsstadier (figur 4) af de overførte embryoner. Overlevelsesraten ved fødslen (procentdel af embryoner resulterer i en hvalp) bevist effekten af laparoskopisk teknik beskrevet i dette papir. De højere værdier blev opn?...

Watch this Scientific Journal Video about Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model at JoVE.com

Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model

Minimalt invasivt Embryo Transfer og embryo Vitrificering på det optimale embryo stadie i kanin model

Assisteret reproduktionsteknik (ARTs) er i løbende evaluering for at forbedre resultaterne og reducere de dermed forbundne risici. Dette manuskript beskriver en minimalt invasiv Embryo Transfer procedure med en effektiv kryopreserverings protokol, der tillader brug af kaniner som en ideel dyremodel for menneskelig reproduktion.

Assisted reproductive techniques (ARTs), such as in vitro embryo culture or embryo cryopreservation, affect natural development patterns with perinatal ...

Hovedformålet med dette eksperiment er at beskrive en laparoskopisk embryooverførselsprocedure hos kanin som model. Den største fordel ved denne teknik er, at denne ene arbejder for at overføre embryoner ved hjælp af en nem, minimalt invasiv teknik. Desuden virker den effektive embryoyopræserveringsprotokol, der er beskrevet her, også til langtidsopbevaring af kaninembryonerne, hvilket giver tidsslektrisk logistisk kapacitet og evnen til at transportere prøven.Som vi ved, er assisterede reproduktive teknologier i løbende evaluering for at forbedre resultaterne og reducere de dermed forbundne risici. Derfor kan kanin ved hjælp af begge teknikker bruges som en ideel dyremodel for menneskelig reproduktion til at besvare centrale spørgsmål på dette område, såsom virkningerne af in vitro embryo manipulation på afkom. Visuel demonstration af disse spørgsmål er afgørende, da embryon overførsel skridt er vanskelige at lære, fordi det skal gøres med stor præcision for at sikre succes af teknikken.Ved embryonal vitrificering nedsænkes embryonerne i enslibrerende opløsning i to minutter efterfulgt af en et minuts inkubation i vitrificeringsopløsning. Ved inkubationens afslutning indbelægges embryonerne i et minihalm af mikroliterplast, og den lukkede ende af minihalmen med en passende mikroforpensring på en milliliter. Aspirat base medium op til en tredjedel af halmlængde, efterfulgt af en lille luftboble.Dernæst skal du bruge et stereomikroskop til at aspirere embryonerne i 40 mikroliter vitrificeringsopløsning, efterfulgt af en anden lille luftboble og nok base medium til at flytte første flydende fraktion op til bomuld af mini-halm. Luk derefter den åbnede ende af mini-halm med et halm stik, kaste mini-halm direkte i flydende kvælstof for at opnå vitrificering, og gemme mini-halm i en flydende nitrogen dewar. For at tø embryonerne op til en overførsel skal mini-halmene anvendes vandret 10 centimeter fra den flydende nitrogendamp i 20 til 30 sekunder.Når krystalliseringsprocessen begynder inde i mini-halm, nedsænkes mini-halm i 25 grader celsius vandbad i 10 til 15 sekunder. Straks fjerne mini-halm og bomuld stik og bruge en tilkoblet mikrohænnger til at udvise mini-halm indhold i en plade, der indeholder 25 grader celsius base medium suppleret med 0,33 molar saccharose opløsning, hvor embryoner skal forblive i løbet af fem minutter. Derefter overføres embryonerne til en plade af frisk basismedium i yderligere fem minutters inkubation.Så mange dage før som alder af embryoner, der skal overføres, observere turgiditet og farve vulvaer af de tilgængelige seksuelt modne 4,5 måneder gamle hunkaniner, og fremkalde ægløsning i modtagelige dyr med en enkelt intramuskulær injektion af et mikrogram buserelin acetat uanset kropsvægt. På overførselsdagen skylles de friske eller optøede embryoner i 37 grader celsius basismedium under et stereomikroskop, og et passende konfigureret epiduralkateter på 17 måler til en millilitersprøjte. Aspire en centimeter base medium i kateteret, efterfulgt af en lille luftboble.Derefter aspirere fem til syv embryoner og 10 mikroliter af base medium, efterfulgt af en anden lille luftboble, og en sidste en centimeter af base medium. Når embryonerne er blevet lastet, skal du placere den bedøvede modtagerkanin i et bur på en opvarmningsfase og anvende salven i dyrets øjne. Efter at have bekræftet en manglende reaktion på pedalrefleks, barbere pelsen fra bugen, rengør det kirurgiske område med chlorhexidin gluconat sæbe, og fjern eventuelle resterende hår.Dæk området med en steril drapere med et hul til det kirurgiske område, og indsæt en endoskopisk trokar fem centimeter ind i bughulen, to centimeter caudal til zyphoid processen, og bruge et tryk, der regulerer mekanisk insufflator at puste peritoneal hulrum. Sæt endoskopkameraet gennem endoskopet trokar, og indsæt den 17-gauge epidural nål i lyskeområdet, to til tre centimeter fra infundibulum. Sæt det indlæste kateter gennem epiduralnålen ind i maven, og indsæt en til to centimeter af epiduralkatetret gennem infundibulum i ampulla.Tryk forsigtigt kateteret stemplet ned for at frigøre embryonerne i oviukten. Begge luftbobler skal komme ud af kateteret. Fjern kateteret lige efter embryonerne er blevet frigivet, og aspirere og slip det resterende medie for at bekræfte fraværet af embryoner.Efter at have bekræftet en vellykket overførsel af embryoner, fjerne epiduralnålen og endoskopet kameraet, og frigive abdominal kuldioxid gennem endoskopisk trokar. Rengør trokarens snit med chlorhexidin opløsning, og luk såret med en mikronåret aluminium og en plast dressing. Derefter behandle dyret med de relevante antibiotika og analgetika, og overvåge dyret, indtil fuld helbredelse.Minimalt invasiv laparoskopisk embryooverførsel placerer kaninen blandt de bedste dyremodeller til reproduktionsundersøgelser med en høj procentdel af overførte friske embryoner, der resulterer i en hvalp. Især opnås højere værdier, når den friske embryooverførsel udføres med embryoner i enten den tidlige eller kompakte morulae fase. Lignende resultater observeres efter tidlig og komprimeret forglasset kaninmorteloverførsel, især med kompakt morulae, hvilket bekræfter effekten og pålideligheden af denne teknik til overførsel af friske iglaserede embryoner hos kaniner.Efter denne procedure, andre metoder som betinget Assistive Reproduktiv Technologies kan udføres for at besvare yderligere spørgsmål som, hvordan tilsætning af tætheder kan pådrage sig i en smertestillende effekt senere i livet. Efter den seneste udvikling, denne teknik baner vejen for forskere inden for reproduktion til at udforske denne effekt hos mennesker baseret på den tætte fylogenetiske afstand mellem kanin og mennesker. Således kan denne teknik give resultater let overføres til human klinisk medicin, samt i andre pattedyr arter.Glem ikke, at vores metode giver nogle hygiejniske og økonomiske fordele i overensstemmelse med begrebet tre R's af dyrevelfærd, Udskiftning, Reduktion, og Raffinement, ved at have til hensigt målet om at forbedre den menneskelige behandling af forsøgsdyr.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Microbead Implantation in the Zebrafish Embryo

Mikroperle Implantation i Zebrafisk Embryo

The zebrafish has emerged as a valuable genetic model system for the study of developmental biology and disease. Zebrafish share a high degree of genomic ...

Imaging Subcellular Structures in the Living Zebrafish Embryo

Imaging Subcellulære Strukturer i Living Zebrafisk Embryo

In vivo imaging provides unprecedented access to the dynamic behavior of cellular and subcellular structures in their natural context. Performing such ...

Observing Mitotic Division and Dynamics in a Live Zebrafish Embryo

Observation Mitotisk Division og Dynamics i en Live zebrafisk Embryo

Mitosis is critical for organismal growth and differentiation. The process is highly dynamic and requires ordered events to accomplish proper chromatin ...

Embryo Microinjection and Electroporation in the Chordate Ciona intestinalis

Embryo Microinjection and Electroporation in the Chordate Ciona intestinalis

Embryo Mikroinjektion og Elektroporering i Chordatzoologi<em&gt; Ciona intestinalis</em

Simple model organisms are instrumental for in vivo studies of developmental and cellular differentiation processes. Currently, the evolutionary distance ...

Identification Of Erythromyeloid Progenitors And Their Progeny In The Mouse Embryo By Flow Cytometry

Identifikation af erythromyeloidprogenitorer og deres afkom i musembryoen ved flowcytometri

Macrophages are professional phagocytes from the innate arm of the immune system. In steady-state, sessile macrophages are found in adult tissues where ...

Use of Immunolabeling to Analyze Stable, Dynamic, and Nascent Microtubules in the Zebrafish Embryo

Brug af Immunolabeling til at analysere stabil, dynamisk og vordende mikrotubuli i zebrafisk Embryo

Microtubules (MTs) are dynamic and fragile structures that are challenging to image in vivo, particularly in vertebrate embryos. Immunolabeling methods ...

AFM and Microrheology in the Zebrafish Embryo Yolk Cell

AFM og Microrheology i cellen zebrafisk Embryo æggeblomme

Elucidating the factors that direct the spatio-temporal organization of evolving tissues is one of the primary purposes in the study of development. ...

Effectiveness of the Air Stripping in Two Salmonid Fish, Rainbow Trout (Oncorhynchus Mykiss) and Brown Trout (Salmo Trutta Morpha fario)

Effectiveness of the Air Stripping in Two Salmonid Fish, Rainbow Trout Oncorhynchus Mykiss and Brown Trout Salmo Trutta Morpha fario

Effektiviteten af luft Stripping i to laksefisk fisk, Regnbueørred (Oncorhynchus Mykiss) og ørred (Salmo Trutta Morpha fario)

Egg collection is one of the most crucial procedures during fish reproduction in salmonid hatcheries. Classic methods involve the use of hand massage on ...

Following Endocardial Tissue Movements via Cell Photoconversion in the Zebrafish Embryo

Følgende endokardial væv bevægelser via celle Photoconversion i zebrafisk Embryo

During embryogenesis, cells undergo dynamic changes in cell behavior, and deciphering the cellular logic behind these changes is a fundamental goal in the ...

Microinjection-based System for In Vivo Implantation of Embryonic Cardiomyocytes in the Avian Embryo

Mikroinjektion-baseret System for i Vivo Implantation af embryonale Cardiomyocytes i aviær Embryo

Interpreting the relative impact of cell autonomous patterning versus extrinsic microenvironmental influence on cell lineage determination represents a ...