Name: identification and isolation of oligopotent and lineage-committed myeloid progenitors from mouse bone marrow
Uploaded: 2018-07-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification and Isolation of Oligopotent and Lineage-committed Myeloid Progenitors from Mouse Bone Marrow at JoVE.com

פרוטוקול זה פותחה באמצעות קרנות ממכון לוח של המושלים הרגנרציה לרפואה במרכז הרפואי Cedars-Sinai (כדי HSG), קריירות ב מלגת אימונולוגיה של האגודה האמריקאית של Immunologists (כדי AY HSG), ו פרס מלומד האגודה האמריקנית של המטולוגיה (כדי AY). אנו מודים הליבה Cytometry זרימה בבית Cedars-Sinai Medical Center על סיוע עם FACS מיון.

כל השיטות המתוארות כאן אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים ועל שימוש הוועדה (IACUC) של Cedars-Sinai Medical Center.
1. בידוד של מח העצם העכבר והכנה של השעיה תא בודד
<ol><li>המתת חסד את העכבר בהתאם להנחיות מוסדיים.</li>
	<li>הנח את העכבר לאללה על גבו, תשפריץ עם 70% אתנול (EtOH). עושים חתך קטן (3-5 מ מ) בכל אי?...

<ol>
	<li>Akashi, K., Traver, D., Miyamoto, T., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+clonogenic+common+myeloid+progenitor+that+gives+rise+to+all+myeloid+lineages.">A clonogenic common myeloid progenitor that gives rise to all myeloid lineages.</a> Nature. 404 (6774), 193-197 (2000).</li><li>Y&#225;&#241;ez, A., Ng, M. Y., Hassanzadeh-Kiabi, N., Goodridge, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IRF8+acts+in+lineage-committed+rather+than+oligopotent+progenitors+to+control+neutrophil+vs+monocyte+production.">IRF8 acts in lineage-committed rather than oligopotent progenitors to control neutrophil vs monocyte production.</a> Blood. 125 (9), 1452-1459 (2015).</li><li>Auffray, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CX3CR1++CD115++CD135++common+macrophage/DC+precursors+and+the+role+of+CX3CR1+in+their+response+to+inflammation.">CX3CR1+ CD115+ CD135+ common macrophage/DC precursors and the role of CX3CR1 in their response to inflammation.</a> Journal of Experimental Medicine. 206 (3), 595-606 (2009).</li><li>Fogg, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+clonogenic+bone+marrow+progenitor+specific+for+macrophages+and+dendritic+cells.">A clonogenic bone marrow progenitor specific for macrophages and dendritic cells.</a> Science. 311 (5757), 83-87 (2006).</li><li>Onai, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+clonogenic+common+Flt3+M-CSFR++plasmacytoid+and+conventional+dendritic+cell+progenitors+in+mouse+bone+marrow.">Identification of clonogenic common Flt3+M-CSFR+ plasmacytoid and conventional dendritic cell progenitors in mouse bone marrow.</a> Nature Immunology. 8 (11), 1207-1216 (2007).</li><li>Hettinger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Origin+of+monocytes+and+macrophages+in+a+committed+progenitor.">Origin of monocytes and macrophages in a committed progenitor.</a> Nature Immunology. 14 (8), 821-830 (2013).</li><li>Y&#225;&#241;ez, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granulocyte-monocyte+progenitors+and+monocyte-dendritic+cell+progenitors+independently+produce+functionally+distinct+monocytes.">Granulocyte-monocyte progenitors and monocyte-dendritic cell progenitors independently produce functionally distinct monocytes.</a> Immunity. 47 (5), 890-902 (2017).</li><li>Olsson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+analysis+of+mixed-lineage+states+leading+to+a+binary+cell+fate+choice.">Single-cell analysis of mixed-lineage states leading to a binary cell fate choice.</a> Nature. 537 (7622), 698-702 (2016).</li><li>Amend, S. R., Valkenburg, K. C., Pienta, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+hind+limb+long+bone+dissection+and+bone+marrow+isolation.">Murine hind limb long bone dissection and bone marrow isolation.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), (2016).</li><li>Y&#225;&#241;ez, A., Goodridge, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interferon+regulatory+factor+8+and+the+regulation+of+neutrophil,+monocyte,+and+dendritic+cell+production.">Interferon regulatory factor 8 and the regulation of neutrophil, monocyte, and dendritic cell production.</a> Current Opinion in Hematology. 23 (1), 11-17 (2016).</li><li>Manz, M. G., Miyamoto, T., Akashi, K., Weissman, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+isolation+of+human+clonogenic+common+myeloid+progenitors.">Prospective isolation of human clonogenic common myeloid progenitors.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 99 (18), 11872-11877 (2002).</li></ol>

ויסמן gating אסטרטגיה עבור זיהוי קדמון מיאלואידית העכבר1 כבר את תקן זהב עבור immunologists ו ההמטולוגים במשך כמעט 20 שנה, אבל עכשיו זה לכאורה כי השערים "CMP" ו- "GMP" הם מאוד הטרוגנית יותר מדויק אסטרטגיות המגביל נחוצים. בפרוטוקול כי שתיארנו כאן מאפשר הזיהוי של oligopotent ושל קבוצות משנה ביצע שושל?...

ומונוציטים, נויטרופילים, תאים דנדריטים (Dc) הם התאים מיאלואידית הנובעים מן אבות hematopoietic, בעיקר במח העצם, על ידי תהליך הנקרא myelopoiesis. אבות מיאלואידית משותף (CMPs) יש פוטנציאל לייצר התאים מיאלואידית, כמו גם megakaryocytes, אריתרוציטים, אבל בתאי הלימפה לא. גרנולוציט-מונוציט אבות (Gmp), אשר נגזרות CMPs, להפיק גרנולוציטים ומונוציטים, אך איבדו מגקריוציט של כדוריות דם אדומות פוטנציאליים. ומונוציטים הקלאסית plasmacytoid בקרי קבוצת מחשבים (cDCs/שיתפקדו) הם גם חשבו נובעים אבות נפוץ הידוע בשם אבות מונוציט-DC (MDPs), המיוצרים על ידי הדרגתי ההגבלה של פוטנציאל שושלת היוחסין בסופו של דבר התוצאה ביצע השושלת CMPs. אבות: אבות גרנולוציט מונוציט אבות, אבות תא דנדריטי (איור 1).
וייסמן ועמיתיו דיווחו כי CMPs נמצאים בערכה לין– c-+ Sca-1– (ביירד–) CD34+ FcγRהלאו שבר של העכבר מח העצם, ואילו Gmp הכלולים CD34 ביירד– + FcγR היי חלק1. עם זאת, אלו שברים "CMP" ו- "GMP" הם מאוד הטרוגנית. למשל, השבר "GMP" מכיל גם גרנולוציט ביצע לשושלת אבות מונוציט אבות1,2. MDPs דווחו בנפרד כדי להיות CX3CR1+ Flt3+ CD115+ אבות כי גם אקספרס CD34 ו FcγR3,-4. MDPs להצמיח cDC/pDC-הפקת נפוצות DC אבות (CDPs), אשר דווחו לבטא רמות נמוכות יותר של c-Kit (CD117), לא נכללות שבר ביירד– 5.
בעבר והונח ומונוציטים להיווצר באמצעות נתיב יחיד (CMP-GMP-MDP-מונוציט). בקנה אחד עם זה אבות מודל, ביצע מונוציט מתוצרת Gmp (על שם אבות מונוציט, MPs)2 ו- MDPs (על שם נפוץ מונוציט אבות, cMoPs)6 שנראה אותם התאים על בסיס משותף סמן משטח ביטוי . עם זאת, אנחנו לאחרונה הוכיח כי ומונוציטים מיוצרים באופן עצמאי על ידי Gmp ו MDPs, היו מסוגלים להבחין בין MPs cMoPs על ידי רצפי RNA בתא יחיד7.
אנחנו ששינה לאחרונה את ויסמן "CMP" ואסטרטגיה "GMP" חסימה כדי לזהות subfractions 6 של מח העצם של העכבר C57BL/6J המכילה oligopotent שונים, ביצע שושלת היוחסין קדמון מיאלואידית קבוצות משנה. קודם דיווחנו כי צביעת עבור Ly6C ו- CD115 מתירה את ניתוקה של oligopotent Gmp, וכן גרנולוציט אבות (GPs) של אבות מונוציט (MPs והן cMoPs, אשר כעת אין אפשרות להפריד) שבר "GMP"2 (ביירד - CD34+ FcγRהיי שער; איור 1). לאחר מכן להדגים MDPs מצויים בעיקר השבר "CMP" (CD34 ביירד– + FcγRהלאו שער), אשר מכיל גם Flt3+ CD115הלאו , Flt3– קבוצות משנה7 (איור 1 ). CMP-+ CD115הלאו שבר Flt3 התשואות Gmp והן MDPs בעת העברה המאמצת. המשנה CMP-Flt3– מכיל אבות כי נראה ביניים בין CMP-Flt3+ CD115הלאו תאים Gmp. בניגוד MDPs, CMP-Flt3+ CD115הלאו והן שברים CMP-Flt3– גם בעלי מגקריוציט כדוריות דם אדומות פוטנציאליים.
חשוב לציין, עם זאת, כי זה כרגע לא ברור אם השברים "CMP" מכילים אבות כי הם באמת oligopotent (למשל, תאים בודדים בתוך CMP-+ CD115הלאו שבר Flt3 שקיימים נויטרופילים, מונוציט, DC, מגקריוציט, פוטנציאל כדוריות דם אדומות), או לחלופין, מהווים תערובת של אבות עם פוטנציאל שושלת היוחסין מוגבל יותר. המושבה ויוצרים מבחני (methylcellulose תרבויות) חשפה תאים עם גרנולוציט (נויטרופילים), כדוריות דם אדומות, מונוציט מגקריוציט פוטנציאליים (תאי GEMM) ב- "CMP," CMP-Flt3+ CD115הלאו ושברים CMP-Flt3– 1 ,7, אך אינן מתירות את ההערכה של פוטנציאל DC. לעומת זאת, המושבה ויוצרים מבחני הוכיחה את קיומו של oligopotent Gmp (אבות נויטרופילים וגם מונוציט פוטנציאליים)1,שבר "GMP"2, זה נתמך על ידי תא בודד לאחרונה ניתוח transcriptomic8. לא כיום ידוע, עם זאת, בין אם אלה Gmp oligopotent גם לייצר אחרים גרנולוציטים (אאוזינופילים, בזופילים, ו תאי פיטום).
בהתבסס על מחקרים אלה, עכשיו נדגים איך פני השטח 7 סמנים (c-Kit, Sca-1, CD34, FcγR, Flt3, Ly6C ו CD115) יכול לשמש לזיהוי ולבידוד אלה 6 קבוצות משנה של oligopotent, ביצע לשושלת אבות מיאלואידית. הפרוטוקול המתואר כאן יכול להיות מיושם עבור in vitro לקשרי תרבות מבחני (תרבויות methylcellulose או נוזל), ויוו העברה המאמצת ניסויים עכברים, אנליזה מולקולרית (רצפי RNA בתפזורת, תא בודד, סופג המערבי, וכו).
הפרוטוקול מורכב 3 שלבים: 1) הכנת השעיה תא בודד של מח העצם תאים, 2) העשרה עבור אבות hematopoietic (מגנטי תא לפעיל על-מיון), ו- 3) זיהוי ובידוד במידת הצורך, של קבוצות משנה קדמון על ידי זרימת cytometry (באמצעות מנתח או סדרן, לפי הצורך). הצעד הראשון הוא בידודו של תאים במח העצם עצמות הירך ואת tibias של עכברים לאללה, והוא דומה לזה שתואר לעיל פרוטוקולים אחרים9. בשלב הבא, המדגם הוא מועשר עבור תאי גזע וקדמון באמצעות קוקטייל של נוגדנים נגד סמני פני שטח התא של אריתרוציטים, נויטרופילים ומונוציטים, לימפוציטים, וכו ', כדי לרוקן את התאים הבדיל. זו אינה חובה, אבל מומלץ בחום כדי למטב את הזיהוי של ערכות המשנה קדמון, וכדי להפחית את כמות נוגדנים לצורך זיהוי קדמון ולא את הזמן הנדרש עבור cytometry זרימה. פרוטוקול דלדול שושלת היוחסין להלן מתאר מיון תא Magnetic-Activated (מקינטוש) באמצעות ערכת דלדול העכבר תא השושלת (אשר מכיל biotinylated נוגדנים נגד CD5, CD45R (B220), CD11b, Gr-1 (Ly6G/ג), 7-4, וטר-119, בנוסף אנטי ביוטין . גרגרי) ומפריד ממוכנת מגנטי. השלב האחרון הוא הזיהוי (ומיון, במידת הצורך) של ערכות המשנה קדמון על ידי cytometry זרימה. לוח נוגדן המתוארים להלן (ראה גם לוח 1) תוכנן כדי לשמש cytometer זרימה (מנתח או סדרן) עם לייזרים 4 (405 ננומטר, 488 ננומטר, 561 nm, 640 ננומטר).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58061/58061fig1.jpg"> איור 1: אבות נויטרופילים, מונוציט, DC מסלולים בידול. המודל לאחרונה המתוקן של myelopoiesis7 מודגם, עם השערים וייסמן "CMPs" (כחול) ו- "Gmp" (ירוק)1 בשכבות. איור זה השתנה. ואח 2017 Yáñez7. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58061/58061fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.</a>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="945">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">Mouse: Wild-type C57BL/6J (CD45.2)</td>
			<td style="width:177px;">The Jackson Laboratories</td>
			<td style="width:172px;">Cat#JAX:000664</td>
			<td style="width:239px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">Lineage Cell Depletion Kit, mouse</td>
			<td style="width:177px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:172px;">Cat#130-090-858</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">Rat anti-mouse CD34 (clone RAM34) FITC</td>
			<td style="width:177px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:172px;">Cat#553733</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:357px;">Rat anti-mouse CD16/CD32 (Fc&#947;R; clone 93) APC-Cy7</td>
			<td style="width:177px;">BioLegend</td>
			<td style="width:172px;">Cat#101327</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:357px;">Rat anti-mouse Ly6A/E (Sca-1; clone 108113) PE-Cy7</td>
			<td style="width:177px;">BioLegend</td>
			<td style="width:172px;">Cat#108114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:357px;">Rat anti-mouse CD117 (c-Kit; clone 2B8) Pacific Blue</td>
			<td style="width:177px;">BioLegend</td>
			<td style="width:172px;">Cat#105820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">Rat anti-mouse Ly6C (clone HK1.4) PerCP-Cy5.5</td>
			<td style="width:177px;">BioLegend</td>
			<td style="width:172px;">Cat#128012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">Rat anti-mouse CD115 (clone AFS98) PE</td>
			<td style="width:177px;">BioLegend</td>
			<td style="width:172px;">Cat#135506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">Rat anti-mouse CD135 (Flt3; clone A2F10.1) APC</td>
			<td style="width:177px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:172px;">Cat#560718</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">CountBright Absolute Counting Beads</td>
			<td style="width:177px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:172px;">Cat#C36950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">AutoMACS Separator</td>
			<td style="width:177px;">Miltenyi Biotec</td>
			<td style="width:172px;">N/A</td>
			<td>Use the &#34;deplete&#34; program</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">BD LSRFortessa</td>
			<td style="width:177px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:172px;">N/A</td>
			<td>5 lasers, 15 colors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">BD FACS Aria III cell sorter</td>
			<td style="width:177px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:172px;">N/A</td>
			<td>5 lasers, 13 colors</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:357px;">FlowJo</td>
			<td style="width:177px;">FlowJo, LLC</td>
			<td style="width:172px;">https://www.flowjo.com</td>
			<td>For further analysis of the .fcs files</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification and isolation of oligopotent and lineage-committed myeloid progenitors from mouse bone marrow

אבות מיאלואידית כי תשואות נויטרופילים ומונוציטים, תאים דנדריטים (Dc) יכול להיות מזוהה ב והיא מבודדת ממח העצם של עכברים עבור ניתוחים hematological ו. לדוגמה, מחקרים של המאפיינים תאית ומולקולרית של אוכלוסיות קדמון מיאלואידית ניתן לחשוף את המנגנונים שבבסיס הטרנספורמציה לוקמיה או להדגים כיצד המערכת החיסונית מגיבה לחשיפה הפתוגן. בעבר אסטרטגיות cytometry זרימה שתואר עבור זיהוי קדמון מיאלואידית אפשרו התקדמות משמעותית בתחומים רבים, אך שברים שהם מזהים הטרוגנית מאוד. אסטרטגיות המגביל הנפוצות ביותר מגדירים מח העצם שברים מועשר עבור האוכלוסיות הרצוי, אך גם להכיל מספרים גדולים של אבות "מזהם". מחקרים אחרונים שלנו פתרו את רוב זה הטרוגניות, פרוטוקול שאנו מציגים כאן מתירה את ניתוקה של 6 subpopulations של oligopotent, ביצע לשושלת אבות מיאלואידית 2 שתואר קודם לכן מח העצם שברים. הפרוטוקול מתאר 3 שלבים: 1) בידוד של מח העצם תאים, 2) העשרה עבור אבות hematopoietic על-ידי מגנטי תא לפעיל על-מיון (דלדול שושלת היוחסין מאת מקינטוש) ולאחר 3) זיהוי של קדמון מיאלואידית קבוצות משנה על-ידי cytometry זרימה (כולל קרינה פלואורסצנטית תא לפעיל על-מיון, FACS, במידת הצורך). גישה זו מאפשרת כימות קדמון ובידוד למגוון רחב של יישומי בתוך חוץ גופית וויוו , כבר הניב תובנות הרומן משעולים, מנגנונים של נויטרופילים, מונוציט DC בידול.

באמצעות פרוטוקול המתואר לעיל, זה אפשרי להשיג ~ 100 מיליון תאים (כולל תאי דם אדומים, או תאים nucleated ~ 50 מיליון) של עצמות הירך והן tibias (2 רגליים) של עכבר C57BL/6J אחד (6-8 שבועות ישנים, זכר או נקבה). 1-2 מיליון תאים לין– ניתן לבודד לכל העכבר על ידי MACS דלדול תאי לין+ .
<p class="jove_conte...

Watch this Scientific Journal Video about Identification and Isolation of Oligopotent and Lineage-committed Myeloid Progenitors from Mouse Bone Marrow at JoVE.com

Identification and Isolation of Oligopotent and Lineage-committed Myeloid Progenitors from Mouse Bone Marrow

נדגים כיצד לזהות ולבודד 6 קבוצות משנה של אבות מיאלואידית ממח העצם מאתר באמצעות שילוב של מגנטי קרינה פלואורסצנטית מיון (מקינטוש ו- FACS). פרוטוקול זה יכול לשמש in vitro לקשרי תרבות מבחני (תרבויות methylcellulose או נוזל), ויוו המאמצת העברת הניסויים של RNA/חלבון ניתוחים.

זיהוי ובידוד של Oligopotent, ביצע לשושלת אבות מיאלואידית ממח העצם העכבר

Myeloid progenitors that yield neutrophils, monocytes and dendritic cells (DCs) can be identified in and isolated from the bone marrow of mice for ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Differentiating Functional Roles of Gene Expression from Immune and Non-immune Cells in Mouse Colitis by Bone Marrow Transplantation

הבחנת תפקידים פונקציונליים של ביטוי גנים מתאים חיסוניים וללא חיסון בקוליטיס המאוס על ידי השתלת מח עצם

To understand the role of a gene in the development of colitis, we compared the responses of wild-type mice and gene-of-interest deficient knockout mice ...

Investigation of Macrophage Polarization Using Bone Marrow Derived Macrophages

חקירה של קיטוב Macrophage שימוש המקרופאגים נגזרים מח עצם

The article describes a readily easy adaptive in vitro model to investigate macrophage polarization. In the presence of GM-CSF/M-CSF, hematopoietic ...

Isolation, Purification and Labeling of Mouse Bone Marrow Neutrophils for Functional Studies and Adoptive Transfer Experiments

בידוד, טיהור וסימון של נויטרופילים מח עצם עכבר ללימודים פונקציונליים וניסויי העברת מאמצת

Neutrophils are critical effector cells of the innate immune system. They are rapidly recruited at sites of acute inflammation and exert protective or ...

Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus

בידוד של תאי מיאלואידית דנדריטים ותאי האפיתל מקורנית האדם

In this protocol we provide a method to isolate dendritic cells (DC) and epithelial cells (TEC) from the human thymus. DC and TEC are the major antigen ...

Bone Marrow-derived Macrophage Production

מח עצם נגזרות Macrophage הפקה

Macrophages are critical components of the innate and adaptive immune responses, and they are the first line of defense against foreign invaders because ...

Isolation and Intravenous Injection of Murine Bone Marrow Derived Monocytes

המונוציטים בידוד והזרקה תוך ורידית של Murine מח העצם נגזר

As a subtype of leukocytes and progenitors of macrophages, monocytes are involved in many important processes of organisms and are often the subject of ...

Tracking Mouse Bone Marrow Monocytes In Vivo

Tracking Mouse Bone Marrow Monocytes In Vivo

מעקב עכבר מח עצם המונוציטים<em&gt; In vivo</em

Real time multiphoton imaging provides a great opportunity to study cell trafficking and cell-to-cell interactions in their physiological 3-dimensionnal ...

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

Myeloid Cell Isolation from Mouse Skin and Draining Lymph Node Following Intradermal Immunization with Live Attenuated Plasmodium Sporozoites

בידוד תא מיאלואידית מעור העכבר וניקוז הלימפה הצומת בעקבות החיסון תוך-עורית עם נחלש חי<em&gt; Plasmodium</em&gt; Sporozoites

Malaria infection begins when the sporozoite stage of Plasmodium is inoculated into the skin of a mammalian host through a mosquito bite. The highly ...

Murine Hind Limb Long Bone Dissection and Bone Marrow Isolation

Murine הינד לימב ארוך עצם Dissection ובידוד מח העצם

Investigation of the bone and the bone marrow is critical in many research fields including basic bone biology, immunology, hematology, cancer metastasis, ...

Generation and Identification of GM-CSF Derived Alveolar-like Macrophages and Dendritic Cells From Mouse Bone Marrow

דור וזיהוי GM-CSF נגזר מכתשיים דמוי מאקרופאגים דנדריטים תאי עכבר מח עצם

Macrophages and dendritic cells (DCs) are innate immune cells found in tissues and lymphoid organs that play a key role in the defense against pathogens. ...