Name: minimally invasive embryo transfer and embryo vitrification at the optimal embryo stage in rabbit model
Uploaded: 2019-05-16T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model at JoVE.com

Detta arbete stöddes av medel från ministeriet för ekonomi och konkurrens kraft i Spanien (AGL2017-85162-C2-1-R) och Generalitat Valenciana Research Programme (PrometeoII 2014/036). Engelsk text version reviderad av N. Macowan English language service

Alla experimentella metoder som användes i denna studie utfördes i enlighet med direktiv 2010/63/EU EEG för djur försök och granskades och godkändes av etik kommittén för försöks verksamhet med djur av Universitat Politècnica de València. Spanien (forsknings kod: 2015/VSC/PEA/00170). XGD, FMJ, MPVC och JSV innehar ett tillstånds intyg utfärdat av den statliga administrationen i Valencia för att experimentera på djur. XGD är bemyndigad att på plats övervaka djurens välbefinnande och skötsel under expe...

Sedan det första dokumenterade levande födelse fallet från överförda embryon9, denna teknik och kanin arter har blivit avgörande i reproduktions studier. Dessutom kräver embryoforskning med manipulation, produktion, frys förvaring etc. som ett sista steg en utvärdering av embryokapaciteten för att generera friska fullgångna avkomlingar. Därför är embryotransferteknik oumbärlig13,28. Under årens lopp har de kirurgis...

Med syftet att kringgå mänsklig infertilitet eller förbättra spridningen av boskap med högt genetiskt värde och bevara djurens genetiska resurser, en uppsättning tekniker kollektivt kallas Assisterad befruktning teknik, såsom superovulation, i provrörsbefruktning, embryokultur eller frys förvaring utvecklades1,2. För närvarande, hormonella behandlingar ges för att stimulera äggstockarna och producera ett stort antal antrala äggstocks cancer folliklar1. Oocyter som samlats in från dessa folliklar kan mognas, befruktas, och utvecklas in vitro tills de antingen är kryskonserverade eller överförs till surrogat mödrar3. Emellertid, under dessa behandlingar, köns celler och zygoter utsätts för en rad icke-fysiologiska processer som kan kräva embryonal anpassning för att överleva i dessa villkor4,5. Denna anpassning är möjlig på grund av tidig embryo plasticitet, som tillåter embryonala förändringar i gen uttryck och utvecklingsprogram6. Dessa modifieringar kan dock påverka de efterföljande stadierna av embryots utveckling fram till vuxen ålder, och det är nu allmänt accepterat att metoder, timing, kryokonservering eller odlings förhållanden uppvisar olika utfall på embryots öde7 , 8. därför, för att belysa de specifika inducerade effekterna av ARTs, är användningen av väl karaktäriserade djur modeller oundviklig.
Den första dokumenterade levande födelsen till följd av överföring av däggdjurs embryon ägde rum i 18909. Idag, Embryo Transfer (ET) till en surrogat hona är ett avgörande steg i att studera de ART-inducerad effekter under preimplantationen på efterföljande embryonal utveckling stadier10. ET tekniker beror på storleken och anatomiska strukturen hos varje djur. När det gäller stora djur modeller, har det varit möjligt att utföra et genom transcervikal kirurgisk et tekniker, men i mindre storlek arter kateterisering av livmoder halsen är mer komplex och kirurgisk teknik används ofta11. Men, kirurgiska ET kan orsaka blödningar som kan försämra implantation och embryonal utveckling, som blod kan invadera livmoder lumen, orsakar embryo död10. Transcervical kirurgisk et tekniker tillämpas fortfarande på människor, babianer, nötkreatur, svin och möss12,13,14,15,16,17, men kirurgiska ETS används fortfarande på arter som getter, får eller andra djur som medför ytterligare svårigheter10,18,19,20,21, såsom kaniner (två oberoende livmoder halsen) eller möss (liten storlek). Men kirurgiska överförings metoder tenderar att gradvis ha ersatts av mindre invasiva metoder. Endoskopi användes för att överföra embryon, till exempel i kaniner, grisar och små idisslare18,19,20. Dessa minimalt invasiva endoskopi metoder kan användas för att överföra embryon i ampulla via infundibulum, vilket är viktigt hos kaniner och har visat positiva effekter hos vissa arter20. Detta bygger på vikten av en korrekt dialog mellan embryo och mor under tidiga embryonala stadier i oviduct. Som nämnts ovan, är det embryo remodeling som sker i kaniner under embryo migration genom utväxande viktigt att uppnå embryon som kan implantatet22,23.
Större djur modeller, såsom nötkreatur, är intressanta eftersom biokemiska och preimplantatorisk egenskaper liknar dem i mänskliga arter24. Men stora djur är för dyra att använda i preliminära prövningar, och gnagare anses vara en idealisk modell (76% modellorganismer är gnagare) för laboratorie forskning25. Ändå ger kanin-modellen vissa fördelar jämfört med gnagare i reproduktions studier, eftersom vissa reproduktiva biologiska processer utställda av människor är mer likartade hos kaniner än hos möss. Människor och kaniner presentera en liknande kronologisk embryonal arvs massa aktivering, gastrulering och hemochorial moderkakan struktur. Dessutom, med hjälp av kaniner är det möjligt att veta den exakta tidpunkten för befruktning och graviditets stadier på grund av deras inducerad ägg lossning25. Kanin livscykler är korta, slutföra dräktitet i 31 dagar och nå puberteten vid ungefär 4-5 månader; djuret är lätt att hantera på grund av dess fogliga och icke-aggressiva beteende, och dess underhåll är mycket ekonomiskt jämfört med bekostnad av större djur. Dessutom är det viktigt att nämna att kaniner har en duplex livmoder med två oberoende cervixes11,25. Detta placerar kaninen i ett preferens-placerar, som embryon från de olika experimentella grupperna kan överföras in i samma djur, men in i ett olikt livmoder-horn. Detta gör att vi kan jämföra både experimentella effekter, minska maternell faktor från resultaten.
Idag, kirurgisk et metoder är inte i bruk i kanin. Vissa studier som genomfördes i slutet av 90-talet med hjälp av en transcervikal et-teknik resulterade i låga leverans hastigheter från 5,5% till 20,0%11,26 mot 50-65% av kirurgiska metoder, bland dem laparoskopi förfarande som beskrivs av Besenfelder och Brem18. Den låga andelen lyckade av dessa kirurgisk et metoder i kaniner sammanfaller med avsaknaden av nödvändiga embryo remodeling i oviduct, vilket undviks i transcervikal et. Här beskriver vi en effektiv minimalt invasiv laparoskopisk ET-procedur med kaniner som modellorganism. Denna teknik ger en modell för ytterligare reproduktiv forskning i stora djur och människor.
Eftersom kaniner har ett särskilt smalt tidsfönster för embryoimplantation kräver ET i denna art en hög grad av synkronisering mellan embryots utvecklingsstadium vid ET och mottagarens fysiologiska status27. I vissa fall, efter en reproduktiv behandling som bromsar embryots utveckling (t. ex. in vitro -kultur) eller förändrar den endometriereceptivitet (såsom superovulation behandlingar), det finns ingen synkronisering mellan embryot och moderns livmoder. Dessa situationer kan påverka utfallet negativt. För att svara i dessa sammanhang, beskriver vi en effektiv kanin morula förglasning protokoll som tillåter oss att pausa, organisera och återuppta experimenten. Denna process är logistiskt önskvärt för reproduktiva studier och ger oss kapacitet för långsiktig lagring av embryon, vilket möjliggör deras transport. Laparoskopisk procedur och frys bevarande strategier möjliggör bättre planering av studier med färre djur. Således, vår metodik erbjuder hygieniska och ekonomiska fördelar och överensstämmer med begreppet 3R (ersättning, minskning och förfining) av djur försök med det uttalade målet att förbättra människors behandling av försöks djur. Således, med dessa metoder, kaniner utgör en idealisk modellorganism för in vivo reproduktiva analyser.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>332</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>626</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buserelin Acetate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>B3303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clorhexidine digluconate soap</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>0265DCCJ500B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clorhexidine digluconate solution</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>0265DCCA500B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2</td>
			<td>Air Liquide</td>
			<td>99921</td>
			<td>CO2 N48.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Incubator</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>15385194</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl Sulfoxide</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>W387509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s phosphate-buffered saline (DPBS)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D5773</td>
			<td>Without calcium chloride.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric razor</td>
			<td>Oster Golden A5</td>
			<td>078005-140-002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endoscope camera</td>
			<td>Optomic Spain S.A</td>
			<td>OP-714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endoscope trocar with silicone leaflet valve</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>30114GK</td>
			<td>Lightweight trocar model.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enrofloxacin</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>9993046</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epicraneal needle 23G</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>514056353</td>
			<td>Smaller needles can be also used.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidural catheter</td>
			<td>Vygon corporate</td>
			<td>187.10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Epidural needle</td>
			<td>Vygon corporate</td>
			<td>187.10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene Glycol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>102466-M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye ointment</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>5273</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine hydrochloride</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>184</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laparoscopy equipment</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>26003 AA</td>
			<td>Hopkins&#174; Laparoscope, 0&#186;-mm straight-viewing laparoscope, 30-cm length, 5-mm working channel.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source</td>
			<td>Optomic Spain S.A</td>
			<td>Fibrolux 250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Nitrogen</td>
			<td>Air Liquide</td>
			<td>P1505XXX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical CO2 insufflator</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>Endoflator&#174;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>9993501</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, 35-mm</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>CLS430165-500EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic dressing (Nobecutan)</td>
			<td>IBOR medica</td>
			<td>7140028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Straw 0.25 mL</td>
			<td>IMV - technologies</td>
			<td>6431</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodide solution</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>02656DPYS500S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5880</td>
			<td>Any regular surgical grade steel small straight scissors will work.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone tube for insufflator</td>
			<td>Karl Storz Endoscopia Ib&#233;rica S.A.</td>
			<td>20400040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>MZ16F</td>
			<td>There are cheaper options such as Leica MZ8 or Nikon SMZ-10 or SMZ-2B, to name a few.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Gloves</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>087GL010075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gown</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>12261501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile mask</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>058B15924B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straw Plug</td>
			<td>IMV - technologies</td>
			<td>6431</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S7903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1-mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>11750425</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 5-mL</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>11773313</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urinary catheter</td>
			<td>IMV - technologies</td>
			<td>17722</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waterbath</td>
			<td>RAYPA</td>
			<td>BAE-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Alvet Escart&#237;</td>
			<td>525225</td>
			<td>To be ordered by a licensed veterinarian.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbits</td>
			<td>Universitat Polit&#232;cnica de Val&#232;ncia</td>
			<td>Line A</td>
			<td>Other maternal lines, such as Line V or Line HP can be used.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

minimally invasive embryo transfer and embryo vitrification at the optimal embryo stage in rabbit model

Assisterad reproduktions teknik (ARTs), till exempel in vitro embryokultur eller kryokonservering i embryon, påverkar naturliga utvecklings mönster med perinatal och postnatal följder. För att säkerställa att ART-tillämpningar är ofarliga är studier i djur modeller nödvändiga. Dessutom, som ett sista steg, embryonal utveckling studier kräver utvärdering av deras förmåga att utveckla fullvärdiga friska avkomma. Här är embryo överföring till livmodern oumbärlig för att utföra någon ARTs-relaterade experiment.
Kanin har använts som en modellorganism för att studera däggdjurs reproduktion i över ett sekel. Förutom sin fylogenetiska närhet till den mänskliga arten och dess ringa storlek och låga underhållskostnader, det har viktiga reproduktiva egenskaper såsom inducerad ägg lossning, en kronologi av tidig embryonal utveckling som liknar människor och en kort dräktighet som tillåter oss att studera konsekvenserna av ART ansökan lätt. Dessutom, ARTs (såsom intracytoplasmatisk spermie injektion, embryokultur, eller frys förvaring) tillämpas med lämplig effektivitet hos denna art.
Med hjälp av den laparoskopiska Embryo Transfer teknik och frys förvaring protokoll som presenteras i denna artikel, vi beskriver 1) hur man överför embryon genom en enkel, minimalt invasiv teknik och 2) ett effektivt protokoll för långtids lagring av kanin embryon för att ge tid-flexibel logistik kapacitet och förmåga att transportera provet. De resultat som erhålls efter överföring av kanin embryon på olika utvecklingsstadier visar att morula är den idealiska scenen för kanin embryo återhämtning och överföring. Således krävs en oviductal embryo överföring, vilket motiverar det kirurgiska ingreppet. Dessutom är kanin morulae framgångs rikt förglasade och laparoscopically överförs, vilket bevisar effektiviteten av de beskrivna teknikerna.

Minimalt invasiv laparoskopisk överföring av färska eller förglasade embryon placerar kaninen bland de bästa modell djuren för reproduktions studier. Tabell 1 visar resultaten av färska et i olika utvecklingsstadier (figur 4) av överförda embryon. Överlevnads graden vid födseln (andelen embryon som resulterade i en PUP) visade på effekten av den laparoskopiska teknik som beskrivs i detta dokument. De högre värdena uppnåddes nä...

Watch this Scientific Journal Video about Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model at JoVE.com

Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model

Minimalinvasiv embryoöverföring och embryo-förglasning vid det optimala embryonala steget i Rabbit Model

Assisterad reproduktions teknik (ARTs) är i ständig utvärdering för att förbättra resultaten och minska riskerna. Detta manuskript beskriver ett minimalt invasivt embryo överförings förfarande med en effektiv frys förvaring protokoll som tillåter användning av kaniner som en idealisk djur modell av mänsklig reproduktion.

Assisted reproductive techniques (ARTs), such as in vitro embryo culture or embryo cryopreservation, affect natural development patterns with perinatal ...

Huvudmålet med detta experiment är att beskriva en laparoskopisk embryoöverföringsprocedur i kanin som modell. Den största fördelen med denna teknik är att den här arbetar för att överföra embryon med hjälp av en lätt, minimalt invasiv teknik. Dessutom fungerar det effektiva embryo cryopreservation-protokollet här som beskrivs även för att långtidsförvara kaninembryonen, vilket ger tids-flexibla logistiska kapaciteter och möjlighet att transportera provet.Som vi vet, assisterad reproduktiv teknik är i kontinuerlig utvärdering för att förbättra resultaten och minska de risker som är förknippade med detta. Därför kan kanin med hjälp av båda teknikerna användas som en idealisk djurmodell av mänsklig reproduktion för att besvara nyckelfrågor inom detta område, såsom effekterna av in vitro embryomanipulationen på avkomman. Visuell demonstration av dessa frågor är kritiska eftersom embryot överföringssteg är svåra att lära, eftersom det måste göras med stor precision för att säkerställa framgång av tekniken.För embryonal förglasning, sänk ned embryona i jämviktslösning i två minuter, följt av en minuts inkubation i förglasningslösning. I slutet av inkubationen, ladda embryona i en 125 microliter plast mini-halm, och koppla den slutna änden av mini-halm med en lämplig en milliliter mikrodispenser. Aspirera bas medium upp till en tredjedel av halmlängden, följt av en liten luftbubbla.Därefter använder en stereomicroscope att aspirera embryona i 40 mikroliter av förglasning lösning, följt av en annan liten luftbubbla och tillräckligt bas medium för att flytta första flytande fraktion upp till bomull av mini-halm. Stäng sedan den öppnade änden av mini-halm med en halm plugg, doppa mini-halm direkt i flytande kväve för att uppnå förglasning, och lagra mini-halm i en flytande kväve dewar. För att tina embryona för en överföring, placera mini-halm horisontellt 10 centimeter från den flytande kväveångan i 20 till 30 sekunder.När kristalliseringsprocessen börjar inuti mini-halm, sänk mini-halm i 25 grader celsius vattenbad i 10 till 15 sekunder. Ta omedelbart bort mini-halm och bomull pluggar och använda en kopplas mikrodispenser att utvisa mini-halm innehållet i en tallrik som innehåller 25 grader celsius bas medium kompletteras med 0,33 molar sackaros lösning, där embryon måste finnas kvar under fem minuter. Överför sedan embryona till en tallrik med färskt basmedium i ytterligare fem minuters inkubation.Så många dagar före som åldern på de embryon som skall överföras, observera turgidity och färg på vulvas av de tillgängliga sexuellt mogna 4,5 månader gamla kvinnliga kaniner, och inducera ägglossning i de mottagliga djuren med en enda intramuskulär injektion av ett mikrogram buserelin acetat oavsett kroppsvikt. På dagen för överföringen, skölj de färska eller tinade embryona i 37 graders celsius basmedium under ett stereomikroskop, och fäst en lämpligt konfigurerad 17-gauge epiduralkateter till en milliliterspruta. Aspirera en centimeter basmedium in i katetern, följt av en liten luftbubbla.Sedan aspirera fem till sju embryon och 10 mikroliter bas medium, följt av en annan liten luftbubbla, och en slutlig en centimeter bas medium. När embryona har laddats, placera den sövda mottagaren kaninen i en bur på en värmande scen, och applicera salva på djurets ögon. Efter att ha bekräftat en brist på svar på pedal reflex, raka pälsen från ventrala buken, rengör det kirurgiska området med klorhexidin glukonat tvål, och ta bort eventuella kvarvarande hår.Täck området med en steril drapera med ett hål för operationsområdet, och sätt in en endoskopisk trocar fem centimeter i bukhålan, två centimeter caudal till zyphoid processen, och använda ett tryckreglerande mekanisk insufflator att blåsa upp bukhålan. Sätt in endoskopkameran genom den endoskopiska trokaren och sätt in den 17 gauge epiduralnålen i inguinalregionen, två till tre centimeter från infundibulumet. För in den belastade katetern genom epiduralnålen i buken, och för in en till två centimeter av epiduralkatetern genom infundibulumet i ampulla.Tryck försiktigt ned kateterkolven för att släppa ut embryona i äggkroppen. Båda luftbubblorna måste utstå ur katetern. Avlägsna katetern precis efter att embryona har frigjorts, och aspirera och frisläppa det återstående mediet för att bekräfta frånvaron av embryona.Efter att ha bekräftat en lyckad överföring av embryon, ta bort epidural nålen och endoskopet kameran, och släpp buken koldioxid genom endoskopisk trocar. Rengör troaksionsansionen med klorhexidinlösning, och stäng såret med en mikronisk aluminium och ett plastförband. Behandla sedan djuret med lämpliga antibiotika och smärtstillande medel, och övervaka djuret tills full återhämtning.Minimalt invasiv laparoskopisk embryoöverföring placerar kaninen bland de bästa djurmodellerna för reproduktionsstudier, med en hög andel överförda färska embryon som resulterar i en valp. I synnerhet uppnås högre värden när den färska embryoöverföringen utförs med embryon i antingen det tidiga eller kompakta morulastadiet. Liknande resultat observeras efter tidig och komprimerad vitrified kanin morula överföring, särskilt med kompakt morulae, bekräftar effekten och tillförlitligheten av denna teknik för överföring av färska i-vitrified embryon i kaniner.Efter detta förfarande, andra metoder som villkorliga Assistive Reproductive Technologies kan utföras för att besvara ytterligare frågor som hur tillägg av tätheter kan ådra sig i en smärtstillande effekt senare i livet. Efter den senaste utvecklingen banar denna teknik vägen för forskare inom reproduktionsområdet att utforska denna effekt hos människor baserat på det nära fylogenetiska avståndet mellan kanin och människor. Således kan denna teknik ge resultat lätt överförbara till human klinisk medicin, liksom i andra däggdjursarter.Glöm inte att vår metod erbjuder några hygieniska och ekonomiska fördelar överensstämmer med begreppet tre R: s av djurskydd, Ersättning, minskning, och förfining, genom att ha för avsikt att förbättra människors behandling av försöksdjur.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Microbead Implantation in the Zebrafish Embryo

Microbead Implantation i zebrafisk embryot

The zebrafish has emerged as a valuable genetic model system for the study of developmental biology and disease. Zebrafish share a high degree of genomic ...

Imaging Subcellular Structures in the Living Zebrafish Embryo

Imaging subcellulära strukturer i vardagsZebraFish Embryo

In vivo imaging provides unprecedented access to the dynamic behavior of cellular and subcellular structures in their natural context. Performing such ...

Observing Mitotic Division and Dynamics in a Live Zebrafish Embryo

Observation Mitotisk Division och dynamik i en Live Zebrafisk Embryo

Mitosis is critical for organismal growth and differentiation. The process is highly dynamic and requires ordered events to accomplish proper chromatin ...

Embryo Microinjection and Electroporation in the Chordate Ciona intestinalis

Embryo Microinjection and Electroporation in the Chordate Ciona intestinalis

Embryo mikroinjektion och elektroporering i chordate<em&gt; Tarmsjöpung</em

Simple model organisms are instrumental for in vivo studies of developmental and cellular differentiation processes. Currently, the evolutionary distance ...

Identification Of Erythromyeloid Progenitors And Their Progeny In The Mouse Embryo By Flow Cytometry

Identifikation av erytromyeloidprogenitorer och deras avkomma i musembryo med flödescytometri

Macrophages are professional phagocytes from the innate arm of the immune system. In steady-state, sessile macrophages are found in adult tissues where ...

Use of Immunolabeling to Analyze Stable, Dynamic, and Nascent Microtubules in the Zebrafish Embryo

Användning av Immunolabeling att analysera stabil, dynamisk och begynnande mikrotubuli i zebrafiskar embryot

Microtubules (MTs) are dynamic and fragile structures that are challenging to image in vivo, particularly in vertebrate embryos. Immunolabeling methods ...

AFM and Microrheology in the Zebrafish Embryo Yolk Cell

AFM och Microrheology i cellen zebrafiskar Embryo äggula

Elucidating the factors that direct the spatio-temporal organization of evolving tissues is one of the primary purposes in the study of development. ...

Effectiveness of the Air Stripping in Two Salmonid Fish, Rainbow Trout (Oncorhynchus Mykiss) and Brown Trout (Salmo Trutta Morpha fario)

Effectiveness of the Air Stripping in Two Salmonid Fish, Rainbow Trout Oncorhynchus Mykiss and Brown Trout Salmo Trutta Morpha fario

Effektiviteten i den luft som strippar i två laxfisk, regnbåge (Oncorhynchus Mykiss) och öring (Salmo Trutta Morpha fario)

Egg collection is one of the most crucial procedures during fish reproduction in salmonid hatcheries. Classic methods involve the use of hand massage on ...

Following Endocardial Tissue Movements via Cell Photoconversion in the Zebrafish Embryo

Följande endokardiella vävnad rörelser via Cell Photoconversion i zebrafiskar embryot

During embryogenesis, cells undergo dynamic changes in cell behavior, and deciphering the cellular logic behind these changes is a fundamental goal in the ...

Microinjection-based System for In Vivo Implantation of Embryonic Cardiomyocytes in the Avian Embryo

Mikroskop-baserat System för i Vivo Implantation av embryonala hjärtmuskelcellerna i aviär embryot

Interpreting the relative impact of cell autonomous patterning versus extrinsic microenvironmental influence on cell lineage determination represents a ...